1.
Variedades comunes de
protozoos.
Práctica 4. Observación de
protozoos.
I. Fundamento teórico:
Los protozoos, pertenecientes al reino Eucariota, son organismos unicelulares
que se encuentran en una amplia gama de hábitats, desde ambientes
acuáticos hasta terrestres húmedos, desempeñando roles diversos que
incluyen el parasitismo. A pesar de su unicelularidad, exhiben una notable
diversidad morfológica y taxonómica, con estructuras celulares a menudo
complejas. En entornos acuáticos, los ciliados, flagelados y rizópodos son
ejemplos comunes de este grupo diverso de organismos.
[Link] comunes de
protozoos.
II. Objetivos:
• Observar directamente, con el microscopio óptico, células eucariotas del
reino protista, concretamente protozoos.
III. Materiales:
• Microscopio
• Mechero bunsen
• Portaobjetos y cubreobjetos
• Pipeta Pasteur
• Asa de siembra
• Frasco lavador con agua
• Tinción azul de metileno
• Muestra de protozoos
IV. Métodos:
Preparación de la muestra:
Para la preparación de la muestra de
In vivo
In vivo con glicerina
In vivo con tinción
Fijada con tinción
V. Cuestiones:
1. Describe la preparación de la muestra en el apartado de métodos.
2. Expón brevemente las diferencias entre protozoos y bacterias.
Las bacterias son organismos unicelulares procariotas, por lo que no disponen de un núcleo
delimitado (su ADN se encuentra libre en el citoplasma) y no contiene orgánulos complejos y
tienen pared celular. En cambio, los protozoos son organismos unicelulares eucariotas, es decir,
disponen de un núcleo celular bien delimitado que contiene el material genético y en el citoplasma
se encuentran los orgánulos celulares y no tienen pared celular.
Otra diferencia es que los protozoos son heterótrofos (se alimentan a partir de materia orgánica),
realizan una alimentación por fagocitosis, absorbiendo a otros seres vivos que digieren
intracelularmente. En cambio, las bacterias son mucho más diversas metabólicamente, con especies
heterótrofas, fotoautótrofas y quimioautótrofas (obtienen la energía de la degradación de
compuestos inorgánicos).
3. Comenta las diferencias observadas preparando la muestra por
las diferentes
metodologías de la práctica.
In vivo: Con este método los microorganismos se encuentran vivos por lo que
pudimos observar con total claridad la movilidad y velocidad de los protozoos.
In vivo con glicerina: Aquí también están vivos los microorganismos, pero la
diferencia que se encuentra cuando le echas glicerina es que el medio se
convierte más viscoso y a los protozoos les cuesta más moverse, por lo que se
pueden observar la manera en la que se mueven cuando están vivos pero a
una velocidad mucho menor.
In vivo con tinción: consiste en teñir tejidos vivos, y esto provoca que se tinten
determinadas células o estructuras, y así se aprecia el contraste entre la célula
y el medio y por lo tanto poder estudiar mejor las estructuras de los
organismos ya que a simple vista con el microscopio no resultaría tan evidente
y fácil de diferenciar.
Fijada con tinción: es la más adecuada para determinar e identificar a la
perfección las estructuras de las células, ya que debido a la alteración de la
permeabilidad de la membrana el colorante pasa mucho mejor. En este caso
hemos fijado la muestra mediante calor con el mechero bunsen, momento en
el que mueren las células, y que tiene como finalidad preservar la formas de la
célula o tejidos tanto como sea posible.
4. Los protozoos, ¿tienen núcleo? ¿Qué tipo de nutrición tienen?
Los protozoos son organismos unicelulares eucariotas que generalmente son heterótrofos y se
alimentan de otros seres vivos a través de un proceso de fagocitosis, es decir, que absorben otros
organismos para alimentarse de ellos. Siendo eucariotas, tienen un núcleo delimitado donde se
almacena el ADN y unos orgánulos celulares en el citoplasma.
5. Escribe una breve clasificación de los protozoos. ¿A qué filo o
subfilo pertenece el
que pretendías obtener?
• Rizópodos. Se caracterizan por desplazarse mediante pseudópodos, es decir, formando
“dedos” con el citoplasma y la membrana plasmática que se proyectan hacia adelante. Estas
proyecciones se emplean también para capturar alimento e introducirlo al citoplasma, en un
proceso llamado fagocitosis.
• Ciliados. Su membrana plasmática está rodeada de cilios, es decir, filamentos similares pero
más pequeños y numerosos que los flagelos, que sirven para movilizar a la célula.
• Flagelados. Están dotados de uno o más flagelos, o sea, “colas” que permiten impulsar la
célula y movilizarla.
• Esporozoos. Se trata de parásitos, carentes de movilidad pero que poseen una fase de
división múltiple conocida como esporulación, y que son causantes de enfermedades, como
la malaria.
6. Indica si has logrado el objetivo que te planteabas (qué protozoo
buscabas y si lo
encontraste), y discute el resultado.
BIBLIOGRAFÍA:
• Preparar una práctica de laboratorio, diseñando la toma de la
muestra en base a una búsqueda bibliográfica independiente.
Materiales
• Microscopio
• Mechero de alcohol o mechero bunsen.
• Portaobjetos y cubreobjetos
• Pipeta Pasteur
• Asa de siembra (opcional)
• Frasco lavador con agua
• Tinción de azul de metileto (opcional)
• Muestra de protozoos
Métodos
Preparación de la muestra
El alumnado debe preparar su propia muestra de protozoos,
buscando en la web o el libro de texto información sobre
dónde pueden encontrar protozoos.
Deberá describir detalladamente en el fundamento teórico
qué esperaba obtener, y en el procedimiento, cómo preparó
la muestra (incluyendo las horas o días que tuvo el cultivo
en casa).
La muestra debe traerla al colegio después en un recipiente
herméticamente cerrado. Observación de protozoos
In vivo
1. Limpia un portaobjetos con alcohol y déjalo secar al
aire.
2. Toma una gota con una pipeta Pasteur de la muestra
de protozoos.
3. Añade la gota sobre el portaobjetos.
4. Coloca el cubreobjetos sobre la gota, evitando la
formación de burbujas.
5. Obsérvala al microscopio, comenzando por los mínimos
aumentos.
6. Dibuja en tu cuaderno los protozoos que hayas
observado, y trata de identificarlos.
• In vivo con glicerina
Esta vertiente de la práctica añade glicerina a la muestra
para aumentar la viscosidad del medio y reducir la movilidad
de los protozoos. Para ello basta con coger una gota de
glicerina con una pipeta Pasteur limpia, y añadirla al lado del
cubreobjetos. La gota pasará por capilaridad. También
puedes hacer una preparación 1:1 de muestra y glicerina en
un vaso de precipitado.
In vivo con tinción
Puedes añadir una gota de colorante al lado del
cubreobjetos y dejar que permee por capilaridad.
Fijada con tinción
Al fijar la muestra, las células se mueren, se altera la
permeabilidad de la membrana y el colorante pasa mucho
mejor. Utilizaremos azul de metileno, aunque no es el más
común para protozoos.
1. Limpia un portaobjetos con alcohol y déjalo secar al
aire.
2. Toma una gota con una pipeta Pasteur de la muestra
de protozoos.
3. Esteriliza un asa de siempre (sumérgelo en alcohol y
sécalo con el mechero
bunsen).
4. Una vez enfríe, extiende la gota por la superficie del
porta.
5. Seca el porta al aire o con breves pasadas (3 o 4) sobre
el mechero bunsen, con
cuidado de no quemar la muestra.
6. Añade una gota de azul de metileno con la pipeta Pasteur y
déjala actuar entre 3 y 5 minutos.
7. Lava el exceso de colorante, seca con papel de filtro o al aire
y lleva la muestra al microscopio.
Cuestiones
1. Describe la preparación de la muestra en el apartado de
métodos.
2. Expón brevemente las diferencias entre protozoos y
bacterias.
3. Comenta las diferencias observadas preparando la muestra
por las diferentes
metodologías de la práctica.
4. Los protozoos, ¿tienen núcleo? ¿Qué tipo de nutrición
tienen?
5. Escribe una breve clasificación de los protozoos. ¿A qué filo
o subfilo pertenece el
que pretendías obtener?
6. Indica si has logrado el objetivo que te planteabas (qué
protozoo buscabas y si lo
encontraste), y discute el resultado.
Bibliografía
Práctica adaptada de De Juan Herrero, J. Práctica no2.
Observación de Moneras y protistas. Universidad d’Alacant.
Departament de Biotecnología. Disponible online
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