BIOSEPARACIONES
MEMBRANAS:
Las membranas son barreras físicas semipermeables que separan dos fases, impidiendo su
contacto y restringiendo el movimiento a través de ella de forma selectiva.
OPERACIONES DE MEMBRANA
-Operaciones de concentración: se elimina parte del disolvente.
-Operaciones de purificación o clarificación: se eliminan componentes no deseados, que
son retenidos por la membrana.
-Operaciones de fraccionamiento: se consigue la separación de determinados
componentes.
PROPIEDADES DE LA MEMBRANA DE FILTRACIÓN
-Relación de rechazo: indica la cantidad o tamaño del material retenido o rechazado.
-Hidrofobicidad: intensidad de la tensión interfacial entre el agua y la superficie de la
membrana. Los materiales hidrofóbicos son más susceptibles.
-Estabilidad térmica: aumenta el tiempo de vida, ya que permite un régimen de limpieza más
agresivo sin dañar el material.
CLASIFICACIÓN DE LAS MEMBRANAS:
Naturaleza: biológica y sintética (orgánicas, poliméricas, líquidas, compuestas).
-Poliméricas u orgánicas: hidrofóbicas, hidrofílicas: la desventaja es la baja resistencia a la
temperatura y al pH.
-Membranas de cerámica o inorgánicas: óxido de sílice y alúmina: toleran altas
temperaturas, pero son caras.
Estructura: macroscópicas (laminares, tubulares, fibras huecas), microscópica (según
porosidad: densas, porosas) y (según configuración: simétricas y asimétricas).
DISMINUCIÓN DEL FLUJO:
-Al aumentar el flujo tangencial se mejora el flujo permeado. La resistencia de la membrana
originada por el ensuciamiento se reduce, ya que el propio flujo arrastra deposiciones.
TECNOLOGÍA DE MEMBRANAS
Ventajas:
-Los procedimientos se pueden realizar a temperatura ambiente.
-La concentración por membranas no exige un cambio de fase.
-Tiene menos gastos de mantenimiento.
-Consumo de energía reducido.
-No se utilizan compuestos químicos ajenos a la disolución a tratar.
Desventajas:
-Obstrucciones en la membrana disminuye el flujo del filtrado.
-Inversión inicial elevada.
CLASIFICACIÓN DE LOS PROCESOS SEGÚN LA FUERZA IMPULSORA
-Principio: eléctrico, fuerza impulsora: gradiente de potencial, proceso: electrodiálisis.
-Princiìo: químico, fuerza impulsora: gradiente de concentración, proceso: diálisis
pervaporación.
-Principio: de presión, fuerza impulsora: gradiente de presión, proceso: ósmosis inversa,
nanofiltración, ultrafiltración, microfiltración.
PERVAPORACIÓN
-Es la evaporación selectiva de un componente de una solución líquida al ponerla en
contacto con una membrana no porosa.
-Permeado: componente que atraviesa la membrana en forma gaseosa.
-Retenido: componente que permanece en fase líquida retirándose en un concentrado.
-Separación de los componentes es determinada por la diferencia de las presiones de vapor
y tasas de permeabilidad.
-La fuerza impulsora es la diferencia del potencial químico, inducido al aplicar vacío en el
lado de la fase gaseosa.
-Es la única operación de separación por membranas en la que los componentes que
permean cambian de estado.
-Tiene principal aplicación en la recuperación de sustancias volátiles.
-Producción de alcohol puro.
-Desalcoholización de la cerveza y el vino.
ELECTRODIÁLISIS
-Las membranas están cargadas eléctricamente y pueden separar iones de soluciones
acuosas.
-Los electrolitos son normalmente transferidos desde una solución menos concentrada, a
través del intercambio iónico de la membrana, hasta una solución más concentrada con la
ayuda de energía eléctrica.
-Las membranas cationicas (+) retienen ánodos y las aniónicas (-) retienen cátodos.
-Una membrana de intercambio iónico se componen de cadenas macromoleculares
(generalmente polímeros) formando una red tridimensional insoluble, sobre las cuales están
fijados los grupos funcionales ionizados.
-Tiene su principal uso en la extracción de sales a partir de agua salobre.
-También en la desmineralización del suero de leche, azúcar, y vino; desacidificación de
jugos.
-Este proceso se utiliza en Japón, donde por ley se utiliza para producir la sal de mesa.
PERMEACIÓN DE LÍQUIDOS O DIÁLISIS
-Es la separación de partículas coloidales por medio de una membrana semipermeable. Las
partículas en solución pueden pasar a través de membranas semipermeables en tanto que
las partículas coloidales no. Los solutos pequeños de una fase líquida se difunden
fácilmente debido a las diferencias de concentración a través de una membrana porosa
hacia la segunda fase líquida (o fase gaseosa).
-Se acostumbra a separar especies que difieren apreciablemente en tamaño, y que tienen
una diferencia razonablemente grande de velocidades de difusión es decir un índice de
difusión.
-Los flujos de soluto dependen del gradiente de concentraciones en la membrana, por lo
que la diálisis se caracteriza por bajos flujos.
-En general se utiliza en soluciones acuosas.
GRADIENTE DE PRESIÓN
-Son procesos de membrana caracterizados por el hecho que la fuerza impulsora que
facilita el paso a través de la membrana es por gradiente de presión.
-Ósmosis inversa, nanofiltración, ultrafiltración, microfiltración
MICROFILTRACIÓN
-Es la más antigua de las cuatro tecnologías de membrana que utilizan presión.
-Se utiliza una presión <5 atm.
-Microfiltración 0.1-0.10 micrómetros.
-Utilizada principalmente para clarificar aguas y separar partículas en suspensión
ULTRAFILTRACIÓN
-Se utiliza una presión 2-8 atm.
-Ultrafiltración 0.01-1 micrómetros.
-Suelen ser membranas porosas y asimétricas.
-Para clarificar aguas y separar las partículas de suspensión como proteínas y almidón.
Elimina bacterias, virus, hongos y partículas de hierro y magnesio.
NANOFILTRACIÓN
-0.01-0.001 micrómetros
-Puede utilizar membranas cargadas eléctricamente.
-Se utiliza una presión 5-15 atm.
-Utilizadas principalmente para desmineralizar el agua (sales divalentes) y eliminar metales
pesados.
ÓSMOSIS INVERSA
-En la ósmosis el disolvente va desde un soluto diluido hacia el soluto concentrado a través
de una membrana semipermeable que permite el paso del disolvente pero impide el paso
de los solutos.
-Para invertir el flujo del agua de manera que fluya desde la solución salina hacia el
disolvente fresco, se aumenta la presión por encima de la presión osmótica en el lado de la
solución.
-<0.001
-Se aplica una presión mayor a la osmótica >25atm
-Las membranas suelen ser hidrófilas.
-Utilizada principalmente para producir agua ultrapura con sus derivados en la industria
electrónica o farmacéutica.
APLICACIONES EN LA TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS
-Las membranas más utilizadas en la industria alimentaria con la microfiltración y
ultrafiltración, ya que pueden trabajar a altas temperaturas.
-Inicio: acondicionamiento de la calidad de los líquidos para procesar.
-Núcleo: optimización o sustitución de un proceso para aumentar el rendimiento.
-Final: purificación-concentración de productos. Conservación de alimentos, tratamiento de
efluentes.
-Microfiltración: eliminación de M.O de la leche, concentrado de micelas de caseína para
producir suero nativo.
-Ultrafiltración: concentrado de proteínas de suero, para obtener proteínas aisladas de suero
y proteínas concentradas de suero, clarificación de jugo de frutas, recuperación y
concentración de compuestos fenólicos de vinos.
-Nanofiltración: separación de concentración de componentes bioactivos para su posterior
uso en la fortificación de alimentos, desalinización de aguas marinas.
-Osmosis inversa: remoción de patógenos del agua para consumo humano, obtención de
agua para calderas, desalcoholización de vino y cerveza.
APLICACIONES DE LA BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL
-Tratamiento de aguas residuales:
-Membranas con nanocompuestos:
-Oro: eliminación de metales pesados.
-Plata: fungicida, bactericida y viricida.
-Titanio: algunos contaminantes reaccionan formando especies inofensivas.
-Grafeno: desalinización.
ELECCIÓN DE LA MEMBRANA ADECUADA
-Naturaleza de la sustancia a separar: contenido de sólidos (líquidos o gases) disueltos,
carga del material.
-El pH y la temperatura de la corriente del proceso.
-Espectro de filtración.
TÉCNICAS ELECTROFORÉTICAS
-La electroforesis es una técnica de separación de las biomoléculas según su movilidad y
naturaleza, a través de un gel u otro tipo de matriz de naturaleza porosa, en el cual, por
acción de un campo eléctrico, serán separadas de acuerdo a su tamaño o peso molecular.
-Técnica utilizada en campos como biología molecular, bioquímica, proteómica y
metagenómica.
Tipo de electroforesis:
-Electroforesis capilar (EC): combina aspectos de la electroforesis convencional y el HPLC.
-Electroforesis de frente móvil o libre: es el origen de la electroforesis tal y como la
conocemos hoy en día.
-Electroforesis de zona (convencional): en papel, en acetato de celulosa, en gel (agarosa,
poliacrilamida, almidón).
Electroforesis capilar (EC): combina aspectos de la electroforesis convencional y el HPLC
-El capilar está cargado negativamente en su superficie.
-El separa cualquier tamaño de partícula.
-Utiliza volúmenes muy pequeños de muestra (nL).
-No requiere de colorantes, las proteínas se detectan por espectrofotometría.
-La velocidad de separación es mayor que en la convencional.
Electroforesis de frente móvil o libre: es el origen de la electroforesis y como la conocemos.
-Las proteínas se desplazan a velocidades diferentes según sus cargas y coeficientes.
-Tienen poco poder de resolución.
Electroforesis de zona: la muestra se desplaza sobre un soporte sólido.
-Las proteínas se desplazan a velocidades diferentes según sus cargas y coeficientes.
-Los medios estabilizadores pueden ser papel filtro, acetato de celulosa, gel de agarosa y
gel de poliacrilamida.
Electroforesis de zona en gel de poliacrilamida PAGE:
-Son soporte de elección para la electroforesis de proteínas.
-Se utilizan agentes desnaturalizantes de proteínas como SDS
-Son químicamente inertes, estables en un amplio rango de pH, temperatura y fuerza iónica
.
Electroforesis de zona en gel de agarosa
-No es un compuesto tóxico.
-Permite realizar el análisis de ácidos nucleicos con pesos moleculares variados, según la
concentración de agora que se emplee
-Su poder de resolución es menor que el de los geles de poliacrilamida
-El tamaño de los poros del gel es inversamente proporcional a la concentración de agarosa
Componentes:
-Fuente de alimentación (voltios y amperios).
-Electrodos: ánodos (+) y cátodos (-)
-Cubeta de electroforesis
-Solución buffer
-Soporte electroforético
-Transiluminador
FACTORES QUE AFECTAN LA ELECTROFORÉSIS
Campo eléctrico:
-Fuerza de voltaje: la molécula será arrastrada por la fuerza de voltaje
-Intensidad amperios
-Resistencia determinada por el soporte y el buffer
-Temperatura: el aumento puede dañar el soporte, el equipo y desnaturalizar las proteínas
Muestra:
-Carga o densidad de carga
-Tamaño y forma
Tampón (buffer) de electroforesis
-pH y concentración
APLICACIONES DE LA ELECTROFORESIS
-Determinar los tamaños moleculares de los ácidos nucleícos.
-Analizar los fragmentos cortados con enzimas de restricción.
-Aislar y recuperar fragmentos de ADN purificados para clonaciones moleculares
-Analizar productos de PCR
-Identificación de fracciones proteicas proteínas particulares por tamaño.
CROMATOGRAFÍA
-Técnica que permite la separación de componentes estrechamente relacionados en
mezclas complejas. Los componentes se distribuyen entre una fase móvil y otra
estacionaria.
-Se basa en el principio de retención selectiva.
Puede cumplir dos funciones:
-Separar componentes, para obtenerlos más puros y utilizarlos posteriormente
-Analñitica: medir la proporción de los componentes de la mezcla
-El soluto es absorbido de la solución por la fase estacionaria, más tard, desadsorbido
pasando la fase móvil.
-La fuerza con que es adborbido el soluto depende de su polaridad y la del solvente.
-A medida que los componentes de la mezcla se separan, ccomienzan a formar bandas o
zonas móviles donde cada banda debe de tener un componente.
