¿Cómo se compone un espectrofotómetro?

Para que un espectrofotómetro realice las funciones correctas es necesario que cuente con
aquellos componentes que lo ayudarán en su labor. Por lo tanto, un espectrofotómetro se
compone de:

Fuente de luz
La fuente de luz ilumina la muestra química o biológica, pero para que realice su función debe
cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad, direccionalidad, distribución de energía
espectral continua y larga vida.
Las fuentes de luz que puede tener un espectrofotómetro son:
- Lámpara de wolframio (también llamado tungsteno)
- Lámpara de arco de xenón
- Lámpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios atómicos

Monocromador
El monocromador de un espectrofotómetro aísla las radiaciones de longitud de onda deseada,
logrando obtener luz monocromática.
Un monocromador está constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el
elemento de dispersión.

Colimador
El colimador es un lente que lleva el haz de luz entrante con una determinada longitud de
onda hacia un prisma, el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz logrando que se
redireccione hacia la rendija de salida.

Compartimiento de muestra
En el compartimento de muestra es donde se lleva a cabo la interacción R.E.M. con la
materia.

Detector
El detector se encarga de evidenciar una radiación para que posteriormente sea estudiada y
saber a qué tipo de respuesta se enfrentarán (fotones o calor).

Registrador
Convierte el fenómeno físico en números proporcionales al analito en cuestión.

Fotodetectores
Los fotodetectores de un espectrofotómetro perciben la señal en forma simultánea en 16
longitudes de onda y cubren al espectro visible, de esta manera se reduce el tiempo de
medida y minimiza las partes móviles del equipo.
- Espectrofotómetros de ultravioleta / visible (UV-VIS)
- Espectrofotómetros de absorción atómica (AA)
- Espectrómetros de plasma acoplado a espectrómetro de masas (ICP-oTOFMS)
- Espectrofotómetros de infrarrojo por transformada de Fourier (FTIR)

El espectrofotómetro ultravioleta-visible[editar]
El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o
transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que
contiene una cantidad conocida de la misma sustancia. Todas las sustancias pueden absorber
energía radiante. El vidrio, que parece ser completamente transparente, absorbe longitudes de
onda que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la región del IR. La
absorción de las radiaciones UV, visibles e IR depende de la estructura de las moléculas, y es
característica para cada sustancia química. El color de las sustancias se debe a que absorben
ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a
nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbida. Esta espectrofotometría utiliza
radiaciones del campo UV de 80 a 400 nm, principalmente de 200 a 400 nm (UV cercano) y
de luz visible de 400 a 800 nm, por lo que es de gran utilidad para caracterizar las soluciones
en la región ultravioleta-visible del espectro. Se rige por una ley muy importante: la ecuación
de Beer-Lambert.

Ley de Beer-Lambert[editar]
Artículo principal: Ley de Beer-Lambert
Una expresión para la ecuación de Beer-Lambert es la siguiente:
donde:
es el rango de luz captado por el tubo de fotocolorimetría,
es el rango de luz que sale del tubo de fotocolorimetría y que va a llegar a la celda
fotoeléctrica donde es captada y medida
es la capacidad de captación del haz del campo electromagnético,
es la longitud del tubo de fotocolorimetría, en cm.
es la concentración de la muestra ya ubicada en el tubo de fotocolorimetría.
La ley de Beer permite cuantificar la concentración de una muestra por UV, también puede ser
expresada de la siguiente manera:
donde:
es la absorbancia
es el coeficiente de extinción (Característico de cada sustancia).
es la longitud del paso de la cuba (cm).
es la concentración (moles/l).
La zona de longitudes de onda que se registra en un espectro UV-Vis es de entre 200 y 800
nm. En esta zona no absorben dobles ni triples enlaces aislados.
Solo van a absorber enlaces pi conjugados y heteroátomos con pares de electrones no
compartidos (O, N), como los grupos cromóforos.
Características del sistema[editar]
 Las muestras en solución se ponen en una pequeña celda de silicio.
 Se utilizan dos lámparas: una de H o deuterio para la región UV, y una de W /
halógeno para la región visible
 Se utiliza también una celda de referencia que contiene solo solvente.
 La luz pasa simultáneamente por la celda de muestra y la celda de referencia.
  El espectrómetro compara la luz que pasa por la muestra con la que pasa por la celda
de referencia.
 La radiación transmitida es detectada y el espectrómetro obtiene el espectro de
absorción al barrer la longitud de onda de la luz.
Tipos de espectrofotómetros[editar]
 Espectrofotómetro de doble haz: es aquel que cuenta con dos compartimientos para
celdas de muestra que le permite medir simultáneamente la cantidad de energía
radiante absorbida por una matriz (blanco) y la energía absorbida por la muestra
compuesta por la matriz y la especie de interés.
 Espectrofotómetro de haz simple: cuenta con un único compartimiento de celda con lo
cual se debe realizar la medida de absorción del “blanco” para poder registrar un cero
(o referencia) y luego medir la absorción de la muestra.
Consideraciones generales[editar]
La espectroscopia ultravioleta-visible es la más limitada para la información de compuestos.
Los compuestos que tengan un cromóforo o instauraciones son visibles en esta región. Un
cromóforo es cualquier grupo de átomos que absorben luz independientemente de que
presente color o no, aunque también puede presentar un grupo auxócromo que es el que
amplia la conjugación de un cromóforo mediante la compartición de electrones de no enlace.
La máxima absorción se debe a la presencia de cromóforos en una molécula. Este tipo
de espectroscopia sirve principalmente para el análisis de compuestos aromáticos y ácidos
carboxílicos (α y β) insaturados.
Para el análisis de catalizadores suele utilizarse una variante de esta espectroscopia
llamada espectroscopia de reflectancia difusa (física)#Reflexi.C3.B3n difusa.