ACTUALIZACIÓN EN VIRUS
DE PLANTAS
Dr. Alejandro Risco Mendoza
alejandrorisco@[Link]
La Molina, 30 noviembre 2024
1
CURSO DE ACTUALIZACIÓN DE FITOPATOLOGÍA
Virus
Es un conjunto de una o más moléculas de ácido nucleico, ya sea ARN o ADN,
normalmente envuelto en una capa o capas protectoras de proteínas o lipoproteínas, que
es capaz de organizar su propia replicación solo dentro de células hospedante adecuadas.
Por lo general, puede ser transmitido horizontalmente entre hospedantes. Dentro de
tales células, la replicación del virus (i) depende de la maquinaria de síntesis de proteínas
del hospedante, (ii) se organiza a partir de reservas de los materiales requeridos en lugar
de por fisión binaria, (iii) se encuentra en sitios que no están separados del contenido
celular del huésped por una membrana lipoproteica continua, y (iv) está constantemente
generando variantes a través de varios tipos de cambios en el ácido nucleico viral.
Es un ser vivo?
R. Hull, 2014
• Se multiplica,
• Genera progenies,
• Evoluciona,
• Fuera de la célula es inerte pero cuando entra en la
células se multiplica. 2
Forma y tamaño
Isométricos:
25 - 85 nm
Figura: Cowpea severe C.E. Fribourg S.
mosaic virus (CPSMV).
3
Forma y tamaño
Abastonados o
filamentosos rígidos:
140 – 2000 nm
Figura: Maracuja mosaic virus
C.E. Fribourg S.
(MarMV).
Forma y tamaño
Abastonados flexuosos o
filamentosos:
140 – 2000 nm
C.E. Fribourg S.
Figura: Potato virus Y (PVY).
5
Forma y tamaño
Baciliformes con
membrana:
30 – 360 nm
Figura: Maize mosaic virus
(MMV)
6
Taxonomía
Siddell et al., Journal of General Virology 2023;104:001840 DOI
10.1099/jgv.0.001840 7
Taxonomía
Clasificación en género y familia
• Tipo de acido nucléico
• Número de componentes del genoma
• Organización del genoma viral
• Morfología de la partícula viral
• Modo de transmisión
• Gama de hospedantes
• Relación filogenético
Clasificación en las taxas superiores (Orden, Clase, Filo, Reino, Dominio)
Relación evolutivo (Filogenia)
[Link]
…
Taxonomía
Taxonomía
EJEMPLO:
RNA de cadena simple y positiva [ssRNA(+)]
Familia: Virgaviridae
Género: Tobamovirus
Especie: Tobamovirus fructirugosum
Virus:
• tomato brown rugose fruit virus,
• virus del rugoso del tomate
[Link]
Acrónimo: TBRFV
Nomenclatura de virus
Language Virus name Virus species name
English maize mosaic virus Alphanucleorhabdovirus maydis
Arabic (en cualquier lengua)
Chinese 玉米花叶病毒
French virus de la mosaïque du maïs
Japanese トウモロコシモザイクウイルス
Russian виpyc мoзaики кyкypyзы
Spanish virus del mosaico del maíz
Swahili virusi vya Batobato ya mahindi
Arch Virol 148:2481–2488
Virus transmitidos mecánicamente y por contacto
Virus Virus Acrónimo Especie viral Género
Mosaico del tabaco Tobacco mosaic virus TMV Tobamovirus tabaci Tobamovirus
Mosaico del tomate Tomato mosaic virus ToMV Tobamovirus tomatotessellati Tobamovirus
Moteado suave del ají Pepper mild mottle virus PMMoV Tobamovirus capsici Tobamovirus
Mosaico del maracuyá Maracuja mosaic virus MarMV Tobamovirus maracujae Tobamovirus
Rugoso del tomate tomato brown rugose fruit virus TBRFV Tobamovirus fructirugosum Tobamovirus
Virus X de la papa Potato virus X PVX Potexvirus ecspotati Potexvirus
Mosaico del pepino Pepino mosaic virus PepMV Potexvirus pepini Potexvirus
Mosaico comun de la yuca Cassava common mosaic virus CsCMV Potexvirus marmormanihotis Potexvirus
Mosaico del papayo Papaya mosaic virus PapMV Potexvirus papayae Potexvirus
Virus S de la papa Potato virus S PVS Carlavirus
Virus latente de la arracacha arracacha laten virus ALV Carlavirus
Virus latente de la papa andina Anden potato laten virus APLV Tymovirus latandigenum Tymovirus
Moteado de la papa andina Andean potato mottel virus APMoV Tymovirus mosandigenum Comovirus
Virus C del olluco Ullucus virus C UVC Comovirus
Moteado del clavel carnation mottle virus CarMV Comovirus
Virus transmitidos mecánicamente y por contacto
Familia: Virgaviridae
Género: Tobamovirus
• Mosaico del tabaco, Tobamovirus tabaci (tobacco mosaic virus,TMV)
• Mosaico del tomate, Tobamovirus tomatotessellati (tomato mosaic virus, ToMV)
• Moteado suave del ají, Tobamovirus capsici (pepper mild mottle virus, PMMoV)
• Rugoso del tomate, Tobamovirus fructirugosum (Tomato brown rugose fruit virus, ToBRFV)
Virión abastonado rígido
monopartito, de 18 nm de
diámetro y 300-310 nm de
largo. ssRNA (+) de 6.3-6.5 kb
ICTV, 2024; ViralZone: [Link] 14
Género: Tobamovirus
yellow pepper mild mottle virus (YPMMoV)
chilli pepper mild mottle virus (CPMMoV)
Pimiento que portaban alelos L no funcionales ( L 0 ) a tobamovirus fueron susceptibles. Por
otro lado, las plantas de pimiento que portaban alelos L 1 , L 2 , L 3 y L 4 fueron resistentes a
15
todos los aislados.
Virus del rugoso del tomate
Tomato brown rugose fruit virus (ToBRFV)
En 2014, en Israel se notificó la presencia de un nuevo virus del género
Tobamovirus.
Tomate (Solanum lycopersicum) y pimiento (Capsicum annuum).
Jordan Israel, Mexico, California, Germany, China, Palestine, Turkey, Italy,
UK, Netherlands, Greece, Spain y France.
(Salem et al., 2016, Luria et al., 2017, Cambrón-Crisantos et al., 2019, Camacho-Beltran et al., 2019, Ling et al., 2019, Menzel et al., 2019,
Yan et al., 2019, Alkowni et al., 2019, Fidan et al., 2019, Panno et al., 2020, Skelton et al., 2019, EPPO, 2019, Ministère de l'agriculture et de
l'alimentation, 2020).
Perú ??? ([Link]
[Link]
16
Virus del rugoso del tomate
Virus del rugoso del tomate
ToBRFV
Virus del rugoso del tomate
N. glutionsa
N. occidentalisa
Pimiento piquillo
(Capsicum annuum)
Nicandra physalodes
Virus del rugoso del tomate
INOCULACION DEL VIRUS AL
SUELO
Turba nueva + ToBRFV. 40 días
después de la siembra.
A (derecha) y B plantas de
Nicotiana glutinosa mostrando
lesiones necróticas locales. A
(izquierda) y C. plantas de tomate
con mosaicos.
Ensayos para el control de tobamovirus
TRATAMIENTO CON LUZ UV
- Tratamiento A: Placa Petri + ToBRFV
- Tratamiento B: Celular +ToBRFV
- Tratamiento C: Equipo de medición de humedad + ToBRFV
Ensayos para el control de tobamovirus
Descripción de las estrategias empleadas para la inactivación de ToBRFV.
Estrategia Descripción
Peroxido (T1) Sustrato nuevo + ToBRFV + (peróxido de hidrógeno + ácido peracético)
HipNa (T2) Sustrato nuevo +ToBRFV + Hipoclorito de sodio 1%
Vap Sustrato nuevo + ToBRFV + 95 °C x 15 min
Ozo Sustrato nuevo +ToBRFV + Agua ozonizada (5 ppm)
C+ Sustrato nuevo + ToBRFV
C- Sustrato nuevo
Ensayos para el control de tobamovirus
T1 T2 Vap C+
Electroforesis en gel de agarosa. RT-PCR
usando primers específicos para deccion de
ToBRFV.
Tobamovirus vs potyvirus
A. Risco M. A. Risco M. A. Risco M.
PTV ToBRFV ToBRFV + PTV
Virus del rugoso del tomate + PTV
ToBRFV + PTV
Diagnóstico
a. Plantas indicadoras
Nicotiana glutinosa:
abrasivo (carborundum) + jugo
b. Serología: ELISA, Dot-ELISA.
c. RT-PCR, RT-qPCR: primers especificos
b. Metagenómica: NGS/HTS
Diagnóstico
Serología: inmunostrip
Diagnóstico
Género: Tobamovirus
chilli pepper mild mottle virus (CPMMoV), tomato brown rugose fruit virus (ToBRFV)
Diagnóstico
Primers para la detección de ToBRFV
Temperatura de
Primer Secuencia Amplicón anillamiento (Tm) Referencia
ToBRFV-Falk AATGTCCATGTTTGTTACGCC
560 pb 55 °C Alkowni et al. (2019)
ToBRFV-Ralk CGAATGTGATTTAAAACTGTGAAT
ToBRFV-FMX AACCAGAGTCTTCCTATACTCGGAA
Rodríguez-Mendoza et al. (2019)
476 pb 58 °C
ToBRFV-RMX AGGAGATTATTAAGAGATGGTGAG
Control de tobamovirus
Varias medidas preventivas, al igual que para todo los
otros virus, por que son intracelulares y sistémicos.
1. Descontaminación.
2. Uso de inhibidores de infección.
3. Reducción en el tránsito y limpieza de herramientas.
4. Rotación de cultivos.
5. Cultivares resistentes.
6. Utilizar semilla certificada.
Control de tobamovirus
1. Descontaminación
• Vapor de agua >90oC x 15 min
• Usar una nueva cama donde no hubo plantas enfermas.
• Tratamiento de la semilla con fosfato trisódico y hipoclorito de sodio.
Control de tobamovirus
1. Descontaminación
Fosfato trisódico y/o hipoclorito de sodio.
Control de tobamovirus
2. Uso de inhibidores de infección
• La leche solo es un inhibidor de infección, NO inactiva al virus (la
acción se desconoce).
• (20 L leche fresca + 2.5 kg leche polvo + 20 L agua )/ 100 metros
de cama.
• Aplicación un día antes del trasplante, aplicar cada 20 min. a los
brazos y manos.
Control de tobamovirus
3. Reducción en el transito y limpieza de herramientas.
• Efectuar el máximo numero de aplicaciones o ingreso al campo,
antes de que las plantas cierren el surco.
• Limpieza o lavados (con detergentes): mochilas, herramientas,
llantas de tractor, tijeras, etc.
Control de tobamovirus
4. Rotación de cultivo
• Una de las medidas más efectivas para el control.
• Eliminar rastrojos “gruesos”
• Hacer aradura profunda y promover que el rastrojo fino se
descomponga y elimine el virus.
• Rotar con otro cultivo que no sea solanáceas o que no sean
hospederos del virus.
Control de tobamovirus
5. Resistencia
ToMV
• Solanum peruvianum (Lycopersicon
peruvianum). RH gobernada por 02 genes
dominantes Tm-2 y Tm-2a , muy fácil pasar a
tomate a través de cruzamiento. 25 – 26 oC,
a T o > 26 oC el gen deja de funcionar – No
hay RH, síntoma sistémico.
• Gen Tm (Solanun hirsutum) en Var. Tomate
de mesa que son conducidos en invernadero
Control de tobamovirus
6. Resistencia
PMMoV
• Capsicum frutenscens cv. Tabasco. RH
gobernada por el genes L no funciona
ante toda las razas.
• 02 genes Li y L3 en Capsicum chinensis
resistente a toda las razas.
Ensayos para el control de ToBRFV
Tm-2a (+) Tm-2a-Testigo Tm-0 (+) Tm-0-Testigo
Tm-2 (+) Tm-2 Testigo Tm-1 (+) Tm-1 Testigo
Virus de cucurbitacea (Sandia)
VIRUS ACRÓNIMO ESPECIE GÉNERO
Cucumber green mottle mosaic virus CGMMV Tobamovirus viridimaculae Tobamovirus
Squash mosaic virus SqMV Comovirus cucurbitae Comovirus
Melon necrotic spot virus MNSV Gammacarmovirus melonis Gammacarmovirus
LISTA DE PLAGAS CUARENTENARIAS NO PRESENTES EN EL PERU? (SENASA).
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Cucumber green mottle
• mosaic virus
Calabazas
• Sandia
• Pepinillo
• Melón
• Zapallito italiano
• Cucurbita moschata
• Lagenaria siceraria
• Calabza cera “wax gourd”
•
HOSPEDANTE/ •
Luffa cylindrica “calaza serpiente”
ridge gourd “calabaza redonda”
• Calabaza serpiente “snake gourd”
FUENTE • Sicyos angulatus “Pepino estrella”
• Ecballium elaterium “El cohombrillo amargo, pepinillo del diablo o elaterio”
• Heracleum moellendorffii “Apiacea”
• Eleusine indica “poacea”
• Semilla de sandia y melón
• Nicotiana benthamiana
• Solanum nigrum
• Ajo
• Vid
• Maiz
• Polen colectado en colmena
• Agua fresca
Cucumber green mottle mosaic virus
Aumento de la incidencia mundial del virus del mosaico moteado verde del pepino en diferentes países
durante el período de 1935 a 2016 (82 años). Los círculos muestran las primeras detecciones en países
individuales durante tres períodos de tiempo diferentes: naranja, 1935-1986 (52 años); rojo, 1987-2006 (20
años); azul, 2007-2016 (10 años).
Annu. Rev. Phytopathol. 2017. 55:231–56
Cucumber green mottle mosaic virus
CABI Compendium
[Link]
Cucumber green mottle mosaic virus
SÍNTOMA
?
A. Risco M.
Cucumber green mottle mosaic virus
SÍNTOMA
Cucumber green mottle mosaic virus on greenhouse
grown cucumbers in Alberta, Canada.
Photo by Dr. Weizheng (John) Zhang.
Cucumber green mottle mosaic virus
Symptoms in the host range plants inoculated with: a, CGMMV-SP in Gomphrena globosa, b,
CGMMV-SPCu16 in Chenopodium amaranticolor, c, CGMMV-SP in cucumber, d, CGMMV-SP in
melon, e, CGMMV-SPCu16 in watermelon, and f, CGMMV-SP in pumpkin.
Published in: Oscar Crespo; Dirk Janssen; Carmen García; Leticia Ruiz; Plant Disease 2017, 101, 977-984.
Copyright © 2017 The American Phytopathological Society • DOI: 10.1094/PDIS-09-16-1220-RE
Cucumber green mottle mosaic virus
Síntomas causado por CGMMV en
hoja y frutos de diferentes especies de
cucurbitáceas. En pepino (Cucumis
sativus): moteado leve y mosaico en
(a) una hoja infectada y (b,c) frutos. En
melón (Cucumis melo): (d) moteado
evidente, mosaico y deformación de la
hoja en una hoja infectada y (e–g)
moteado en dos tipos diferentes de
frutos infectados. En sandía (Citrullus
lanatus): (h) moteado amarillo en una
hoja infectada y (i,j) lesiones
necróticas marrones en tallos y
pedúnculos (flechas de una punta)
acompañadas de frutos amarillentos
con pulpa esponjosa (flechas de dos
puntas)..
Annu. Rev. Phytopathol. 2017. 55:231–56
Consideraciones
• La aplicación de productos al suelo o al sustrato de siembra, como peróxido
de hidrógeno combinado con ácido peracético, agua ozonizada a 5 ppm u
otras sustancias que inactivan virus de distinta naturaleza a los tobamovirus,
no logra eliminar el ToBRFV.
• Además, ciertos productos químicos empleados para la "inactivación del virus"
pueden causar toxicidad en plantines de solanáceas. Por otro lado, la
exposición a radiación UV tampoco resulta eficaz para inactivar el ToBRFV.
• Se ha comprobado que una temperatura de 95°C durante 15 minutos logra
inactivar de manera efectiva este virus.
• El diagnóstico de enfermedades virales debe basarse en un enfoque integral,
que incluya la observación de síntomas, las condiciones ambientales, la
distribución espacial y la aplicación de diversas técnicas o métodos.
• Es importante destacar que el manejo de los virus debe ser preventivo, ya que
no existe un método único que sea 100% eficaz.
Alejandro Risco Mendoza
alejandrorisco@[Link]
