Determinación del índice de espuma
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1. OBJETIVO
Evaluar la actividad de saponinas extraídas de Agave americana
como agente precipitante y coadyuvante para la remediación de
aguas contaminadas con cromo hexavalente y arsénico.
2. ALCANCE
Cuantificar las saponinas extraídas mediante cromatografía
líquida de alta resolución (HPLC) (FOX, 2000).
3. REFERENCIAS NORMATIVAS
EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LAS SAPONINAS EXTRAÍDAS DE
Agave americana COMO AGENTES PRECIPITANTES Y COADYUVANTES
Autores: GABRIEL ALEXANDER ARCOS
PÉREZ ALEJANDRA ESTEFANÍA VIVAR
ROBLES
DESARROLLO.
6.1 Principio
Para la extracción de saponinas se utilizan alcoholes como el metanol o el etanol, o bien
se pueden recurrir a disoluciones hidrometanólicas después de realizar un desengrase
con éter de petróleo. Los disolventes polares solubilizan varios compuestos, por eso es
necesario hacer una mezcla de agua con n-butanol para solubilizar las saponinas que
posteriormente se precipitan al añadir al medio un disolvente como el éter etílico
(Bruneton , 2001, pág. 670).
Caracterización
Hemolítico. Ruptura de Espuma. Persistente en una
Índices
membranas en eritrocitos. decocción de agua.
Reacción de Liebermann. Aldehído anísico con vainilla y
Reacciones coloreadas Anhídrido acético en otros aldehídos aromáticos en un
medio sulfúrico medio ácido mineral fuerte.
Cromatografía de capa Cromatografía liquida en alta
Métodos cromatográficos fina. Control de calidad de resolución. Controles de pureza
drogas con saponinas. y valoración.
6.4.1 Equipos
Plancha de agitación
Estufa
Agitadores
6.4.2 Materiales
Matraz
Lavado de materiales
Para los siguiente análisis se deber tener todos los materiales a utilizar bien limpios y
esterilizados para que no haya alguna contaminación cruzada
.
TRATAMIENTO DE MUESTRAS
Se seleccionaron 8 plantas adultas y 11 plántulas, de las cuales se
tomó 1 muestra para enviarla al Herbario de la PUCE para su registro
e identificación.
Colecta del material vegetal
A B
Figura 2. Reconocimiento del área de trabajo en la comuna de Cocotog. A. Selección del material vegetal. B.
Colecta del material vegetal.
Elaborado por: (Arcos, Vivar, 2014).
Una vez colectadas las raíces de Agave americana se realizó un
lavado y posteriormente se las almacenó en refrigeración a 4°C.
Se realizó el secado de las raíces a una temperatura de 45°C, hasta
peso constante. Una vez seco el material vegetal se efectuó una
operación de molienda y tamizado para facilitar el contacto con el
disolvente en el proceso de maceración.
El tamizaje se realizó en un agitador marca DURATAP.
Preparación del material vegetal
A B
Figura 3. Preparación de raíces para la extracción de crudo de saponinas. A. Lavado de raíces. B. Secado en estufa
de raíces. C. Molienda de raíces.
Elaborado por: (Arcos, Vivar, 2014).
2.1 Prueba de espuma
Se colocaron en un matraz Erlenmeyer 10g de muestra de la raíz de Agave americana
con 150 ml de agua destilada a 50°C, inmediatamente se realizó una agitación vigorosa
por 5 minutos. La prueba se considera positiva si la espuma generada perdura por más
de 5 minutos como muestra la figura 4. Esta prueba fue realizada con la finalidad de
determinar la presencia de saponinas.
Prueba de espuma
Figura 4.Previo a una agitación durante 5 minutos, se observa la presencia de saponinas en la
muestra.
Elaborado por: (Arcos, Vivar, 2014).
