PREUNIVERSITARIO

BE01
TESLA

ADN
ADN
El ADN es el material genético que los organismos heredan de sus padres. En él están los
genes, porciones específicas de la macromolécula de ADN, que programan las secuencias de
aminoácidos y que corresponde a la estructura primaria de las proteínas. De este modo, y a
través de las acciones de las proteínas, el ADN controla la vida de la célula y del organismo.

La secuencia del material genético se compone de cuatro bases nitrogenadas distintas, que
tienen una función equivalente a letras en el código genético: adenina (A), timina (T), guanina
(G) y citosina (C) en el ADN y adenina (A), uracilo (U), guanina (G) y citosina (C) en el ARN.

La estructura del ADN corresponde a una hélice formada por dos cadenas de polímero de ADN,
que se empaqueta cada vez más con la ayuda de proteínas, hasta formar la cromatina y
cromosomas.

Fig. 1. Estructura del ADN y empaquetamiento.

Experimentos clásicos en ADN

Nuestra comprensión moderna del papel del ADN en la herencia nos ha conducido a una gran
variedad de aplicaciones prácticas, como el análisis forense, las pruebas de paternidad y la
selección genética. Hoy en día muchas personas tienen al menos un conocimiento básico sobre
el ADN, sin embargo hace menos de un siglo ni siquiera los miembros mejor educados de la
comunidad científica sabían que el ADN era el material hereditario.

¿Proteínas o ADN?
El trabajo de Gregor Mendel mostró que los rasgos (como el color de las flores en plantas de
guisantes) no se heredaban directamente, sino que en realidad eran especificados por genes
que pasan de padres a hijos. Posteriormente, gracias al trabajo de otros científicos a
comienzos del siglo XX, se estableció que los factores hereditarios de Mendel probablemente
se encontraban en los cromosomas.

En un comienzo se creía que el material genético se encontraba en las proteínas unidas al

ADN, empaquetándolo. Se sabía que las proteínas tienen diversas secuencias de aminoácidos,
mientras que se creía que el ADN era un aburrido polímero repetitivo, del cual se conocía poco
o de forma incorrecta su estructura. Hoy sabemos que el ADN en realidad no es repetitivo y
puede almacenar grandes cantidades de información. Pero, ¿cómo fue que los científicos
identificaron por primera vez que el "aburrido" ADN podría realmente ser el material
genético?

La transformación bacteriana de Frederick Griffith

En 1928 el bacteriólogo Frederick Griffith realizaba diversos experimentos en búsqueda de una
vacuna contra la neumonía. Utilizaba ratones como modelo animal de experimentación, y
bacterias Streptococcus pneumoniae. En sus experimentos, Griffith utilizó dos cepas de
bacterias relacionadas, conocidas como R y S.

Cepa R. Este tipo de bacterias formaban colonias con bordes bien definidos y aspecto rugoso
po eso se les lla ó R al ultiva los e pla as de Pet i. Las bacterias R no eran virulentas, es
decir, al inyectarlas en un ratón no causaban enfermedad.

Cepa S. Este tipo de bacterias forma a olo ias edo das y lisas s ooth e i glés, y po
eso la de o i a ió S g a ias u a e voltu a de polisa á idos polí e os de azú a es . Esta
capa protegía a las bacterias S del sistema inmunitario del ratón, por lo que resultaban
virulentas (capaces de causar enfermedad). Los ratones a los que se les inyectaban bacterias S
vivas desarrollaban neumonía y morían.

La experimentación de Griffith consistió en inyectar bacterias S previamente calentadas a altas

temperaturas en ratones. Es decir, inyectó bacterias muertas, resultando en ratones sin
infección. Sin embargo, los experimentos tomaron un giro inesperado cuando inocuas
bacterias R se combinaron con las inofensivas bacterias S muertas por calor y se inyectaron en
un ratón. El ratón no solo desarrolló neumonía y murió, sino que cuando Griffith tomó una
muestra de sangre del ratón muerto encontró bacterias S vivas

Griffith concluyó que las bacterias de la cepa R debían haber tomado lo que él llamó principio
transformante de las bacterias S muertas por calor, que les permitió "transformarse" en
bacterias con cobertura lisa y volverse virulentas.
Fig. 2. Experimento de Griffith.

Avery, McCarty y MacLeod descubren que es el principio transformante

En 1944 Oswald Avery, Maclyn McCarty y Colin MacLeod se propusieron identificar el
"principio transformante" de Griffith.

La experimentación comenzó con grandes cultivos de células S muertas por calor, luego
purificaron lo que ellos pensaron e a el p i ipio t a sfo a te lava do, sepa a do y
destruyendo enzimáticamente componentes celulares. Con este método, fueron capaces de
obtener pequeñas cantidades de principio transformante altamente purificado, el cual podían
luego analizar con otras pruebas para determinar su identidad

Evidencias preliminares sugirieron a Avery y colegas que el principio transformante podría

tratarse de ADN. Entre ellas:

 La sustancia purificada dio un resultado negativo en las pruebas químicas conocidas

para detectar proteínas, pero un resultado fuertemente positivo en un examen
químico para detectar ADN.
 La composición elemental del principio transformante purificado era muy semejante a
la del ADN en su proporción de nitrógeno y fósforo.
 Enzimas que degradan proteínas y ARN tenían poco efecto sobre el principio
transformante, pero las enzimas capaces de degradar ADN eliminaban la actividad
transformante.

Estas evidencias no convencieron del todo a Avery, pensaba que era posible que alguna
sustancia contaminante presente en pequeñas cantidades, y no el ADN, fuera el principio
transformante real. Por esta razón el debate sobre el papel del ADN continuó hasta 1952,
cuando Alfred Hershey y Martha Chase utilizaron un enfoque diferente para identificar
concluyentemente al ADN como el material genético.

Los experimentos de Hershey y Chase

Hershey y Chase estudiaron bacteriófagos, virus que atacan bacterias. Los fagos que utilizaban
eran simples partículas compuestas de proteína y ADN, con sus estructuras externas hechas de
proteínas y el núcleo interno compuesto por ADN. Ellos sabían que los fagos se unían a la
superficie de una célula bacteriana hospedera e inyectaban alguna sustancia en el hospedero.

La teoría de Hershey era que esta sustancia resultaría ser una proteína que daba
i st u io es e la a te ia hospede a, o e za do la p oducción de montones y montones
de fagos, es decir, esta sustancia era el material genético del fago.

Para establecer si el fago inyectaba ADN o proteína en las bacterias hospederas, Hershey y
Chase prepararon dos lotes diferentes de fagos. En cada lote, el fago se produjo en presencia
de un elemento radioactivo específico que se incorporó a las macromoléculas (ADN y
proteínas) que componían el fago.

Una muestra se produjo en presencia de S35, un isótopo radiactivo de azufre. El azufre se

encuentra en muchas proteínas y está ausente en el ADN, por lo que este tratamiento solo
marcaba radiactivamente las proteínas del fago.

La otra muestra se produjo en presencia de P32, un isótopo radiactivo de fósforo. El fósforo se

encuentra en el ADN, pero no en las proteínas, por lo que este tratamiento solo marcaba
radiactivamente el ADN del fago (y no sus proteínas).

Cada lote de fagos marcados radiactivamente se utilizó para infectar un cultivo diferente de
bacterias. Después de que ocurría la infección, cada cultivo se metía en una licuadora para
retirar cualquier fago o fragmento de fago restante del exterior de las células bacterianas por
estrés mecánico. Finalmente, los cultivos se centrifugaron para separar las bacterias de los
residuos de fago. La centrifugación causa que el material más pesado, como las bacterias, se
mueva a la parte inferior del tubo y forme una masa llamada sedimento. El material más
ligero, como el fago, los fragmentos de fago y el medio que se usó para alimentar a las
bacterias, forma una capa líquida llamada sobrenadante.

Al analizar la radiactividad del sedimento y sobrenadante en ambos experimentos, Hershey y

Chase encontraron gran cantidad de P32 en el sedimento, mientras que casi todo el S35 en el
sobrenadante.

Con base en esto y otros experimentos similares, Hershey y Chase concluyeron que el ADN, y
no la proteína, se inyectaba en las células del hospedero y constituía el material genético de
los fagos.
Fig. 3. Experimento de Hershey y Chase.

Descubriendo la estructura de doble hélice del ADN, el aporte de

Chargaff, Watson y Crick, Wilkins y Franklin.
Gracias al trabajo del bioquímico Phoebus Levene y otros, los científicos del tiempo de Watson
y Crick sabían que el ADN se componía de subunidades llamadas nucleótidos.

A pesar de lo que sabían sobre la anatomía básica de una cadena de ADN, en ese momento los
investigadores no sabían cuántas cadenas de nucleótidos componían una molécula de ADN,
cómo estaban dispuestas las cadenas en el espacio ni, mucho menos, cómo la estructura del
ADN podría permitir la codificación y transmisión de la información hereditaria.

Leve e p opuso la hipótesis del tet a u leótido , ue o side a ue todas las olé ulas de
ADN se componían de proporciones iguales de los cuatro nucleótidos (es decir, nucleótidos
con las bases A, T, C y G) y que estos nucleótidos se organizaban en unidades repetidas
idénticas. El camino opuesto fue tomado por Chargaff, quien había aislado ADN de diversas
especies y analizado su composición de bases, esperando encontrar diferencias entre ellos.
Chargaff

Erwin Chargaff analizó el ADN de diferentes especies y determinó su composición de bases A,

T, C y G. Este científico hizo varias observaciones claves:

 A, T, C y G no se encontraban en cantidades iguales.

 La cantidad de bases variaba entre especies, pero no entre individuos de la misma
especie.
 La cantidad de A siempre era igual a la cantidad de T y la cantidad de C siempre era
igual a la cantidad de G (A = T y G = C).

Posteriormente Watson y Crick se asa o e las eglas de Chargaff pa a postula el odelo

de la doble hélice del ADN.

Watson, Crick y Rosalind Franklin

En lugar de realizar nuevos experimentos en el laboratorio, Watson y Crick principalmente
recolectaron y analizaron fragmentos de información existente y los juntaron de formas
novedosas y reveladoras. Algunas de sus pistas más importantes sobre la estructura del ADN
fueron producto del trabajo de Rosalind Franklin, una química que trabaja en el laboratorio del
físico Maurice Wilkins.

Franklin era experta en cristalografía de rayos X, una poderosa técnica para la determinación
de la estructura de moléculas. Cuando la forma cristalizada de una molécula, como el ADN, se
expone a rayos X, los átomos en el cristal desvían algunos de los rayos y forman un patrón de
difracción que da pistas sobre la estructura de la molécula.

Fig. 4. Rosalind Franklin y el resultado de la difracción de rayos X del ADN. El patrón de

difracción tiene una forma de X representativa de la estructura helicoidal de doble cadena del
ADN visto desde arriba.
La cristalografía de Franklin dio a Watson y Crick importantes pistas sobre la estructura del
ADN. Algunas de estas provenían de la famosa "imagen 51," una imagen de difracción de rayos
X del ADN sorprendente y extraordinariamente clara que produjeron Franklin y su estudiante
de posgrado. El patrón de difracción en forma de X de la imagen de Franklin inmediatamente
le sugirió a Watson una estructura helicoidal de dos cadenas para el ADN.

Fue en a principios de la década de 1950 en que el biólogo estadounidense James Watson y el

físico británico Francis Crick propusieron su famoso modelo de la doble hélice del ADN,
construido a partir de la revisión de varios investigadores (entre ellos Franklin, Wilkins,
Chargaff y otros). En 1962, James Watson, Francis Crick y Maurice Wilkins recibieron el Premio
Nobel de medicina. Desafortunadamente, para entonces Franklin había muerto y los premios
Nobel no se otorgan póstumamente.

El modelo del ADN de Watson y Crick

La estructura del ADN, representada según el modelo de Watson y Crick, es una hélice
dextrógira de doble cadena antiparalela. El esqueleto de azúcar-fosfato de las cadenas de ADN
constituye la parte exterior de la hélice, mientras que las bases nitrogenadas se encuentran en
el interior y forma pares unidos por puentes de hidrógeno que mantienen juntas a las cadenas
del ADN.

Orientación antiparalela: El ADN de doble cadena es una molécula antiparalela, lo que

significa que se compone de dos cadenas que corren una junto a la otra pero en direcciones
opuestas. En una molécula de ADN de doble cadena, el extremo 5' (el que termina con un
grupo fosfato) de una cadena se alinea con el extremo 3' (el que termina con un grupo
hidroxilo) de su pareja y viceversa.

La hélice dextrógira: En el modelo de Watson y Crick, las dos cadenas de ADN giran una
alrededor de la otra para formar una hélice dextrógira, es decir, que gira hacia la derecha. La
torsión de la doble hélice del ADN y la geometría de las bases crea un hueco más amplio
(llamado surco mayor) y un hueco más estrecho (llamado surco menor) que corren a lo largo
de la molécula. Estos surcos son importantes sitios de unión para las proteínas que mantienen
el ADN y regulan la actividad de los genes.

Apareamiento de bases: En el modelo de Watson y Crick, las dos cadenas de la doble hélice
del ADN se mantienen unidas por puentes de hidrógeno entre las bases nitrogenadas en
cadenas opuestas. Cada par de bases forma un "peldaño" en la escalera de la molécula de
ADN. Estas correspondencias entre A-T y G-C se conocen como pares de bases
complementarias. Aunque el modelo original de Watson y Crick propuso que existían dos
puentes de hidrógeno entre las bases de cada par, hoy sabemos que G y C forman un puente
adicional (tal que los pares de A-T forman dos puentes de hidrógeno en total, mientras que los
pares de G-C forman tres).

Actividad 1
1. ¿A qué molécula se refiere el p i ipio t a sfo a te de Griffith?
a. Proteínas
b. Azúcares
 c. ADN
d. ARN
e. Lípidos
2. La estructura de doble hélice de Watson y Crick corresponde a:
a. Un modelo
b. Una teoría
c. Una hipótesis
d. Un principio
e. Una ley

Replicación del ADN

La replicación del ADN significa producir una copia exacta de sí mismo. El DNA es capaz de
producir una réplica exacta de sí mismo gracias al apareamiento de bases (A con T y C con G).
Cuando el DNA hace una molécula duplicada de sí misma las dos cadenas que lo conforman se
separan. Una vez que las cadenas se han separado, nuevas unidades de bases nitrogenadas (A,
T, C y G), azúcares y fosfatos se ubican de acuerdo a las reglas de apareamiento de bases. A va
en la posición opuesta de T, y C en la opuesta de G. Al termino de todo este proceso se han
creado dos moléculas de DNA idénticas.

La replicación del ADN es semiconservativa. Esto quiere decir que por cada hebra nueva que
se produce se mantiene una de las hebras molde originales en las hijas.

Fig. 5. Replicación semiconservativa del ADN.

Entre las proteínas que participan de este proceso encontramos a la Helicasa encargada de
separar o abrir la cadena de ADN; Topoisomerasa encargada de desenrollar la hélice del ADN;
Primasa que pega pequeños segmentos de ARN sobre las hebras moldes, llamados cebadores
o primers, para permitir la unión de la ADN polimerasa a la hebra molde; ADN polimerasa
encargada de construir la hebra nueva sobre la hebra molde; SSB encargadas de mantener al
ADN abierto, sin enrollarse y estable para que la replicación ocurra; y la ADN ligasa encargada
de unir los fragmentos de Okazaki (cadenas cortas de ADN recién sintetizadas que serán parte
de la nueva hebra) producidos en la hebra retardada por acción de la ADN polimerasa.

La epli a ió del ADN sie p e va e el se tido ’ a 3’ e la ueva he a, po lo ta to se utiliza

la he a olde o ple e ta ia e el se tido 3’ a ’. Es po esta azó ue e la hebra
retardada” se generan fragmentos de Okazaki, pues la ADN polimerasa de e devolve se a
generar una nueva hebra cada cierto segmento, indicados por primers puestos por la primasa.

Fig. . Repli a ió del ADN e se tido ’ a 3’.

Ejercicios
1. [Modelo PSU 2014] Las poblaciones de anfibios han disminuido y dicho
fenómeno se asocia al aumento de la radiación UV en la superficie terrestre.
Además, se sabe que todos los anfibios poseen una enzima llamada fotoliasa,
que repara el daño en el ADN causado por la radiación UV natural. Para
investigar este fenómeno, se tomaron dos grupos de tres especies diferentes
de anfibios, que fueron tratados tal como se muestra en el siguiente diseño
experimental:

¿Cuál de las siguientes hipótesis es posible sustentar con los resultados

obtenidos?
a. La rana arborícola tiene una mayor actividad de fotoliasa que el resto de
estas especies.
b. El declive de todas estas especies de anfibios es resultado del aumento de
la radiación UV.
 c. La rana de las cascadas presenta menor concentración de fotoliasa que el
sapo occidental.
d. En ausencia de radiación UV, el sapo occidental tiene mayor actividad
fotoliasa que el grupo experimental de la rana de las cascadas.
e. La radiación UV inhibe la fotoliasa de la rana arborícola.

2. [Modelo PSU 2015] Si el anticodón del ARNt que porta el aminoácido leucina
es GAG, entonces, la secuencia de nucleótidos en el ADN que codifica para
este aminoácido es
a. GAG.
b. CUC.
c. CTC.
d. AUG.
e. UCG.

3. [Modelo PSU 2015] En el siguiente gráfico se muestra el efecto de la

composición de pares de bases sobre la temperatura de desnaturación del
ADN.

Al respecto, es correcto inferir que:

a. un mayor contenido GC se refleja en una mayor Tm.

b. no hay relación entre el contenido GC y el aumento de Tm.
c. se observa una relación inversa entre el contenido GC y Tm.
d. cuanto mayor es el contenido GC la hebra de ADN es más susceptible a
la desnaturación por acción de la temperatura.
e. la estabilidad del ADN es independiente del aumento de la
temperatura.

4. [Modelo PSU 2015] La tabla del código genético muestra la correspondencia

entre
a. ADN y genes.
b. ADN y aminoácidos.
c. ARN mensajero y codones.
d. codones y aminoácidos.
e. codones y anticodones.
5. [Modelo PSU 2016] El mecanismo involucrado en la síntesis del ARNm a partir
del ADN se denomina:
a. transformación.
b. translocación.
c. transcripción.
d. transducción.
e. traducción.

6. [Modelo PSU 2016] Si se desea extraer el ADN nuclear de una célula vegetal sin
romper la célula, ¿cuál es el orden de estructuras, desde el exterior al interior,
que se debe atravesar?
a. Membrana plasmática – pared celular – carioteca
b. Pared celular – membrana plasmática – carioteca
c. Carioteca – membrana plasmática – pared celular
d. Membrana plasmática – carioteca – pared celular
e. Pared celular – carioteca – membrana plasmática

7. [Modelo PSU 2016] La figura corresponde a una simplificación del modelo de

ADN propuesto por Watson y Crick en 1953.

Al respecto, es correcto afirmar que la importancia de este modelo radica en

que:

I) facilitó la comprensión de la estructura del material genético.

II) permitió explicar algunos fenómenos o situaciones problema
relacionadas con el material genético.
III) permitió observar la estructura del material genético tal cual es.

a. Solo I
b. Solo III
c. Solo I y II
d. Solo II y III
e. I, II y III

8. [Modelo PSU 2016] Un investigador analizó una muestra de ADN bacteriano y

estableció que el 24% de los nucleótidos correspondía a timina. ¿Cuál es el
porcentaje de citosina presente en la muestra de ADN analizada?
a. 24%
b. 48%
c. 76%
 d. 52%
e. 26%

9. [Modelo PSU 2016] Según el modelo de doble hélice del ADN, propuesto por
Watson y Crick, es correcto afirmar que
a. la adenina se une siempre con la citosina.
b. las dos cadenas de nucleótidos de la molécula son paralelas.
c. las bases nitrogenadas de ambas cadenas se unen mediante puentes
disulfuro.
d. las pentosas y los grupos fosfatos forman el interior de la hélice.
e. la cantidad de nucleótidos de pirimidina es igual que la de nucleótidos
de purina.

10. Respecto del ADN de cualquier organismo. ¿Cuál(es) de las siguientes

relaciones es (son) verdadera(s)?
i. El número de bases púricas es siempre igual al de las
pirimídicas.
ii. El número de guaninas es siempre igual al de las citosinas.
iii. La suma de adeninas y timinas es siempre igual a la suma de
guaninas y citosinas.
a. Solo i
b. Solo ii
c. Solo iii
d. Solo i y ii
e. i, ii y iii

11. [Modelo PSU 2011] En la replicación del ADN, las copias resultantes están
formadas por:
a. dos hebras nuevas de ADN.
b. dos hebras de ADN conservadas.
c. una hebra de ADN conservada y otra nueva.
d. dos hebras de ADN, cada una con una mitad conservada y otra nueva.
e. dos hebras de ADN, cada una de las cuales es un mosaico de partes
conservadas y nuevas.

12. Al marcar radiactivamente ambas hebras de una molécula de ADN, y

experimentar dos ciclos de replicación en una solución libre de marcador
radiactivo. De las cuatro moléculas resultantes de ADN:
a. todas presentan radiactividad.
b. ninguna presenta radiactividad.
c. la mitad presenta radiactividad.
d. una presenta radiactividad en ambas hebras.
e. la mitad presenta radiactividad en ambas hebras.

13. El código genético es universal. Esto implica que

 i. todos los seres vivos tienen los mismos genes
ii. la secuencia de ADN que estructura los genes de cualquier
organismo es la misma
iii. un triplete de ARN codifica el mismo aminoácido en cualquier
organismo
Es(son) correcta(s)
a. sólo i
b. sólo ii
c. sólo iii
d. sólo ii y iii
e. i, ii y iii

14. [Modelo PSU 2012] El modelo de Watson y Crick para la estructura del ADN
afirma que este polímero es
a. una hebra lineal.
b. una cadena lineal asociada a histonas.
c. una hebra que forma una estructura helicoidal.
d. dos hebras que forman una estructura helicoidal.
e. una doble hebra asociada a histonas.

15. La di e ió de la epli a ió es de ’ a 3’. ¿Qué se tido te d á la he a

molde?
a. ’ a 3’
b. ’ a ’
c. 3’ a 3’
d. 3’ a ’
e. Ninguna

16. Hershey realizó su experimentación para comprobar que las proteínas eran las
portadoras de la información genética. ¿Cuál de las siguientes hipótesis calza
mejor con su experimentación?
a. Si las proteínas portan el material genético, entonces se observará la
marca de S35 al interior de E. Coli posterior a la infección por
bacteriófagos tratados con radiactividad.
b. Si el ADN porta el material genético, entonces se observará la marca
de P32 al interior de E. Coli posterior a la infección por bacteriófagos
tratados con radiactividad.
c. Si el ADN porta el material genético, entonces se observará la marca
de S35 al interior de E. Coli posterior a la infección por bacteriófagos
tratados con radiactividad.
d. Si las proteínas portan el material genético, entonces se observará la
marca de P32 al interior de E. Coli posterior a la infección por
bacteriófagos tratados con radiactividad.
e. Ninguna de las anteriores
 17. En el laboratorio se ha determinado que una especie tiene el 82% de su
material genético constituido por Guanina y Citosina. ¿Qué porcentaje tiene
esta especie para Adenina y Timina?
a. 82%
b. 18%
c. 20%
d. 100%
e. 88%

18. Una célula contiene 24% de Timina. ¿Qué porcentaje de Adenina tiene la
misma célula?
a. 30%
b. 76%
c. 60%
d. 24%
e. 15%

19. La Adenina y Timina se unen por dos puentes de hidrógeno en la hélice del
ADN, mientras que la Guanina y Citosina se unen por tres puentes de
hidrógeno. Al respecto:
a. Un ADN rico en A y T tienen menor probabilidad de romperse o
abrirse.
b. Un ADN rico en G y C tienen menor probabilidad de romperse o
abrirse.
c. Un ADN rico en A y C tienen menor probabilidad de romperse o
abrirse.
d. Un ADN rico en G y T tienen menor probabilidad de romperse o
abrirse.
e. Un ADN rico en A y U tienen menor probabilidad de romperse o
abrirse.

20. Participan de la replicación del ADN

i. Topoisomerasa
ii. ARN polimerasa
iii. ADN polimerasa
iv. Helicasa
a. Solo i
b. Solo ii
c. ii y iv
d. i, ii, y iii
e. i, iii y iv

CLAVES

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
A A A D C B C E E D
11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
C C C D D A B D B E