Bloque 3:

Reconocimiento de Antígenos por el

Sistema Inmunitario Específico o
Adaptativo

Tema 10: Anticuerpos: estructura y función

Tema 11: Antígenos: tipos y características
Tema 12: Genética Molecular de las Inmunoglobulinas y
producción de Anticuerpos
Tema 13: Complejo Principal de Histocompatibilidad
(MHC)
Tema 14: Receptor Antigénico del Linfocito T (TCR)
Tema 15: Procesamiento de Antígeno y Presentación a
los linfocitos T
Tema 10.-Anticuerpos: estructura y función

Elena Martín-Orozco Santiago

Universidad de Murcia
 Conceptos básicos
•La estimulación de las células B por la interacción
entre su BCR y el antígeno hace que se diferencien a
células B plasmáticas.

•Los anticuerpos son glicoproteínas secretados por las

células B plasmáticas.

•Los anticuerpos se unen específicamente a su

antígeno correspondiente.

•También reciben el nombre de Inmunoglobulinas.

•Existen Inmunoglobulinas de membrana (BCR) y

secretadas (anticuerpos).
 Inmunoglobulinas
Existen sólo en vertebrados

Ig de membrana: Receptor Ig secretada: Anticuerpo

BCR Ac

Plasma
Secreciones mucosas
Líquido intersticial
 Primeros experimentos sobre mecanismos de la
inmunidad.

INMUNIDAD HUMORAL:

• E. von Behring y S. Kitasato (1890-1901):

• " El suero de animales contiene sustancias

(anticuerpos) que se unen específicamente a Emil Behring (1854-1917).
los patógenos relevantes. Premio nobel de Fisiología y
Medicina, 1901.

• La transferencia de este suero inmune

confiere inmunidad a los animales tratados".

• Consecuencias de estos estudios:

• 1.1 Respuesta inmunológica específica.
• 1.2 Memoria inmunológica.
.

Shibasaburo Kitasato (1852-1931)

 3) Elvin Kabat (1930): "Inmunoglobulinas".
Inmunoglobulinas: la fracción gamma-globulina del suero.
La IgG es la que aparece en esa fracción; otras inmunoglobulinas pueden aparecer
en las otras fracciones.
Experimento Kabat (1939): - Conejo → OVA → suero
- Reacción con OVA → precipitado
Solubilidad/Migración en un campo eléctrico

Suero de conejo
inmunizado

Suero de conejo no
inmunizado

Biographical Memoirs V.85 (2004)

National Academy of Sciences
 Estructura química de los anticuerpos
(1950-1960)

(Rodney R. Porter;UK) (Gerald M. Edelman (EE UU))

Rotura enzimática:
Disociación con B-ME + urea:
-papaína: 2 Fab (fragment antigen binding) + Fc
-pepsina: F(ab’)2 + Fc’ 2 cadenas 50 kD (440aa) H
Fab y F(ab’)2 reconocen el antígeno, 2 cadenas 25 kD (220aa) L
Fc y Fc’ no.
Estructura química de los anticuerpos

Digestión
con pepsina

Reducción con
β-mercaptoetanol
Digestión
con papaína
 Inmunoglobulinas
Existencia dos regiones

Ag Ag

Variable V Unión a
antígeno Especificidad

Constante C Actividad
biológica
concreta

Cadena ligera
2 Cadenas κ, λ
Ligeras (L)

2 Cadenas Cadena pesada

Pesadas (H)
µ, δ, γ, ε, α
 Cadena pesada Cadena ligera
μ, γ, δ, α o ε κoλ

Región
bisagra
Zona de unión
al antígeno

Zona de actividad
biológica
Zona bisagra (en inglés “hinge”): da flexibilidad a la molécula.
 Tres regiones funcionales

•Región variable VH/VL, Fv: une antígeno

•Region constante, CH/CL: Actividad biológica

•Region bisagra: da flexibilidad a la molécula

 La estructura básica de las
inmunoglobulinas

2 Cadenas Sitio de
Ligeras (L)
unión o
paratopo
VH VH
2 Cadenas
Pesadas (H)
C1 C1
VL VL
CL CL

Región Fab
Cadena ligera
Cadena pesada
Sitios de unión del C’
C2 y del FcR
C2
Región Región Fc
bisagra
C3 C3
 Estructura y función de la región Fc

αδγ

εµ
La región bisagra está
CH2 reemplazada por un dominio Ig
adicional

La estructura del Fc es la misma para todas las especificidades de anticuerpos

dentro de un mismo ISOTIPO
La estructura actúa como receptor para las proteínas del complemento
y como ligando para los sitios de unión celular
 Determinantes Isotípicos

Basados en la secuencia de aminoácidos de las regiones

constantes de las cadenas pesadas (dan lugar a los isotipos o
clases de Igs) y ligeras (dan lugar a los tipos de cadenas
ligeras)
 Dominios constantes
Cadena H: CH1, CH2, CH3 y CH4 Cadena L : CL1
a) Cadenas L: existen dos tipos: κ y λ. (aprox. 2/3 de las Igs humanas
tienen cadenas L tipo κ.).
b) Cadenas H : existen 5 clases diferentes (ISOTIPOS).
IgG : cadena H γ
IgM: cadena H µ
IgA: cadena H α
IgE: cadena H ε
IgD: cadena H δ
Isotipos o Clases de inmunoglobulinas:
Subclases de Inmunoglobulinas:
IgG1 IgG2 IgG3 IgG4

Subclases:
IgG: IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4
IgA: IgA1 e IgA2.
Dentro de las clases se pueden establecer
subclases considerando:
• la secuencia de aminoácidos de la región
constante de las cadenas H,
• el diferente número y situación de los
puentes disulfuro intercatenarios
establecidos entre las cadenas pesadas.
IgA1 IgA2 • Patrones de glicosilación
 Determinantes alotípicos

Variaciones alélicas en regiones puntuales de los

dominios constantes de las cadenas pesadas y ligeras
 Determinantes idiotípicos

Variaciones en la secuencia de aminoácidos en los dominios variables

de las cadenas pesadas y ligeras. Son responsables de la especificidad
antígénica de cada molécula de Ig.
 Idiotipo frente
a Paratopo

Paratopo: parte del Anticuerpo

en la región Fv que se une a
una parte concreta del antígeno
(epítopo)
Idiotipo: variaciones en la
secuencia de aa de los dominios
variables de un anticuerpo.
 Isotipo Alotipo Idiotipo

Tipo de cadena Diferencias puntuales Región variable

Región constante

Tipo de Distribución Localización Ejemplos

Variante
variación

Variantes existentes
en el suero de todos Clases o Isotipos CH IgA, IgM
Subclases CH IgA1, IgA2
Isotípica los individuos de una
misma especie Tipos CL λ, κ

Variantes alélicas
presentes en las Grupos Gm (humanos)
Alotipos Principalmente CH/CL,
Alotípica poblaciones de una
a veces VH/VL
especie

Conjunto de variantes Una o más regiones

antigénicas caracte- hipervariables
Idiotípica rísticas de cada anti- Idiotipos Regiones variables formando el sitio de
cuerpo de un mismo unión al antígeno
individuo
Estructura detallada de las Igs
Dominios globulares de las Inmunoglobulinas
 Dominios
globulares
característicos
de las Igs
Bellanti, JA (Ed). Immunology IV: Clinical Applications in
Health and Disease. I Care Press, Bethesda, MD, 2012
 Plegamiento de las Inmunoglobulinas
Motivo estructural característico de todos los dominios de Igs

Un barril de 7 (CL) ó 9 (VL) láminas

β conectadas por bucles y Un barril compuesto de láminas
organizadas alrededor de un organizadas en torno a un hueco
dominio interno hidrofóbico central

Barril en construcción
Dominio VL
Structural Biology and Functions of Immunoglobulins ©Dr. Colin R.A. Hewitt 2005-2006
Proyección plana de los dominios C y V
Tipo C ( 4 + 3 hebras) Tipo V (4 + 5 hebras)
Dominios Constantes Dominios Variables
A B

Regiones CDR
 Plegamiento de una cadena ligera
Dominios inmunoglobulina: sandwich de láminas plegadas beta.
Estructura estabilizada por puentes disulfuro y de H.

• Superfamilia de Inmunoglobulinas
• Muchas de las moléculas del sistema inmune que participan en los procesos de
reconocimiento adhesión y unión, contienen el dominio de inmunoglobulina en su
estructura.
Superfamilia de las
Duplicaciones de
Inmunoglobulinas un gen ancestral común
Reconocimiento de Antígeno por las
Inmunoglobulinas:
Regiones Determinantes de
Complementariedad (CDR) o Regiones
Hipervariables (HV)
Bellanti, JA (Ed). Immunology IV: Clinical Applications
in Health and Disease. I Care Press, Bethesda, MD, 2012
Las cadenas pesadas y ligeras tienen tres regiones
hipervariables que se agrupan espacialmente
CDR1 CDR2 CDR3

CDRs = Residuos, de unos

10 amino-ácidos de longitud,
Dominio de altamente variables
inmunoglobulina
 Regiones hipervariables de las Igs

HV FR
CDR

En cada dominio variable el plegamiento de la proteína expone las

regiones hipervariables a la zona de contacto con el antígeno (HV ó
CDR: regiones determinantes de complementariedad). Las regiones
menos variables flanquean las anteriores (FR: regiones marco)
La variabilidad y la
estructura primaria

Región V de la cadena ligera

CDR1 CDR2 CDR3 CDR1 CDR2 CDR3

Los CDRs son como dedos de dos manos
cogiendo el Antígeno

Cadena ligera (L) Cadena pesada (H)

CDR1 CDR1
CDR2 CDR2
CDR3 Antígeno CDR3
Garlandscience https://my.rocketmix.com/Player.aspx?id=54081
Cadena pesada µ δ γ ε α
Isotipos de Ig
VERTEBRADOS

2 Cadenas
ligeras (L)

2 Cadenas
pesadas (H)
IgD IgE IgG Isotipos de
Inmunoglobulinas
humanas

IgA IgM
 IgM monomérica
La IgM sólo existe como monómero en la superficie de las células B

La IgM monomérica tiene muy baja afinidad por el antígeno

Dominios
Cµ2 constantes
de la cadena
pesada

Cµ4 contiene las regiones transmembrana y citoplásmica. Dichas regiones

se eliminan por procesamiento alternativo del ARN para producir IgM
secretada
IgM polimérica
• La IgM puede formar pentámeros y
hexámeros
• Cµ3 une C1q para activar la vía clásica
del C´
• Cµ1 une C3b facilitando la captación de
antígenos opsonizados por parte de los
macrófagos
• Cµ4 participa en la polimerización
(también Cµ3).

• Alta avidez (10 sitios de unión)

• Ig con mayor capacidad de activación de
complemento
• Gran tamaño que dificulta su difusión en los
tejidos

http://www.slideshare.net/rajud521/antibody-structure-amp-function
 La unión al Antígeno induce cambios
conformacionales en la IgM

IgM en solución, no unida a antígeno IgM unida a antígeno

Conformación plana o en estrella Conformación en grapa o en cangrejo
No une Complemento Muy eficiente en unir Complemento
 Respuesta T-dependiente:
Concentración de Ac en suero respuesta primaria
(Unidades/ml)

RESP
RESP . 2ª
. 1ª

Tiempo desde la inmunización

 La IgA es la clase predominante en las
secreciones de las mucosas
En humanos existen dos subclases: IgA1 e IgA2.

En el suero predomina la subclase IgA1 en forma de

monómero, constituyendo del 10 al 15% de las Ig
totales (1.4-4 mg/ml).

En las secreciones seromucosas son muy abundantes

IgA1 (vías respiratorias) e IgA2 (colon), que aparecen
como dímeros (o polímeros).

Las secreciones donde aparece la IgA secretora (sIgA)

son: saliva, lágrimas, fluido nasal, tracto bronquial,
tracto genitourinario, tracto digestivo, leche
materna y calostro.
• Es la principal clase de Ig de neutralización en las mucosas.
• Es la que se produce en mayores cantidades (1-2 g/día)
• Se transfiere al recién nacido por la leche materna
• Larga vida media (6 días)
 IgA participa en la Inmunidad en Mucosas
Sitios efectores de Inmunidad:
-Lámina propia
-Linfocitos intraepiteliales
Sitios inductores de Inmunidad:
-Placas de Peyer
-Ganglios linfoides mesentéricos
Sitios inductores y sitios efectores de
Inmunidad

https://clinicalgate.com/mucosal-immunity/
 Dimerización de IgA y secreción

S S
S S
J
s s
S S
S S

• IgA1 se encuentra fundamentalmente en suero y proviene de células B

plasmáticas de médula ósea

• IgA2 se encuentra principalmente en secreciones mucosas, calostro y

leche proviene de células B plasmáticas localizadas en mucosas
http://clinicalgate.com/mucosal-immunity/
 Exclusión
inmunológica

J Allergy Clin Immunol. 2013

April ; 131(4): 933–957.
doi:10.1016/j.jaci.2013.02.023.
La IgG, es la clase dominante en suero y la
más versátil

• Neutralización (todas)
• Opsonización (IgG1, IgG3)
• Activación de complemento (IgG1, IgG3)
• Citotoxicidad mediada por anticuerpos (IgG1, IgG3)
• Transferida por la placenta al feto (IgG1, IgG3)
• Presentan la mayor vida media en plasma (aprox 3
80 % de las Ig semanas)
del suero
Los niveles de Igs en recién nacidos
descienden a los 6 meses de vida
La IgE, tiene su papel principal en la
respuesta contra parásitos
• Dirige la acción de los eosinófilos contra parásitos y larvas
de insectos
• Degranulación de mastocitos en presencia de antígenos
específicos
• Es la principal mediadora del proceso de alergia.
• Menor concentración sérica (0,3 µg/ml)
• Menor vida media: 2,5 días
 IgD: la inmunoglobulina misteriosa
• Descubierta hace casi 50 años.

• Inicialmente se pensó que era un isotipo

tardío en la evolución. Recientemente se
ha demostrado que ya existía en el
ancestro común de todos los vertebrados
mandibulados y que surgió junto con la
IgM en el momento de la aparición de la
inmunidad adaptativa hace 500 millones
de años.

• IgD muestra gran plasticidad estructural

y puede expresarse de forma dominante
como Ig de membrana o como
anticuerpo secretado dependiendo de la
especie.
 La IgD se
originó de
forma
temprana en
la evolución y
presenta una
gran
diversidad y
plasticidad

Curr Opin Immunol. 2011 June ; 23(3):

345–352. doi:10.1016/j.coi.2011.01.006.
 Inmunoglobulina D
¿Dónde la hemos visto antes?

IgD de membrana forma parte del receptor del linfocito B (BCR): Se desconoce su
contribución específica en el proceso de activación de las células B.
IgD de membrana

δ
 La IgD secretada y la Inmunidad en Mucosas

• Gran abundancia de células B productoras

de IgD en mucosas de las vías respiratorias
altas.

• IgD secretada se une a microorganismos

patógenos inductores de afecciones
respiratorias y a productos derivados de
ellos.

• En pacientes con deficiencia selectiva de

IgA, se han detectado niveles elevados de
células B productoras de IgD.

• IgD secretada es capaz de activar células del

sistema inmune innato por unión a un
receptor no identificado.
 Localización de IgD soluble

• En suero

• En fluído nasal, lacrimal, salivar, mamario, bronquial,

pancreático y cerebrospinal.

• En líquido amniótico de embarazadas con

concentraciones que aumentan progresivamente
durante la primera mitad del embarazo.

• En las secreciones de la mucosa intestinal solo se

detectan trazas de IgD.
 Región Fc: especialización funcional
Es esencial para reclutar la cooperación de otras células y moléculas para
la defensa. Funciones principales:

• FcR no transportadores:
• Fagocitosis
• Citotoxicidad Celular dependiente de
Anticuerpos (ADCC)
• Degranulación de mastocitos

• FcR transportadores:
• Transporte de Igs hacia lugares
inaccesibles (mucosas, feto, leche,
lágrimas,etc). Esta función
(transcitosis) requiere la unión al
Receptor Fc Neonatal (FcRn) o al
Receptor de Ig polimérica (pIgR).
Receptores Fc de Inmunoglobulinas (1):
ADCC y/o
Receptores NO transportadores: fagocitosis y/o
liberación de
Citoquinas/
ADCC y/o Degranulación
Mediadores
fagocitosis mastocitos
inflamatorios
IgG IgE IgA

CD64 CD32 CD16 CD89

Regulación
ITAM=Motivo de activación intracelular basado en tirosinas
ITIM=Motivo de inhibición intracelular basado en tirosinas
Receptores Fc de Inmunoglobulinas (2):
Receptores transportadores:

• FcRn (receptor Fc neonatal)

• pIgR (receptor de Ig polimérica)

 IgA participa en la Inmunidad en Mucosas
Sitios efectores de Inmunidad:
-Lámina propia
-Linfocitos intraepiteliales
Sitios inductores de Inmunidad:
-Placas de Peyer
-Ganglios linfoides mesentéricos
 Receptor de poli-Ig o
Ig polimérica :

Expresión en la superficie basolateral del epitelio

de las mucosas y en el epitelio de las glandulas
mamaria, salival y lacrimal. Se une a la cadena
J. También puede transportar IgM.

• Componente secretor: polipéptido que es

parte del receptor de poli-Ig que transporta y que
permanece unido al dímero de IgA después de
su secreción. Protege la IgA de la proteolisis.
Transporte de IgA
secretora:
Transcitosis

Componente
secretor
Cadena J

IgA dimérica/IgA secretora

IgM pentamérica/IgM secretora

Funciones de la IgA secretora
 Receptor FcRn o neonatal
• Heterodímero: β2-microglobulina +proteína homóloga a MHC-I.
• Unión a la zona CH2-CH3 de Igs.
• Expresión: hígado, glándulas mamarias, intestino de neonatos,
placenta y otros.
• Funciones:
a) transferencia pasiva de IgGs de la madre al hijo.
b) regulación de los niveles séricos de IgG

• FcRn recicla IgG de la mayoría de las células y la transporta

bidireccionalemnte a través de las barreras epiteliales para
regular la inmunidad sistémica y de mucosas.

• Debido a su elevada concentración, la IgG suele ser

internalizada por las células mediante mecanismos
inespecíficos de endocitosis. Sin embargo FcRn rescata la IgG
de la degradación lisosomal intracelular reciclándola desde el
endosoma a la superficie celular.
 Transferencia
materna de IgG
Humanos: a través de la placenta
Receptor Fc neonatal: Transferencia de
IgG materna a través de la placenta

NATuRe RevIeWS | IMMunoloGy Reviews volume 20 | July 2020 | 441

Receptor Fc neonatal: Transferencia de
IgG circulante a la leche materna

NATuRe RevIeWS | IMMunoloGy Reviews volume 20 | July 2020 | 441

Homeostasis en adultos
 Algunos Rc no transportadores:

• FcεRI: Receptor de alta afinidad para IgE

• FcγRIII (CD16)
FcεRI: receptor de alta afinidad para IgE

• La interacción IgE-
FcεRI es la más alta de
todos los Rc Fc
• La unión de IgE a
FcεRI aumenta la vida
media de la IgE
• Se expresa en
Mastocitos y Basófilos.

http://www.slideshare.net/rajud521/antibody-structure-amp-function
FcγRIII (CD16)

Se expresa en células NK y
en Monocitos/Macrófagos
 Concentración Vida media
Isotipo de Subtipos Forma
sérica en suero Funciones
Anticuerpo (Cadena H) Secretada
(mg/mL) (dias)
Inmunidad
IgA (dímero) mucosas
IgA IgA1,2 (α1 or α2) 3.5 6 Monómero,
dímero

Receptor
antigénico de
Ninguno IgD
Trazas 3 células B
IgD (δ) Monómero
vírgenes;
Mucosas

Defensa frente a
parásitos;
Ninguno IgE
IgE (ε)
0.05 2
Monómero
hipersensibilidad
inmediata

Opsonización,
activación del
complemento,
IgG1-4 IgG1
IgG (γ1, γ2, γ3, or γ4)
13.5 23
Monómero
ADCC, inmunidad
neonatal,
regulación células
B

Receptor
antigénico de
células B
Ninguno IgM vírgenes;
IgM (μ)
1.5 5
Pentámero activación del
complemento
Aplicaciones de los Anticuerpos:

• Clínica

• Investigación
 Anticuerpos
Monoclonales

B cell and tumor cell weding

Photographed celebrating the announcement of the Nobel

Prize in Physiology or Medicine awarded to Jerne, Köhler and
Milstein on 15 October 1984. Reprinted with permission from
Ref. 18 © F. Hoffman-La Roche, Basel, Switzerland (1996).
 Obtención de Anticuerpos Monoclonales (1)
Obtención de hibridomas productores de anticuerpos

Obtención de células
de bazo de ratones
Inmunizados con Ag X

Línea celular de Mieloma

Mezcla de células de bazo, mutante: Incapaz de crecer
algunas productoras de Acs en medio selectivo HAT; no
anti-X produce Anticuerpos

Mezcla de células
fusionadas y no
fusionadas Selección in vitro
en medio HAT

Sólo crecen las

células fusionadas
(hibridomas)
Fig. 5-9
Abbas, Lichtman, and Pillai. Cellular and Molecular Immunology, 7th edition. Copyright ©Copyright
2012 by Saunders,
© 2011 anan imprint
by Saunders, of Elsevier
imprint of Elsevier Inc. I
 Obtención de Anticuerpos Monoclonales (2)

Purificación de clones de hibridoma productores de anticuerpos anti-X

Clones aislados derivados de una única célula

Análisis del Sbte de cada clon para detectar presencia

de Anticuerpos anti-X y expansión de los clones positivos

Hibridomas
productores
de Anticuerpos
monoclonales
Anti-X
Fig. 5-9
Abbas, Lichtman, and Pillai. Cellular and Molecular Immunology, 7th edition. Copyright ©Copyright
2012 by Saunders,
© 2011 anan imprint
by Saunders, of Elsevier
imprint of Elsevier Inc. I
Lo que se debe aprender de este tema

1. Conocer las propiedades generales de las inmunoglobulinas

2. Describir la estructura de las inmunoglobulinas

3. Establecer la relación entre la estructura y función de las

inmunoglobulinas
4. Definir las clases y subclases de las inmunoglobulinas
5. Conocer las propiedades de los isotipos.
6. Comprender las funciones biológicas de las inmunoglobulinas