Tinción de Gram
Gran
La tinción de Gram es una prueba que detecta bacterias en el lugar donde se sospecha una infección, como la garganta, los pulmones,
los genitales o las lesiones en la piel. Las tinciones de Gram también se pueden usar para detectar bacterias en ciertos fluidos
corporales, como la sangre o la orina. Hay dos categorías principales de infecciones bacterianas, grampositivas y gramnegativas. Las
categorías se diagnostican según cómo reacciona la bacteria a la tinción de Gram. La tinción de Gram es de color púrpura. Cuando la
tinción se combina con la bacteria en una muestra, las bacterias puede seguir de color púrpura o volverse rosadas o rojas. Si se
mantienen púrpura, son grampositivas. Si se vuelven rosadas o rojas, son gramnegativas. Las dos categorías causan tipos diferentes
de infecciones:
Las infecciones grampositivas incluyen el Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (SARM), las infecciones por
estreptococos y el shock tóxico
Las infecciones gramnegativas incluyen salmonela, neumonía, infecciones del tracto urinario y gonorrea
Saber si las bacterias son grampositivas o gramnegativas ayuda a su profesional de la salud a identificar el tipo de infección y los
antibióticos más eficaces.
La tinción de Gram se suele usar para saber si usted tiene una infección bacteriana. Si es así, la prueba muestra si la infección es
grampositiva o gramnegativa. La tinción de Gram también puede usarse para diagnosticar infecctiones por hongos.
Los pasos para realizar la tinción de Gram son los siguientes:
Recoger la muestra de bacterias a estudio mediante un isopo (bastón estéril de algodón).
Extender dicha muestra sobre un portaobjetos y dejarla secar.
Fijar la muestra mediante un alcohol (metanol).
Aplicar el tinte de violeta de genciana sobre el portaobjetos y esperar un minuto.
Enjuagar la muestra con agua y aplicar un fijador del violeta de genciana (lugol). El lugol y el violeta de genciana forman un
complejo insoluble en agua capaz de penetrar en la pared de las células bacterianas.
Lavar de nuevo el portaobjetos con una mezcla de alcohol y acetona durante unos segundos.
Opcionalmente se puede añadir una tinción de safranina o fucsina para distinguir las gram negativas que aparecerán bajo el
microscopio (en lugar de incoloras) con un tono rosado o rojo. Lavar con agua.
Ya se puede observar la muestra al microscopio donde se visualizarán de color violeta las gram positivas y de color rosa-rojizo
las gram negativas.
En el caso de las bacterias gram positivas los complejos insolubles se quedan atrapados entre las capas de peptidoglicano de la pared
bacteriana, sin disolver y dando la coloración morada característica al observarlas al microscopio. En cambio, en las bacterias gram
negativas estos compuestos sí que se disuelven y pierden su color. Al microscopio se verán incoloras o de color rosa-rojo, en función
de si se ha añadido la fucsina al final de la técnica de tinción de Gram.
Entre las bacterias gram positivas más frecuentes se encuentran el Staphylococcus, el Streptococcus y el enterococo. Ejemplos de
bacterias gram negativas son la Escherichia coli y la Pseudomona aeuruginosa. Las limitaciones de la técnica vienen dadas por las
características de la muestra, el protocolo de tinción y además el hecho de que algunas bacterias no presentan pared celular.
Tinción de la Tuberculosis
La tinción de Ziehl Neelsen (ZN), es una técnica de coloración de microorganismos para la identificación de patógenos, como
Mycobacterium tuberculosis causante de la tuberculosis, que requiere de tres (03) soluciones: Carbol Fucsina Fenicada (Fucsina Básica),
Azul de Metileno al 1% y Solución Decolorante, que se elaboran en la Sección de Reactivos y Colorantes del Instituto Nacional de
Higiene Rafael Rangel y se emplean en el diagnóstico de tuberculosis. Es un análisis de laboratorio que determina si una muestra de
tejido, sangre u otra sustancia corporal está infectada con la bacteria que causa la tuberculosis (TB) y otras enfermedades.
La forma en la que podemos realizar este examen :
Orina
Heces
Esputo
Médula ósea
Tejido
La muestra se envía luego a un laboratorio. Una porción de la muestra se coloca sobre un portaobjetos de vidrio, se tiñe y se calienta.
Las células en la muestra retienen el tinte. Luego, se lava el portaobjetos con una solución ácida y se aplica un colorante diferente.
