INTRODUCCIÓN

La constante búsqueda de alternativas terapéuticas en la medicina moderna ha renovado el

interés por explorar fuentes naturales, especialmente aquellas derivadas de la flora autóctona de
distintas regiones del mundo. Las plantas, como elementos esenciales en los ecosistemas, son un
valioso reservorio de compuestos bioactivos, muchos de los cuales muestran propiedades
antimicrobianas. Estos compuestos podrían ser clave frente a la creciente resistencia de los
microorganismos patógenos a los tratamientos convencionales (Granados y López, 2007). En este
contexto, Eucalyptus robusta, una especie originaria de la zona costera sureste de Australia, emerge
como un ejemplo destacado de la riqueza de la biodiversidad vegetal, aún poco explorada en
términos de sus aplicaciones terapéuticas (Hernández, García, Serrano, Ávila, Dávila y Cervantes,
2015).

EL PROBLEMA

Planteamiento del Problema

En los últimos años, se ha observado un aumento significativo en la incidencia de infecciones

fúngicas, acompañado de cambios en las características de las micosis invasoras. Además, esto
incluye el descubrimiento de nuevas especies patógenas y el incremento de cepas resistentes a los
antifúngicos. La aparición de resistencia en los hongos es una consecuencia inevitable del uso
continuo de estos compuestos en el tratamiento de micosis invasoras.

Es por esta razón, que las investigaciones actuales han centrado gran interés en la identificación de
sustancias antimicrobianas de origen vegetal. Siendo este un campo de estudio prioritario para
diversos institutos a nivel mundial en la búsqueda de mejorar la calidad de vida del hombre.

Pregunta de investigación

¿Qué relación existe entre la actividad antifúngica y la composición química del extracto de las flores
de Eucalyptus robusta?

Justificación de la investigación

A lo largo del tiempo, ha habido una creciente necesidad de alternativas terapéuticas frente a
infecciones micóticas, ya que muchas enfermedades causadas por hongos presentan una evolución
clínica compleja y altos índices de resistencia a los tratamientos convencionales.
Aunado a eso, el análisis de las propiedades antifúngicas de extractos naturales constituye una
oportunidad única para generar conocimiento y explorar agentes terapéuticos que sean sostenibles,
efectivos y menos nocivos para la salud humana y el medio ambiente.

Por otra parte, las enfermedades micóticas, representan un desafío global, especialmente en
pacientes inmunocomprometidos. Su control se complica debido a la similitud estructural entre las
células fúngicas y las humanas lo que dificulta el desarrollo de moléculas selectivas que ataquen
exclusivamente a las células patógenas.

Objetivos de la investigación

Objetivo General

Confirmar la relación entre la actividad antifúngica y la composición química del extracto de las flores
de Eucalyptus robusta en cepas de referencia internacional.

Objetivos específicos

 Obtener el extracto de las flores de Eucalyptus robusta mediante el método de reflujo

utilizando como solvente metanol:agua (7:3)

 Identificar cualitativamente los metabolitos secundarios presentes en el extracto adquirido

a través de pruebas químicas de coloración y/o precipitación.

 Determinar la actividad antifúngica del extracto obtenido de las flores de Eucalyptus

robusta a través del método de difusión en agar con discos, en cepas de referencia
internacional

Alcances y Limitaciones de la Investigación

Alcances de la Investigación

 Aportar nuevos datos sobre las características fitoquímicas y bioactividad de las flores de
Eucalyptus robusta.

 Dar a conocer los resultados del estudio de los extractos de las flores de Eucalyptus robusta
en cuanto a la actividad antifúngica como una fuente de recursos terapéuticos para el
tratamiento de enfermedades.
 Limitaciones de la Investigación

 Intervención de variables externas que alteren el curso de la investigación.

 Alto costo de los reactivos.

 Dificultad para la recolección de la planta.

Trabajos Previos

PRIMERO

El presente problema de estudio ha sido divulgado por varios autores en los últimos años. Se
puede citar a Mehta y colaboradores que en el año 2020 llevaron a cabo un trabajo titulado:
Estudio comparativo de las actividades antibacterianas y antifúngicas de extractos de
cuatro plantas autóctonas.

El objetivo de este trabajo fue comparar la efectividad de los extractos de cuatro plantas
autóctonas en el control de patógenos bacterianos y fúngicos.

Para ello, se utilizaron diferentes solventes para extraer los compuestos activos de las hojas y
raíces de estas plantas, incluyendo metanol, éter de petróleo, cloroformo y acetato de etilo.

Las pruebas de actividad antimicrobiana se llevaron a cabo en placas de 96 pocillos utilizando

la técnica de microdilución. Las placas fueron incubadas a 35°C durante 24 horas para
bacterias y a 25°C durante 72 horas para hongos. Los patógenos evaluados incluyeron la
bacteria Staphylococcus aureus y los hongos Aspergillus brasiliensis y Candida albicans. El
control positivo consistió en el antibiótico Ciprofloxacino (50 µg/ml).

 Los resultados mostraron que el extracto de Nerium sp. tuvo una fuerte actividad
antibacteriana en concentraciones altas (hasta 50 µg/ml).

 Sin embargo, en concentraciones más bajas, la actividad fue mínima y no inhibió el

crecimiento bacteriano.

 La actividad antifúngica, el extracto de Eucalyptus sp. destacó como el más eficaz,

especialmente contra Candida albicans, lo que resalta su potencial como agente antifúngico
natural.
 Este estudio aporta evidencia relevante sobre la eficacia antimicrobiana de los extractos de
Nerium sp. y Eucalyptus sp., destacando el potencial de estas plantas como fuentes de compuestos
activos para el tratamiento de infecciones bacterianas y fúngicas. La potente actividad antifúngica
observada en el extracto de Eucalyptus sp justifica su inclusión como antecedente para futuras
investigaciones en este campo.

SEGUNDO

Fernandes y cols (2023) publicaron un artículo titulado: Evaluación de la actividad antifúngica del
extracto metanólico de Psidium guineense (Myrtaceae) frente a cepas del género Candida en
la Revista Europea de Ciencias Médicas y de la Salud.

El principal objetivo de este estudio fue evaluar la actividad antifúngica del extracto metanólico de
Psidium guineense contra diversas especies del género Candida, específicamente Candida albicans,
Candida tropicalis y Candida krusei.

El estudio se llevó a cabo mediante ensayos in vitro utilizando el extracto metanólico de las hojas de
Psidium guineense como sustancia de prueba. Las cepas fúngicas utilizadas fueron previamente
identificadas y mantenidas en medios de cultivo estándar, como agar dextrosa Sabouraud (SDA) y
caldo dextrosa Sabouraud (SSB). Para el control positivo, se empleó nistatina, un antifúngico
estándar conocido.

La técnica empleada para determinar la actividad antifúngica fue la microdilución en caldo, que
permitió calcular la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) del extracto metanólico frente a las cepas
de Candida.

Los resultados obtenidos indicaron que la CMI del extracto metanólico de Psidium guineense fue
superior a 1024 μg/mL, lo que sugiere que la actividad antifúngica del extracto es de débil a
moderada frente a las cepas de Candida evaluadas.

Dado que los resultados muestran una actividad antifúngica limitada, este estudio se incluye como
antecedente en la presente investigación, destacando la necesidad de explorar más a fondo el
potencial antifúngico de los extractos de las plantas, específicamente Eucalyptus robusta en este
caso.

TERCERO

Amaral y cols (2023) publicaron un artículo titulado: Metabolitos de la madera de Myrcia insularis
Gardner (Myrtaceae) tienen potencial actividad contra Candida. El principal objetivo de este
estudio fue aislar y evaluar la actividad antifúngica de los metabolitos secundarios presentes en la
madera de Myrcia insularis, una planta de la familia Myrtaceae.
La madera de Myrcia insularis fue recolectada en un remanente de bosque semideciduo estacional
en el bosque atlántico del norte del estado de Río de Janeiro, Brasil. Para la extracción de los
metabolitos, se utilizó la técnica de maceración en frío con metanol durante cuatro días, repitiendo el
proceso tres veces para garantizar una recuperación total de los compuestos activos. Los extractos
obtenidos fueron concentrados en un rotavapor y luego se suspendieron en una mezcla de agua y
metanol (1:3). Posteriormente, se distribuyeron en diferentes fracciones utilizando disolventes de
distinta polaridad: diclorometano (CH₂Cl₂), acetato de etilo (AcOEt) y butanol (ButOH).

El análisis cromatográfico y espectroscópico permitió la identificación del ácido arjunólico, un

triterpeno, como el principal compuesto aislado de la fracción de acetato de etilo. Para evaluar la
actividad antifúngica, se realizaron pruebas de inhibición del crecimiento de cepas de Candida
(Candida buinensis y Candida tropicalis) en diferentes concentraciones de los extractos.

Los resultados mostraron que las fracciones de acetato de etilo fueron las más activas, con una
inhibición del crecimiento de Candida buinensis de aproximadamente 73% y 64% a concentraciones
de 200 y 100 µg/mL, respectivamente.

En el caso de Candida tropicalis, las concentraciones de 200, 100 y 50 µg/mL de la misma fracción
lograron reducciones de alrededor del 61%, 46% y 15% en el crecimiento de la cepa,
respectivamente.

Por otro lado, la fracción de diclorometano mostró una menor actividad antifúngica, sin inhibir el
crecimiento de Candida buinensis en ninguna de las concentraciones probadas, aunque presentó
una ligera actividad contra Candida tropicalis, con inhibiciones del 14%, 11% y 8% en
concentraciones de 200, 100 y 50 µg/mL, respectivamente.

Antecedentes Históricos o Epistemológicos

Las plantas medicinales han sido fuente de una amplia variedad de compuestos biológicamente
activos por muchos siglos y se ha utilizado sea como material crudo (extractos, infusiones, tinturas,
entre otras) o como compuestos puros para el tratamiento de enfermedades

El género Eucalyptus comenzó a ser empleado en plantaciones en Europa hace menos de 200
años. En Estados Unidos se introdujo a mediados del siglo XIX, por los flujos migratorios; en
Sudáfrica y Brasil a finales del XIX

Específicamente el Eucalyptus robusta fue descrito formalmente por el botánico inglés Joseph Banks
durante la expedición del Capitán Cook en el año 1770, aunque su uso en las comunidades
indígenas australianas precede ampliamente a este registro
En el siglo XIX El interés europeo por las propiedades terapéuticas del Eucalyptus se consolidó.
François Pierre Fouquet, en su obra del año 1845, hizo hincapié en las propiedades antisépticas de
varias especies del género, iniciando así su incorporación en la medicina occidental.

Por otra parte, el médico británico William S. Greenish, en 1855, comenzó a experimentar con estos
aceites para el tratamiento de enfermedades respiratorias como la bronquitis y la neumonía,
empleando los aceites esenciales y sus extractos tanto en inhalaciones como en aplicaciones
tópicas.

Es por esto, que la evidencia acumulada durante el siglo XX consolidó al Eucalyptus robusta como
un recurso invaluable en el tratamiento de resfriados, gripe y diversas afecciones pulmonares
crónicas.

Bases Teóricas

Productos Naturales

También llamados metabolitos secundarios, son compuestos biosintetizados a partir de los

metabolitos primarios, pero son de distribución más limitada en el reino de las plantas, estando
restringido a un grupo taxonómico en particular.

Estos metabolitos secundarios aparentemente no tienen una función en el metabolismo básico de

las plantas, pero a menudo tienen un rol ecológico, son atractores para la polinización o sirven como
defensa contra microorganismos, insectos y contra otras plantas.

Por otra parte, ellos se encuentran en concentraciones muy pequeñas y no de forma generalizada,
estos pueden ser utilizados comercialmente como compuestos biológicamente activos:
farmacéuticos, sabores, fragancias, colorantes, entre otros.