1
Apoptosis: Muerte celular programada.
Gina Bahsas El Hagali.
Instituto de Inmunología Clínica – Universidad de Los Andes.
En el cuerpo humano constantemente se están produciendo células; ya sea
como parte del remodelado y reparación de tejidos, o para el mantenimiento
del pool de células sanguíneas. Para evitar la acumulación de células
senescentes, dañadas o aquellas células que ya no son necesarias para el
organismo, las mismas llevan a cabo un fenómeno denominado Apoptosis, que
se incluye dentro de los mecanismos que mantienen la homeostasis del cuerpo
humano.
La apoptosis se describe como un proceso de muerte celular programada, que
está controlado genéticamente. Es un evento fisiológico que no acarrea la
producción de un proceso inflamatorio. Para llevarlo a cabo, las células
requieren de energía proveniente del ATP (1). Cuando en la célula ocurre este
fenómeno, se inducen en ella cambios morfológicos como; la disminución del
tamaño celular, la condensación de la cromatina y fragmentación del núcleo y
la formación de invaginaciones y protrusiones en la membrana plasmática, en
forma de ampollas denominadas cuerpos apoptóticos (2). Otro rasgo típico del
fenotipo apoptótico incluye la translocación de la fosfatidilserina, que
normalmente se encuentra en la cara interna de la célula, pero durante la
apoptosis pasa a la superficie celular, lo que trae como consecuencia el
reconocimiento de la célula apoptótica por parte de los fagocitos, los cuales se
unen a ella y la engullen para evitar la liberación del contenido celular y que se
produzca una reacción inflamatoria (3).
En el proceso de apoptosis juega un rol muy importante la activación de un
grupo de cisteín proteasas denominadas caspasas (cysteinyl aspartate-specific
proteases) las cuales van a desencadenar dos posibles vías de señalización,
que eventualmente convergen y ocasionan la desaparición de la célula (4). Las
caspasas han sido clasificadas en base a sus funciones en los siguientes
grupos: caspasas iniciadoras (caspasa-2, 8, 9 y 10); efectoras (caspasa-3, 6 y
7); y caspasas inflamatorias (caspasa-1, 4 y 5) (5, 6). Además de las caspasas,
Apoptosis: Muerte celular programada 2
en la apoptosis participan también las calpaínas, que son cisteín proteasas que
requieren de Ca2+ para llevar a cabo la degradación de proteínas de membrana
y del citoesqueleto (7).
Posterior a la activación de las caspasas, se van a desencadenar dos posibles
vías de señalización que son:
Vía de señalización Extrínseca:
Está mediada por “receptores de muerte”, los cuales se ubican en la superficie
de la membrana celular. Estos receptores presentan un dominio extracelular
rico en cisteína y un dominio citoplasmático de muerte, que es el responsable
de generar interacciones proteína-proteína, que tendrán como consecuencia la
activación de diversas cascadas de señalización, que inducirán a la muerte
celular (1). Esta vía puede ser iniciada de diversas maneras; por la unión de los
miembros de la familia del factor de necrosis tumoral (TNF) a sus ligandos que
son los receptores de TNF o TNFR (8), por otra parte el estímulo iniciador
también puede ser la unión de TRAIL (TNF-Related Apoptosis Inducing Ligand) a
los receptores DR4 (Death Receptor 4) y DR5, y por último a través de la unión
de FasL (Fatty acid synthetase Ligand) al receptor Fas (9, 10). Luego de que
estas interacciones se lleven a cabo, se reclutan moléculas adaptadoras como
TRADD y FADD y se da lugar a la formación de un complejo multiproteíco,
conocido como complejo de señalización inductor de muerte o DISC (11). La
formación de este complejo activa a las caspasas 8 y 10 y finalmente ejercen
su acción las caspasas 3, 6 y 7, con lo que eventualmente se producirán
cambios morfológicos en la célula, característicos del fenotipo apoptótico ya
descrito (10, 12).
Existe una proteína denominada; celular caspase-8 (FLICE)-like inhibitory
protein o cFLIP que también es reclutada al DISC, ésta es una pseudocaspasa
que en concentraciones elevadas es capaz de bloquear la actividad de la
caspasa 8 (13), con lo que se ve limitado el número de caspasas iniciadoras
que se unen al DISC y en consecuencia, la cantidad de proteínas clivadas y
activadas es menor (10).
Apoptosis: Muerte celular programada 3
Es relevante mencionar que la unión de Fas a su ligando tiene una
participación importante en la apoptosis a nivel del sistema inmunológico, en
particular cuando ocurre la muerte de células tumorales o infectadas, mediada
por linfocitos T citotóxicos o por células Natural Killer, o también cuando ocurre
la supresión de células T maduras al final de una respuesta inmune (14).
Vía de señalización Intrínseca:
Esta vía se encuentra regulada por un juego de fuerzas opuestas entre
miembros de la familia BCL2. El estímulo iniciador para esta vía lo
proporcionan sensores intracelulares que responden a señales de que ha
ocurrido daño celular. Entre estas señales destacan; la privación de factores de
crecimiento, la acumulación intracelular de especies reactivas del oxígeno,
daño al ADN, estrés en el retículo endoplasmático, entre otras (8). Una vez que
se activa esta vía, ocurren cambios a nivel de la estructura de la mitocondria,
que incrementan la permeabilidad de la misma, lo cual promueve la liberación
de proteínas pro-apoptóticas desde el espacio intermembranal hacia el citosol.
Dentro de los componentes pro-apoptóticos que se liberan destacan; el
citocromo c, SMAC/Diablo y la serín-proteasa HtrA2/Omi (15, 16). El citocromo c
es responsable de la activación de la proteína Apaf-1 (Apoptotic protease
activating factor-1) así como también de la activación de las caspasas 8 y 9, las
cuales una vez activadas movilizan a las caspasas 3, 6 y 7, que van a favorecer
la demolición de la célula y la activación de ADNasas (1, 17).
Por otro lado, las proteínas SMAC/Diablo y HtrA2/Omi inhiben a los IAP
(inhibidores de proteínas apoptóticas). También son liberados hacia el citosol;
factores inductores de apoptosis (AIF), endonucleasa G y CAD. Su función es la
degradación del ADN en fragmentos altamente específicos (7, 18).
Existen diversos factores que determinan cual es la vía de muerte celular que
será activada, entre los que se incluyen; el tipo de estímulo iniciador recibido,
la fase del ciclo celular en la que se encuentra la célula, y en el caso de las
células inmunes, el estado de activación celular (1).
Familia BCL2:
Apoptosis: Muerte celular programada 4
Como ya fue mencionado, la regulación de la vía intrínseca de la apoptosis está
a cargo del balance entre miembros de esta familia, con funciones pro-
apoptóticas y anti-apoptóticas. Los miembros de esta familia se caracterizan
por poseer dominios de homología a BCL2. Estos dominios son los que van a
participar en las interacciones proteína-proteína (19). Dentro de los miembros
anti-apoptóticos se encuentran; los que presentan 4 dominios de homología a
BCL2 como; BCL2, BCL-XL, BCLW, MCL1, y A1. Sus funciones son mediar
mecanismos que favorezcan a la supervivencia celular (20). Por otro lado,
están BAX y BAK que tienen tres dominios de homología con BCL2, estas
proteínas son pro-apoptóticas y juegan un rol fundamental en el proceso de
incrementar la permeabilidad mitocondrial y así favorecer la liberación del
citocromo c (21).
Existen otras proteínas que poseen únicamente el dominio de homología 3 de
BCL2 (BH3), denominadas proteínas BH3, entre las que se puede mencionar a;
BIM, PUMA y BID. Su función es unirse a los miembros anti-apoptóticos e
inhibir su acción, permitiendo entonces la liberación de las proteínas BAX y
BAK (22, 23).
Todas estas proteínas reguladoras de los cambios en la membrana
mitocondrial, a su vez están controladas por la proteína supresora de tumores
p53. Dicha proteína se activa en respuesta a daño a nivel del ADN. Si la célula
no es capaz de reparar el daño, p53 induce la muerte celular por un
mecanismo que aún no está del todo dilucidado (24). Es por esto que p53 ha
sido descrito como guardián del genoma, pues evita el desarrollo y
proliferación de células con material genético defectuoso (25).
Diferencias entre apoptosis y otros procesos de muerte celular:
La apoptosis no es la única forma de muerte celular, también se encuentran los
procesos de Necrosis y Autofagia, no obstante; estos eventos contrastan en la
forma en la que se llevan a cabo y en las características morfológicas que
adquieren las células que están atravesando por estos fenómenos.
La Necrosis es un proceso de degeneración celular que se lleva a cabo sin
requerimiento energético. Se caracteriza porque hay pérdida de la integridad
Apoptosis: Muerte celular programada 5
de la membrana, lo que permite el ingreso de líquido extracelular, trayendo
como consecuencia que la célula aumente de tamaño, característica que la
diferencia de la apoptosis, pues en esta última, la integridad de la membrana
plasmática se mantiene hasta que el proceso finaliza (26, 27). Generalmente la
necrosis es consecuencia de la exposición a toxinas u otro tipo de daño celular.
Una vez que inicia este fenómeno, induce la muerte de células vecinas
también, y al mismo tiempo favorece a que se produzca una reacción
inflamatoria, mientras que, como ya fue mencionado, la apoptosis es un evento
fisiológico (28, 29).
Con respecto a la Autofagia se ha descrito que; este proceso permite el
reciclaje celular, a través de la formación de auto-fagosomas, que comprenden
vesículas contentivas de organelas y citoplasma que se fusionan con lisosomas
y son degradadas (30, 31). Se diferencia de la apoptosis, entre otras cosas,
porque es considerado un proceso cuya función predominante es la
supervivencia de la célula, no obstante; también se lleva a cabo como parte del
proceso de presentación antigénica y como una forma de muerte celular
programada, morfológicamente caracterizada por una importante
vacuolización del citoplasma sin condensación de la cromatina (3).
Referencias Bibliográficas: 6. Riedl SJ, Salvesen GS. The apoptosome:
signalling platform of cell death. Nat
1. Hotchkiss RS, Strasser A, McDunn JE, Rev Mol Cell Biol. 2007; 8: 405–413.
Swanson PE. Mechanisms of Disease. 7. Elmore S. Apoptosis: A review of
Cell Death. N Engl J Med. 2009; 361(16): programmed cell death. Toxicol Pathol.
1570-1583. 2007; 35 (4): 495-516.
2. Krysko DV, Vandenabeele P (eds.), 8. Galluzi L, Kepp O, Trojel-Hansel C,
Phagocytosis of Dying Cells. Kroemer G. Mitochondrial control of
Science+Business Media B.V. 2009. cellular life, stress, and death. Circ Res.
DOI: 10.1007/978-1-4020-9292-3_2. 2012; 111: 1198-1207.
3. Chaabane W, User SD, El-Gazzah M, 9. Strasser A, Jost PJ, Nagata S. The many
Jaksik R, Sajjadi E, Rzeszowska-Wolny J, roles of FAS receptor signaling in the
et al. Autophagy, Apoptosis, Mitoptosis immune system. Immunity. 2009; 30:
and Necrosis: Interdependence between 180–192.
those pathways and effects on cancer. 10. Gong J, Kumar SA, Graham G, Kumar A.
Arch Immunol Ther Exp. 2013; 61: 43- FLIP: Molecular switch between
58. apoptosis and necroptosis. Molecular
4. Lamkanfi M, Festjens N, Declercq W et Carcinogenesis. 2013; DOI
al. Caspases in cell survival, 10.1002/mc.22027.
proliferation and differentiation. Cell 11. Bouillet P, O’Reilly LA. CD95, BIM and T
Death Differ. 2007; 14: 44–55. cell homeostasis. Nature Reviews
5. Rai NK, Tripathi K, Sharma D, et al. Immunology. 2009; 9; 514-519.
Apoptosis: a basic physiologic process 12. Sheridan C, Martin SJ. Commitment in
in wound healing. Int J Low Extrem apoptosis: slightly dead but mostly
Wounds. 2005; 4:138–144. alive. Trends Cell Biol. 2008; 18: 353-
357.
Apoptosis: Muerte celular programada 6
13. Siegel RM. Caspases at the crossroads 22. Strasser A. The role of BH3-only
of immune-cell life and death. Nature proteins in the immune system. Nat Rev
Reviews Immunology. 2006; 6: 308-317. Immunol. 2005; 5: 189-200.
14. Yolcu ES, Ash S, Kaminitz A, Sagiv Y, 23. Kaufmann T, Tai L, Ekert PG, et al. The
Askenasy N, Yarkoni S. Apoptosis as a BH3-only protein bid is dispensable for
mechanism of T-regulatory cell DNA damage- and replicative stress
homeostasis and suppression. induced apoptosis or cell-cycle arrest.
Immunology and Cell Biology. 2008; 86: Cell. 2007; 129: 423-33.
650-658. 24. Riley T, Sontag E, Chen P, et al.
15. Vande Walle L, Lamkanfi M, Transcriptional control of human p53-
Vandenabeele P. The mitochondrial regulated genes. Nat Rev Mol Cell Biol.
serine protease HtrA2/Omi: an 2008; 9:402–412.
overview. Cell Death Differ. 2008; 25. Vazquez A, Bond EE, Levine AJ, Bond
15:453–460. GL. The genetics of the p53 pathway,
16. Chipuk JE, Green DR. How do BCL-2 apoptosis and cancer therapy. Nat Rev
proteins induce mitochondrial outer Drug Discov. 2008; 7: 979-87.
membrane permeabilization? Trends 26. Nagata S, Hanayama R, Kawane K.
Cell Biol. 2008; 18: 157 -64. Autoimmunity and the clearance of
17. Strasser A, Cory S, Adams JM. dead cells. Cell. 2010; 140: 619–630.
Deciphering the rules of programmed 27. Galluzzi L, Maiuri MC, Vitale I, et al. Cell
cell death to improve therapy of cancer death modalities: classification and
and other diseases. The EMBO Journal. pathophysiological implications. Cell
2011; 30: 3667-3683. Death Differ. 2007; 14: 1237-1243.
18. Huerta S, Goulet E, Huerta-Yépez S, 28. Zong WX, Thompson CB. Necrotic death
Livingston E. Screening and detection of as a cell fate. Genes. Dev 2006; 20: 1-
apoptosis. Journal of Surgical Research. 15
2007; 139: 143-156. 29. Golstein P, Kroemer G. Cell death by
19. Adams JM, Cory S. Bcl-2-regulated necrosis: towards a molecular
apoptosis: mechanism and therapeutic definition. Trends Biochem Sci. 2007;
potential. Curr Opin Immunol. 2007; 19: 32: 37-43.
488-96. 30. Levine B, Deretic V. Unveiling the roles
20. Youle RJ, Strasser A. The BCL-2 protein of autophagy in innate and adaptive
family: opposing activities that mediate immunity. Nat Rev Immunol. 2007; 7:
cell death. Nat Rev Mol Cell Biol. 2008; 767-77.
9: 47-59. 31. Harris J. Autophagy and cytokines.
21. Goldstein JC, Munoz-Pinedo C, Ricci JE, Cytokine. 2011; 56: 140-144.
et al. Cytochrome c is released in a
single step during apoptosis. Cell Death
Differ. 2005; 12: 453-62.
