UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE TECNOLOGIA MEDICA

ESPECIALIDAD DE LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA

ASIGNATURA:

HISTOTECNOLOGÍA E HISTOQUÍMICA

ASIGNACIÓN:

INFORME DE PRÁCTICA Y DESARROLLO DE EVIDENCIAS PC2

ESTUDIANTE:

NADIRA ALONDRA BAUTISTA FAJARDO

DOCENTE:

Lc. ANGIE LOZA ALMEYDA

CICLO:

IV

SEDE O FILIAL:

CHINCHA

TURNO:

TA

CHINCHA – PERÚ

2024
 INDICE

INTRODUCCIÓN.....................................................................3

TINCIÓN DE HEMATOXILINA Y EOSINA...........................4

TINCIÓN DE PERLS Y PARLS................................................6

CONCLUSIÓN...........................................................................8
 INTRODUCCIÓN

Con la ayuda de la microscopía óptica se puede estudiar en detalle la estructura y

composición de los tejidos y células en histología y citología . Dado que los tejidos y las

células son transparentes, se deben emplear técnicas de tinción para mejorar el contraste

y permitir la visualización de los componentes celulares con la claridad suficiente para

la identificación de estructuras particulares y el diagnóstico de enfermedades. La técnica

H&E es una de las técnicas más comunes y más usada para visualizar la estructura

general de los tejidos mediante la tinción de los núcleos celulares (calentados de azul

violeta con hematoxilina) además del citoplasma , que generalmente se tiñe de rosa rojo

con eosina .

Además de H&E, existe una técnica específica para la detección de componentes

celulares particulares. En este contexto, las técnicas más implementadas incluyen la

tinción de Perl y la tinción PAS . Cada una de estas técnicas tiene una lógica y un

procedimiento. La tinción de Perl se utiliza para investigar la presencia de hierro en los

tejidos, mientras que la tinción PAS se utiliza normalmente para la detección de

polisacáridos, como el glucógeno. Ambas técnicas, junto con la H&E, pueden

proporcionar información muy necesaria para el diagnóstico y la investigación en los

diversos campos de la biología.

 TINCIÓN DE HEMATOXILINA Y EOSINA

FUNDAMENTO

Es la metodología de tinción más frecuentemente recurrida en histología y citología

para proporcionar contraste en la morfología de cortes de tejido en estudio mediante
microscopía óptica. Este método depende fundamentalmente de una mezcla de dos
colorantes: hematoxilina, que tiñe de azul-violeta los núcleos de las células , y eosina,
que contra tiñe de rosa-rojo el citoplasma y otros componentes celulares .

PRINCIPIO DE LA TINCIÓN:
 HEMATOXILINA:
Como se dijo anteriormente , la hematoxilina es un colorante básico que se une a los
ácidos nucleicos (ADN y ARN) en los núcleos celulares, dándoles un color azul-violeta.
 EOSINA:
La eosina es un colorante ácido que se une a las proteínas en el citoplasma junto con
otras estructuras celulares como las fibras de colágeno, dándoles un color rosa-rojo.

PROCEDIMIENTO GENERAL DE TINCIÓN H&E :

1. Preparación de la muestra : Se prepara una sección delgada de tejido o un frotis celular y se

fija con un agente fijador para mantener la estructura .

2. Hidratación: Se somete a una serie de soluciones acuosas para reemplazar el alcohol utilizado
durante la fijación , permitiendo así que los colorantes penetren en las células.

3. Tinción con hematoxilina : Se deja que la muestra esté en contacto con la solución de
hematoxilina durante un período de tiempo suficiente para que el colorante se una a los núcleos.
4. Lavado : La hematoxilina sobrante se elimina de la muestra con agua .

5. Diferenciación: Se utiliza una solución ácida para eliminar el exceso de colorante que se ha
unido a otras estructuras celulares, dejando solo la coloración en los núcleos.

6. Lavado: Se lava la muestra con agua para eliminar el ácido diferenciador.

7. Tinción con eosina: La muestra se coloca en una solución de eosina durante un tiempo
determinado, permitiendo que el colorante se una al citoplasma y a otras estructuras.

8. Deshidratación: La muestra se coloca en una serie de soluciones alcohólicas para eliminar el

agua y prepararla para la inclusión en parafina.

9. Montaje: La muestra se monta en un portaobjetos con un medio de montaje transparente.

BENEFICIOS DE LA TINCIÓN H&E:

Visualización de estructuras: La tinción H&E permite visualizar la estructura de los

tejidos de forma contrastada, diferenciando claramente los núcleos celulares del
citoplasma y otras estructuras.

Identificación de tipos celulares: La tinción H&E puede ayudar a identificar diferentes

tipos de células en un tejido, ya que cada célula tiene un tamaño y una forma nuclear y
citoplasmática característicos.

Detección de anormalidades: La tinción H&E puede revelar anormalidades en la

estructura y la organización de los tejidos, como la presencia de células neoplásicas o de
inflamación.

APLICACIONES DE LA TINCIÓN H&E:

Diagnóstico de enfermedades: La tinción H&E es una herramienta fundamental en el

diagnóstico de enfermedades, ya que permite al patólogo examinar la estructura de los tejidos y
detectar anormalidades.

Investigación: La tinción H&E se utiliza en investigaciones científicas para estudiar la

estructura y la función de los tejidos.

“La tinción con H & E representa una forma sencilla y económica de tinción; sin embargo ,
tiene gran importancia para la determinación de la estructura del tejido”
 TINCIÓN DE PERLS Y PARLS

PERLS
FUNDAMENTO
El principio de la tinción de Perl, como se explicó anteriormente , se basa en la reacción del
hierro en los tejidos con ferrocianuro de potasio en presencia de ácido clorhídrico para formar
un complejo azul profundo. La reacción es específica para el hierro y puede provocar depósitos
de hierro en los tejidos.

PROCEDIMIENTO
Desparafinar e hidratar la muestra , luego bañar en solución de ferrocianuro de potasio al 1% en
HCl al 2% durante 20-30 min , seguido de lavar , contra teñir con eosina, deshidratar y montar
en un portaobjetos.

INTERPRETACIÓN
Hierro presente demostrado como gránulos azules.

PAS
FUNDAMENTO
La tinción PAS es un método histoquímico para detectar la presencia de polisacáridos
( glucógeno, mucopolisacárido y glucoproteínas ) en tejidos. Se basa en la reacción del ácido
peryódico (HIO4) con los grupos 1,2-glicol de los polisacáridos formando aldehídos. Estos
aldehídos reaccionan con el reactivo de Schiff, dando un color magenta .

PROCEDIMIENTO:
 Preparación de la muestra: La muestra se desparafina y se hidrata.
 Oxidación: La muestra se deja permanecer en la solución de ácido peryódico durante
algún tiempo , normalmente de 5 a 10 minutos .
 Reacción de Schiff: La muestra se deja permanecer en la solución de reactivo de Schiff
durante algún tiempo ; normalmente, de 15 a 30 minutos .
 Lavado: El exceso de reactivo de Schiff se lava con agua de la muestra .
 Contraste: La contra tinción se puede realizar utilizando hematoxilina para los núcleos
de las células .
 Deshidratación y montaje: La muestra se deshidrata y se monta, en un medio de
montaje transparente sobre el portaobjetos.
INTERPRETACIÓN:

Las estructuras de color magenta indican la presencia de polisacáridos.

DIFERENCIAS
1. Perl's detecta hierro, mientras que PAS detecta polisacáridos.
2. Perl's emplea ferrocianuro de potasio y ácido clorhídrico, mientras que PAS
emplea ácido peryódico y reactivo de Schiff.
3. Perl's tiñe de azul , mientras que PAS tiñe de magenta .

4.1. Perl's: Diagnóstico de enfermedades de almacenamiento de hierro , estudio del

metabolismo del hierro.

4.2. PAS: Diagnóstico de enfermedades de almacenamiento de glucógeno ,

identificación de células mucosas , estudio de la estructura de los tejidos conectivos.
 CONCLUSIÓN

En resumen , la tinción H&E , la tinción de Perl y la PAS son tres técnicas histológicas

principales que ayudan en la detección de diferentes componentes celulares. H&E da

una visión general de la estructura del tejido ; la tinción de Perl es específica para la

detección de hierro en los tejidos, mientras que la tinción PAS es un método

histoquímico que detecta la presencia de polisacáridos. Cada una de estas técnicas

depende de una reacción química específica que produce una determinada tinción , que

es visible en las estructuras de interés. La elección depende del objetivo del estudio y

del componente celular a detectar. Las aplicaciones de tales técnicas en el diagnóstico

de enfermedades y la realización de investigaciones científicas han permitido una mejor

comprensión de la estructura y la función tanto en los tejidos como en las células.