UNIVERSIDAD MICHOACANA DE SAN NICOLÁS DE HIDALGO
FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA
Laboratorio de análisis Instrumental
DOCENTE: M.C [Link] LA SALUD LAURA GARCIA SALINAS
PRACTICA No.12 Separacion de aminoacidos por cromatografia
en papel
Equipo 3
Alumna: Sonia Elizabeth Sánchez Martínez 1924591X
Semestre: 5
Sección: 03
Morelia, Mich , 23de octubre 2024
Objetivo:
Separar una mezcla de aminoácidos utilizando la cromatografía en papel y calcular el
factor de retención (Rf) de cada aminoácido.
Introducción:
La cromatografía en papel es una técnica que nos permite separar y analizar diferentes
componentes de una mezcla. En este experimento, usaremos esta técnica para separar
aminoácidos, que son los bloques de construcción de las proteínas.
Para hacerlo, usaremos papel de filtro como la fase estacionaria y una mezcla de
butanol, ácido acético glacial y agua (en una proporción de [Link]) como la fase móvil. El
papel de filtro retiene los componentes de la mezcla según sus afinidades con el papel y
con el solvente.
La cromatografía en papel puede hacerse de dos maneras: ascendente y descendente.
En la ascendente, el solvente sube por el papel gracias a la capilaridad. En la
descendente, el solvente baja por el papel debido a la gravedad, lo que puede hacerque
el proceso sea un poco más rápido.
Para este experimento, aplicamos una mezcla de aminoácidos en el papel de filtro y
dejamos que el solvente (la fase móvil) se mueva. A medida que el solvente se desplaza,
los diferentes aminoácidos se separarán formando bandas. Después, mediremos la
distancia recorrida por cada banda y la distancia recorrida por el solvente para calcular el
factor de retención (Rf) de cada aminoácido.
El factor de retención nos ayuda a identificar y caracterizar los aminoácidos en la mezcla,
basándonos en cómo se movieron a lo largo del papel. Esta técnica es esencial en
muchos campos, desde la bioquímica hasta la medicina, ya que permite analizar mezclas
complejas de una manera sencilla y efectiva.
Material
• Papel de cromatografía
• Disolvente un mezcla de agua y alcohol
• Vasos de precipitados o frascos
• Marcador
• Pipetas o goteros
• Muestras de aminoácidos
• Solución reveladora (como la ninhidrina)
• Regla
• Guantes y gafas de protección
Procedimiento
Corta una tira de papel de cromatografía.
Dibuja una línea a unos 2 cm del borde inferior con un lápiz.
Aplicación de Muestras:
Usa una pipeta o gotero para colocar pequeñas gotas de aminoácidos en la línea del papel.
Deja que se sequen.
Preparación del Disolvente:
Llena un vaso de precipitados con un poco de disolvente (por ejemplo, agua con alcohol), lo
suficiente como para mojar la base del papel pero no cubrir las muestras.
Desarrollo de la Cromatografía:
Coloca el papel en el vaso de precipitados con la línea de la muestra hacia abajo. Asegúrate de
que las muestras no toquen el disolvente directamente al principio.
Deja que el disolvente suba por el papel y separe los aminoácidos. Esto puede tomar unos
minutos.
Revelado:
Saca el papel del disolvente y deja que se seque.
Rocía el papel con la solución de ninhidrina y calienta suavemente si es necesario para que los
aminoácidos se revelen como manchas de color.
Calculos
A=1.3÷3.5=0.37cm
B=1.2 ÷3.5=0.34 cm
M=1.3÷3.5=0.37 cm
Conclusion
La cromatografía en papel es una técnica útil y simple para separar mezclas y analizar sus
componentes, como los aminoácidos. En este experimento, los aminoácidos se aplican a una
tira de papel y se colocan en un disolvente. A medida que el disolvente sube por el papel,
arrastra consigo los aminoácidos, separándolos en distintas manchas según su afinidad con el
disolvente.
En conclusión, esta técnica te permite ver cómo se comportan y se separan los diferentes
componentes de una mezcla. Es una herramienta educativa que ayuda a entender conceptos
básicos de química y biología. Además, es económica y fácil de realizar, por lo que es ideal tanto
para laboratorios escolares como para investigaciones básicas.
Referencias
Ruiz Olivares, L. (2019). Práctica 6: Separación de aminoácidos por cromatografía en
papel. Universidad Autónoma de Aguascalientes. Recuperado de
[Link]
aguascalientes/bioquimica/practica-6-separacion-de-aminoacidos-por-cromatografia-
en-papel/11959101
Peinado Peinado, J., & Meléndez-Valdés, F. T. (2023). Cromatografía en papel de
aminoácidos. Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Universidad de
Córdoba. Recuperado de
[Link]
%20PAPEL%[Link]
Jorrín Novo, J. V., Díaz, M. N., & Bárcena Ruiz, J. A. (2023). Separación de aminoácidos
por cromatografía en capa fina y detección mediante reacción con ninhidrina.
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Universidad de Córdoba.
Recuperado de
[Link]
%20CAPA%20FINA%20DE%[Link]
