HONGOS: AISLAMIENTO Y OBSERVACIÓN MACROSCÓPICO Y
MICROSCÓPICO
V. Ordoñez Duran (104921021023)
Yurleny Alejandra Beltran Reyes (104922011282)
Elmer Emidio Ordoñes Ojeda (104921021060)
Laboratorio de Microbiología, Universidad del Cauca, Popayán Colombia
Recibido: 22 noviembre 2024
Resumen
Los hongos pueden ser unicelulares, o se pueden diferenciar y hacer
multicelulares mediante el desarrollo de filamentos con ramificación larga. En
esta práctica de laboratorio se realizaron varios procedimientos para identificar el
crecimiento de los hongos en diferentes cultivos y siembras. Se realizó una
siembra directa usando como muestra un tomate en estado de descomposición,
obteniendo como resultado un alto crecimiento microbiano afectado por un
hongo. También se identificaron las características macroscópicas y
microscópicas de diferentes mohos (Aspergillus y Trichoderma) y levaduras a
40X y 100X, donde se ubico hifas, conidióforos color, apariencia, etc. Por último
se realizó una siembra a partir de cultivos puros en el centro del agar, donde se
incubó la muestra por 8 días, observando su crecimiento. Se pudo deducir que los
hongos son microorganismos que subsisten en diferentes tipos de hábitat y si se
tienen condiciones adecuadas para su crecimiento, se desarrollará de manera
apropiada y rápida.
esporas, las cuales se propagan a través del
1. INTRODUCCIÓN. aire, el agua o a través de insectos.
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Los hongos son organismos que tienen un El principal objetivo de esta práctica se basó en
núcleo definido y que poseen características la caracterización macroscópica y microscópica
similares a las plantas y los animales. Sin de hongos, a partir de cultivos puros y realizar
embargo, no están conformados por órganos procesos de medición y registro de crecimiento
como hojas, raíces, corazón o pulmones. Sus a través del cultivo, así como también
células son alargadas y al alinearse unas con identificar signos y síntomas de una muestra
otras forman filamentos denominados hifas. vegetal.
Estas se entrelazan en una masa similar al
algodón llamada micelio. A estos hongos se les 2. OBJETIVOS.
denomina filamentosos. No obstante, algunos
hongos pueden estar formados por una sola • Identificar y analizar la presencia de hongos
célula; es el caso de las levaduras. Por otra en muestra vegetal contaminada (tomate de
parte, los hongos (moho) son organismos cocina) describiendo síntomas y signos
microscópicos que viven en la materia animal o evaluando los posibles riesgos para la salud
vegetal, estos ayudan en la descomposición de humana.
la materia muerta y a reciclar los nutrientes del • Reconocer y caracterizar un hongo por sus
medio ambiente. Se encuentran presente características físicas y patógenas presentes.
prácticamente en todas partes y se les puede •Examinar la morfología y el color de las
encontrar creciendo en materia orgánica como esporas de diferentes hongos, y cómo estas
el suelo, los alimentos y la materia vegetal. características ayudan en su identificación.
Para poder reproducirse, el moho produce
3. MATERIALES Y MÉTODOS
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Características macroscópicas y microscópicas de los hongos
Los materiales utilizados en la práctica de durante el aislamiento y cultivo de los
microcultivo y aislamiento de hongos incluyen: hongos .
● Medio de cultivo: PDA
● Cámara húmeda. 4. RESULTADOS Y DISCUSIONES
● Bisturí estéril: Para cortar porciones de
PDA. 4.1. Observación síntomas y signos por
● Asa estéril: Para inocular el medio con siembra directa.
esporas o hifas de hongos.
● Portaobjetos y cubreobjetos: Para la La muestra vegetal utilizada fue un tomate de
observación microscópica. cocina el cual estuvo en contacto constante con
● Agua destilada estéril: Para mantener humedad durante 8 días, en la Fig 1 se puede
un ambiente húmedo. observar la muestra afectada.
● Azul de lactofenol: Para la observación
de estructuras microscópicas.
● Hipoclorito al 0,5%: Para desinfectar
muestras vegetales.
● Frasco lavador con etanol.
Se utilizan varios métodos, entre los cuales se
da a resumir de forma concreta los siguientes
que hicieron una práctica efectiva:
1. Siembra directa: Este método implica
cortar pequeños cuadritos de tejido de
plantas con síntomas de infección y
sembrarlos directamente en un medio Fig 1. Muestra vegetal
de cultivo (PDA) después de
desinfectarlos con hipoclorito al 0,5% . Es posible identificar claramente sus síntomas,
y signos los cuales se mencionan a
2. Microcultivo: Consiste en inocular una continuación:
porción de PDA en un portaobjetos
dentro de una cámara húmeda. Se Síntomas presentes en la muestra vegetal:
coloca el portaobjetos en un ambiente ● Blandura y suavidad en la mitad
controlado para permitir el crecimiento afectada
del hongo, manteniendo la humedad ● Cambio de color en la zona afectada
adecuada durante el proceso de volviendose mas blanca
incubación . ● Pérdida de firmeza alrededor del tomate
3. Repique y subcultivo: Este método se Signos presentes en la muestra vegetal:
utiliza para obtener cultivos puros de ● Manchas blancas en la zona afectada
hongos. Se toma una pequeña muestra ● Generación de lixiviados en gran
de un cultivo en medio sólido y se proporción
siembra en un nuevo medio PDA, ● Olor desagradable
incubando a 28 °C para observar el
crecimiento . Además es posible identificar que presenta una
capa en su parte superior parecida a “espuma”
4. Técnicas de asepsia: Se enfatiza la lo cual representa la presencia de una infección
importancia de trabajar en condiciones fúngica. Esta representa una colonia de esporas
estériles para evitar la contaminación del hongo que se ha desarrollado en la
superficie del tomate, esto ocurre debido a
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condiciones ambientales que permiten el crecimiento de esporas, resultado esperado,
crecimiento del hongo, como por ejemplo la debido a que la muestra vegetal las contenía y
humedad. que el tomate estaba contaminado con este
hongo antes de ser sembrado en el Agar PDA,
Luego de dejar la siembra directa en la lo cual fue así.
incubadora durante 8 días a 28 °C el resultado a
continuación en las Fig 2 y Fig 3. Algunos hongos son beneficiosos y se utilizan
en la producción de alimentos como el queso ó
el pan, otros pueden ser perjudiciales para la
salud por ejemplo cuando hay presencia de
micotoxinas, sustancias tóxicas producidas por
ciertos tiempos de hongos. De acuerdo a un
estudio en la revista de química agrícola y
alimentaria estos pueden ser cancerígenos con
el hígado y son resistentes al calor y procesos
de cocción, por lo cual siguen siendo
perjudiciales aun después de cocinarlo, ya que
Fig 2. Siembra PDA 1 dia a 28 °C al cocinar un tomate mohoso no asegura que las
micotoxinas se eliminen. Además, los hongos
pueden ser alergénicos para algunas personas
por las esporas del moho y provocar síntomas
alérgicos en individuos sensibles como
estornudos, picazón en los ojos y problemas
respiratorios, así como desencadenar asma,
vómitos o diarrea. Algunas micotoxinas irritan
el revestimiento de los intestinos aunque es
menos común también hay riesgo de infección
en hongos en personas con sistemas
inmunológicos debilitados causando
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infecciones.
Fig 3. Siembra PDA 8 días a 28 °C Por tanto siempre se debe inspeccionar los
tomates antes de consumirlos y descartar todo
Se puede observar que hubo crecimiento el tomate si se le presenta algún síntoma,
Microbiano, lo cual refleja la contaminación de además previo a su consumo estos deben
la muestra vegetal con un hongo. El color almacenarse en lugares frescos y secos,
blanco del cultivo sugiere la presencia de un así como tener un adecuado lavado con vinagre
hongo filamentoso, como por ejemplo diluido. Es importante realizar este proceso con
Aspergillus. Sin embargo, una identificación todas las frutas y verduras.
precisa requeriría un examen microscópico y
pruebas adicionales, lo cual no se realizó en el 4.2. A partir de cultivo puro.
laboratorio. Además, se identificó que el hongo
encontró las condiciones de temperatura (28
°C) y nutrientes (Agar PDA) óptimas para su
proliferación.
Teniendo en cuenta el hecho de que el hongo
haya cubierto toda la caja de Petri indica que se
propaga rápidamente bajo condiciones
favorables. En la Fig 3 también se observa el
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Características macroscópicas y microscópicas de los hongos
Aquí mostraremos la curva de crecimiento de acuerdo al
pasar de los días de incubación, las cual es directamente
proporcionar el crecimiento con el pasar de los días:
Fig 4. Dia 1 de crecimiento Aspergillus.
Gráfica 1. Crecimiento Aspergillus
El análisis del crecimiento lo hicimos y
concluimos en base de cinco aspectos
importantes los cuales son biológicos y
ambientales:
● Reproducción asexual: Aspergillus se
reproduce principalmente a través de
esporas, que germinan en condiciones
adecuadas y comienzan a formar hifas.
Fig 5. Dia 2 de crecimiento Aspergillus.
A medida que las hifas se extienden y
ramifican, el hongo coloniza el medio
de cultivo, lo que resulta en un aumento
en el tamaño de la colonia .
● Disponibilidad de nutrientes: El
medio de cultivo (como PDA)
proporciona los nutrientes necesarios
para el crecimiento del hongo,
incluyendo carbohidratos, proteínas y
minerales. A medida que el hongo
consume estos nutrientes, puede
continuar creciendo y expandiéndose.
● Condiciones ambientales óptimas: La
Fig 6. Dia 3 de crecimiento Aspergillus.
incubación a temperaturas controladas
(por ejemplo, 28 °C) y la humedad
adecuada en el ambiente de cultivo
crean condiciones ideales para el
crecimiento de Aspergillus. Estas
condiciones permiten que el hongo se
desarrolle de manera eficiente y rápida .
● Competencia reducida: En un cultivo
puro, la ausencia de otros
microorganismos significa que
Aspergillus no enfrenta competencia
por recursos, lo que le permite crecer
sin restricciones.
Fig 7. Última medición de crecimiento Aspergillus.
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● Adaptación y colonización: A medida
que el hongo se establece en el medio,
puede adaptarse a las condiciones
específicas del entorno, optimizando su
crecimiento y reproducción..
4.3. Caracterización macro y micro.
Características macroscópicas Aspergillus
En la figura 4 y 5 se observan las características
macroscópicas del moho Aspergillus.
Fig 10. Características micro Aspergillus
a: hifa aseptada
b: conidióforos terminados en vesículas
cubiertas de fiálides de las que se generan
largas cadenas de conidias.
Características macroscópicas Trichoderma
En las figuras 7 y 8 se pueden observar las
características macroscópicas de Trichoderma.
Fig 8. Aspergillus
Topografía verrugosa o cerebriforme.
Fig 11. Trichoderma
Fig 9. Características macro Aspergillus
Crecimiento rápido, tamaño grande, distribuida
por toda la caja de petri, color café oscuro,
granular y terrosa.
Características microscópicas Aspergillus
Las características microscópicas del moho Fig 12. Características macroscópicas Trichoderma
Aspergillus están vistas en la figura, observados
a 40X. Micelio: esponjoso y abundante
Color: verde oscuro
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Características macroscópicas y microscópicas de los hongos
Crecimiento: distribuido por toda la caja de el comportamiento de los hongos bajo
petri en gran cantidad. distintas condiciones experimentales.
Características microscópicas Trichoderma. 6. BIBLIOGRAFÍA.
En la figura 9 se observan las características 1. J. Á. Cuevas, «Los hongos: Héroes y
microscópicas del moho Trichoderma. villanos de la prosperidad humana,» Revista
digital universitaria UNAM, Volumen 17, 1
septiembre 2016. pp. 4-7.
2. J. N. Hernandez, «Caracterización
físico-química y microbiológica del tomate
margariteño (Licoperscum esculentum var.
España) y evaluación de la efectividad de
tratamiento de pre-envasado para el incremento
de su vida comercial a temperatura ambiente.,»
Córdoba, Servicio de Publicaciones de la
Universidad de Córdoba., 2013, pp. 21,31,38.
Fig 13. Características microscópicas Trichoderma
a: conidióforos
b: conidios
c: clamidosporas
5. CONCLUSIONES.
● Se identificó la alta propagación que
tiene el hongo presente en el tomate
teniendo en cuenta la gran proliferación
que hubo en 1 día, y el margen de
crecimiento al completar los 8 días de
incubación, destacando la importancia
de controlar las condiciones de
almacenamiento de los alimentos para
prevenir tales infecciones.
● Las características macroscópicas
permiten distinguir entre especies,
determinar su hábitat y entender sus
funciones ecológicas, como la revisión
o simbiosis.
● El estudio de hongos en el laboratorio
se benefició significativamente de las
técnicas microbiológicas utilizadas, que
permitieron observar, cultivar e
identificar hongos con precisión. El uso
de medios de cultivo adecuados y la
observación microscópica detallada
fueron fundamentales para comprender
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