PRÁCTICA No.
6 ADN, LA MOLÉCULA DE LA VIDA
I. Pasaporte
A. Vea la realización del laboratorio virtual sobre extracción de ADN que se
encuentra en el siguiente link: [Link]
v=q9AJbJeeaO8
B. Indique ¿Cuál es la función de cada una de las soluciones/reactivos que
utiliza durante el proceso de la extracción de ADN?
C. Dibuje o realice un esquema de las siguientes moléculas indicando sus partes o
componentes estructurales.
1. Nucleótido
2. ADN
II. Introducción
El ácido nucleico ADN (ácido desoxirribonucleico) es el material genético de todos los
organismos vivos; en organismos eucariotas el ADN está contenido en el núcleo, mientras que
en procariotas se encuentra en una región del citoplasma llamada nucleoide.
Uno de los grandes descubrimientos del siglo XX fue realizado por James Watson y Francis Crick
en 1953; ellos descifraron que el ADN tiene una estructura de doble hélice constituida por
nucleótidos de cuatro tipos: A (adenina), G (guanina), T (timina), C (citosina); además
propusieron que las dos hebras que constituyen la doble hélice se complementan
exactamente, de tal manera que los únicos pares de nucleótidos posibles son A-T o G-C.
El ADN se organiza en genes y almacena información genética. Un gen es un fragmento de
ADN que contiene la información que codifica para una característica. Para que esta
información se convierta en una característica observable, debe transmitirse primero a otro
tipo de ácido nucleico llamado ARN (ácido ribonucleico), mediante un proceso llamado
transcripción. En organismos eucariotas el ARN transporta la información genética fuera del
núcleo, al citoplasma en donde es traducida a proteínas. Este último proceso es llamado
traducción y es llevado a cabo por los ribosomas. ¿Cómo es que la información contenida en
los ácidos nucleicos se convierte en los aminoácidos que constituyen las proteínas? Esta
“decodificación” de información emplea el código genético, el cual consiste en un conjunto de
64 tripletas de nucleótidos (codones) presentes en el ARNm, cada uno de los cuales codifica
para uno de los 20 posibles aminoácidos; así como también indican en donde empieza (codón
de inicio) y donde termina (codón stop) el mensaje.
III. Aprendizaje
● Extrae ADN utilizando sustancias de uso cotidiano.
IV. Materiales
En esta práctica ustedes realizarán un experimento de extracción de ADN. A continuación, te
listamos los materiales que deben ser traídos por su naturaleza perecedera.
A. Materiales disponibles en laboratorio
1. Licuadoras
2. Morteros
3. Jabón líquido
4. Alcohol al 95%
5. Sal
6. Suavizador de carne (opcional)
7. Tubos de vidrio
8. Gradillas
9. Palillos de dientes
10. Beakers de 250 y 100 mL
11. Gasa
12. Bolsas de desechos
B. Materiales que deben traer los estudiantes.
1. ½ taza de tejido asignado (arveja, espinaca, fresa, banano, hígado,
levadura, cebolla o pollo)
V. Procedimiento
Parte I: Extracción de ADN
1. Reunir aproximadamente ½ taza del material seleccionado
2. Disuelva una cucharadita de sal en 200 ml de agua tibia para tejido animal o 3
cucharaditas para tejido vegetal. Según sus conocimientos previos ¿para qué
cree que se utilizará la sal? -La sal se utiliza para romper la pared celular de la
célula vegetal.
3. Coloque la totalidad del tejido en la licuadora o procesador de alimentos (en el
caso del hígado y arveja especialmente) o bien en un mortero (en el caso de la
espinaca, cebolla y levadura).
4. Licúe o procese a alta velocidad entre 15 a 30 segundos. Si utiliza un mortero,
macere hasta que desintegre el tejido y obtenga una mezcla homogénea. La
consistencia debe ser de una sopa ligera pero consistente.
5. Transfiera el contenido macerado en un beaker de 100 ml, filtrándolo a través de
un trozo de gasa sujetado con una banda de hule. CUIDADO en este paso, haga el
filtrado despacio evitando derramar el líquido en la mesa de trabajo. ¿Por qué es
importante este paso? -Para separar la materia que no se necesita, es decir
quedarnos solo con el material que contenga ADN que seria la parte liquida
6. Al producto ya filtrado en el beaker agregue dos (2) cucharaditas llenas de jabón
líquido y revuelva suavemente con un palillo de dientes, tratando de no hacer
muchas burbujas. Déjelo reposar entre 5 a 10 minutos. ¿Para qué utiliza el jabón
líquido en este paso? El jabón se utiliza para romper la membrana celular y así
poder sacar todo lo que esta adentro de la célula.
7. Vierta una porción de la mezcla en tres tubos de ensayo, llenándolos hasta un
tercio del volumen total del tubo.
8. Agregue una pizca de suavizador de carne y revuelva suavemente con un palillo
de dientes. Sea cuidadoso ya que si revuelve muy fuerte o rápido romperá las
hebras de ADN. Puede sustituir el suavizador de carne por jugo de piña o líquido
para limpiar lentes de contacto. Explique ¿para qué se añade suavizador de
carne, jugo de piña o liquido de lentes en este paso? Las enzimas del suavizador
ayudan a separar el ADN de las proteínas de la solución.
9. Incline el tubo y agregue lentamente por la pared del tubo de ensayo
aproximadamente el mismo volumen que tiene de solución de etanol al 95%,
tratando de formar una capa sobre la mezcla. El alcohol es menos denso que el
agua, por lo que flota por encima de la mezcla.
10. Deje reposar, luego observe en donde está el alcohol y busque grumos o fibras
blanquecinas; éstas son el ADN que sube hacia el alcohol.
11. Compare su extracción de ADN con la de sus compañeros que utilizaron otros
tejidos y anote las diferencias observadas en la apariencia y rendimiento de los
diferentes tejidos.
Sustancias Extracción Imagen
Hígado Se noto una gran
cantidad de muestra de
ADN e inclusive más que
en el del pollo. El hígado
tiene muchas proteínas
y por eso mismo
tenemos más tejido.
Pollo Al igual que el hígado el
pollo tiene tejidos
fibrosos. El ADN es muy
visible en la parte de
arriba de la muestra.
Levadura La levadura tiene menos
cantidad de ADN
flotante ya que tiene
muchas otras proteínas
y materiales a
comparaciones de las
frutas y verduras.
Alverja Tiene muy poco ADN en
la parte de arriba del
tubo de ensayo.
Banano Solución con muchos
otros materiales, pero al
igual que en la fresa se
puede notar la
separación de los tejidos
en la parte de arriba de
la solución.
Cebolla Se puede ver claramente
la amplia cantidad de
ADN en la parte de
arriba.
Fresa Es mas fácil notar la
extracción de ADN ya
que al tener células
sexuales, estas
contienen una mayor
nivel de ADN.
Tomate Similar a la fresa, se
puede notar la
extracción de ADN en la
parte superior del tubo.
Espinaca Espinaca no tiene casi
nada de extracción de
ADN porque es un
tejido fibroso.
12. Si se forma suficiente precipitado puedes usar un palillo para enrollarlo y sacarlo
de la solución.
13. Puedes almacenar el ADN en un recipiente sellado que contenga alcohol.
Discusión de Resultados
Durante este laboratorio se extrajo ADN de diferentes materiales, entre ellos carnes,
vegetales, frutas, y también hongos. Es importante destacar que la extracción fue diferente en
los diferentes materiales gracias a las diferencias en los tipos de células que tiene cada uno. La
estructura de la célula vegetal es diferente a la de la célula animal y por ende se uso un
proceso levemente diferente para poder extraer por completo el ADN de cada uno. Para
comenzar, se necesita entrar a la célula que se logra con ayuda de solución salina tibia. Se
utiliza la sal para poder purificar el ADN mediante la neutralización de cargas del ADN, y de esta
manera el ADN se une en vez de repelerse (Fang,et al., 2023). Se utiliza una mayor cantidad de
sal en la célula vegetal ya que es necesario hacer una ruptura en su pared celular por lo cual se
necesita una solución salina de mayor impacto (Rocha, 2002). Los tipos de células utilizados
durante este laboratorio tienen membranas grasas por lo cual el detergente fue utilizado para
poder romper estas membranas y así poder entrar a la célula (Merino, et al., 2019) Por último
el etanol fue de mucha importancia gracias a que este permite que el ADN se separe del resto
de material en la mezcla ya que hace que su carga quede neutralizada y también hace que
pierda su solubilidad para que el ADN se precipite y se pueda observar cómo tejidos blancos
(Merino, et al., 2019.)
Es inevitable observar la diferencia en las cantidades de tejidos dependiendo del tipo
de célula que se observó. La primera diferencia clara es entre la célula vegetal y animal. Ambos
tienen presencia de proteínas ya que son necesarias para el funcionamiento de cada uno, pero
las proteínas de origen animal son mas complejas que las de origen vegetal. Por esta razón se
puede observar una mayor cantidad de ADN en las muestras de células animales que en las de
células vegetales (Torres, et al., 2007).
Al experimentar con las hojas de espinaca, la separación de moléculas y la visibilidad
de ADN fue mucho más tardada que con tejidos como el de la fresa. La espinaca se dejó
reposar por más tiempo del recomendado y aun así fue muy poca la visibilidad que se tuvo del
extracto de ADN. La espinaca y todas las hojas se consideran tejidos fibrosos gracias a su
flexibilidad y su alta cantidad de fibra como también de agua (Cámara de Comercio de Bogotá,
2015). Comparando los diferentes tipos de células vegetales observados en este caso se puede
observar una diferencia en los tejidos de los frutos y las hojas de las células vegetales. Se
comprobó que las en las células de los frutos se separó el ADN más fácilmente que en las
células de las hojas gracias a la cantidad de células sexuales que contienen los frutos (Segui,
2010).
A diferencia de las células animales y vegetales, en el caso de la levadura, fue mucho
más compleja la extracción de ADN. Esto debido a que la estructura de la levadura y de
cualquier tipo de hongo es mas compleja. La pared celular contiene varios tipos de
polisacáridos y también existe la presencia de inhibidores que hace más difícil la extracción de
ADN. Se puede notar una gran diferencia en la muestra de levadura comparada con todas las
demás gracias a sus componentes (Mamani, et al., 2014).
Conclusiones
1. La cantidad de proteína que tiene el tejido hace que cambie la facilidad con la que se
extrae el ADN de este.
2. Fue más fácil extraer el ADN de las células vegetales después de agregar mayor
cantidad de sal ya que esta rompió la pared celular.
3. Al observar la extracción de espinaca, parecía que no contenía ADN debido a que
después de bastante tiempo no se separaban las moléculas de ADN de la solución y
con esto se comprobó que ya que la espinaca es un tejido fibroso hay menos cantidad
de ADN y también su extracción es mas compleja.
Referencias
C., Fang, D., Gima, N., Gupta. (2023). Effect of Varying Salt Concentrations on DNA Extraction
from Strawberries and Bananas.
[Link]
_on_DNA_Extraction_from_Strawberries_and_Bananas
Cámara de Comercio Bogotá. (2015). Manual Espinaca. Núcleo Ambiental S.A.S.
Gómez, J., Merino, J. & Gallego, R. (2019). Extracción de ADN con material cotidiano: desarrollo
de una estrategia interdisciplinar a partir de sus fundamentos científicos. Educación Química,
30(1), 58-68.
Mamani, W., Martínez, R. & Sepúlveda, C. (2014). Un método rápido y eficiente para la
extracción de ADN total de hongos filamentosos del suelo. Idesia, 32(2), 75-78.
Rocha, P. (2002). Teoría y Práctica para la extracción y purificación del ADN de palma de aceite.
Palma, 23(3), .
Seguí, J. (2010). Biología y Biotecnología Reproductiva de las Plantas. Universidad Politécnica
de Valencia.
Torres, L., Valencia, A., Sampedro, J. & Nájera, H. (2007). Las proteínas en la nutrición. Revista
Salud Publica y Nutrición, 8(2), 1-7. [Link]
2007/[Link]
VI. Valoración
Ítem Puntos Observaciones
Resultados y observaciones de la extracción /20
Discusión /50
Conclusiones /30
Total /100
