I.

RESULTADOS

Tabla 1.
Medio de Color del Indicador que Tipo de medio Cepa Forma de
cultivo medio de contiene el de cultivo bacteriana siembra en el
cultivo medio medio de
cultivo

Caldo Transparente No contiene Enriquecido Salmonella Inoculación en

glucosado amarillento caldo

Caldo de bilis Verde Bilis y verde Selectivo Escherichia Inoculación en

verde brillante amarillento brillante coli caldo

Medio Stuart Transparente Tampón Transporte Staphylococcu Inoculación en

en tubo opaco fosfato s aureus tubo

A. Mac Conkey Rojo claro Rojo neutro Selectivo y Salmonella Estría cruzada
en placa diferencial choleraesuis

Verde brillante Verde Verde brillante Selectivo Mezcla de Estría

en placa amarillento bacterias

Eosina Azul de Rojo oscuro, Eosina y azul Selectivo y Pseudomonas Estría cruzada
metileno en azulado de metileno diferencial aeruginosa
placa

Salmonela - Rojo naranjoso Rojo neutro y Selectivo y Salmonella Estría cruzada

Shigella verde brillante diferencial choleraesuis

Agar nutritivo Transparente No contiene No selectivo Bacillus subtilis Estría

inclinado opaco
 Tabla 2.
Medio de cultivo Cepa bacteriana Morfología Forma y Modi cación en
colonial agrupación el medio a las 24
bacteriana y hrs de cultivo
tinción de gram

Caldo glucosado Salmonella Se tornó un poco

más turbio.

Casi no se
distinguen, se vio
como una Gram
Ligeramente turbio
positiva pero es
No hubo
Gram negativa.
sedimentación
No hubo
formación de
película en la
super cie

Caldo bilis verde Escherichia coli Se volvió más

brillante turbio e intenso el
color, se hizo una
condensación en
el fondo del tubo.

Forma de bacilos
Mayor Turbidez aislados, es Gram
Poca formación de negativo pero se
sedimento vio como Gram
positiva
Medio Stuart en Staphylococcus No se
tubo aureus distinguieron
cambios
signi cativos

No se Se ven pequeños
distinguieron cocos aislados o
cambios en diplococos, es
signi cativos Gram positivo.
fi
fi
fi
fi
A. Mac Conkey en Salmonella Crecimiento de
placa choleraesuis colonias, el color
del agar se volvió
más opaco.

Colonias de 1mm,
incoloras,
transparentes, con
bordes enteros y Se presentó en
forma circular. forma de bacilos
empalizados, en
letras chinas y es
Gram negativa.

Verde brillante en Mezcla de No se pudo No se realizó el

placa bacterias apreciar cultivo de la
manera adecuada,
se debió de
cultivar una
mezcla de
bacterias, en
cambio se
cultivaron dos
bacterias
diferentes
separadas.

Eosina Azul de Pseudomonas El color del agar

metileno en placa aeruginosa se hizo más
transparente y
menos intenso,
crecimiento de
colonias y un olor
fétido.
Solo kas grandes
de 5 -6mm, color
gris, con bordes Se presentó en
enteros, forma forma de bacilos
circular, agrupados en
traslúcidas opacas letras chinas, son
y consistencia Gram negativos.
mucoide.
Salmonela - Salmonella Crecimiento de
Shigella choleraesuis colonias y el color
del agar perdió
brillo

Colonias de 3mm,
color blanco
Se presentó en
grisáceo,
forma de bacilos
redondas, con
empalizados y
apariencia rugosa,
aislados, es Gram
y luz mate
negativo.
traslúcida.

Agar nutritivo Bacillus subtilis Crecimiento de

inclinado colonias

Colonias de 2mm,
con luz mate y
opaca. Se presentó en
forma de bacilos
alargados, en
cadenas cortas y
son Gram positivo.

II. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Según Merchant y Packer (1980), Salmonella spp es una bacteria que requiere fuentes simples
de carbono y nitrógeno para su crecimiento, ya que metabolizar la glucosa, por lo cual crece en
caldo glucosado. Este medio provee una fuente rica de energía y favorece el crecimiento rápido,
gracias a la glucosa que contiene.

Siguiendo con E. coli, es una bacteria Gram negativa que tolera bien los ácidos biliares y el
verde brillante, componentes selectivos que se encuentran en el caldo bilis verde brillante, este
medio está diseñado para seleccionar bacterias entéricas al inhibir la flora Gram positiva, lo que
genera un ambiente favorable para E. coli ya que reduce la competencia por nutrientes. Los
factores de crecimiento de E. coli incluyen la necesidad de una fuente de carbono como la
glucosa o lactosa y el nitrógeno. La capacidad de E. coli para fermentar azúcares como la lactosa
y producir ácidos es útil para su identificación en medios diferenciales.

En el caso de Staphylococcus aureus, Gentilini et al. (2007), mencionan que es una bacteria que
tiene una gran capacidad para adaptarse a distintos ambientes. En el Medio Stuart, ya que es un
medio de transporte, está diseñado para mantener la viabilidad de las bacterias sin promover su
crecimiento activo, por lo cual no contiene nutrientes suficientes para un desarrollo, lo que
garantiza que la bacteria pueda sobrevivir durante el transporte a temperaturas controladas sin
agotarse ni perder su viabilidad. Como se puede observar en la tabla 2, casi no se distinguió esta
bacteria bajo microscopio, debido a que esta bacteria requiere fuentes de aminoácidos, vitaminas,
y otros nutrientes que este medio no tiene, por lo cual no se observa un crecimiento significativo
en este medio en comparación con los otros medios.

El medio MacConkey es selectivo y diferencial y está diseñado para aislar bacterias Gram
negativas como Salmonella choleraesuis, ya que contiene lactosa, sales biliares y cristal violeta,
que inhiben el crecimiento de bacterias Gram positivas. Salmonella choleraesuis no fermenta
lactosa, produce colonias incoloras, lo que permite su diferenciación de otras enterobacterias
fermentadoras de lactosa, como la E. coli.

Pasando al caso de Pseudomonas aeruginosa se clasifica como una bacteria Gram negativa que
prospera en ambientes con pocos nutrientes, en el caso del medio eosina azul de metileno, es
selectivo y diferencial, es decir que inhibe el crecimiento de bacterias Gram positivas y permite
identificar a las bacterias fermentadoras de lactosa por el cambio de color en el medio. La
especie P. aeruginosa no fermenta lactosa, por lo cual crece formando colonias incoloras o de un
tono pálido, lo que facilita su diferenciación e identificación como se puede observar en la tabla
2.

En el caso del medio Salmonella-Shigella, la bacteria Salmonella choleraesuis crece bien debido
a los componentes selectivos de este medio que inhiben el crecimiento de otras bacterias Gram
positivas o no entéricas, como las sales biliares y el verde brillante, también proporciona
nutrientes esenciales, que sirven como fuentes de carbono y nitrógeno. Este medio es diferencial,
quiere decir que permite identificar la producción de ácido sulfhídrico, que forma colonias
negras, característica de ciertas especies de Salmonella. En el caso reflejado en la tabla 2, sólo se
ve el crecimiento de las colonias pero no la producción del ácido sulfúrico.

Por último, Bacillus subtilis es una bacteria Gram positiva que crece en medios ricos en
nutrientes, como el agar nutritivo ya que contiene extractos de carne y peptonas, proporcionando
una fuente completa de carbono, nitrógeno y factores de crecimiento. A diferencia de los medios
selectivos utilizados para enterobacterias, el agar nutritivo es un medio general que promueve el
crecimiento de una amplia variedad de microorganismos y bacterias, B. subtilis forma esporas, lo
que le permite sobrevivir en condiciones adversas, pero en un medio rico como el agar nutritivo,
se observa un crecimiento rápido y la formación de colonias grandes y rugosas, típicas de las
especies esporuladas, características que se pueden observar en la tabla 2.
III. ASIGNACIÓN

Los cambios observados en los medios de cultivo selectivos se deben al metabolismo bacteriano,
ya que modifica las propiedades químicas del medio. Por ejemplo, en el agar MacConkey, la
bacteria Escherichia coli fermenta lactosa, produciendo ácido láctico, lo que disminuye el ph.
Según el autor Madigan et al. (2021), este cambio provoca que el indicador rojo neutro cambie a
un color rojo- rosa alrededor de las colonias, lo que indica la fermentación de lactosa.

De forma similar, Staphylococcus aureus se desarrolla en agar manitol salado, que es un medio
selectivo para bacterias halotolerantes que contiene manitol y el indicador rojo fenol. Al
metabolizar el manitol, S. aureus genera ácidos que disminuyen el ph del medio, cambiando el
color del indicador de rojo a amarillo, lo que indica la fermentación de este carbohidrato.

IV. CONCLUSIÓN

Gracias a esta práctica se pudo aprender sobre la importancia del uso y función de los diferentes
medios selectivos, al igual de cuáles son sus diferencias y para que sirven cada uno de ellos, que
bacterias son las que se identifican y desarrollan en cada uno de estos medios y porque razones,
además se aprendió acerca del metabolismo de estas bacterias, lo cual determina su crecimiento
y diferenciación según el medio en el que se siembre.

V. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

- Merchant, I. A., & Packer, R. A. (1980). Bacteriología y Virología Veterinarias. 3 Edición

Española. Editorial Acribia. Zaragoza.

- Gentilini, E., Reinoso, E., Echeverría, M., Leardini, N., & Copes, J. A. (2007). Microbiología
veterinaria (pp. 320-325). N. O. Stanchi, & P. E. Martino (Eds.). Buenos Aires: Inter-médica.

- Madigan, M. T., Bender, K. S., Buckley, D. H., Sattley, W. M., & Stahl, D. A. (2021). Brock
Biology of Microorganisms (16.a ed.). Pearson.
DIAGRAMA DE FLUJO