BIOMOLECULA A RECONOCER
CARBOHIDRATO PROTEINAS
El reactivo de Benedict es El hidróxido de
el indicador que utilizamos potasio hace que
para detectar una proteína se
monosacáridos. Cuando los rompa para que el
monosacáridos se mezclan sulfato de cobre
con los de Benedict y se pueda reaccionar
calientan, se produce un con los enlaces
cambio de color. Si hay peptídicos. El color
una pequeña cantidad de resultante es
monosacárido en las púrpura. Cuantas
soluciones, se produce una más proteínas, y
solución verdosa. Si la por lo tanto más
solución contiene una gran enlaces
cantidad de monosacárido, peptídicos, haya
resulta un precipitado en la solución,
anaranjado. Una solución más oscuro se
precipitante significa que volverá el púrpura
pequeñas partículas se resultante.
depositan fuera de la
solución.
Monosacáridos + Proteínas + KOH
Calor ⇒ Verde a Naranja CuSO 4 ⇒ Morad
Reactivo de Benedict + +
REACCION PARA RECONOCER PROTEINAS
Materiales
1. Tubos de ensayo etiquetados con el contenido que agregarás a cada
tubo
2. Vaso de precipitados con agua y placa caliente (agua calentada a
punto de ebullición)
3. Regla métrica
4. Marcador
5. Agua desionizada y soluciones de carbohidratos
6. Herramienta apropiada para eliminar los tubos calientes del agua
Procedimiento
1. Obtener 5 tubos de ensayo y numerarlos 1 — 5.
2. Usa un marcador para indicar 2.5 cm de la parte inferior y otra marca
a 5cm de la parte inferior.
3. Llene cada tubo de ensayo hasta su marca de 2.5 cm con la solución
adecuada:
1. Agua destilada 2. Solución concentrada de glucosa 3. Solución
diluida de glucosa 4. Solución de sacarosa 5. Solución de almidón
4. Agrega la solución de Benedict a cada tubo hasta la marca de 5 cm.
5. Colocar todos los tubos en un baño de agua caliente (90°C) durante 2
min y observar los cambios de color durante este tiempo.
6. Después de 2 min, retire los tubos del baño de agua y registre el color
de su contenido en la siguiente tabla. También observa las reacciones
de tu compañero de clase.
Color después de ¿Presencia de
Contenido del tubo
la reacción proteína?
Agua
Solución proteica
Solución de aminoácidos
Solución desconocida
Instrucciones para limpiar
* Los tubos limpios son muy importantes. Los tubos contaminados
pueden influir en los resultados de futuras pruebas.
Cuando sus observaciones estén completas, lave y enjuague
cuidadosamente los tubos siguiendo las instrucciones de la Parte I.
Análisis de datos
1. ¿Cuál de las soluciones es un control positivo? ¿Cuál es un
control negativo?
2. ¿Los aminoácidos individuales tienen enlaces peptídicos?
¿Cómo sabes que esto es cierto?
3. ¿Qué tipo de solución probaste como tu desconocida? ¿Contenía
proteína?
4. Observe las reacciones de sus compañeros de clase y describa
qué soluciones desconocidas contienen más y menos proteínas.
¿Cómo se puede decir?
III. Lípidos
Usar guantes y evitar el contacto con Sudán IV ya que se
considera un posible carcinógeno. Inmediatamente lávese la piel
con jabón y abundante agua si entra en contacto con la
solución.
Práctica No. 18
Biomoléculas
Objetivos:
A lo largo de la práctica se realizarán múltiples reacciones químicas y pruebas
esenciales, que caracterizan la presencia de diferentes biomoléculas en una mezcla o
producto específico. Asimismo, también será necesario aprender a cuantificar las
mismas para su posterior análisis y observación de datos y resultados.
Introducción:
El carbono y sus compuestos son fabricados constantemente por múltiples organismos
vivos, y se encuentran divididos en cuatro grandes grupos: carbohidratos, lípidos,
proteínas y ácidos nucleicos. Todos ellos difieren tanto es sus propiedades químicas,
como en las físicas; sin embargo, los tres primeros son similares metabólicamente, al
menos, en el hecho de que son fuente de energía para los organismos, dado a que el
rompimiento de moléculas complejas da como resultado liberación de energía. De esta
manera los componentes de las moléculas orgánicas se pueden usar en una gran
variedad de combinaciones en los organismos vivos. A estos componentes se les
conoce como biomoléculas, y están presentes en la mayoría de los procesos
biológicos de los organismos. (Universidad Nacional de Colombia, 2013)
A lo largo de la práctica, se trabajará con distintos compuestos así como con múltiples
pruebas metódicas con el fin de identificar las biomoléculas que se hallan presentes en
los productos adyacentes en cuestión. Dichas pruebas son desglosadas en la sección
de Desarrollo para tener una mayor visión del trabajo experimental realizado durante
las tres horas de laboratorio. No obstante, se mencionará un poco acerca de las
pruebas más características para la identificación de glúcidos.
Para la identificación de glúcidos con poder reductor dentro de los monosacáridos y
disacáridos, se trabajó primordialmente con dos pruebas, conocidas como Fehling y
Benedict.
Las pruebas de Fehling y Benedict se basan en la capacidad de los azúcares
reductores de reducir los iones cúpricos (Cu2+). Tanto la solución de Fehling como la
de Benedict son soluciones alcalinas de Cu2+ complejado con iones tartrato (Fehling) o
citrato (Benedict). Si un fluido analizado contiene un azúcar reductor, el ion cúprico se
reduce al estado cuproso (Cu2O). Esta reducción del cobre se manifiesta en la
desaparición del color azul oscura de la solución reactivo y en la aparición de un
precipitado rojo.
(Bradley, F., & Bennett, T. P., 1982)
Consideraciones Teóricas
Las biomoleculas son las moléculas constituyentes de los seres vivos. Los cuatro
bioelementos más abundantes en los seres vivos son el carbono, hidrógeno, oxígeno y
nitrógeno, representando alrededor del 99% de la masa de la mayoría de las células
Diferencias entre azúcares reductores y no reductores
El azúcar, un carbohidrato cristalino, comestible y soluble en agua, es esencial para la
producción de energía en todos los seres vivos. Aunque se asocia más comúnmente
con la sacarosa que se encuentra en los alimentos de sabor dulce, el azúcar también
se encuentra en la mayoría de las frutas (fructosa) y en casi todos los aperitivos,
alimentos procesados o bebidas con sabor como el jarabe de maíz de alta fructosa. A
nivel químico, un azúcar se considera "reductora" si reduce un agente oxidante dentro
de una reacción química, mientras que las que no reducen la oxidación se llaman "no
reductoras".
Componentes químicos
Los azúcares con estructuras químicas que incluyen un átomo de carbono anomérico
libre (tal como glucosa, maltosa, lactosa y fructosa) utilizan este extremo libre para
reducir el oxígeno en una reacción química mediante la donación de electrones a la
otra (unión) molécula. Otros azúcares (tales como sacarosa) han cerrado estructuras
químicas, donde los átomos abiertos son utilizados para unir a la estructura en su
conjunto y, por lo tanto, no tienen los electrones libres para donar a la molécula de
unión. Debido a esto, la oxidación no se reduce durante la reacción.
Tipos de azúcares reductores
Todos los monosacáridos (azúcares simples que no pueden descomponerse en
moléculas más pequeñas) son azúcares reductores. Dos de los tres tipos de azúcares
disacáridos (con dos anillos de sustancias químicas), maltosa y lactosa, tienen la
estructura química abierta necesaria para actuar como agentes reductores. La
estructura simple de los monosacáridos les permite romperse dos veces tan
rápidamente como los disacáridos, mientras que los disacáridos se rompen en sus
partes más pequeñas primero.
Tipos de azúcares no reductores
El tercer tipo de disacáridos, sacarosa, y polisacáridos (azúcares con anillos
químicas múltiples) son los azúcares no reductores. Los polisacáridos - almidones
- tienen estructuras cerradas, que utilizan átomos libres para unir entre sí los
anillos múltiples, y tardan mucho más tiempo en descomponerse.
Desarrollo:
EXPERIMENTO I. Reconocimiento de glúcidos
MATERIALES Y REACTIVOS
- Tubos de ensayo
- Gradilla
- Pinzas
- Mechero
- Pipetas
-Solución de Lugol
- Solución de Fehling A y B
- Solución alcalina (sosa, potasa, bicarbonato, etc.)
- HCl diluido
- Soluciones al 5% de glucosa, maltosa, lactosa, fructosa, sacarosa y almidón.
Los monosacáridos y la mayoría de los disacáridos poseen poder reductor, que
deben al grupo carbonilo que tienen en su molécula. Este carácter reductor puede
ponerse de manifiesto por medio de una reacción redox llevada a cabo entre ellos
y el sulfato de Cobre (II). Las soluciones de esta sal tienen color azul. Tras la
reacción con el glúcido reductor se forma óxido de Cobre (I) de color rojo. De este
modo, el cambio de color indica que se ha producido la citada reacción y que, por
lo tanto, el glúcido presente es reductor.
Prueba de Fehling
. Poner en los tubos de ensayo 3ml de la solución de glucosa, maltosa, lactosa
fructosa o sacarosa (según indique el profesor).
. Añadir 1ml de solución de Fehling A (contiene CuSO4) y 1ml de Fehling B (lleva
NaOH para alcalinizar el medio y permitir la reacción)
. Calentar los tubos a la llama del mechero hasta que hiervan.
. La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo y será negativa si
queda azul o cambia a un tono azul-verdoso.
. Observar y anotar los resultados de los diferentes grupos de prácticas con las
distintas muestras de glúcidos que se le proporcionaran.
R= 2.5 ml de maltosa, sacarosa, glucosa, fructuosa y almidón.
La solución de Fehling ya se encontraba preparada, se usó maltosa,
sacarosa, glucosa y fructuosa los resultados fueron:
Solución Color Resultado
Maltosa Cambió de color azul a Positivo
rojo
Sacarosa No cambió de color, Negativo
permaneció en azul
Glucosa Cambió de color azul a Positivo
rojo
Fructuosa Cambió de color azul a Positivo
rojo
Prueba de Tollens
Coloque en un tubo de ensayo limpio 1 ml de solución de nitrato de plata al 2.5%,
agregue una gota de hidróxido de sodio al 5% y después gota a gota y con
agitación una solución de hidróxido de amonio al 5% justo hasta que se disuelva el
óxido de plata que precipitó, evitando cualquier exceso de NH4OH. Este reactivo
debe usarse recién preparado y debe destruirse con un exceso de ácido nítrico al
terminar de utilizarlo, ya que forma compuestos explosivos.
Agregue al reactivo recién preparado 5 a 10 gotas de solución de azúcar, agite
y caliente brevemente en baño maría, sin dejar de agitar durante el
calentamiento. La aparición de un espejo de plata indica prueba positiva para
azúcar reductor. Una vez terminada la prueba el tubo de ensaye se deberá
limpiar con ácido nítrico para destruir el espejo de plata.
Esta prueba fue realizada en la sesión #16 de laboratorio, el reactivo de
trollens fue preparado con anterioridad por el maestro a cargo, los
reactivos que fueron utilizados para esta prueba fueron
· Sacarosa
· Glucosa
· Fructuosa
· Lactosa
· Maltosa
*Debido a una posible contaminación en los reactivos estos no mostraron
los resultados esperados, ya que el espejo de plata apareció en 4 de
ellos(sacarosa, glucosa, fructosa y lactosa) cuando solamente debía a
aparecer en 2 (glucosa y sacarosa).
Prueba de Benedict
Coloque en un tubo de ensaye 1 ml del reactivo de Benedict y cuatro o cinco
gotas de la solución del azúcar. Caliente a ebullición y deje enfriar a
temperatura ambiente. Un precipitado cuya coloración varía desde amarillo
hasta rojo, con decoloración de la solución, indica prueba positiva.
Solución Observaciones
Fructuosa Después de calentarse se tono de un color rojo en la parte inferior,
en medio azul y en la parte superior de un tono naranja.
Maltosa En la parte inferior apareció un color rojizo menos profundo que
el de la fructuosa pero abarcaba más volumen del tubo de ensayo,
se muestra azul en la parte intermedia y en la parte superior se
observa un color anaranjado más claro que el de la fructuosa.
Sacarosa Continuo de color azul
Glucosa Tiene una mancha roja al fondo, seguida de una azul y en la parte
superior una de color naranja.
Anote los resultados en el siguiente cuadro:
Reacción de Trollens Reacción de Fehling Reacción de Benedict
Glucosa Formación de espejo Cambió de color Tiene una mancha roja
de plata azul a rojo. Positivo al fondo, seguida de una
azul y en la parte
superior una de color
naranja
Fructuosa Formación de espejo Cambió de color Después de calentarse
de plata azul a rojo. Positivo se tono de un color rojo
en la parte inferior, en
medio azul y en la parte
superior de un tono
naranja.
Maltosa No se formó el Cambió de color En la parte inferior
espejo de plata azul a rojo. Positivo apareció un color rojizo
menos profundo que el
de la fructuosa pero
abarcaba más volumen
del tubo de ensayo, se
muestra azul en la parte
intermedia y en la parte
superior se observa un
color anaranjado más
claro que el de la
fructuosa.
Sacarosa Formación de espejo No cambió de color, Continuo de color azul
de plata permaneció en azul.
Negativo
La sacarosa es un disacárido que no posee carbonos anoméricos libres por lo
que carece de poder reductor y la reacción con el reactivo de Fehling es
negativa, tal y como ha quedado demostrado en el experimento 1.
Sin embargo, en presencia de HCl y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es
decir, incorpora una molécula de agua y se descompone en los monosacáridos
que la forman, glucosa y fructosa, que sí son reductores. La prueba de que se
ha verificado la hidrólisis se realiza con el reactivo de Fehling y, si el resultado
es positivo, aparecerá un precipitado rojo. Si el resultado es negativo, la
hidrólisis no se ha realizado correctamente y si en el resultado final aparece
una coloración verde en el tubo de ensayo se debe a una hidrólisis parcial de la
sacarosa.
TÉCNICA
. Tomar 3ml de solución de sacarosa y añadir 10 gotas de HCl diluido.
. Calentar a la llama del mechero durante unos 5 minutos.
. Dejar enfriar.
. Neutralizar añadiendo 3ml de solución alcalina.
. Realizar la prueba de Fehling como se indica en el experimento 1.
. Observar y anotar los resultados
El color de la sacarosa paso de ser azul a ser un color verde ligeramente
rojizo, lo que nos indica que hubo una hidrolisis parcial.
INVESTIGACIÓN DE POLISACÁRIDOS (ALMIDÓN)
FUNDAMENTO
El almidón es un polisacárido vegetal formado por dos componentes: la amilosa
y la amilopectina. La primera se colorea de azul en presencia de yodo debido
no a una reacción química sino a la adsorción o fijación de yodo en la superficie
de la molécula de amilosa, lo cual sólo ocurre en frío. Como reactivo se usa
una solución denominada lugol que contiene yodo y yoduro potásico.
Como los polisacáridos no tienen poder reductor, la reacción de Fehling da
negativa.
TÉCNICA
. Colocar en un tubo de ensayo 3ml de la solución de almidón.
. Añadir 3 gotas de la solución de lugol.
. Observar y anotar los resultados.
. Calentar suavemente, sin que llegue a hervir, hasta que pierda el color.
. Enfriar el tubo de ensayo al grifo y observar cómo, a los 2-3 minutos,
reaparece el color azul.
Se colocaron 3 ml de solución de almidón al 5% en un tubo de ensayo y
posteriormente se le añadieron 3 gotas de solución Lugol, la solución se
tornó de un color café oscuro en el fondo y en la superficie se observó un
color aún más oscuro, se calentó sin que se dejase hervir hasta que el
color se perdió, después de enfrió el tubo con agua del grifo y después
de aproximadamente 4 min la solución de torno azul nuevamente.
EXPERIEMENTO II. Extracción de ADN
MATERIAL Y REACTIVOS
· Mortero con pistilo
· Colador o centrífuga
· Vaso de precipitado de 100 mL
· Tubo de ensayo grande
· Varilla fina o asa de Henlle
· Matras erlemeyer 125 Ml
· Muestra vegetal (fresa, zarzamora, hijo, plátano, tomate. jitomate)
· 1 Kilogramo de Hielo
· Agua (destilada o mineral)
· Cloruro de sodio
· Bicarbonato sódico
· Detergente líquido
· Alcohol etílico 90 %
FUNDAMENTO
La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los
iones salinos son atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su
disolución y posterior extracción de la célula. Se empieza por lisar (romper) las
células mediante un detergente, vaciándose su contenido molecular en una
disolución tampón en la que se disuelve el ADN.
En ese momento, el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos
moleculares: ARN, carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor
proporción. Las proteínas asociadas al
ADN, de gran longitud, se habrá fraccionado en cadenas más pequeñas y
separadas de él por acción del detergente. Sólo queda, por tanto, extraer el
ADN de esa mezcla de tampón y detergente, para lo cual se utiliza alcohol
etílico.
REALIZACIÓN
1. Preparar el tampón o solución de lisis con los siguientes ingredientes y
mantener en la nevera o en un baño de hielo triturado:
· 50 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.
· 1,5 g cloruro de sodio
· 5 g de bicarbonato sódico.
· 5 ml de detergente líquido.
2. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que
pueda haber en la cocina (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos,
y molerla en el mortero con pistilo. Triturar la muestra con un poco de agua
3. Mezclar en un matraz de 125 mL limpio 10 ml del triturado celular con 20 ml
del tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar
después los restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo
pasar por un colador lo más fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja
velocidad 5 minutos y después pipetear el sobrenadante.
4. Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10
ml de alcohol etílico enfriado a 0ºC. Se debe dejar escurrir lentamente el
alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol
quedará flotando sobre el tampón.
5. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la
separación entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y
hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño
de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con
lo cual el ADN quedará adherido a su estreno con el aspecto de un copo de
algodón mojado.
Se molieron en el mortero 3 fresas con un poco de agua y se tomaron 10
ml, luego se colocó dentro del matraz de 125 ml junto con 20ml de la
solución de lisis que anteriormente había sido preparado, se agitó
durante 2 minutos, se hizo pasar por un papel filtro para quitar los
pedazos de mayor tamaño, al liquido molecular obtenido se le quitaron
5ml y se pusieron en un tubo de ensayo, al tubo de ensayo se le agregó
posteriormente 10ml de alcohol etílico, el alcohol quedó en la parte
superior del recipiente sin mezclarse con la solución de lisis, se introdijo
la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre
el alcohol y la solución de lisis, se removió la varilla, pasando un minuto
la varrilla se retiró atravesando la capa de alcohol, el ADN quedó
adherido, su aspecto es una especie de algodón o espuma.
El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que,
entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se
realiza añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden
que se unan al ADN.
Cuestionario:
¿Cuál es la función del detergente en el experimento? Explique y esquematice la
acción
Se ocupó el detergente ya que este realiza la acción de lisar o bien romper las
células que se va a extraer. el detergente hace que la célula vacíe su contenido
molecular en una disolución en la cual se va a disolver el DNA.
¿Cuál es la función química del cloruro de sodio en el experimento?
El cloruro de sodio hace que el proceso de la extracción sea posible pues facilita el
propósito de la deshidratación que realiza el alcohol y así mismo facilita la
separación por medio de la centrifugación.
¿Cuál es la función del alcohol en el experimento?
El alcohol se utiliza para extraer el DNA debido a que la solución contiene además
de DNA otras moléculas como proteínas, RNA, carbohidratos etc., se necesita
sacar únicamente el DNA y el alcohol limpia el DNA haciendo que se deshidrate y
lo aísla para dejarlo libre de impurezas.
Al finalizar la experiencia se obtiene un mucus blanco y fibroso que sería el ADN.
¿Es posible que la molécula de ADN se visualice a simple vista? ¿Por qué? ¿Y
qué creen que contiene "el ADN" obtenido en la experiencia?
No es posible ya que además de el tamaño tiene pegados algunos fragmentos de
RNA y el DNA obtenido no es del todo puro.
CUESTIONARIO
1 ¿Por qué en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?
La glicerina aparece en la fase acuosa debido a que las grasas se descomponen
gracias a que sucede un mecanismo de hidrólisis mediante las enzimas lipasas, el
hecho de que se lleve a cabo la hidrólisis es lo que provoca que el producto de la
descomposición de las grasas en este caso la glicerina aparezca en la fase
acuosa.
2. ¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrólisis de las grasas?
La enzima que logra esto en el aparato es la lipasa, esta enzima da a lugar la
formación de ácidos grasos y glicerina.
3. Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudán III y explica
Debido a que el Sudán III es un colorante que es sumamente soluble en las grasas
hace que la mezcla tome un color rojizo. Por lo tanto esto significa que hace
posible la detección de la presencia de grasas en una mezcla determinada.(Díaz,
2011)
CUESTIONARIO
1. ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de las proteínas?
El proceso de desnaturalización en las proteínas se manifiesta de forma que
aparece un proceso llamado coagulación, el cual consiste en que las proteínas al
ser calentadas a temperaturas de alrededor de mas de 70 grados Celsius o al
agregarse soluciones salinas, ácidos o alcohol forman coágulos y esto destruye
sus estructuras tanto secundaria como terciaria.
2. ¿Cuál de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalización?
El agente desnaturalizante mas potente es el ácido sulfúrico ya que debido a que
es un ácido muy fuerte, es capaz de hacer que la proteína tenga una mayor
pérdida de la estructura.
3. ¿Cómo podríamos saber que una sustancia desconocida es una proteína?
Si en un caso determinado esta proteína sería un lípido se puede hacer uso de
algún ácido para poder desnaturalizarla y se identificarían viendo si se forman
grumos en la mezcla. Posteriormente se podría llevar a cabo la reacción del biuret
adicionando este reactivo y observando la coloración.(Ávila, 2009)
4. ¿Qué coloración da la reacción del Biuret?
la coloración de la reacción del Biuret al haber proteínas es violeta y cuando hay
combinación con polipéptidos da un color rosa.
5. ¿Una proteína coagulada podría dar la reacción del Biuret?
Si es posible realizar la reacción del Biuret con una proteína desnaturalizada ya
que esta al desnaturalizarse pierde su estructura secundaria y terciaria pero
conserva la estructura primaria por lo que los enlaces peptídicos siguen ahí y la
reacción podrá cumplir su objetivo.
6. Si se realiza la reacción del Biuret sobre un aminoácido como la Glicina ¿es
positiva o negativa? ¿Por qué?
Cuando realizamos esta reacción en un aminoácido dará negativa ya que esta
reacción se encarga de detectar la presencia de proteínas y otros compuestos que
cuentan con enlaces peptídicos, estos enlaces deberán ser dos o mas, si se tiene
un solo aminoácido no existe tal enlace. Sin embargo si se tienen dos daría
positiva.(Ávila,2009)
Conclusión:
A lo largo de la práctica se trabajó con distintas pruebas y metodologías con el fin de
identificar la presencia de diversas biomoléculas dentro de los productos en cuestión.
Dentro de dichas pruebas, figuran las más características, como lo son Fehling,
Benedict, y Tollens para el reconocimiento de glúcidos, extracción de ADN, la técnica
de saponificación para el reconocimiento de lípidos y reacciones de Biuret para la
coagulación de proteínas, así como la prueba de Xantoproteínas.
Todo el procedimiento llevado a cabo permitió el análisis y comprensión de los
resultados obtenidos mediante conocimientos afianzados en las materias de Química I
y Química Orgánica, dando como resultado una mayor valoración de los mismos.
Objetivo general: Estudiar e identificar
carbohidratos, vitamina C, proteínas y enzimas
en algunos alimentos.
Materiales y sustancias a utilizar.
Recipientes de vidrio
Cocinilla eléctrica
Goteros
Jeringa 10 mL
Zumo de frutas (naranja, manzana, uva, limón, etc)
Alcohol isopropilico o etílico
Huevo
Leche
Pan
Papa
Levadura
Azúcar
Almidón (fécula de maíz)
Solución de Lugol (Betadine)
Agua oxigenada de 10 y 20 volúmenes
Vaso medidor
Parte I. Proteínas
a) Desnaturalización de la proteína del huevo
Procedimiento:
Separa la clara de la yema de huevo. Luego en 2 recipientes de vidrio
coloca la misma cantidad de clara. En el primer recipiente agrega
alcohol etílico y el segundo recipiente somételo a calentamiento en
un baño de María. Para ambos casos, observa lo que ocurre y
responde:
• Explica ¿qué le sucede a la clara?
• ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la clara de huevo?
• ¿Cuál proteína contiene la clara del huevo?
• ¿Es un proceso irreversible? Explique
• ¿Qué otro agente puede desnaturalizar la proteína de la clara de
huevo?
b) Desnaturalización de la proteína de la leche.
Procedimiento:
Coloca un poco de leche en un recipiente y llévalo a calentamiento en
un baño de María, sin llegar a hervir. Luego agrégale un poco de
zumo de limón. Observa lo que ocurre y responde:
• Explica ¿qué le sucede a la leche?
• ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la leche? ¿Qué significa
que la leche está “cortada”?
• ¿Cuál proteína contiene la leche?
• ¿Es un proceso irreversible? Explique
• ¿Qué otro agente puede desnaturalizar la proteína de la leche?
Parte II. Enzimas. Acción de la catalasa.
Procedimiento 1: Agua oxigenada de 20 volúmenes y levadura
Necesitarás de un recipiente alto de vidrio para que se
pueda apreciar el experimento, ya que el producto formado
es expulsado hacia arriba y de forma rápida.
Coloca en el recipiente media taza de agua oxigenada de
20 volúmenes.
Luego añade 10 gotas de colorante vegetal de tu
preferencia (opcional).
Luego agrega levadura y agitas la mezcla.
Espera unos minutos y observa lo que ocurre.
.Procedimiento 2: Agua oxigenada y papa
En un recipiente agrega un poco de agua oxigenada de 10 volúmenes
y luego añade un trozo de papa. Observa lo que ocurre.
Para ambos casos responde:
¿Qué ocurre al agregar la levadura y la papa?
¿Cuál reacción fue más rápida?
¿Cuál es la función de la levadura y la papa?
¿Qué le ocurrió al agua oxigenada?
¿Qué es la catalasa?
Parte III. Carbohidratos.
Prueba de Lugol
Para este experimento necesitarás de una papa, pan, solución de
sacarosa, jugo de naranja y solución de almidón. A cada muestra
agrégale unas gotas de Lugol y observa lo que ocurre. Si no dispones
de la solución de Lugol, puedes utilizar una solución de betadine
(polividona yodada), que no es más que una solución empleada como
desinfectante y antiséptico, principalmente para tratar cortes
menores en la piel.
La prueba de Lugol da positivo cuando muestra una coloración
púrpura o azul oscuro.
Responde:
¿En qué consiste la prueba de Lugol?
¿Por qué el almidón se torna purpura o azul cuando se le
añade Lugol?
¿Por qué la sacarosa y el jugo de naranja dan negativo para
esta prueba? Explique.
Parte IV. Vitamina C
Se realizará una prueba para identificar la cantidad de vitamina C que
hay en diferentes tipos de jugos. Para ello, primeramente se debe
preparar una solución analizadora, la cual permitirá identificar la
vitamina C.
Esta solución se prepara de la siguiente manera:
Disuelve una pequeña cantidad de fécula de maíz en agua y luego
sométela a calentamiento. El líquido sobrenadante será el almidón en
solución.
Ahora añade 10 mL de disolución de almidón a 250 mL de agua, y a
esto unas gotas de betadine (yodo en disolución). Trata de que el
líquido se torne azul oscuro, ya que si añades mucho yodo, el líquido
quedará parduzco y el análisis de vitamina C no será efectivo.
Ahora es momento de analizar la cantidad de vitamina C que hay en
los zumos de frutas que tengamos a la mano. Para ello, dispone de la
cantidad de recipientes de vidrio que corresponda a los diferentes
zumos que tengamos. En cada recipiente añade 10 mL de la solución
azul analizadora. Luego con un gotero añade gota a gota el zumo de
fruta de tu preferencia y anota en un cuadro la cantidad que se
necesitó para decolorar la solución. Puedes probar con zumo natural o
envasado, agua, zumo recién exprimido o que se ha calentado antes
del análisis.
El zumo tendrá más vitamina C cuantas menos gotas necesitemos
para decolorar la solución analizadora.
Responde:
¿Qué es la vitamina C?
¿Por qué se decolora la solución yodada en presencia de la
vitamina C?
¿Cuál de los zumos de frutas analizados posee mayor
cantidad de vitamina C? ¿cuál posee menor cantidad?
1. Observa el ADN de una fruta
Cuando estamos hablando de biomoléculas, el rey de todos es el ADN
o ácido desoxirribonucleico. Entender la estructura, la función y la
regulación del ADN ha sido uno de los grandes retos de la ciencia; y
en los últimos años cada vez se agregan nuevas aplicaciones al uso
de esta molécula.
Hacer un experimento para ver el ADN es impresionante para los
estudiantes, pero además les ayuda a entender las bases de lo que
ya se considera la próxima revolución industrial: la biología sintética.
¿Qué necesitas?
Sal, jabón líquido (para trastes), agua tibia a caliente, fresas o
plátanos, filtros para café, etanol frío y recipientes de trabajo.
¿Qué tienes que hacer?
Poner la fruta en un recipiente y agregar suficiente agua caliente para
cubrirla. Agregar 5 cucharadas de una mezcla de jabón líquido con
sal. Machacar o moler toda la mezcla. Filtrar el resultado y agregar el
alcohol frío a la solución filtrada por la orilla del recipiente. Podrás ver
las fibras de ADN a simple vista.
Con este experimento los estudiantes podrán ver el ADN a simple vista.
¿Por qué funciona?
La mezcla de jabón con sal rompe las paredes celulares y libera el
ADN, el cual es soluble en agua pero no en alcohol. Una vez que se
agrega el alcohol el ADN se agrega hasta formar las fibras visibles. Se
eligen estas frutas por tener genomas grandes y múltiples copias, lo
que hace que sea más fácil obtener mayor cantidad de ADN.
¿Quieres lograr más?
Si bien extraer ADN de frutas es una excelente introducción por su
simplicidad, no ofrece una experiencia completa sobre lo que es
trabajar con ADN. Con los módulos “Extracción de ADN de
bacterias” y “Análisis forense” de Scintia puedes llevar a tu salón
de clases una experiencia integral para hacer análisis de ADN ¡tal
cual lo hacen en los laboratorios forenses!