Comunicación Intercelular, señales

químicas, receptores de membrana y

segundos mensajeros.

Agustín Martínez C
[Link]@[Link]
El experimento de Otto Loewi descubrimiento de
transmisión química por neurotransmisores.
Células en tejidos y organos

Comunicación intercelular

•Metabolismo
{
Coordinación •Diferenciación
•Crecimiento

Patricio Vélez
 Tipos de comunicación intercelular
1.- Señal
Señal Endocrina
Endocrina
Vaso Sanguíneo

Secreción de Hormonas
Hacia el torrente Sanguíneo Células Blanco

2.- Señal Paracrina 5.- Uniones en Hendidura (Gap Junctions)

comunica el citoplasma de dos células
vecinas

Célula secretora Célula Blanco

3.- Señal Autocrina

Señal extracelular
Receptor

Señal unida a
membrana

La célula secretora es el propio blanco

4.- Señalización por contacto célula-célula

Célula señalizadora Célula blanco adyacente

 Comunicación intercelular
(primeros y segundos mensajeros)

Primeros mensajeros
• Hormonas
• Neurotransmisores
• ATP
• Lipídicos (Derivados del ácido araquidónico, DG, seramidas, etc.)
• Oxido Nítrico.
• Moléculas de adhesión celular

Segundos Mensajeros
• Ión Calcio, IP3
• Nucleótidos cíclicos (AMPc, GMPc)
• ATP
• Oxido Nítrico
• Acido araquidónico
Moleculas señales ejercen su acción a diversas distancias

Señales endocrinas: Hormonas. Células blanco están lejos de las

células secretoras. Hormonas son acarreadas por la sangre.

Señales paracrinas: Neurotransmisores o Neurohormonas.

Moleculas señales actuan en células blanco que están muy cerca.

Señales autocrinas: Las células responden a sustancias que

ellas mismas secretan. Ej. Factores de crecimiento.

Patricio Vélez
Sistema endocrino
Representantes de 4 categorias de hormonas o primeros
mensajeros
 Receptores son proteínas con especificidad por ligando

Hormona
Neurotransmisor Receptor
Factor de Crecimiento
Receptores son proteínas con especificidad por ligando

Complejo ligando-receptor

Patricio Vélez
Receptores son proteínas con especificidad por ligando
y responde con un cambio conformacional

Cambio en la
funcion celular

Cambio conformacional

Patricio Vélez
 Criteria for hormone-mediated events

• Receptor must possess structural and steric specificity for a

hormone and for its close analogs as well.

• Receptors are saturable and limited (i.e. there is a finite number of

binding sites).

• Hormone-receptor binding is cell specific in accordance with target

organ specificity.

• Receptor must possess a high affinity for the hormone at

physiological concentrations.

•Once a hormone binds to the receptor, some recognizable early

chemical event must occur.
 Receptor occupancy, activation of target cell
responses, kinetics of binding

•Activation of membrane receptors and

target cell responses is proportional to
the degree of receptor occupancy.

•However, the hormone concentration at

which half of the receptors is occupied
by a ligand (Kd) is often lower than the
concentration required to elicit a half-
maximal biological response (ED50)
Especificidad por el efector

Receptor 1 Respuesta 1

Receptor 2 Respuesta 2

Receptor 3 Respuesta 3

Patricio Vélez
Un receptor puede tener mas de
un efecto.

Respuesta 1
Célula 1

Respuesta 2
Célula 2

Respuesta 3
Célula 3

Patricio Vélez
 Un transmisor actúando sobre distinto receptores y
células puede inducir respuesta fisiológicas muy
dispares.

Gatilla contracción

Músculo esquelético

Reduce frecuencia
cardíaca
Acetilcolina Corazón

Exocitosis enzimas
digestivas

Receptor de Acino pancreatico

Acetilcolina

Patricio Vélez
 Célula muscular cardiaca Glándulas salivales Célula músculo esquelético

Respuestas inducidas por el neurotransmisor acetilcolina (Ach) en distintas células. Aunque en las células
muscular cardiaca y las de la glándula salival poseen el mismo tipo de receptor de Ach, la activación de este receptor
produce una señal intracelular que es interpretada de forma diferente por ambas células (en las células cardiacas
reduce la frecuencia de contracción y en las de la glándula salival produce secreción). En cambio la célula muscular
esquelética posee un receptor diferente de Ach cuya activación se traduce en contracción
 Tipos de Receptores
a) Receptores intracelulares

b) Receptores de superficie celular

a) Receptores acoplados a proteína G (adrenalina, glucagon, serotonina) Receptores de Superficie

b) Receptores que son canales iónicos (acetilcolina) c) Receptores acoplados a tirosina quinasa (eritropoyetina, interferones)

d) Receptores con actividad enzimática intrínseca

Muchas hormonas inducen la producción segundos mensajeros
al interior de la célula blanco.

Formación complejo LIGANDO-RECEPTOR DE SUPERFICIE

Aumento o reducción de la concentración de

señal intracelular (segundo mensajero)

(AMPc GMPc IP3 DAG Ca2+)

Enzimas y otras proteínas

Patricio Vélez
Los receptores de superficie se agrupan en categorías
según se comunican al efector

• Receptores canales iónicos (inotrópicos). El receptor y

el efector están en la misma proteína

•Receptores acoplados a proteína- G. El receptor y el

efector se comunica a través de proteínas o la
producción de segundos mensajeros.

•Receptores ligados a tirosin-quinasas (citoquinas)

• Receptores con actividad catalítica intrínseca

Patricio Vélez
Primeros mensajeros se clasifican de acuerdo a su
solubilidad y a la localización de sus receptores

1. Moléculas lipofílicas que se unen a receptores intracelulares.

2. Moléculas hidrofílicas que se unen a receptores superficiales.

3. Moléculas lipofílicas que se unen a receptores superficiales.

Patricio Vélez
 Hormonas liposolubles con receptores intracelulares
(Esteroides: tiroxina, ácido retinoico, etc)

Proteína acarreadora
Hormona

núcleo

Vaso sanguineo mRNA

Receptor
intracelular

ADN
Patricio Vélez
Hormonas que activan receptores nucleares. Todas ellas son
pequeñas e hidrofóbicas. Las hormonas sexuales, Estradiol and
testosterona, son esteroides.
La superfamilia de receptores nucleares. Los receptores nucleares se unen al DNA ya sea como homodímeros o
heterodímeros. (A) Todos los receptores nucleares tienen estructura similar. En verde se indica el dominio que une DNA. (B) Un
receptor en su forma inactiva se encuentra unido a proteínas inhibitorias. (C) La unión del ligando al receptor produce cambios
conformacionales, las proteínas inhibidoras se disocian, otras proteínas (co-activdoras) se unen al dominio de activación
transcripcional produciendo un aumento en la transcripción de genes específicos.
Hormonas hidrosolubles que se unen a receptores de superficie

Dos grupos:

➢Hormonas peptídicas (insulina, hormona del

crecimiento, glucagón, etc) Factores de crecimiento peptídicos
tienen efecto más prolongado.

➢Pequeñas moléculas cargadas (adrenalina, histamina,

etc). Generalmente los efectos se ejercen inmediatamente pero duran
muy poco.

Patricio Vélez
Hormonas liposolubles que se unen a receptores de
superficie
Acido araquidónico aprox 16 Prostaglandinas
(ácido graso de 20 carbonos) (PGA PGI)

Sintetizadas y secretadas continuamente en varios tipos de células

y destruidas rápidamente por enzimas presentes en los fluidos
corporales.
➢Modulan la acción de otras hormonas
➢Algunas PGs controlan agregación de plaquetas
➢Síntesis es inhibida por aspirina y otros antinflamatorios
➢Ciertas PGs inician contracción del músculo liso uterino

Patricio Vélez
 Muchas hormonas inducen la producción segundos mensajeros
al interior de la célula blanco.

Formación complejo LIGANDO-RECEPTOR DE SUPERFICIE

Aumento o reducción de la concentración de

señal intracelular (segundo mensajero)

(AMPc GMPc IP3 DAG Ca2+ Acido Araquidónico )

Enzimas y otras proteínas

Patricio Vélez
 Sistema de transducción por proteína G y segunos mensajeros

Señal externa Noradrenalina Acetilcolina Histamina

(primer mensajero)

Extracelular

Receptor Receptor Receptor Receptor de

Receptor -adrenérgico Muscarinico Histamina
MP
Efector
Transductor Gs Adenilato Gq PLC G PLA2
Primario ciclasa
Citoplasma

Segundo mensajero cAMP IP3 DAG Acido araquidonico

Quinasa dependiente lipo- Ciclo-

Efector secundario Ca2+ PKC oxigenasa oxigenasa
cAMP
Formulas de algunos segundos mensajeros comunes
 Proteína G transductora
Adrenalina
Glucagón
Serotonina

R
G E

receptor

Proteína G
Enzima efectora inactiva
inactiva
(adenilato ciclasa, fosfolipasa C, etc)

Patricio Vélez
 R
G+ E

Complejo
ligando -receptor
Proteína G
Enzima efectora inactiva
activa
(adenilato ciclasa, fosfolipasa C, etc)

Patricio Vélez
 R
G+ E

Complejo
ligando -receptor
Proteína G
Enzima efectora inactiva
activa
(adenilato ciclasa, fosfolipasa C, etc)

Patricio Vélez
 (adenilato ciclasa, fosfolipasa C, etc)
Enzima efectora activa

R
G+ E+

Complejo
ligando -receptor

Patricio Vélez
 (adenilato ciclasa, fosfolipasa C, etc)
Enzima efectora activa

R
G+ E+

Complejo
ligando -receptor

Genera segundo mensajero

(AMPc o IP3 o DAG)
Patricio Vélez
Acoplamiento receptor-efector

Proteína Gs

R
Adenilato
ciclasa
G Gs
G
GDP

Patricio Vélez
1. La unión de la hormona causa cambio
conformacional del receptor

R
Adenilato
ciclasa
G Gs
G
GDP

Patricio Vélez
2. Receptor interacciona con proteína Gs

R
Adenilato
ciclasa
G Gs
G
GDP

Patricio Vélez
 3. GDP es reemplazado por GTP

R
Adenilato
ciclasa
G Gs
G
GDP

GTP

Patricio Vélez
 4. GDP es reemplazado por GTP

R
Adenilato
ciclasa
G Gs
G
GTP

GDP

Patricio Vélez
 5. Las subunidades de Gs se disocian

R
Adenilato
ciclasa
G Gs
G
GTP

Patricio Vélez
6. Gs se une con la adenilato ciclasa y la activa. La
hormona se disocia.

R
Adenilato
ciclasa
G Gs
G
GTP

Patricio Vélez
7. Adenilato ciclasa sintetiza AMPc y GTP unido a Gs se
hidroliza

R
Adenilato
ciclasa
G Gs
G
GTP

Pi
ATP AMPc + PPi
8. Gs y adenilato ciclasa se disocian y se vuelve a la condición
inicial

R
Adenilato
ciclasa
G Gs
G
GDP

Patricio Vélez
La unión de una hormona o ligando (ej: adrenalina, glucagon)
a un receptor acoplado a proteína Gs produce activación de
la adenilato ciclasa. Por efecto de la unión del ligando a su
receptor, la proteína Gs es activada y envía la señal hormonal
a la proteína efectora, en este caso la adenilato ciclasa. Gs
se encuentra en dos formas, una forma inactiva unida a GDP
y una forma activa unida a GTP. En la forma activa la proteína
Gs se disocia y el complejo Gs-GTP activa directamente la
adenilato ciclasa. El estado activado es de vida media corta
ya que GTP es rápidamente hidrolizado. Esto termina la señal
hormonal produciendo el reensamblaje de la forma inactiva
Gs-GDP retornando el sistema al estado en reposo. La unión
de otra hormona causa la repetición del ciclo. Tanto las
subunidades Gγ como Gsα estan unidas a la membrana
plasmática por union covalente a lípidos de la cara interna de
la membrana. La union del receptor activado a la Gsα
promueve la disociación del GDP y su reemplazo por GTP.
Cascada de
amplificación
 En células adiposas
Adrenalina
Glucagón PGE1
ACTH Adenosina

R R
Adenilato
ciclasa
G  G G 
s
Gi
GDP GDP

activación inhibición
Patricio Vélez
 GDP GTP

Proteína Gs Proteína Gs
GDP GTP
actividad

(-)
Vibrio cholerae

Bordetella pertussis
Actua sobre Gi
Pi

Patricio Vélez
Cholera toxin activates the adenylate
cyclase enzyme in cells of the intestinal
mucosa leading to increased levels of
intracellular cAMP, and the secretion of
H20, Na+, K+, Cl-, and HCO3- into the
lumen of the small intestine.
 Regulación antagónistica de
efectores a nivel de proteína G
Adrenalina
Glucagón PGE1
ACTH Adenosina

R R
Adenilato
ciclasa
G  G G 
s
Gi
GDP GDP

activación inhibición
Patricio Vélez
 Transmisores dispares pueden inducir respuesta
fisiológicas similares

glucagón

AMPc

Degradación de
glicógeno

AMPc

GLUCOSA

adrenalina Célula hepática

Patricio Vélez
Lipidos como segundos mensajeros
Segundos mensajeros derivados del fosfatidilinositol (PI). (a) Síntesis de DAG e IP3. Cada PI quinasa unida a
membrana coloca un fosfato sobre un grupo hidroxilo específico del anillo inositol, produciendo fosfoinositoles PIP y
PIP2. De la descomposición del PIP2 por la enzima fosfolipasa C (PLC) se produce DAG e IP3. (b) Formación de
otros fosfoinositoles (amarillo) e inositol fosfatos (azul). Estas reacciones son catalizadas por varias proteínas
quinasas y la PLC.
Producción de Acido araquidónico por fosfolipasa A2 (PLA2)
Histamina

R PLA2

G
G  PI

4-Bromophenancyl bromide
Nordihydroguaiaretic acid Indomethacin, aspirina y
Acido Araquidónico otras drogas anti-
inflamatorias

12-Lipoxigenasa 5-Lipoxigenasa Cicloxigenasa

Varios metabolitos Leucotrienos Protaglandinas

activos
Tromboxanos
Regulación del Ca2+ intracelular
Señalización por Ca2+
Elevación de los niveles citoplasmáticos de Ca2+ via IP3. La unión de una hormona a su
receptor produce activación de proteína G (Gq), la cual activa a la fosfolipasa C por un
mecanismo análogo a la activación de las adenilato ciclasa. La fosfolipasa C activada
descompone el PIP2 y produce IP3 y DAG. El IP3 difunde a través del citosol e interactúa con
un canal de Ca2+ sensible a IP3 que se encuentra en la membrana del retículo
endoplasmático, causando la liberación de los iones Ca2+ almacenados en el interior del
retículo. El Ca2+ intracelular induce variadas respuestas celulares, ej: un aumento en el Ca2+
citoplasmático produce el reclutamiento de la proteína quinasa C (PKC) desde el citosol a la
membrana plasmática donde es activada por DAG. Luego la PKC activada fosforila (incorpora
grupos fosfatos) en varias proteínas (enzimas, receptores, canales, proteínas del citoesqueleto,
etc) produciendo una alteración la actividad específica.
Liberación de Ca2+ mediado por receptor de rayanodina
(RYRs) en músculo esquelético. El receptor de
dihidropiridina sensible a voltaje en la membrana
plasmética contacta al receptor de rayanodina localizado
en la membrana del retículo sarcoplásmico. En respuesta a
cambios en el voltaje, el receptor de dihidropiridinas sufre
un cambio conformacional; lo que a su vez produce un
cambio conformacional en el receptor RYRs asociado, lo
que abre un canal de calcio de manera que los iones Ca2+
son liberados al citosol.
Proteínas quinasas activadas por segundos mensajeros

Mecanismo de activación de proteínas quinasas.

Las proteínas quinasas estan formadas por varios
dominios especializados que cumplen funciones
específicas. Cada quinasa contiene dominios
catalíticos homólogos que transfieren los grupos
fosfatos a las proteínas sustratos. Estos dominios
catalíticos están inactivos por la presencia de
dominios autoinhibitorios que ocupan el sitio
catalítico. La unión de un segundo mensajero, tales
como, cAMP, DAG, o Ca2+, al dominio regulador
apropiado de la PK remueve al dominio inhibitorio
permitiendo la función del dominio catalítico
activado. En algunas quinasas, tales como, PKC y
CaMKII, el dominio autoinhibitorio y catalítico son
parte de la misma molécula. Para otras quinasas,
como la PKA, el domino inhibitorio es una
subunidad proteica separada.
Papel de segundos mensajeros en la regulación de proteínas por
fosforilación

Regulación de proteínas por fosforilación (modificación post-traduccional). Las proteínas

quinasas (PK) son enzimas que transfieren grupos fosfatos (Pi) desde el ATP a los
aminoácidos serina, treonina o tirosina de las proteínas sustratos (en el contexto de secuencias
aminoacídicas específicas). Esta fosforilación es reversible y produce la alteración o
modificación de la función de proteínas celulares. La remoción de grupos fosfatos es catalizado
por proteínas fosfatasas. Tanto proteínas quinasas como fosfatasas son reguladas por una
variedad de segundos mensajeros intracelulares.
The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1998
The Nobel Assembly at the Karolinska Institute in Stockholm,
Sweden, has awarded the Nobel Prize in Physiology or Medicine for
1998 to Robert F Furchgott, Louis J Ignarro and Ferid Murad for
their discoveries concerning "the nitric oxide as a signalling molecule
in the cardiovascular system".

Robert F Furchgott, born Louis J Ignarro, born 1941 Ferid Murad, born 1936
1916 Dept. of Pharmacology, Dept. of Molecular and Dept. of Integrative Biology
SUNY Health Science Center Medical Pharmacology Pharmacology and Physiology
New York UCLA School of Medicine University of Texas Medical
Los Angeles
School, Houston
 A New Principle
• Nitric Oxide, NO, is a short-lived, endogenously produced gas that acts as a
signalling molecule in the body. Signal transmission by a gas, produced by
one cell, which penetrates membranes and regulates the function of other
cells is an entirely new principle for signalling in the human organism.
 Furchgott's sandwich

• Robert F Furchgott showed that acetylcholine-induced relaxation of blood

vessels was dependent on the endothelium. His "sandwich" experiment set the
stage for future scientific development. He used two different pieces of the
aorta; one had the endothelial layer intact, in the other it had been removed.
 Ignarro's spectral analysis
• Louis Ignarro reported that EDRF relaxed blood vessels. He also identified EDRF as a
molecule by using spectral analysis of hemoglobin. When hemoglobin was exposed to
EDRF, maximum absorbance moved to a new wave-length; and exposed to NO,
exactly the same shift in absorbance occurred! EDRF was identical with NO. A new
principle for signalling between human cells was discovered.
Spectrophotometry

Hemoglobin (yellow) exposed to

endothelial cells that were stimulated
to produce EDRF (green)

Hemoglobin (yellow) directly

exposed to NO (green)

The shift of absorption

curves is identical, hence
EDRF is NO
 Murad's enzyme activation
• Ferid Murad knew that nitroglycerine caused relaxation of smooth muscle cells. The enzyme,
guanylyl cyclase, was activated and increased cyclic GMP, causing relaxation of the muscle.
Did nitroglycerin act via release of nitric oxide, NO? He bubbled NO-gas through tissue
containing the enzyme; cyclic GMP increased! A new mode of drug action had been

discovered!

NO induces synthesis of cGMP by

stimulation of GC leading to
relaxation of myosin (muscle protein)

Acetylcholine stimulates the endothelial

cells to produce a factor, NO, which
penetrates into and activates the
muscle cells causing relaxation.
GMPc y Oxido Nitrico
 Papel del Oxido nítrico en la vasodilatación

Papel del óxido nítrico (NO) en la relajación del músculo liso vascular. La acetilcolina liberda por un
terminal nervioso en la pared del vaso sanguíneo activa la sitetasa de NO en las células endoteliales
causando pa producción de NO. El NO difunde fuera de las células endoteliales hacia las células
musculares lisas contiguas donde se une a la enzima guanilato ciclasa activándola y produciendo el
segundo mensajero guanosil monofosfato ciclico (cGMP). El cGMP gatilla una respuesta que causa la
relajación del músculo liso, aumentando el flujo sanguíneo a través del vaso sanguíneo.
Lípidos, Ca+2 y GMPc y sus interacciones
Redes complejas de señales
 Depolarización Liberación de Potencial post-
sináptica acetil-colina sináptico

Potencial de
acción

Liberación de
Ca2+

Contracción

De la sinápsis a la contracción muscular

Calcio libera calcio
Algunos primeros mensajeros
Neuronal second messengers. (A) Mechanisms
responsible for producing and removing second
messengers, as well as the downstream targets of
these messengers. (B) Proteins involved in delivering
calcium to the cytoplasm and in removing calcium
from the cytoplasm. (C) Mechanisms of production
and degradation of cyclic nucleotides. (D) Pathways
involved in production and removal of diacylglycerol
(DAG) and IP3. (E) Nitric oxide synthesis and
degradation.