4. REACTIVOS 6. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES. 3.

S e ha añadido azida sódica en concentraciones de menos de

0,1 g/dl a ciertos componentes como agente antibacteriano. Para evitar
CONTENIDO DEL KIT la acumulación de azidas metálicas explosivas en las cañerías de plomo y
Reactivos sólo para uso en diagnósticos in vitro.
Identificación de los grupos 60 ensayos (R62025) cobre, los reactivos desechados sólo deberán verterse en el alcantarillado
Sólo para uso profesional. público previa dilución y eliminación con grandes cantidades de agua.
de estreptococos
Si desea más información sobre los componentes potencialmente 4. Deben tomarse las precauciones de seguridad adecuadas durante
1. Látex para identificación de 1 frasco cuentagotas peligrosos, consulte la hoja de datos de seguridad del fabricante y el
Key Code TSMX7773C estreptococos del grupo A (R62030) (tapón rojo) la manipulación y el procesamiento de todas las muestras clínicas
etiquetado del producto. y controles, ya que puede haber presentes microorganismos vivos
[Link]/ifu 2. Látex para identificación de 1 frasco cuentagotas
estreptococos del grupo B (R62031) (tapón rosa) PRECAUCIONES DE SEGURIDAD patógenos. Los antígenos de control consisten en estreptococos
3. Látex para identificación de 1 frasco cuentagotas 1. La mezcla de los reactivos 1 y 2 tiene un pH ácido y debe considerarse inactivados. La inactivación se ha comprobado mediante cultivo; no
Europe + 800 135 79 135 US 1 855 236 0910 estreptococos del grupo C (R62032) (tapón naranja) potencialmente peligrosa hasta que se neutralice con el reactivo 3. obstante, ningún ensayo conocido puede garantizar una inactivación
CA 1 855 805 8539 ROW +31 20 794 7071 4. Látex para identificación de 1 frasco cuentagotas Si bien es poco probable que estos reactivos sean nocivos para la total.
estreptococos del grupo F (R62034) (tapón azul) piel normal intacta, deben tomarse precauciones especiales para 5. Los látex y los antígenos de control contienen ProClin 300® al 0,05%.
evitar el contacto con los ojos y las mucosas sensibles, y los cortes y Si cualquiera de los reactivos entra en contacto con la piel o los ojos,

Identificación de los
5. Látex para identificación de 1 frasco cuentagotas
estreptococos del grupo G (R62035) (tapón morado) abrasiones. En caso de contacto con la piel, lave con agua y jabón. En lávese inmediatamente con agua abundante.
6. Control positivo (R24042) 1 frasco cuentagotas caso de contacto con los ojos, aclare con abundante agua. Precauciones de manipulación
(tapón amarillo) 2. El reactivo de extracción 2 contiene ácido acético, clasificado como Este producto no se debe usar si (a) hay pruebas de contaminación, (b)

grupos de estreptococos 7. Reactivo 1 (R62050)

8. Reactivo 2 (R62055)
1 frasco cuentagotas
(tapón rojo)
1 frasco cuentagotas
corrosivo (C) por las directivas pertinentes de la Comunidad Económica
Europea (CEE). A continuación, encontrará las advertencias pertinentes
sobre peligros (H) y precauciones (P).
ha pasado la fecha de caducidad o (c) pueden observarse otros signos de
deterioro.
(tapón azul) 7. OBTENCIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS
9. Reactivo 3 (R62060) 1 frasco cuentagotas
R62025.......................................................60 ES
10. Agitadores
(tapón verde)
1 bolsa
H317 Puede provocar una reacción
Los especímenes deben ser recogidos y manipulados conforme al
procedimiento normal del laboratorio cumpliendo al mismo tiempo con los
protocolos locales relativos a la formación, seguridad y salud.
1. UTILIDAD
11. Portaobjetos desechables (R62070) 1 paquete ATTENCIÓN alérgica en la piel.
12. Instrucciones de uso 1 P280 Llevar guantes/prendas/gafas/más- 8. PROCEDIMIENTO
El kit PathoDx® para identificación de grupos de estreptococos de cara de protección.
Remel es un ensayo de aglutinación de látex diseñado para identificar 5. DESCRIPCIÓN, PREPARACIÓN PARA EL USO Y ALMACENAMIENTO MATERIALES SUMINISTRADOS
estreptococos beta-hemolíticos de los grupos A, B, C, F y G de Lancefield P302 + P352 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: El kit para identificación de grupos de estreptococos (62025) contiene
Si desea más información, consulte el apartado Advertencias
a partir de placas de cultivo primario. El kit también puede utilizarse con Lavar con agua y jabón abundantes. materiales suficientes para realizar 60 ensayos; consulte el apartado
y precauciones en este folleto.
estreptococos beta-hemolíticos crecidos en caldo en cultivo puro. Los P333 + P313 En caso de irritación o erupción Contenido del kit en este folleto.
materiales suministrados están diseñados para diagnóstico in vitro con cutánea: Consultar a un médico.
objeto de facilitar el agrupamiento rápido de los estreptococos beta- MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS
hemolíticos. Si el kit está cerrado, consérvelo a 2-8°C. Todos los componentes del kit son 1. Dispositivo de esterilización en asa
más estables a 2-8°C que a temperaturas más elevadas. Si cuando se abre H302 Nocivo en caso de ingestión.
2. Asa de inoculación, torunda, recipientes para las muestras
2. RESUMEN Y EXPLICACIÓN DEL ENSAYO el kit se observa cristalización del reactivo de extracción 3, se debe dejar H319 Provoca irritación ocular grave.
Los carbohidratos de los estreptococos de los grupos A, B, C, F, y G son que alcance la temperatura ambiente antes de usarlo. ATTENCIÓN 3. Incubadoras, sistemas ambientales alternativos
4. Medios complementarios
antígenos complejos con un oligosacárido de ramnosa y cadenas laterales P264 Lavarse concienzudamente la cara,
Solo se deben almacenar a 2 – 8 °C los reactivos contra el látex y los antígenos las manos y las áreas de la piel 5. Microorganismos para control de calidad
diferentes, que consisten principalmente en glucosamina acetilada o no control. Los demás componentes se deben almacenar a 2 – 28 °C. 6. Portaobjetos para microscopio
acetilada. expuestas tras su manipulación
Los componentes incluidos en el kit pueden intercambiarse con 7. Agua destilada
En el procedimiento PathoDx® se utiliza un método de aglutinación de componentes del mismo número de referencia. Los componentes se P301 + P312 EN CASO DE INGESTIÓN: Llamar 8. Tubos de ensayo de 12 × 75 mm
látex junto con un procedimiento de extracción con ácido nitroso2,10. venden por separado. a un CENTRO DE INFORMACIÓN 9. Pipetas de punta desechable de 50 µl (62080 y 62081), o pipetas capilares
La IgG unida al látex es muy específica para el antígeno de un grupo TOXICOLÓGICA o a un médico si se o Pasteur
estreptocócico determinado. Este método ofrece importantes ventajas Látex para identificación de grupos encuentra mal. 10. Lámpara incandescente (recomendada)
respecto de otros procedimientos de agrupamiento estreptocócico por Cinco frascos cuentagotas, uno específico para cada

su rapidez, simplicidad y conveniencia. uno de los grupos A, B, C, F y G; Cada uno contiene P305 + P351 EN CASO DE CONTACTO CON LOS PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO
3,0 ml de una suspensión de partículas de látex + P338 OJOS: Aclarar cuidadosamente con Si los reactivos contra el látex y los antígenos control se almacenan a 2 –
3. PRINCIPIOS BIOLÓGICOS DEL PROCEDIMIENTO sintético cubierto por anticuerpo de conejo IgG agua durante varios minutos. Quitar 8 °C no es necesario esperar a que estos reactivos lleguen a la temperatura
En el procedimiento PathoDx®, los anticuerpos específicos con los que de conejo. Conservantes: azida sódica al 0,098% y las lentes de contacto, si lleva y ambiente. Si cuando se abre el kit se observa cristalización del reactivo de
están recubiertas las partículas de látex reaccionan con los antígenos ProClin 300® al 0,05%. Conservar a 2-8°C; estable resulta fácil. Seguir aclarando. extracción 3, se debe dejar que alcance la temperatura ambiente antes
del grupo estreptocócico extraídos de la pared celular bacteriana, y hasta la fecha de caducidad impresa en la etiqueta. de usarlo. Utilice pipetas Pasteur, capilares o de punta desechable para
los aglutina. Ante la presencia de antígeno del grupo estreptocócico Inmediatamente antes de su uso, resuspenda las H314 Provoca quemaduras graves en la transferir el extracto.
correspondiente, las partículas sensibilizadas forman un patrón de perlas invirtiendo la ampolla o bien agitándola piel y lesiones oculares graves. Colonias en medios sólidos:
aglutinación granular claro y fácil de leer que contrasta con el aspecto
blanquecino uniforme de un ensayo negativo. El procedimiento de
suavemente con un agitador de tubos tipo Vortex.
PELIGRO P280 Llevar guantes/prendas/gafas/ Paso 1 Etiquete un tubo de ensayo de 12 × 75 mm para cada muestra
extracción con ácido nitroso ofrece una ventaja respecto del método de
extracción enzimática ya que el primero, a diferencia del segundo, no
CONTROL +
Control positivo
Un frasco cuentagotas con 3 ml de antígeno de
máscara de protección. y ambos controles (antígenos de control de estreptococos
ABC y FG).
control polivalente que contiene antígenos de P301 + P330 EN CASO DE INGESTIÓN: Enjuagarse Paso 2 Añada 2 gotas de reactivo 1 a cada muestra y tubo de control
libera antígenos de reacción cruzada de Streptococcus pneumoniae ni de
estreptococos del grupo D9,12,16. estreptococo extraídos de cepas representativas + P331 la boca. NO provocar el vómito. apretando el frasco cuentagotas suavemente en posición vertical.
de los grupos de Lancefield A, B, C, D, F y G. La P303 + P361 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL Paso 3 Añada 2 gotas de reactivo 2 a cada muestra y tubo de control.
El ensayo está diseñado para ser utilizado con colonias estreptocócicas
solución contiene un 0,098 % de azida de sodio + P353 (o el pelo): Quitarse inmediatamente
beta-hemolíticas cultivadas en agar sangre de oveja o con aislados Paso 4 Elija de 1 a 4 colonias beta-hemolíticas aisladas con una varilla
como conservante. Conservar a 2-8°C; estable hasta
estreptocócicos puros en cultivos en caldo. El antígeno específico del las prendas contaminadas. Aclararse aplicadora desechable o con un asa de inoculación (pueden
la fecha de caducidad impresa en la etiqueta.
grupo se extrae utilizando el procedimiento de extracción con ácido la piel con agua o ducharse. elegirse más de cuatro si las colonias son diminutas o tienen
nitroso a temperatura ambiente. A continuación, se neutraliza la mezcla Reactivo 1 menos de 18 horas. En caso de que sea necesario, “barra” una
de la reacción. El antígeno extraído es aglutinado por partículas de látex P305 + P351 EN CASO DE CONTACTO CON LOS cantidad abundante de colonias pasando una varilla aplicadora
Un frasco cuentagotas con 7 ml de reactivo de + P338 OJOS: Aclarar cuidadosamente con
recubiertas con IgG durante una rotación de 1 minuto del portaobjetos extracción. Guárdelo con la tapa bien cerrada; por el área de mayor crecimiento de la placa de cultivo). No utilice
de ensayo. agua durante varios minutos. Quitar una torunda, ya que absorberá demasiado volumen de líquido.
Guardar bien cerrado a 2 – 28 °C hasta la fecha de
Los reactivos están diseñados para producir una aglutinación positiva las lentes de contacto, si lleva y Mezcle los reactivos de extracción con una varilla o un asa.
caducidad impresa en la etiqueta.
(2+ o superior) con una o dos colonias de 18-24 horas con la mayoría de resulta fácil. Seguir aclarando. Retire el inóculo frotando la varilla o el asa contra el fondo o el
los aislados estreptocócicos beta-hemolíticos. Las colonias diminutas Reactivo 2 lateral del tubo. Deseche la varilla o el asa de forma adecuada.
del grupo F y las variantes de colonias pequeñas de otros estreptococos Un frasco cuentagotas con 7 ml de reactivo de H319 Provoca irritación ocular grave. Paso 5 No es necesario incubar los tubos de ensayo, aunque pueden
pueden requerir 10 colonias o más. extracción. Guárdelo con la tapa bien cerrada; P305 + P351 EN CASO DE CONTACTO CON LOS dejarse hasta 60 minutos a temperatura ambiente (15-28°C)
Los ensayos de agrupamiento estreptocócico rápido se correlacionan Guardar bien cerrado a 2 – 28 °C hasta la fecha de ATTENCIÓN + P338 OJOS: Aclarar cuidadosamente con siempre y cuando se tomen las precauciones necesarias para
mejor con métodos de referencia cuando sólo se analizan estreptococos caducidad impresa en la etiqueta. agua durante varios minutos. Quitar evitar que se sequen. No se han evaluado períodos de incubación
beta-hemolíticos en agar sangre de oveja1,3,5,19. Reactivo 3 las lentes de contacto, si lleva y más largos.
Un frasco cuentagotas que contiene 14 ml de resulta fácil. Seguir aclarando. Paso 6 Añada 4 gotas de reactivo 3 a cada muestra y tubo de control
reactivo de neutralización. Guárdelo con la tapa sujetando el frasco en posición vertical y apretándolo suavemente.
bien cerrada; Guardar bien cerrado a 2 – 28 °C hasta Mezcle los reactivos golpeando el tubo ligeramente con un dedo.
la fecha de caducidad impresa en la etiqueta. Si no se analizan de inmediato, tape bien el tubo y guárdelo a
una temperatura de entre 2-8°C. El ensayo debe realizarse en las
 24 horas siguientes. 9. CONTROL DE CALIDAD 11. LIMITACIONES 13. ENVASE
Paso 7 Designe una fila de óvalos de ensayo en el portaobjetos PathoDx® Deberá realizarse una prueba de control de calidad por cada envío y cada 1. Pueden producirse resultados falso-negativos si se utiliza un número
para cada muestra o control que se desea analizar. nuevo número de lote de kit que se reciba. Todos los laboratorios deberán insuficiente de colonias para la extracción. R62025.................................................................60
Paso 8 Añada 50 µl (o de 1 a 2 gotas de una pipeta Pasteur) de extracto cumplir la normativa vigente. 2. Pueden producirse resultados falso-positivos con algunas cepas
14. LÉGENDE DES SYMBOLES
a cada uno de los cinco óvalos de ensayo. Los siguientes procedimientos pueden utilizarse para comprobar el estreptocócicas cuando se extrae un inóculo demasiado denso. Los
Paso 9 Vuelva a suspender los reactivos de látex agitando el tubo rendimiento de los reactivos de látex: determinantes antigénicos de reacción cruzada menores que no forman
suavemente con un agitador de tubos tipo Vortex o invirtiéndolo.
Añada 1 gota de látex de estreptococo A al primer óvalo y 1 gota
a) Prueba de la reactividad de las suspensiones de látex (procedimiento de
control positivo). Para una prueba: Dispensar una gota de control positivo
parte del carbohidrato del grupo se vuelven reconocibles cuando se
extraen y se analizan grandes cantidades, lo cual lleva a una reacción
CONTROL + Control positivo
de látex de estreptococo B al segundo. Continúe de la misma en el patrón de prueba y mezclar con la suspensión de látex. Mezclar el falso-positiva.
manera, añadiendo látex de estreptococos C, F y G a los 3 óvalos contenido del círculo con un bastoncillo de mezcla nuevo. Después de 3. Streptococcus pneumoniae comparte determinantes antigénicos Contenido o presencia de látex de
restantes. agitar el patrón suavemente durante un minuto, debería producirse la comunes con los estreptococos beta-hemolíticos del grupo C12,13,17 y, caucho natural
Paso 10 Mezcle el látex y el extracto con un agitador, utilizando un aglutinación definitiva con todos los látex de prueba. en consecuencia, puede reaccionar de forma positiva con el látex de
extremo limpio para cada óvalo. b) Prueba de especificidad de la aglutinación (procedimiento de control agrupamiento de estreptococos del grupo C15. Los ensayos de extractos Nº del catálogo
Paso 11 Sostenga el portaobjetos bajo una fuente de iluminación negativo). Para cada aglutinación en látex que se evalúe, dispense de siete cepas de S. pneumoniae de referencia no mostraron ninguna
adecuada e inclínelo suavemente hacia atrás y hacia adelante. 1 gota del extracto preparado (según se describe en el procedimiento reacción con el reactivo de látex de agrupamiento de estreptococos del
grupo C PathoDx®. Es imposible predecir la posible reactividad cruzada Dispositivos médicos de diagnóstico in vitro
Por lo general, se produce una reacción de aglutinación positiva de prueba con medios sólidos) con una varilla de mezclado no inoculada
con uno de los reactivos de látex en un periodo de 15 a 60 o un asa de inoculación. Dispense 1 gota del látex de la prueba, mezcle de un amplio espectro de aislados clínicos de S. pneumoniae. Esta
segundos. Deje de mover el portaobjetos en cuanto se observe el contenido del círculo con una varilla de mezclado limpia. Después de posible reactividad cruzada se evitará mediante el ensayo de colonias Consultar las instrucciones de uso
una reacción positiva discernible y anote el resultado. No mueva sacudir suavemente la tarjeta durante 1 minuto, no se observará una sólo beta-hemolíticas semejantes a estreptococos.
el portaobjetos durante más de 60 segundos. aglutinación significativa en la aglutinación en látex con cualquiera de Grupo de estreptococos Kit A / Lancefield / Límite de temperatura
Procedimiento opcional de colonia directa los látex de prueba. Este procedimiento también debe usarse en casos PathoDx® PathoDx® (Temp. de almacenamiento)
de aglutinación muy débil con una muestra de prueba; dichas pruebas
Paso 1 Este procedimiento opcional puede considerarse cuando hay que arrojen resultados positivos deben repetirse en paralelo con el
suficientes colonias para satisfacer los requisitos de ensayo, es Groupo A 172 / 172 70 / 70
procedimiento de control negativo cuyo resultado sirve como control N Contenido suficiente para <n> ensayos
decir, 4 colonias por reactivo de agrupamiento o 20 colonias para para la comparación directa con la prueba realizada con el extracto
agrupamiento total. Groupo B 139 / 139 72 / 72
bacteriano. Código del lote (nº de lote)
Paso 2 Elija 4 colonias aisladas con una varilla aplicadora desechable c) El rendimiento de los reactivos también puede confirmarse realizando
o con un asa de inoculación (pueden ser necesarias más de Groupo C 62 / 62 71 / 71
el procedimiento de prueba completo en cultivos de caldos de grupos Fecha de caducidad
4 colonias si las colonias son diminutas o tienen menos de 18 conocidos.
horas). Groupo F 47 / 47 63 / 63
Paso 3 Frote las colonias con suavidad, pero concienzudamente, sobre 10. INTERPRETACIÓN Fabricado por
el portaobjetos PathoDx® en el centro del óvalo delineado. RESULTADO POSITIVO: El kit de agrupamiento PathoDx® está diseñado Groupo G 77 / 77 63 / 63
Paso 4 Repita los pasos 1 y 2 para cada reactivo de agrupamiento que para proporcionar una reacción de aglutinación de 2+ o mayor con
se desea utilizar. el extracto de una o dos colonias de un cultivo de 18-24 horas de No agrupable 15 / 15 17 / 17
Paso 5 Añada 1 gota de látex de estreptococo A al primer óvalo y 1 gota estreptococos de los grupos A, B, C y G de Lancefield (variedades
de látex de estreptococo B al segundo. Continúe de la misma de colonias grandes) en 60 segundos para la mayoría de los aislados Total 512 / 512 356 / 356 PathoDx® es una marca comercial registrada de Remel Inc.
manera, añadiendo látex de estreptococos C, F y G a los tres estreptocócicos. Las colonias diminutas del grupo F y las cepas de colonias ATCC® es una marca registrada de American Type Culture Collection.
óvalos restantes. pequeñas de otros grupos requieren muchas más colonias (barrido intenso)
ProClin 300® es una marca comercial de Rohm and Haas Corp.
para brindar una reacción de aglutinación positiva.
Paso 6 Mezcle bien el látex y las colonias del frotis con un agitador, IFU X7773C revisado de marzo de el año 2016
RESULTADO NEGATIVO: Un aspecto blanquecino uniforme sin aglutinación 12. BIBLIOGRAFÍA
utilizando un extremo limpio para cada óvalo. Remel Europe Ltd.
al cabo de 60 segundos. 1. Murray, P.R., E.J. Baron, J.H. Jorgensen, M.A. Pfaller, and R.H. Yolken. 2003. Manual of
Clipper Boulevard West, Crossways
Paso 7 Sostenga el portaobjetos bajo una fuente de iluminación Clinical Microbiology. 8th ed., Vol 1. ASM, Washington, D.C.
adecuada e inclínelo suavemente hacia atrás y hacia adelante. RESULTADOS INDETERMINADOS: Si se produce aglutinación con más de 2. El Kholy, A., et al. 1974. Appl. Microbiol. 28:836-839.
Dartford, Kent, DA2 6PT
un reactivo de látex, el problema puede resolverse de la siguiente manera: Reino Unido
Por lo general, se produce una reacción de aglutinación positiva 3. Evins, G.M., et al. 1983. J. Biol. Standard. 11:333-339.
con uno de los reactivos de látex en un periodo de 15 a 60 1. Aglutinación débil con reactivos de látex múltiples y aglutinación 4. Facklam, R.R. 1977. J. Clin. Microbiol. 5:184-201.
Para obtener asistencia técnica póngase en contacto con su distribuidor local.
segundos. Deje de mover el portaobjetos en cuanto se observe claramente más fuerte con un reactivo. Interpretación: Por lo general, 5. Facklam, R.R., et al. 1979. J. Clin. Microbiol. 10:641-646.
una reacción positiva discernible y anote el resultado. No mueva las reacciones débiles se deben a una reacción inespecífica (p. ej. 6. Facklam, R.R., et al. 1981. Proceed. Internat. Symposium on Streptococcus and
Staph. aureus) y la reacción más fuerte es específica para el grupo Streptococcus Disease. 37-38.
el portaobjetos durante más de 60 segundos.
7. Facklam, R.R. 1984. Eur. J. Clin. Microbiol. 3:91-93.
Ensayo opcional a partir de cultivo en caldo estreptocócico indicado. 8. Harvey, C.L. and M.B. McIllmurray. 1984. Eur. J. Clin. Microbiol. 3:526-530.
Paso 1 Inocule 0,5 ml de caldo soja tripticasa o de cualquier otro caldo 2. Aglutinación aproximadamente igual con más de un reactivo de 9. Hopfer, R.L., et al. 1985. J. Clin. Microbiol. 22:677-679.
adecuado (p. ej. caldo de infusión de cerebro y corazón) con dos o látex (rara vez con más de dos). Interpretación: Había dos grupos 10. Hryniewicz, W., et al. 1976. J. Clin. Microbiol. 4:28-31.
más colonias (según el tamaño) del aislado que se desea agrupar. estreptocócicos con morfología de colonia y beta-hemólisis similares 11. Jablon, J.M., et al. 1965. J. Bacteriol. 89:529-534.
en la placa de cultivo. Repita el ensayo utilizando extractos de colonia 12. Jennings, H.L., et al. 1980. Biochem. J. 19:4712-4719.
Paso 2 Incube el caldo a 35-37°C hasta que esté bien turbio (por lo 13. Krause, R.M. and M. McCarty. 1962. J. Exp. Med. 115:49-82.
puros después de volver a aislarlos.
general, durante 4 horas o más). 14. Lawrence, J., et al.1985. 1985. J. Clin. Microbiol. 22:772-777.
3. Como alternativa, hay antígenos de más de un grupo en la colonia 15. Lee, P. and B.L. Wetherall. 1987. J. Clin. Microbiol. 25:152-153.
Paso 3 Centrifugue el caldo a 1000 × g durante 15 minutos.
analizada. Harvey y McIllmurray 8 publicaron el aislamiento de 16. Ottens, H. and K.C. Winkler. 1962. J. Gen. Microbiol. 28:181-191.
Paso 4 Pipetee con cuidado el caldo para retirarlo del sedimento estreptococos que contenían antígenos del grupo D y grupo G. Además, 17. Poxton, I.R., et al. 1978. Biochem. J. 175:1033-1042.
bacteriano. se han informado casos de presencia de antígenos específicos del grupo 18. Shlaes, D.M., et al. 1984. J. Clin. Microbiol. 20:195-198.
Paso 5 Añada 2 gotas de reactivo 1 al sedimento bacteriano sujetando F (p. ej. tipo II) en los grupos A, C y G,11,16 pero no deberían causar 19. Slifkin, M. and G.R. Pouchet-Melvin. 1980. J. Clin. Microbiol. 11:249-255.
el frasco en posición vertical y apretándolo suavemente. reacciones cruzadas cuando se utilizan reactivos de látex PathoDx®. 20. Wellstood, S. 1982. J. Clin. Microbiol. 15:226-230.
21. Wetkowski, M.A., et al. 1982. J. Clin. Microbiol. 16:86-91.
Paso 6 Añada 2 gotas de reactivo 2 y mezcle con cuidado. AGLUTINACIÓN INESPECÍFICA: En los ensayos con látex, pueden observarse
Paso 7 Incube durante 1 minuto a temperatura ambiente (15-28°C). por lo menos dos tipos de aglutinación inespecífica.
Paso 8 Añada lentamente 4 gotas de reactivo 3. 1. Algunas cepas mucoides de bacterias pueden causar un agrupamiento
Paso 9 Añada 8 gotas de agua destilada de una pipeta de 5 ml y mezcle inespecífico del látex, probablemente debido a la captura física de las
con cuidado. partículas en el material capsular extraído.
Paso 10 Analice 50 µl del extracto como se describe en la sección 2. Las cepas de Staphylococcus aureus portadoras de proteína A pueden
procedimiento del ensayo, pasos 7-11, (Colonias en causar aglutinación falso-positiva de reactivos de látex al unirse a la
medios sólidos). parte Fc de la IgG del látex. Los reactivos PathoDx® se han diseñado
para no reaccionar con niveles moderados de proteína A, pero niveles
PRECAUCIÓN: El procedimiento de colonia directa puede mostrar una
más elevados pueden trastornar el sistema.
aglutinación no específica cuando las micropartículas estén atrapadas por
una capa externa mucoidal presente en algunos cultivos; para minimizar NOTA: Cuando se realice el ensayo, se recomienda inclinar el portaobjetos
este problema, cuando realice pruebas con más de un reactivo de látex, las hacia atrás y hacia adelante durante el tiempo suficiente para obtener
pruebas deberán detenerse cuando se haya observado una reacción inicial una aglutinación que pueda leerse claramente (2+ a 3+). Si se sigue este
positiva que indicará el grupo de estreptococos procedimiento, se reducirán al mínimo las reacciones cruzadas.