LOGRO
FamiliaVibrionaceae
✓ Bacterias que habitan ambientes acuáticos
marinos y fluviales.
✓ Mas de 34 especies, 13 son patógenas en el hombre.
✓ Asociados a infección gastrointestinal :
▪ Vibrio cholerae O1, V. cholerae no O1 ,
V.parahaemolyticus
▪ V. fluvialis, V. furnissii, V. hollisae. V.mimicus,
✓ Asociado a infecciones extraintestinales:
• Vibrio alginolyticus (otitis externa),
V. vulnificus (heridas, septicemia) V.
damsela, V. metschnikovii, V. carchariae, V.
cincinatiensis.
Vibrio spp
• Cortos
• Rígidos
• Gram-negativo
• Flagelo simple , al
moverse parece vibrar
• Bacilo curvos o en forma de coma
• 206 serogrupos
• anaerobio facultativo, posee ambos
metabolismos fermentativo y respiratorio.
¿Qué hay en el nombre?
“el apelativo de cólera
probablemente viene del griego
que se refiere a una gotera en el
techo, comparando la pérdida de
agua cuando llueve con la que
ocurre en una persona
infectada.”
- Dr. Jean-Pierre Raufman
American Journal of Medicine
Vibrio
• Asociados a enfermedad gastrointestinal son
considerados más importantes :
– V. cholerae, V. parahaemolyticus, V.fluvialis, V. hollisae
• Asociados a infección en heridas
– V. alginolyticus, V. vulnificus
Areas afectadas por V. Cholerae (2000)
Epidemias
Transmisión Feco-oral
Heces de personas infectadas contaminan el
suministro de agua
Diarrea hace fácil que las bacterias se
diseminen en condiciones insanas
Cólera
Endémica – problema localizado
/condiciones sanitarias muy pobres
Epidémica – en una región geográfica/ causada por la
migración de personas
Pandémica- en la mayor parte del mundo/han
habido 7 pandemias
Epidemia del cólera en América
Epidemia inicial:
Enero 1991
Agosto 1991
Febrero 1992
Marzo 1993
CLASIFICACIÓN
Vibrios halofílicos
V. Parahaemolyticus
V. Alginolyticus
V. Vulnificus
V. Mimicus
Vibrios No-halofílicos
➢ V. cholerae 01
✓ biotipo clásico
✓ biotipo El Tor
➢ V. cholerae no-01(se encuentra el serogrupo O139.)
ANTÍGENOS
➢ Antígenos flagelares - ‘H’ – comunes a muchos vibrios
➢ Antígenos ‘O’ presentes sobre la pared celular y son
diferentes entre cepas
– ‘O’ le confiere lo liso a las colonias
Clasificación: Antígeno O1 V.Cholerae
FACTORES DE VIRULENCIA
Toxinas y enzimas
▪ Endotoxina termo estable
▪ enterotoxina (exotoxina [toxina del cólera CT])
CT es antigénica y farmacológicamente idéntica en todos los serotipos
y biotipos
Factor de Permeabilidad Vascular(FPV)
CT aumenta el factor de permeabilidad capilar
Mucinasa
Extrema descamación celular
Resistencia
Susceptible al calor, desecación y temperatura de autoclave. En alto pH
y medio salino sobrevive por 1-3 días.
El Tor sobrevive períodos más largos que el tipo clásico.
ACCIÓN DE LA TOXINA V. CHOLERAE
Efectos de la toxina
➢ Inactiva función de GTPasa de receptores acoplados a
proteína-G en las células intestinales
➢ Proteínas G quedan activadas
➢ Aumenta 100 veces el cAMP
➢ Activación de los canales de iones
➢ Flujo y excreción de iones y agua
Cólera
• Enfermedad Diarreica Aguda
• Fuentes de infección: heces, vómitos,
estados de portador
• Muerte puede ocurrir en 24 hrs
• Vómitos sin esfuerzo
• Heces acuosas profusas (agua de arroz)
• Rápida deshidratación
• Shock hipovolémico – pérdida de fluidos
• Acidosis metabólica – por pérdida de fluidos
• anuria
• 15 -20 litros de líquido son perdidos en un día
Incubación
Pocas horas a 5 días Promedio 1-3
días
Período de incubación más corto: pH gástrico alto
(uso de antiácidos) Consumo de altas dosis de
v.cólera
Sin embargo, el período de incubación del
cólera varía según la susceptibilidad del
huésped y el tamaño del inóculo.
Transmisión
• Alimentos y agua contaminados
• Tratamiento inadecuado de aguas negras
• Falta de tratamiento de aguas
• Mariscos mal sanitizados
• Transmisión por contacto es poco probable
Transmisión
Diarrea grave inducida por una enterotoxina secretada
por V. cholerae
Infección transmitida por el agua causada por la ingestión
de agua/alimentos contaminados por copépodos
infectados por V. cholerae
Enteropatía enterotóxica
(diarrea no-invasiva)
Enfermedad epidémica importante
Síntomas
➢ 2-3 días después del consumo de agua o
alimentos contaminados
➢ Usualmente leve o sin síntomas
75% asintomáticos
20% enfermedad leve
2-5% severa
➢ Vomitos Cólicos
➢ Diarrea acuosa (1L/hora)
Sin tratamiento, la muerte llega desde 18
horas a varios días
Consecuencias de Deshidratación severa
• Depleción del volumen intravascular
• Severa acidosis metabólica Fallo renal y cardíaco
• Ojos hundidos, turgencia de la piel disminuida
• Casi no se produce orina
DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO
Muestras:
De pacientes
Heces acuosas
De contactos y portadores
Hisopados rectales
Microscopia Directa
No es confiable
Preparación en fresco en sol. salina/campo oscuro
• Movimiento de dardos (shooting star)
Cultivo
Heces pueden ser cultivadas directamente Medios de cultivo:
– Agar TCBS
– Agar sangre
– Agar Mac Conkey
Aislamiento de Vibrios patógenos
• Crecen en medios alcalinos no ácidos
Muestra fecal: APA con 1% NaCl (37°C, 6-15 horas) Agar TCBS (37°C, 18-24
horas)
• Colonias sospechosas (color amarillo) : screening
V. cholerae O1 e identificación TSI, LIA (37°C, 18-24h).
Colonias amarillas en TCBS : V. cholerae, V. alginolyticus,V. carchariae, V.
cincinatiensis, V. fluvialis, V. furnissii.
Colonias verdes en TCBS : V. parahaemolyticus, V. mimicus, V. vulnificus
La evacuación de heces abundantes en forma
de "agua de arroz" es característica del cólera
grave. Las heces son acuosas con motas de
mucosa y tienen el aspecto del agua en la que
se ha lavado arroz.
Cultivo en TCBS
Vibrio cholerae
• Agar TCBS altamente diferencial y selectivo.
Colonias 2 a 4 mm Amarillas: fermentación de la
Sacarosa
• Redondas, lisas brillantes y Ligeramente aplanadas.
• Inocular en Agar TSI, LIA y TSA.
• Bacilos Gram Negativos pequeños de 0.5-1.5-3um
• Aerobio, desarrolla a 37°C .
• Tiempo de generación muy corto.
• Crece bien medios alcalinos ph 9.2.
• Se destruye a pH ácidos.
Vibrio Parahaemolyticus
• Causa gastroenteritis severa :Transmitido únicamente por
consumo de alimentos marinos crudos (mariscos). No de
persona-persona
• Características enfermedad
• Diarrea acuosa, sangre (algunos casos)
• Nausea, vómitos, dolor de cabeza, abdominal
• Fiebre baja intensidad
• Incubación promedio 15 horas (4-96 h)
• Duración prom3 días
Vibrio Parahaemolyticus
• Son halófilos estrictos
• No fermentan la sacarosa (colonias verdes en
agar TCBS)
• Cepas patogénicas : Presencia de hemolisinas
• No desarrolla en medios diferenciales sin NaCl,
se recomienda agregar 3 gotas de NaCl al 20%,
antes de la siembra.
Pruebas bioquímicas
Principales pruebas
Voges Proskauer
Hemólisis
Polymyxin B
Fago tipificación
Prueba de VP
coloración rojiza después de adicionar hidróxido de
potasio a los cultivos de ciertos microorganismos en
medio con glucosa.
Esta coloración se debe a la oxidación del acetilmetil
carbinol a diacetilo el cual reacciona con la peptona del
medio para dar un color rojo.
Vibrio cholerae
Identificación serológica de V. cholerae
O1
1.- Serogrupos de Vibrio cholerae
O1 El serogrupo O1 se relaciona
con el cólera epidémico y
pandémico.
2.- Serotipos de Vibrio cholerae
O1: 3 serotipos Inaba, Ogawa,
Hikojima
Profilaxia
Medidas generales
• Sanitización y purificación de agua
• Aislamiento de pacientes
Medidas específicas
Parenteral –Vacuna de bacterias muertas (Igual número de Inaba y Ogawa)
Un estudio reciente sobre las vacunas disponibles y sus efectos,
llegaron a la conclusión de que la vacuna preparada de
bacterias muertas (célula completa) es relativamente efectiva y
segura.
Provee protección hasta por dos años después de la primera
dosis y tres a cuatro años con refuerzos anuales. Dukoral®,
ShancholTM y Euvichol-Plus®.
Tratamiento
Reemplazo de agua y electrolitos perdidos
NaCl 3.5 g
KCl 1.5 g
Citrato de sodio 2.9 g
Glucosa 20 g
Todo en un litro de agua
Antibióticos: (Secundarios)
Tetraciclina, Eritromicina, Quinolonas,
azitromicina
GÉNERO CAMPYLOBACTER
• Las especies del género campylobacter, agrupan
bacilos gram negativos, curvos, espiralados o en
forma de S.
• Presenta un flagelo único en uno o ambos extremos.
• En cultivos de varios días (más de tres) degeneran en
formas esféricas u ovoides que han perdido su
viabilidad.
MORFOLOGÍA: bacilos en forma de
coma, Gram (-), móviles, capa S, no
esporulados.
No fermentadores, la mayoría son
microaerófilos.
Obtienen energía de aa o intermediarios
del ciclo tricarboxílico
• 0.2-05 um ancho 0.5-5 um largo
• Oxidasa positiva
• Catalasa positiva
• Microaerófilicos
• T° 35 -42°; PH 7(4.9 -9)
• No hemoliticus
• Lábiles: calor , congelación ,
desecación
IMPORTANCIA
ABORTOS E INFERTILIDAD
ENTERITIS
HEPATITIS
ALIMENTOS
FACTORES DE VIRULENCIA
TOXINAS: La enterotoxina y las citotoxinas.
• La enterotoxina de C. jejuni es similar a la toxina de Vibrio cholerae
• Diarrea sanguinolenta debida a la producción de citotoxinas.
CITOTOXINAS: La citotoxina de distención (CDT), la cual está compuesta por tres
subunidades codificadas por los genes cdtA, cdtB y cdtC, que provoca en las células
eucariotas la detención en fase G2/M del ciclo celular, evitando que éstas entren
en mitosis, y en consecuencia conduce a la muerte celular
CAMPYLOBACTER especies
Campylobacter fetus
“ coli
“ concisus
“ curvus
“ gracilis
“ helveticus
“ hyoilei
“ hyointestinalis
“ jejuni
“ lanienae
“ lari
“ mucosalis
“ rectus
“ showae
“ sputorum
“ upsaliensis
ESPECIES DE MAYOR
INTERES
•Campylobacter fetus subespecie
fetus
• C fetus subesp venerealis
• C jejuni
• C mucosalis
• C hyointestinalis
Campylobacter spp.-reservorios
• Son las aves de corral, el
ganado bovino, ovino y
porcino , roedores, perros
y gatos.
• La cantidad de hospederos
varía con la especie, C.
jejuni tiene un amplio rango
mientras que C. coli es más
frecuentemente aislado de
porcinos.
EPIDEMIOLOGIA Y TRANSMISIÓN
La enteritis por Campylobacter es una causa importante de diarrea
aguda en todo el mundo.
Por lo general, es causada por Campylobacter
jejuni o Campylobacter coli .
TRANSMISIÓN:
• Por los alimentos.
• El Campylobacter habita en el tracto intestinal de aves de
corral.
• Por el agua y por contacto directo con animales o productos
animales.
MANIFESTACIONES CLÍNICAS
Periodo de incubación : El período de incubación medio es de
tres días (rango de uno a siete días)
MANIFESTACIONES CLÍNICAS
Infección asintomática :
• Es poco común en entornos ricos en recursos, pero es más
común en países con recursos limitados.
• Las infecciones asintomáticas en niños pueden afectar el
crecimiento en las primeras etapas de la vida
Síntomas:
Adultos: Calambres , dolor abdominal, periumbilical, diarrea
10v/día , náuseas.
• En 15% de los pacientes heces con sangre.
• La recaída puede ocurrir en 5 a 10 por ciento de los
pacientes.
Niños: diarrea, fiebre, dolor abdominal y vómitos. Las heces con
sangre pueden estar presentes en más del 50% de los niños.
Fiebre , convulsiones.
MANIFESTACIONES ÚNICAS Y COMPLICACIONES
Manifestaciones únicas
• Pseudoapendicitis:
• Colitis
COMPLICACIONES
Inicio agudo :
• Colecistitis, con o sin diarrea previa.
• Peritonitis en pacientes en diálisis peritoneal .
• Erupción (como urticaria, eritema nudoso, vasculitis, celulitis)
• Osteomielitis.
• Meningitis.
• Pseudoaneurisma séptico.
• Pericarditis y miocarditis.
Inicio Tardío:
• Artritis reactiva
• Síndrome de Guillain Barré
DIAGNÓSTICO
• Cultivo
• Inmunofluorescencia( Campilobacteriosis genital bovina C.
Fetus →Abortos)
• Reacción en cadena de polimerasa
• PCR FilmArray
• Antígeno Fecal Campylobacter (Método: ELISA ,detección
cualitativa, útil mientras se espera resultado de cultivo)
• Prueba serológica para detectar anticuerpos IgM , IgG
Campylobacter jejuni
• Prueba inmunocromatográfica(Método : Flujo lateral)
DIAGNOSTICO
COLORACIONES PARA CAMPYLOBACTER
• Coloración Gram( Se reemplaza la safranina por carbol
fucsina a 0.8%,como coloración de contraste para ver mejor
campylobacter)
• Coloración Gram interrumpido
• Coloración Vagó
• Coloración Vagó (modificado)
La tinción de Gram de las heces (x1000) puede, en algunos casos,
mostrar Campylobacter jejuni, que son pequeños bastoncillos curvos
gramnegativos débiles que pueden tener forma de alas de gaviota. Este
hallazgo puede proporcionar evidencia presunta de infección por
Campylobacter antes de los resultados del cultivo de heces. La condición
atmosférica óptima es 85 por ciento de nitrógeno, 10 por ciento de
dióxido de carbono y 5 por ciento de oxígeno.
ASPECTO DE LAS COLONIAS CAMPYLOBACTER
Aspecto de huevo frito (imagen 1,2) Colonias con
proyecciones(imagen 3,4,5)Traslúcidas
CAMPYLOBACTER JEJUNI
TRATAMIENTO y PREVENCIÓN
La infección por Campylobacter suele ser una infección leve y
autolimitada
• Hidratación
• Antibiótico: Azitromicina , Eritromicina
• Segunda línea : Quinolonas
Prevención:
• El pollo debe cocinarse bien.
• Los utensilios, tablas de cortar y otros elementos utilizados en la
preparación de aves crudas deben lavarse minuciosamente.
• Evitar los productos lácteos no pasteurizados.
Helicobacter Pylori
Helicobacter pylori ( H. pylori ) es la infección bacteriana crónica más prevalente
y se asocia con:
• Úlcera péptica
• Gastritis crónica
• Adenocarcinoma gástrico
• Linfoma de tejido linfoide asociado a la mucosa gástrica (MALT)
MORFOLOGIA
• H. pylori es una bacteria gramnegativa microaerófila con forma de espiral,
de 3,5 micrones x 0,5 micrones
• In vitro, es de crecimiento lento.
• CULTIVO: agar sangre o medios selectivos como los medios de Skirrow
• Incubación a 37ºC en una atmósfera de oxígeno al 5 %(microaerofílico),
con contenido entre 10 - 20% de CO2 (capnofílico) y requieren humeda
durante tres a siete días
• Se forman colonias bacterianas translúcidas, pequeñas, de tamaño
uniforme.
• TINCION GRAM: En forma de espiral o bastón.
• La microscopía de alta potencia: H. pylori tiene dos a siete flagelos
envainados unipolares que mejoran su movilidad a través de soluciones
viscosas.
MECANISMO DE INFECCIÓN
MECANISMO DE INFECCIÓN
DETERMINANTES DE PATOGENICIDAD
SIGNOS Y SÍNTOMAS
DIAGNÓSTICO
Métodos No Invasivos
• Antígeno fecal de H . Pylori(E 98%,S 95%)
• Prueba de urea en aliento(E 100%,S 85%)
• Serología H . Pylori (E y S>90%)(Técnicas moleculares
Inmunoblot , inmunoenzimático(Anticuerpos IgA ,IgM , IgG)
Métodos Invasivos
• Biopsia de estómago(vía endoscópica)
• Histología
• Test rápido de ureasa(Biópsia gástrica ,infección activa)
• Técnicas moleculares(PCR)
BIOPSIA
Una vista de aumento medio de
La vista de alta resolución de la una biopsia gástrica obtenida
superficie y del epitelio foveolar mediante endoscopia muestra
muestra numerosos infiltración de glándulas con
organismos Helicobacter neutrófilos (flecha) y aumento
pylori que recubren la superficie de la infiltración de células
de las células (flechas). mononucleares típica de la
gastritis por Helicobacter pylori .
Histología
www.Helicobacterspain.co
m www.Helicobacterspain.
com
Entre los métodos de tinción más utilizados en la
actualidad están la Hematoxilina y eosina, Giemsa y
Warthin- Starry, aunque también se han empleado las
tinciones inmunohistoquímicas.
NH2-CO-NH2 + H2O 2NH4 + CO2
urea ureasa Amonio y anhídrido
carbónico
TRATAMIENTO
IBP : Inhibidor de bomba de
protones → Omeprazol
REFERENCIAS
BIBLIOGRÁFICAS
a. KONEMAN, E. W.; ALLEN, S.D. 2008,"Diagnostico
Microbiológico", 6ta. Edición, Editorial Médica, Mc Graw
Hill. lnteramericana. España, 533 págs.
b. Murray, P.; Rosenthal K.; Pfaller M. 2014. Microbiología
Médica. 7ma edición, Edit. Elsevier. España, 872 págs.
c. Ramírez, R.; Díaz, J. 2017. Microbiología Clínica Básica.
Impreso en Jesús Bellido. Lima, 527 págs.
MUCHAS GRACIAS
¡Muchas gracias!
