1 DUREZA

1.1 Preparación de la muestra

Para la determinación de dureza las muestras deben guardarse en recipientes de plástico
(polietileno o equivalentes) ó de vidrio, debidamente lavados y enjuagados con HNO3 1
+ 1 y secado en estufa. El volumen mínimo de recolección para este tipo de muestras debe
ser de 500 mL. La preservación de la muestra se hace agregando HNO3 hasta un pH<2.
Está preservación debe realizarse en el momento de la toma de muestra
Las muestras deben ser analizadas lo más pronto posible después de su recolección. El
almacenamiento máximo recomendado para estas muestras es de 6 meses. Mantenga la
muestra refrigerada a 4°[Link] el momento del análisis se debe dejar llevar la muestra hasta
temperatura ambiente.
1.2 Reactivos
a) Solución tampón:
Disuelva 0.1179 g de sal disódica de ácidoetilendiaminotetraacético dihidrato (grado de
reactivo analítico) y 64.4 mg de cloruro magnésico (MgCl2*6H2O) en 5 mL de agua
destilada. Agregar esta solución a 1.69 g de NH4Cl y 14.3 mL de NH4OH conc. Diluya
hasta 25 mL con agua destilada.
Almacene la solución en un recipiente de plástico o vidrio de borosilicato durante no más
de 1 mes. Cierre herméticamente para evitar la pérdida de amoníaco (NH3) o la absorción
de dióxido de carbono (CO2).
Descarte el tampón cuando no se alcance un pH de 10,0 +/- 0,1 en el punto final de la
titulación al añadir 1 o 2 ml a la muestra.
b) Indicadores Negro de eriocromo T:
Sal sódica del ácido 1-(1-hidroxi-2-aftilazo)-5-nitro-2-naftol-4-sulfónico; n.º 203 en el
índice de color. Disuelva 0,5 g de colorante en 100 g de 2,2,2-nitrilotrietanol (también
llamado trietanolamina) o 2-metoximetanol (también llamado etilenglicol monometil éter).
c) Titulante EDTA estándar, 0,01 M:
Para un volumen de 250 mL: 0.9308 g de etilendiaminotetracetato disódico dihidrato
(EDTA) y disolverlo en agua destilada hasta 250 mL. Para un volumen de 100 mL: 0.3723
g de etilendiaminotetracetato disódico dihidrato (EDTA) y disolverlo en agua destilada
hasta 100 mL.
d) Solución de calcio estándar 0.01M:
Pese 25,2 mg de polvo de CaCO3 anhidro (estándar primario o reactivo especial con bajo
contenido de metales pesados, álcalis y magnesio) en un erlenmeyer de 50 mL. Coloque un
embudo en el cuello del matraz y agregar, poco a poco, 1 + 1 HCl hasta que se haya
disuelto todo el CaCO3. Agregue 10 mL de agua destilada y hervir durante unos minutos
para expulsar el CO2. Enfrie, agregar unas gotas de indicador rojo de metilo y ajustar al
color naranja intermedio agregando NH4OH 3N o 1+ 1 HCl, según sea necesario.
Transferir y diluir a 25 mL con agua destilada.
e) Hidróxido de sodio (NaOH), 0,1 N
f) Valoración:
Tome 5 mL de la solución estándar de calcio 0.01M, adicione agua hasta 50 mL y proceda
como en las muestras.
V CaCO 3∗M CaCO 3
M EDTA =
V EDTA

1.3 Procedimiento de preparación de estándares

a) Solución patrón que contiene 2000 mg/L de CaCO3 como Dureza Total,
400mg/L de calcio y 243 mg/L de magnesio: Pese 0.1 g de CaCO3 trazable y
0.02078 g de MgO del 97.0%. Disuelva el CaCO3 y el MgO añadiendo poco a poco
HCl 1 + 1en un erlenmeyer de 50 mL, hasta la disolución total del CaCO3, adicione
25 mL de agua ultra pura y haga hervir durante unos minutos para expeler el CO2;
enfríe, adicione unas gotas de indicador rojo de metilo y ajuste al color naranja
intermedio por adición de NH4OH 3N o HCl 1 + 1, según se requiera. Trasfiera
cuantitativamente a un balón aforado y diluya hasta 50 mL con agua ultra pura
b) Estándares de control
Estándar bajo de 50 mg CaCO3/L como dureza total a partir de la solución patrón
preparada, diluir 2.5 mL a 200 mL con agua ultra pura.
Estándar alto de 500 mg CaCO3/L como dureza total, a partir de la solución patrón
preparada, diluir 25 mL a 100 mL con agua ultra pura
1.4 Procedimiento
a. Pretratamiento de la muestra:
Transfiera 50 mL de muestra bien mezclada a un erlenmeyer o vaso de precipitados
(consulte 3030D para el volumen de la muestra). Agregue 5 ml de HNO3 concentrado y
cubra con un vidrio de reloj estriado. Lleve a ebullición lenta en una plancha de
calentamiento y evapore hasta 15 a 20 ml. Agregue 5 ml de HNO3 concentrado y 10 ml de
H2SO4 concentrado, enfriando el erlenmeyer o vaso de precipitados entre las adiciones.
Evapore en una plancha de calentamiento hasta que aparezcan vapores blancos densos de
SO3. Si la solución no se aclara, agregue 10 ml de HNO3 concentrado y repita la
evaporación hasta que aparezcan vapores de SO3.
Caliente para eliminar todo el HNO3, antes de continuar el tratamiento. Todo el HNO3 se
eliminará cuando la solución esté clara y no haya vapores marrones evidentes. No deje que
la muestra se seque durante la digestión.
Enfriar y diluir hasta aproximadamente 50 ml con agua.
Calentar hasta casi hervir para disolver las sales solubles lentamente. Filtrar si es necesario,
luego transferir el filtrado a un matraz volumétrico de 100 ml con dos porciones de agua
destilada, agregando estos enjuagues al matraz volumétrico. Enfriar, diluir hasta el aforo y
mezclar bien. Tomar porciones de esta solución para las determinaciones de metales
requeridas.
b. Titulación de la muestra:
Cargar la bureta de 25 mL con solución estándar EDTA 0.01M
Diluya 25,0 mL de muestra a aproximadamente 50 mL con agua destilada a un vaso
precipitado. Agregue de 1 mL de solución tampón (1 mL será suficiente para obtener un pH
de 10,0 a 10,1.)
Agregue de 1 a 2 gotas de solución indicadora negro de eriocromo T.
Titular con agitación continua, hasta que desaparezca el último matiz rojizo. Agregue las
últimas gotas a intervalos de 3 a 5 s. En el punto final, la solución normalmente es azul. Se
recomienda la luz del día o una lámpara fluorescente de luz del día porque las luces
incandescentes comunes tienden a producir un matiz rojizo en el azul en el punto final.
mgCaCO3 V EDTA∗M EDTA
Durezatotal = ∗100091
L V muestra

Donde:
VEDTA= Volumen del titulante
MEDTA= Molaridad titulante

2 ALCALINIDAD
2.1 Preparación de las muestras
Recolecte las muestras en botellas polietileno o de vidrio boro silicato y guárdelas a baja
temperatura; llene las botellas completamente y tápelas herméticamente. Analice las
muestras antes de un día, si los pH de las muestras son superiores a 8,3 , estas muestras son
especialmente sensibles a los cambios, debido a que las aguas residuales pueden estar
sujetas a acción microbiana y a pérdida o ganancia de CO2 u otros gases cuando se
exponen al aire. Evite la agitación de la muestra y una prolongada exposición al aire. Para
muestras con pH entre 6 – 8 analice antes de 48 horas
2.2 Reactivos
a) Solución de carbonato de sodio, aproximadamente 0,05 N:
Secar de 1 g de Na2CO3 estándar primario a 250 ºC durante 4 h y enfriar en un
desecador. Pesar 0,1250 g o una cantidad cercana, exactamente medida, en un vaso de
10 mL y llevar a 50 mL.
 b) Ácido sulfúrico estándar a 0,02 N:
Coloque en un vaso de precipitados de 100 mL de agua desionizada, agregue muy
lentamente 0,13 mL de ácido sulfúrico concentrado del 98%, complete a 250 mL. En un
vaso de precipitados, coloque 50 mL de agua desionizada, agregue 0.054 mL de acido
sulfúrico concentrado al 98%.
c) Valoración:
Tome 4 mL de solución de carbonato de calcio 0.05 N y adiciónelos en un vaso con 50 mL
de agua destilada. Titule hasta pH 4.5 y calcule normalidad:
A∗B
N acido sulfurico =
53 , 00∗C
A = gramos de Na2CO3 pesados
B = mL de solución de Na2CO3 tomado para titulación
C = mL de ácido empleados
2.3 Procedimiento
Cargue la bureta de 25 mL con H2SO4 0.02N
Transferir 50 mL de muestra a temperatura ambiente a un Erlenmeyer
Titular hasta pH 8,3 si el pH de la muestra es superior a este valor. Continue titulando hasta
4,5 y verificar que se alcance el equilibrio de pH antes de adicionar más titulante.
Si la alcalinidad dio mayor a 100 mg/L tomar muestra menos a 50 mL.
A∗N∗50000
Alcalinidad total CaC O3=
mL de muestra
Donde:
A= mL de ácido estándar gastados
N = Normalidad de ácido estándar

3 SOLIDOS
3.1 Solidos Totales
a) Preparación de la cápsula de porcelana
Caliente la cápsula a 103–105 °C durante 1 h. Enfríe las cápsulas a temperatura ambiente,
péselas y registre el dato. Guarde las cápsulas pesadas en un desecador o en un horno hasta
que se necesiten.
b) Selección del tamaño de la muestra
Elija el volumen de muestra para obtener entre 2,5 y 200 mg de residuo seco. Si es
necesario, se pueden agregar porciones sucesivas de muestra a la misma cápsula después de
la evaporación.
c) Análisis de la muestra
Agregar 25 mL de muestra bien mezclada a la capsula de porcelana. Evapore la muestra
hasta sequedad en un horno (Asegúrese de que la temperatura de evaporación sea >=2 °C
por debajo del punto de ebullición para evitar salpicaduras).
Seque la muestra durante al menos 1 h en un horno a 103–105 °C. Enfríe la capsula en el
desecador a temperatura ambiente y pese. Repita el ciclo (secado durante >= 1 h,
enfriamiento, desecación y pesaje) hasta que el cambio de peso sea <0,5 mg.

Solidos totales ( mgL )= Volumen

( A−B )∗1000
muestra

Donde:
 A= peso residuo seco + capsula (mg)
 B= peso de la capsula de porcelana
3.2 Solidos suspendidos totales secado en 103°c-105°c
a) Preparación del filtro de fibra de vidrio
Inserte el filtro en el aparato de filtración. Aplique vacío y lave el disco con tres porciones
sucesivas de ≥ 20 mL de agua de grado reactivo. Continúe la succión para eliminar todos
los rastros de agua. Retire el filtro del aparato de filtración y transfiéralo a un plato de
pesaje inerte.
Seque el filtro en un horno a 103–105 °C durante ≥ 1 h. Enfríe en un desecador a
temperatura ambiente y pese. Guarde los filtros (en platos o bandejas inertes) en un
desecador o en un horno a 103–105 °C hasta que los necesite.
b) Selección de filtros y tamaños de muestra
Elija volúmenes de muestra para obtener entre 2,5 y 200 mg de residuo seco. Si la filtración
tarda >10 min en completarse, aumente el tamaño del filtro o reduzca el volumen de la
muestra.
c) Análisis de la muestra
Mezcle la muestra y transfiera 25 mL a un filtro de fibra de vidrio con vacío aplicado. Lave
el filtro con al menos tres volúmenes sucesivos de >=10 mL de agua de grado reactivo.
Deje que se escurra por completo entre los lavados y continúe con la succión hasta que se
eliminen todos los rastros de agua.
Retire con cuidado el filtro del aparato de filtración y transfiéralo a un vidrio reloj. Seque
durante >=1 h en un horno a 103–105 °C, enfríe en un desecador a temperatura ambiente y
pese. Repita el ciclo (secado, enfriamiento, desecación y pesaje) hasta que el cambio de
peso sea <0,5 mg.

SST ( )
mg
L
=
( A−B )∗1000
Volumen muestra

Donde:
A= Peso del filtro + residuo seco
B= Peso del filtro

4 DBO5
4.1 Preparación de las muestras
Utilice frascos plásticos de polipropileno de 2000 mL de capacidad. Refrigere la muestra a
4ºC hasta el momento del análisis. Lleve las muestras a temperatura ambiente. Efectúe el
análisis dentro de las 24 horas siguientes a la toma de la muestra.
4.2 Reactivos
Agua destilada y Ultrapura.
Solución tampón de fosfato: Disuelva 0,2125 g de KH2PO4, 0,5438 g de K2HPO4, 0,835 g
de Na2HPO4.7H2O, y 0,0425 g de NH4Cl en aproximadamente 15 mL de agua ultrapura y
diluya a 25 mL. El pH del buffer preparado debe ser 7,2 sin posteriores ajustes, permitiendo
un intervalo entre 7.1 – 7.3 y verificar el pH de cada preparación.
Solución de sulfato de magnesio: Disuelva 0,5625 g de MgSO4.7H2O en agua ultrapura y
diluya a 25 mL.
Solución de cloruro de calcio: Disuelva 0,6875 g de CaCl2 en agua ultrapura y diluya a 25
mL.
Solución de cloruro de hierro (III): Disuelva 0,625 mg de FeCl3.6H2O en agua ultrapura,
diluya a 25 mL.
Ácido Sulfúrico 1 M. En un vaso de precipitados coloque alrededor de 15 mL de agua
ultrapura y agregue muy lentamente y mientras agita, 1.4 mL de ácido sulfúrico
concentrado; diluya a 50 mL.
Hidróxido de Sodio 1M. Disuelva 0,4 g de hidróxido de sodio en agua ultrapura y diluya a
10 mL.
Solución de glucosa - ácido glutámico: Seque a 103 ºC por 1 h glucosa (grado analítico) y
ácido glutámico (grado analítico). Disuelva 3,75 mg de glucosa y 3,75 mg de ácido
glutámico en agua ultrapura y diluya a 25 mL. Almacenarlo en un frasco de tapa de rosca,
estéril, refrigerado y se puede usar por una semana.
Cepa o Semilla: Si no se dispone de fuentes de semillas adaptadas, desarrolle una semilla
aclimatada en el laboratorio aireando continuamente una muestra de aguas residuales
domésticas sedimentadas y agregando pequeños incrementos diarios de muestra del
desecho en cuestión. Utilice una suspensión de suelo, lodo activado o una preparación de
semillas comercial para obtener la población microbiana inicial. Determine la existencia de
una población satisfactoria probando el rendimiento de la semilla en pruebas de DBO en la
muestra. Los valores de DBO que aumentan durante la adaptación a un valor alto constante
indican una aclimatación exitosa de la semilla.
4.3 Preparación de estándares de control
Para mejores resultados seque una pequeña cantidad de los reactivos cada vez que se va a
preparar esta solución.
En un vaso de precipitados coloque alrededor de 0.2 g de ácido glutámico y en otro 0.2g de
glucosa y séquelo a 102 – 104 °C durante una hora en el horno.
Deje enfriar dentro del desecador, hasta temperatura ambiente.
En un vaso de precipitado pese 0,15 gramos de ácido glutámico y en otro 0,15 gramos de
glucosa.
Coloque 200 mL de agua ultrapura en un balón aforado de 1litro, transfiera los 0,15 g de
ácido glutámico, enjuague varias veces el vaso que lo contiene, agite hasta disolución
completa. (No se disuelve fácilmente)
Transfiera los 0,1500 g de glucosa, enjuague varias veces el vaso que lo contiene, agite
hasta disolución completa se agrega éste en el mismo balón del ácido glutámico.
Complete a volumen y homogenice invirtiendo el balón varias veces.
Nota: Este estándar se puede utilizar por una semana, manteniéndolo tapado y refrigerado.
Cuando se vaya a utilizar debe estar a temperatura ambiente.
4.4 Procedimiento
a) Preparación del agua de dilución
Llene la garrafa con 15 L de agua destilada. Airee el agua por dos horas mínimo.
Verifique que la temperatura del agua de dilución sea de 20± 3°C. Controle la temperatura,
midiéndola con el oxímetro a una muestra que se toma en una botella Winkler, repita el
proceso hasta llegar a 19 °C
Agregue 1 mL de cada una de las siguientes soluciones, por cada litro de agua de dilución a
preparar: Solución tampón de fosfatos, Solución de sulfato de magnesio, Solución de
cloruro de calcio, Solución de cloruro de hierro (III).
b) Lectura de Blanco
Aliste tres botellas Winkler y rotule las botellas
Adicione agua de dilución sin llenar completamente la botella. Lea el oxigeno inicial
de los blancos, llene totalmente dejando el sello hidráulico (pequeña película de agua para
impedir el intercambio de oxígeno entre la botella y el ambiente)
Lea las otras dos botellas de blancos como muestras y registre los datos e incube a 20+/-
3°C por cinco días.
Utilice una de las botellas del blanco para calibrar el oxímetro al quinto día y lea el
Oxígeno disuelto residual de los blancos, blanco con cepa, estándares y muestras.
c) Lectura de blanco con adición de cepa
Aliste tres botellas Winkler y rotule las botellas.
Adicione 2 mL de cepa o semilla. Adicione agua de dilución sin llenar completamente la
botella
Lea el oxígeno inicial de los blancos con adición de cepa, llene totalmente dejando el sello
hidráulico (pequeña película de agua para impedir el intercambio de oxígeno entre la
botella y el ambiente)
Registre los datos e incube a 20 +/-3°C por cinco días.
Al quinto día lea el Oxígeno disuelto residual
d) Lectura de estándar
Aliste tres botellas Winkler y rotule tres de las botellas
Adicione 2 mL de cepa o semilla.
Adicione 6 mL del estándar correspondiente.
Adicione agua de dilución sin llenar completamente las botellas.
Lea el oxígeno inicial de los estándares, llene totalmente dejando el sello hidráulico
(pequeña película de agua para impedir el intercambio de oxígeno entre la botella y el
ambiente)
Registre los datos e incube a 20+/- 3°C por cinco días.
Lea el Oxígeno disuelto residual a los 5 días de incubación.
e) Procesamiento de la muestra
NOTA: Las diluciones a utilizar serán de 25%, 50%, 75% y 100% de dilución
Aliste cuatro botellas Winkler y rotule las botellas con el número de muestra, la dilución
correspondiente y la fecha de análisis.
Adicione a cada botella la cantidad de muestra que se ha establecido.
Adicione 2 mL de cepa.
Adicione agua destilada sin llenar completamente la botella. Lea el oxígeno inicial de las
cuatro botellas de muestra, llene totalmente dejando el sello hidráulico (pequeña película de
agua para impedir el intercambio de oxígeno entre la botella y el ambiente)
Si al medir el oxígeno disuelto inicial, ha descendido a menor de 6, preparar otra botella
utilizando un volumen de muestra menor.
Registre los datos e incube a 20°+/- 3 ºC por cinco días.
Al quinto día lea el Oxígeno disuelto residual
Calcule la DBO5 con los resultados obtenidos

DBO5 ( mgOL )= (OD

2 −OD cepa )
consumido
Vm
∗V

Donde:
 OD consumido = ODi – ODr
 OD cepa = ODi (Agua dilución + cepa) – ODr(Agua dilución + cepa)
 Vm = Volumen alícuota de la muestra afectada por el factor de dilución
 V = Volumen de la botella Winkler

5 DETERMINACIÓN DE DQO
5.1 Preparación de las muestras
Colecte las muestras en botellas de plástico o de vidrio. La muestra se preserva en campo
por adición de H2SO4 conc. (2 mL de H2SO4 conc./L de muestra) y se mantiene
refrigerada hasta el momento del análisis. El tiempo máximo de vida útil de la muestra es
de veintiocho días. Las muestras que contengan sólidos sedimentables deben mezclarse
muy bien para homogenizar y obtener una muestra representativa.
5.2 Reactivos
Agua Ultrapura, obtenida en la pistola del purificador
Solución de digestión, 0,0167M ó 0.1 N: Ponga a secar a 150°C durante 2 horas,
Dicromato de potasio (K2Cr2O7) con pureza superior al 99.5%. Disuelva 0.2457 g del
Dicromato de potasio anhidro, en 25 mL de agua desionizada filtrada, adiciónele muy
lentamente 8.35 mL de ácido sulfúrico (H2SO4) concentrado y 1.665 g de Sulfato
mercúrico (HgSO4) grado reactivo, espere a que se disuelva y se enfríe a temperatura
ambiente, complete en balón volumétrico de 50 mL. Almacene en botella ámbar a
temperatura ambiente.
Reactivo de ácido sulfúrico: Prepare con una semana de anticipación. Agregue sulfato de
plata (Ag2SO4), grado reactivo o técnico, en cristales o en polvo, a una cantidad de H2SO4
concentrado en proporción de 5,5 g de Ag2SO4/kg H2SO4(aproximadamente 545 mL de
ácido), tome una botella de 2500 mL de ácido sulfúrico concentrado (como viene en la
presentación del 98%) y adiciónele25.2294 g de Ag2SO4. Deje en reposo una semana para
que se disuelva el Ag2SO4. Una vez disuelto, transfiera cuidadosamente y almacene en la
bureta de vidrio dispensadora, con una capacidad de 50 mL, a temperatura ambiente.
Solución indicadora de ferroina: Disuelva 0.1485 g de 1,10-fenantrolinamonohidratada y
0,0695 g de Sulfato ferroso heptahidratado (FeSO4.7H2O) en agua desionizada filtrada y
diluya en balón de 10 mL.
Ftalato ácido de potasio (KHP) estándar: Triture ligeramente y ponga a secar Biftalato
de potasio (HOOCC6H4COOK) a 110ºC hasta peso constante. Disuelva 0,2125 g de
biftalato de potasio en agua ultrapura y lleve a volumen en un balón volumétrico de 500
mL. El biftalato tiene una DQO teórica de 1,176 mg O2/mg y la solución tiene una DQO
teórica de 500 mg O2/L. La solución es estable hasta tres meses si se conserva refrigerada;
se debe verificar la presencia o ausencia de crecimiento biológico, y en caso afirmativo
descartarla.
Solución titulante de Sulfato ferroso amoniacal hexahidratado
(Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O)FAS, aproximadamente 0.04 N: Disuelva 7.8428 g de FAS
en agua desionizada filtrada. Adicione 10 mL de H2SO4 concentrado lentamente, deje
enfriar y complete a 500 mL. Valore la solución diariamente con la solución de digestión de
K2Cr2O7.
5.3 Procedimiento de preparación de estándares
A partir de la solución patrón de Biftalato de potasio con una DQO igual a 500mgO2/L,
prepare estándares de las siguientes concentraciones:
Prepare un estándar de 50 mgO2/L de DQO a partir de la solución de 500 mgO2/L de
DQO, tome 5 mL de ésta solución y lleve a volumen en un balón aforado clase A de 50 mL,
con agua ultrapura.
Prepare un estándar de 200 mgO2/L de DQO a partir de la solución de 500 mgO2/Lde
DQO, tome 20 mL de ésta solución y lleve a volumen en un balón aforado clase A de 50
mL, con agua ultrapura.
Cada vez que pase un lote de muestras incluya estándares de control de concentraciones 50
y 200 mgO2/L, para muestras que se procesen con Dicromato0,10 N.
5.4 Procedimiento
a) Digestión de la muestra
Precaliente conectando el digestor una hora antes de colocar las muestras para que éste
alcance los 150 °C.
Preparación de blancos: Transfiera 2,5 mL de agua ultrapura en un tubo de digestión,
adicione 1,5 mL de solución de digestión y 3,5 mL de reactivo de ácido sulfúrico (este
reactivo debe ser dispensado gota a gota por la pared del tubo). Tape herméticamente los
tubos, agite varias veces, sin invertir.
Prepare 6 tubos como blancos, 3 de ellos colóquelos en digestión junto con las muestras y
los otros 3 déjelos sin digerir, para valorar la concentración del FAS.
Tratamiento de la muestra: Agite la muestra, transfiera a un tubo de digestión, 2,5 mL de
muestra, agregue cuidadosamente 1.5 mL de solución de digestión y 3,5 mL de reactivo de
ácido sulfúrico por la pared del tubo. Tape herméticamente y agite, si la muestra presenta
coloración verdosa o azul, indica que se encuentra fuera de rango de lectura, repita el
procedimiento utilizando dicromato de potasio 0,25 N, titule con sulfato ferroso amoniacal.
Coloque los tubos con las muestras, los blancos para digestión y los estándares de control
en el digestor precalentado a 150°C. Espere a que se estabilice la temperatura en 150°C y
deje en digestión por 2 horas, después de este tiempo saque los tubos y colóquelos en una
gradilla a enfriar.
Transfiera el contenido de cada tubo a un Erlenmeyer marcado con el número de muestra,
blanco o control.
b) Valoración del Titulante
Valoración del FAS: Tome cada uno de los blancos no digeridos, transfiéralos a un
erlenmeyer de 125 mL, enjuague varias veces con agua ultra pura y vierta el contenido en
el erlenmeyer. Adicione 2 gotas de indicador de ferroina, mezcle rápidamente con el
agitador magnético.
Titule con el FAS aprox 0,04 N. El punto final de la titulación es un cambio de color de
azul verdoso a café rojizo permanente.

c) Titulación de Blancos
Tome los tubos de los blancos digeridos y realice el mismo procedimiento de titulación que
el efectuado para la valoración del FAS.
d) Titulación de las muestras
Tome los tubos de las muestras y estándares y realice el mismo procedimiento de titulación
que el efectuado para la valoración del [Link]: Si en la etapa de titulación de las
muestras al adicionar ferroína, toman color rojizo permanente, significa que todo el
dicromato ha sido consumido, por lo tanto, es necesario utilizar el dicromato más
concentrado. Si este también es consumido diluya la muestra. Deseche los residuos en la
caneca rotulada Desechos de DQO ubicada debajo del mesón del área de DQO.
 DETERMINACIÓN DE DQO POR COLORIMETRIA
Materiales
24 Tubos de digestión
3 Pipetas de 1 mL y 2 mL
1 Espectofotómetro
Gradilla
Reactivos
Solución de digestión: Se agregan aproximadamente 500 ml de agua destilada a 10,216 g
de K2Cr2O7, grado patrón primario, secado previamente a 103°C durante2 h, 167 ml de
H2SO4, y 33,3 g de HgSO4. Se disuelve, se enfría a temperatura ambiente y se diluye a
1000 ml
Reactivo de ácido sulfúrico: Se agrega el reactivo Ag2SO4, grado técnico, cristales o
polvo, al H2SO4 concentrado, en una proporción de 5,5 g de Ag2SO4/kg de H2SO4. Se
deja reposar de 1 d a 2 d para disolver el Ag2SO4.
Ftalato ácido de potasio (KHP) estándar: Triture ligeramente y ponga a secar Biftalato
de potasio (HOOCC6H4COOK) a 110ºC hasta peso constante. Disuelva 0,02125 g de
biftalato de potasio en agua ultrapura y lleve a volumen en un balón volumétrico de 50
mL. El biftalato tiene una DQO teórica de 1,176 mg O2/mg y la solución tiene una DQO
teórica de 500 mg O2/L. La solución es estable hasta tres meses si se conserva refrigerada;
se debe verificar la presencia o ausencia de crecimiento biológico, y en caso afirmativo
descartarla.
a) Digestión de la muestra
Precaliente conectando el digestor una hora antes de colocar las muestras para que éste
alcance los 150 °C.
Preparación de blancos: Transfiera 2,5 mL de agua ultrapura en un tubo de digestión,
adicione 1,5 mL de solución de digestión y 3,5 mL de reactivo de ácido sulfúrico (este
reactivo debe ser dispensado gota a gota por la pared del tubo). Tape herméticamente los
tubos, agite varias veces, sin invertir.
Prepare 6 tubos como blancos, 3 de ellos colóquelos en digestión junto con las muestras y
los otros 3 déjelos sin digerir, para valorar la concentración del FAS.
Tratamiento de la muestra: Agite la muestra, transfiera a un tubo de digestión, 2,5 mL de
muestra, agregue cuidadosamente 1.5 mL de solución de digestión y 3,5 mL de reactivo de
ácido sulfúrico por la pared del tubo. Tape herméticamente y agite, si la muestra presenta
coloración verdosa o azul, indica que se encuentra fuera de rango de lectura, repita el
procedimiento utilizando dicromato de potasio 0,25 N, titule con sulfato ferroso amoniacal.
Coloque los tubos con las muestras, los blancos para digestión y los estándares de control
en el digestor precalentado a 150°C. Espere a que se estabilice la temperatura en 150°C y
deje en digestión por 2 horas, después de este tiempo saque los tubos y colóquelos en una
gradilla a enfriar.
De acuerdo al tubo de digestión se establecen la cantidad de muestras y reactivos para la
digestión

b) Medición de la reducción del dicromato

Enfriar la muestra a temperatura ambiente lentamente para evitar la formación de
precipitados.
Una vez que las muestras se hayan enfriado, purgar, si es necesario, para aliviar la presión
generada durante la digestión. (Purgar implica abrir de manera controlada el recipiente
o sistema para liberar esa presión de forma segura.)
Mezclar el contenido de los recipientes de reacción para combinar el agua condensada y
desalojar la materia insoluble. Dejar que la materia suspendida se asiente y asegurarse de
que el camino óptico esté despejado. Medir la absorción de cada blanco de muestra y
estándar a la longitud de onda de 600 nm.
Utilice un blanco no digerido como solución de referencia.
Analice un blanco digerido para confirmar que los reactivos analíticos son buenos y para
determinar la DQO del blanco; reste la DQO del blanco de la DQO de la muestra.
Alternativamente, utilice el blanco digerido como solución de referencia una vez que se
haya establecido que el blanco tiene una DQO baja.
c. Preparación de la curva de calibración
Prepare al menos cinco estándares a partir de una solución de ftalato de hidrógeno y potasio
con equivalentes de DQO para cubrir cada rango de concentración.
Complete el volumen con agua reactiva; utilice los mismos volúmenes de reactivo, tamaño
de tubo o ampolla y procedimiento de digestión que para las muestras.
Prepare la curva de calibración para cada nuevo lote de tubos o ampollas o cuando los
estándares preparados difieran en un 5 % de la curva de calibración.
Las curvas deben ser lineales. Sin embargo, puede ocurrir cierta no linealidad, según el
instrumento utilizado y la precisión general necesaria.

6 DETERMINACIÓN DE MERCURIO
6.1 Preparación de las muestras
Recolección de la muestra: Se recolecta el agua en frascos de vidrio limpios y libres de
mercurio. La muestra debe preservarse utilizando un ácido fuerte, como el ácido nítrico,
para prevenir la volatilización del mercurio o su adsorción en las paredes del frasco.
Conservación: Las muestras se almacenan en condiciones frías (generalmente a 4°C) para
evitar la pérdida de mercurio hasta su análisis.
6.2 Digestión de la muestra (opcional)
Si la muestra contiene material orgánico u otras impurezas que puedan interferir con el
análisis, es necesario realizar una digestión ácida para convertir todo el mercurio presente
en su forma elemental o iónica (Hg²⁺).
Esto puede implicar el uso de una mezcla de ácidos, como ácido nítrico (HNO₃) y ácido
sulfúrico (H₂SO₄), en un proceso de calentamiento controlado para liberar el mercurio de
las matrices complejas.
6.3 Generación de vapor frío
Reducción del mercurio: El principio clave de la técnica de vapor frío es la conversión del
mercurio presente en la muestra en mercurio elemental (Hg⁰) en fase gaseosa. Para lograr
esto, el mercurio en estado iónico (Hg²⁺) se reduce químicamente a su estado elemental
(Hg⁰) mediante el uso de un agente reductor fuerte, típicamente el borohidruro de sodio
(NaBH₄) o el cloruro de estaño (SnCl₂), en una solución ácida (generalmente HCl).
Al producirse la reacción, el mercurio elemental pasa a su estado gaseoso (vapor frío), ya
que el mercurio tiene un punto de ebullición muy bajo.
6.4 Separación del mercurio en fase gaseosa
El mercurio elemental en forma de vapor es arrastrado mediante un flujo constante de gas
portador, generalmente aire o argón, desde la cámara de reacción hacia la celda de
absorción.
6.5 Detección mediante absorción atómica
En la celda de absorción, el mercurio en fase gaseosa se introduce en el trayecto óptico de
la lámpara de cátodo hueco específica de mercurio, que emite luz en la longitud de onda
característica del mercurio (generalmente 253.7 nm).
Cuando el mercurio gaseoso pasa a través del haz de luz emitido por la lámpara, los átomos
de mercurio absorben esta radiación. La cantidad de radiación absorbida es directamente
proporcional a la concentración de mercurio presente en la muestra.
El espectrofotómetro mide la intensidad de la luz absorbida y, mediante una curva de
calibración previamente preparada con estándares de mercurio conocidos, se determina la
concentración de mercurio en la muestra.

7 DETERMINACIÓN DE CIANURO
7.1 Preparación de la muestra
Recolección de la muestra: Tome la muestra en botellas plásticas de polipropileno, lavadas
con detergente neutro. Enjuague muy bien el material hasta garantizar que ya no tiene
trazas de detergente. Enjuague finalmente con agua destilada.
Conservación: Preserve en campo con Hidróxido de Sodio 6N para mantener el pH entre
12-12,5. Mantenga la muestra refrigerada a 4°C. Analice lo más pronto posible y antes de
14 días