INFORME DE LABORATORIO
ISFDYT 148
MATERIA: Actividad Experimental
ALUMNA: Acosta Luz
PROFESOR: Mancebo Alfredo
CARRERA: Profesorado de Química
TITULO: “Extracción de ADN a partir de células
de la mucosa bucal.”
RESUMEN: El experimento tuvo como objetivo la extracción de ADN de las
membranas de las células del epitelio de la boca. Mediante pruebas realizadas con la
saliva en un tiempo determinado (aproximadamente dos minutos) se pudo visualizar el
precipitado en el fondo del vaso, a nivel macroscópico. La solución de cloruro de sodio
NaCl permitió hacer la suspensión de las células y la acción del detergente romper las
membranas liberando el contenido.
INTRODUCCIÒN:
La molécula de ADN es un polímero que se forma por enlace covalente de miles de
desoxinucleotidos. Su unidad estructural contiene un grupo fosfato, un azúcar de 5
átomos de carbono y una base nitrogenada. La proporción relativa de cada una de las
bases así como el orden o secuencia en que se encuentran, varía de organismo a
organismo, ya que las secuencias de bases específicas para cada organismo, contiene la
información genética que lo define.
Actualmente, existe la tecnología que permite conocer la secuencia de bases de todo el
ADN de un organismo, por ejemplo:
La bacteria Haemophilus influenzae, Escherichia coli.
La estructura propuesta por Watson y Crick es una hélice de giro a la derecha formada
por dos hebras de polidesoxinucleotidos orientadas en sentido anti paralelo.
Se encuentran en las células organizadas en estructuras compactadas, se da una fuerte
tensión que determina que la molécula adopte una configuración superenrrollada.
EXTRACCIÒN DE ADN DE LA SALIVA: Esta información proviene del núcleo de
células del tejido epitelial que se desprenden del revestimiento interior de la boca. Se
recolectó de la muestra bucal, una cierta cantidad de saliva a temperatura ambiente.
Durante la experiencia, pueden observarse tanto la solución de NaCl, que es una mezcla
homogénea de un soluto disuelto en un solvente y una suspensión, que es una mezcla
que se da a escala macroscópica, es decir las partículas son tan grandes que se ven a
simple vista. La extracción de ADN se realizo en etapas utilizando alcohol para
precipitarlo, ya que esta molécula es soluble en agua pero cuando se encuentra en
alcohol se desenrolla y precipita en la interfase. Se observaron unas finas hebras blancas
en el límite de la separación de la fase de alcohol, mientras que el resto de las sustancias
permanecen disueltas.
MÈTODOS Y MATERIALES:
_ Sal, NaCl
_Agua
_Detergente
_ Saliva de la mucosa bucal
_ Etoh
_ Vasos y cuchara
_ Probetas y varilla agitadora
_ Azul de metileno
FUNDAMENTO: La molécula de ADN (acido desoxirribonucleico)presente en el
núcleo de las células eucariotas, tiene como principal función contener la información,
que al expresarse de manera selectiva y regulada permite generar una nueva célula o un
organismo. La información genética se encuentra en estas células, se transcribe a ARN
y se traduce a proteínas.
Es un polímero formado por unidades llamadas nucleótidos, un azúcar (desoxirribosa),
un grupo fosfato que le confiere la característica acida y cuatro bases nitrogenadas:
Adenina, Citocina, Guanina o Timina.
La solución de cloruro de sodio permitió hacer la suspensión de las células del epitelio
bucal, y gracias a la acción del detergente romper las membranas de las células
liberando el contenido y el ADN, que es lo que se pudo observar.
El ADN y el NaCl son menos solubles en el alcohol, por lo que les permite agruparse
formando aglomeraciones y de esta manera precipitar. El NaCl apantalla las cargas del
ADN y este queda menos cargado, esto provoca la precipitación y la formación de
filamentos o finas hebras también.
RESULTADOS:
_ En la interfase se pudo observar las hebras de ADN en el recipiente que se dejo actuar
la solución por un minuto aproximadamente. Se puede ver macroscópicamente,
precipitando.
_ A otra muestra se le coloco azul de metileno, un colorante que se utiliza como tinción
e indicador de los resultados. En este caso su uso, dificulto la extracción de la muestra
por lo que no se obtuvo un resultado esperado. Se pudieron visualizar en el fondo de la
muestra agregados de ADN.
_Las demás muestras se dejaron reposar unos minutos más y esto permitió que las
hebras se aglutinaran y poder extraer el ADN.
CONCLUSIÒN:
Los resultados obtenidos en esta experiencia o método permiten concluir que la saliva
es una muestra para nada invasiva. Es un procedimiento simple de recogida de la
muestra y fácil manejo.
Se logro confirmar la presencia de ADN e las células extraídas.
Fue un proceso de aprendizaje grupal llevado a cabo entre el profesor y alumnos,
pudiendo relacionar conceptos químicos, físicos y biológicos.
BIBLIOGRAFIA:
_Campbell N, “Biología,” séptima edición. Editorial Panamericana. Buenos Aires, 2008
_Eduardo De Robertis Jose HIB, biología celular y molecular.16 edición. Editorial
Ateneo
