Departamento de Ciencias Químico-Biológicas
Práctica # 3
“”Reacción de la enzima Peroxidasa y Polifenol oxidasa
a partir de una misma fuente”
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA II
Maestra
Yaeel Isbeth Cornejo Ramirez
Nombre de los integrantes (numero expediente):
Partición 2
● Astorga Ramos Marcela (221203933)
● Valle Moreno Jackelyn (221206351)
● Zepeda Flores Franshelle Michelle (220207081)
Fecha de entrega: Grupo. Miércoles 03:00 - 5:00 hrs.
25 de septiembre de 2024 Hermosillo, Sonora
Introducción
La peroxidasa es una enzima que se encuentra en plantas, animales y microorganismos y se
encarga de catalizar la reacción de oxidación de varias sustancias y sustratos mediante el
peróxido de hidrógeno. La peroxidasa es utilizada para la cuantificación de glucosa,
metabolitos en sangre, urea, lípidos como colesterol o triglicéridos, también es utilizada para
detección de virus, en la categoría de las enzimas, la peroxidasa pertenece al grupo de las
oxidorreductasas.
Polifenol oxidasa es una enzima de las más estudiadas por la industria alimentaria ya que es
responsable de cambiar el sabor, color y valor nutricional de los alimentos. Es la encargada
del pardeamiento enzimático en frutas y verduras, en otras palabras es la que ocasiona el
oscurecimiento de estos alimentos por la oxidación de compuestos fenólicos.
Objetivo
Observar la actividad enzimática de la peroxidasa y la polifenol oxidasa obtenidas de la
misma fuente, una papa.
Materiales y reactivos
Cuba
2 vasos de precipitado 200 mL
Varilla/agitador de vidrio
Tripié
Tela de asbesto
Mechero bunsen
Gradilla
15 tubos de ensaye 13x100
Pinzas para tubo
Metodología
Resultados
Tubo Contenido Observaciones
1 2 gotas de Catecol 1% - 20 Formación de una capa roja,
gotas de extracto de papa pocas burbujas
2 2 gotas de catecol al 1% - 2 Color rojizo morado muy
gotas H2O2 - 20 gotas de oscuro, espuma aumentando
extracto de papa conforme pasa el tiempo
3 2 gotas de Catecol 1% - 20 No reacción
gotas de extracto de papa
hervida
4 2 gotas de Catecol 1% - 20 No reacción
gotas de extracto de papa
hervida
5 2 gotas de pirogalol al 1% - Amarillo con alo mas oscuro
20 gotas de extracto de papa arriba, pocas burbujas
6 2 gotas de pirogalol al 1% - Color café rojizo y espuma
2 gotas de H2O2 - 20 gotas
de extracto de papa
7 2 gotas de pirogalol al 1% -1 Café claro y poca espuma
gota NaCN - 20 gotas de
extracto de papa
8 2 gotas de pirogalol al 1% - Café oscuro, poca espuma
2 gotas de H2O2 - 1 gota
NaCN - 20 gotas de extracto
de papa
9 8 gotas de tirosina - 20 gotas Color amarillo palido y
de extracto de papa algunas burbujas
10 8 gotas de tirosina - 2 gotas Color amarillo palido y
de H2O2 - 20 gotas de pocas o nulas burbujas
extracto de papa
11 2 gotas de catecol - 2 gotas No reacción
de H2O2 - 20 gotas H2O
12 2 gotas de pirogalol - 2 gotas No reacción
de H2O2 - 20 gotas de H2O
13 20 gotas de extracto de papa No reacción
Notamos que en los tubos con peróxido de hidrógeno se formó un burbujeo, entendiendo que
se llevó a cabo la reacción de la peroxidasa. Entre los tubos que contenían 6 y 8 observamos
una mayor cantidad de burbujas en el tubo 6, eso por que el tubo 8 contenía NaCN lo cual
inhibió parcialmente la reacción. Y finalmente con los tubos que contenían extracto de papa
hervida, tubos 3 y 4, no se observa reacción alguna dado que la enzima ya fue desnaturalizada
gracias al calor.
Discusión
Al llevar a cabo esta práctica obtuvimos como resultado a un cambio de color y espumosidad
debido a lo que contenia cada reactivo en su tubo. El catecol con el extracto de papa y
peróxido de hidrógeno tuvieron la reacción con espuma más notoria de todos los tubos de
ensayo con los diferentes reactivos debido a su catalización. En los demás tubos tuvimos una
reacción de poco a nada de espuma esto fue debido a la oxidación de los reactivos dando a
entender que estos no pudieron liberar tanto oxígeno.
Conclusión
La práctica realizada salio como era de esperarse y pudimos observar como ocurrian los
diferentes cambios de color y espuma en los diferentes tubos y asi poder hacer comparaciones
en ellos y poder entender las reacciones que suceden en cada caso. Además de analizar desde
el inicio hasta después del tiempo de espera en su reacción final.
Referencias:
Pérez Anaya, D. B. Regalado González, C. Rodríguez Cabrera, N. A. (s. f.).
PURIFICACIÓN DE UNA PEROXIDASA RECOMBINANTE DE NABO MEDIANTE
CROMATOGRAFÍA DE AFINIDAD. Recuperado de:
https://www.uaq.mx/investigacion/difusion/veranos/memorias-
2010/12%20Verano%20Ciencia%20Region%20Centro/UAQ%20Perez%20Anaya.pdf
Vazquez M. A. (2012). Síntesis, diversidad estructural, propiedades y actividad catalítica de
complejos de manganeso con diferentes grupos funcionales. Recuperado de:
https://dialnet.unirioja.es/servlet/tesis?codigo=122310#:~:text=Las%20catalasas%20son%2
0los%20enzimas,sustratos%20por%20per%C3%B3xido%20de%20hidr%C3%B3geno.
Suarez P. BalbinaIcon A Colman S. Clausen A; Feingold, S. (2016). Pardeamiento
enzimático: caracterización fenotípica, bioquímica y molecular en variedades de papa
nativas de la Argentina Recuperado de:
https://ri.conicet.gov.ar/handle/11336/138322#:~:text=El%20pardeamiento%20enzim%C3%
A1tico%20(PE)%20esta,deseables%20para%20la%20calidad%20industrial.
(2006). Caracterización de Polifenoloxidasa Extraída de Pera (cv. Packam´s Triumph) y
Manzana. Recuperado de: https://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0718-
07642006000600012#:~:text=Las%20polifenoloxidasas%20(PFO)%20que%20se,procesami
ento%20de%20frutas%20y%20vegetales.