UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BAJA CALIFORNIA
BIOQUIMICA
PRÁCTICA 11
DETERMINACIÓN DE
TRIGLICÉRIDOS
EN SANGRE
ALUMNA: PAMELA NATALIA CASTRO RODRIGUEZ
GRUPO: 423 SUB: 1
B.Q. MARIA DE LOS REMEDIOS SANCHEZ DIAZ
INTRODUCCIÓN A LOS
TRIGLICERIDOS
Los triglicéridos son grasas que suministran energía a la célula. Al igual que el colesterol,
son transportados a las células del organismo por las lipoproteínas en la sangre.
Formados por tres ácidos grasos y glicerol.
Principal reserva de energía en el cuerpo.
Insolubles en agua, transportados en sangre por lipoproteínas.
Se descomponen en ayuno o ejercicio para generar energía.
Desequilibrio en sus niveles se asocia a obesidad y enfermedades cardiovasculares.
EN QUE CONSISTE EL METODO
Los triglicéridos incubados con lipoproteinlipasa (LPL) liberan glicerol y ácidos grasos
libres. El glicerol es fosforilado por glicerolfosfato deshidrogenasa (GPO) y ATP en
presencia de glicerolquinasa (GK) para producir glicerol-3-fosfato (G3P) y adenosina-5-
difosfato (ADP). El G3P es entonces convertido a dihidroxiacetona fosfato (DAP) y
peróxido de hidrogeno (H2O2) por GPO.
Al final, el peróxido de hidrogeno (H2O2) reacciona con 4-aminofenazona (4-AF) y p-
clorofenol, reacción catalizada por la peroxidasa (POD) dando una coloración roja.
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de triglicéridos
presentes en la muestra ensayada
PREPARACION Y MATERIALES
Reactivo de trabajo (RT): Disolver el contenido de un vial de R2 Enzimas en
un frasco de R1 Tampón. Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su
contenido. RT Estabilidad: 6 semanas en nevera (2-8ºC) o una semana a 15-
25ºC
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta,
cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz
y se evita su
contaminación. No usar reactivos fuera de la fecha indicada.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
- Presencia de partículas y turbidez.
- Absorbancia (A) del blanco a 505 nm ≥ 0,14.
Equipo de laboratorio:
Espectrofotómetro: Para medir la
absorbancia de la reacción enzimática,
esencial para cuantificar la actividad de la
LDH en la muestra.
Pipetas y puntas de micropipeta: Para medir
volúmenes precisos de reactivos y muestras.
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo: Longitud de onda: 505 (490-550) nm
Celda: 1 cm paso de luz
Temperatura constante: 37ºC / 15-25ºC
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
3. Pipetear en una celda.
4. Mezclar e incubar 5 minutos a 37ºC o 10 min. a temperatura
ambiente
5. Leer la absorbancia (A) del Patrón y la muestra, frente al Blanco de
reactivo. El color es
estable como mínimo 30 minutos.
VALORES NORMALES Y
RESULTADOS
Factor de conversión:
mg/dL x 0,0113 = mmol/L.
Hombres: 40 – 160 mg/dL
Mujeres: 35 – 135 mg/dL
SEGREGACIÓN DE RPBI S
(GENERADOS DURANTE LA
PRÁCTICA)
El manejo adecuado incluye:
Contenedores rojos: Para objetos punzocortantes o
material contaminado con sangre.
Bolsa amarilla: Para material no punzante contaminado
con sustancias químicas.
Almacenamiento: Residuos deben ser etiquetados y
almacenados en un área específica hasta su correcta
disposición.
Eliminación: De acuerdo con la norma local NOM-087-
ECOL, deben ser recolectados por un servicio autorizado
para su tratamiento y disposición final.
CONCLUSIÓN
La determinación de triglicéridos en sangre es crucial para evaluar el riesgo
de enfermedades cardiovasculares y el metabolismo lipídico. Niveles
elevados pueden indicar problemas de salud como obesidad, diabetes, y
dislipidemias, que requieren atención médica para prevenir
complicaciones.
BIBLIOGRAFIA
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