MEDAC
Instituto Oficial de Formación Profesional
Grado de Anatomía Patológica y
Citodiagnóstico
Cuaderno de Laboratorio
ASIGNATURA
Técnicas Generales de Laboratorio
PRESENTA
Kiara Karolina Cabrera Coz
Zaragoza, 2024
Caso práctico.
Se analizan 6 muestras mediante PCR para detectar la presencia de
citomegalovirus. Se realiza una PCR multiplex con cebadores específicos
para amplificar un fragmento de 250 pb del genoma viral, junto con
cebadores específicos para amplificar un fragmento de 400 pb de un gen
que codifica la B-globina que debería estar en todas las muestras.
Finalizada la reacción se realiza una electroforesis en gel de agarosa al 2%
junto con un marcador de tamaños.
Analiza y razona el resultado de cada muestra.
Análisis de las muestras:
1:
Es el marcador de peso molecular por lo que nos ayudará a determinar el
tamaño aproximado de las moléculas de ADN presentes en la muestra y nos
permite verificar que la técnica de electroforesis se está realizando
correctamente.
2:
Indica que hay presencia de la banda de 250 pb ya que ha habido una
amplificación del fragmento del genoma de citomegalovirus, lo cual vemos
que hay presencia del virus en la muestra. Por otro lado, también indica
presencia de la banda de 400 pb (B-globina) lo cual se ha realizado una
correcta amplificación del ADN de la muestra, por lo que es positivo. En
conclusión, la muestra 2 presenta evidencia del citomegalovirus.
3:
Aquí vemos que hay presencia de la banda de 250 pb porque habido una
amplificación del fragmento del genoma del citomegalovirus, por lo tanto,
hay virus en la muestra. En relación con la banda de 400 pb, vemos que
está presente porque ha habido una correcta amplificación del ADN por lo
que el resultado es positivo. En conclusión, la muestra 3 es positiva para el
citomegalovirus. En la muestra 3 también podemos ver que hay presencia
de una banda menor a 100 pb, por lo que puede ser por una contaminación
de la muestra.
4.
En esta muestra vemos que hay una ausencia de la banda de 250 pb lo cual
indica que no se ha amplificado el fragmento del genoma, por lo tanto, no
hay presencia del citomegalovirus. En relación con la banda de 400 pb (B-
globina) tampoco hay evidencia, por lo tanto, el resultado es negativo.
Además, podemos ver que hay presencia de 3 bandas, por lo que podría ser
una contaminación de la muestra.
5.
Indica la ausencia de la banda de 250 pb por lo que no hay presencia de
virus en la muestra, por lo tanto, es negativa. Respecto a la banda de 400
pb, no está presente por lo que no ha habido una adecuada amplificación
del ADN de la muestra, por lo tanto, el resultado es negativo. Esto podría
deberse por una baja carga viral o por un error al realizar la extracción del
ADN o la PCR.
6.
Podemos evidenciar que no hay presencia de la banda de 250 pb por lo que
no habría presencia del virus en la muestra. Por otro lado, vemos que hay
presencia de la banda de 400 pb lo que ha habido una adecuada
amplificación del ADN de la muestra, por lo tanto, el resultado es positivo.
7.
Indica la presencia de la banda de 250 pb por lo que ha habido una correcta
amplificación del fragmento del genoma del citomegalovirus. Por lo tanto,
hay presencia del virus en la muestra. En relación con la banda de 400 pb,
evidenciamos que no esta presente en la muestra por lo que el resultado es
negativo. Además, podemos ver que hay presencia de una banda menor a
100 pb, por lo que puede ser por una contaminación de la muestra.