Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

PRACTICA N° 05: IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLÉCULAS

Introducción:
Toda materia viva está compuesta por un grupo reducido de moléculas combinadas entre sí; algunas
de estas moléculas funcionan como parte estructural de las células y los tejidos del cuerpo de los
organismos.
Los componentes fundamentales de todo ser vivo son los siguientes:
Bioelementos: son todos los elementos químicos que constituyen a los seres vivos. Según su
abundancia se pueden clasificar en tres grupos: Bioelementos primarios: son los más abundantes.
Representan el 99,3% del total de átomos del ser vivo. Los principales son el C, H, O, N.
Bioelementos secundarios: constituyen prácticamente el 0,7% del total de átomos del ser vivo. Los
principales son P, K, S, Na, el, Mg, Fe.
Oligoelementos: son elementos que aparecen en cantidades ínfimas o trazas, pero aun así su
presencia es esencial para el correcto funcionamiento del ser vivo. Los principales son Mn, Zn, F,
Mo, Se.
Biomoléculas: son las moléculas que constituyen los seres vivos. Atendiendo a su naturaleza
química se pueden clasificar
Biomoléculas inorgánicas, tales como el agua, los gases (dióxido de carbono), sales inorgánicas
(fosfato y carbonatos), Biomoléculas orgánicas, tales como los glúcidos (glucosa, glucógeno), lípidos
(triacilglicéridos, colesterol), proteínas (hemoglobina) y los ácidos nucleicos (DNA y RNA).
En la presente práctica se van a realizar reacciones para entender y conocer más claramente las
biomoléculas, sus propiedades y la presencia o no en algunos alimentos que consumimos en nuestra
vida diaria.

Objetivo:
Determinar de forma cualitativa la presencia de las biomoléculas en los alimentos.

Materiales:
Tubos de ensayo
Gradilla
Mortero
Agua destilada
Mechero
Trípode
Malla de asbesto
Solución de Lugol
Reactivo de Biuret
Reactivo de Sudan
HN03 concentrado
H2S04 concentrado
Solución de alfa naftol
Solución de Reactivo de Benedict
Solución de carbohidratos al 1 % (glucosa, fructosa)
Goteros plásticos

PROCEDIMIENTO PREVIOS DE LA PRÁCTICA:

Preparación de la solución de almidón. En un vaso de precipitado de 250ml, disolver por

calentamiento O,5 gr de almidón en 5ml de agua, Una vez disuelto, agregar 45ml de agua

18
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

destilada y caliente hasta ebullición. Se debe obtener una solución casi transparente con el
que se va a trabajar.
Preparación de la muestra para proteínas. Solución de albúmina (Clara de huevo): Al
preparar la solución de clara de huevo hágalo de la siguiente manera: "Se bate la clara de
huevo durante unos instantes y se mezcla después con cinco veces su volumen de agua. La
mezcla se filtra y el filtrado se usa para realizar las experiencias de esta práctica.

CARBOHIDRATOS: Dentro de esta categoría se incluyen sustancias que cumplen funciones

importantes como componentes de plantas y animales, proporcionando estructura en los primeros
y constituyéndose en fuente de energía en los segundos. Los carbohidratos, también conocidos
como glúcidos, sacáridos o hidratos de carbono, están compuestos principalmente por carbono,
hidrógeno y oxígeno. Los carbohidratos son polihidroxialdehídos, polihidroxicetonas o compuestos
que, por hidrólisis, se convierten en aquellos. El criterio seguido a la hora de clasificarlos está
establecido de acuerdo con el comportamiento seguido por el carbohidrato cuando es sometido a
hidrólisis ácida. De esta manera tenemos básicamente tres grupos: Monosacáridos, Oligosacáridos
y Polisacáridos. (Cuero, et al 2010).

IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

Reacción de Lugol.
Se toman y rotulan tres (4) tubos de ensayo y se rotulan con el nombre de glucosa, fructosa,
almidón y agua destilada.
En cada uno de ellos se depositan 2ml de las distintas soluciones de carbohidratos al 1 % y agua
destilada.
Agregue dos gotas de solución de lugol y mezcle bien.
Sólo coloque el tubo en posición vertical y observe la formación del color.
Tome el tubo que ha trabajado como almidón e introdúzcalo en agua hirviendo. ¿Qué se observa?

http://www.iescolonial.es/documentos/glucidos%20paseo.htm

Prueba para determinar la presencia de almidón:

Coloque una pequeña muestra de papa rayada en un tubo de ensayo y añada 1ml de agua.
Agregue 2 o 3 gotas de Lugol y agite.
Observe el color que desarrolla la reacción.
Repita el procedimiento usando una pequeña cantidad de maicena.

19
 Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

Reacción de Fehling:
Tomar la muestra que se quiera analizar (normalmente una cantidad de 1 cc.)
Añadir 0,5 ml de Fehling A y 0,5 ml de Fehling B. El líquido del tubo de ensayo adquirirá un
fuerte color azul.
Calentar el tubo al baño María o directamente en un mechero de Laboratorio.
La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo-ladrillo.
La reacción será negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-verdoso.

http://www.iescolonial.es/documentos/glucidos%20paseo.htm

Reacción de Benedict.
Se toman y rotulan tres (4) tubos de ensayo con el nombre de glucosa, fructosa, almidón y agua
destilada
En cada uno de ellos se depositan 2ml de las distintas soluciones de carbohidratos al 1 % y agua
destilada
Agregar 2ml de reactivo de Benedict y mezcle bien.
Luego llevar los tubos de ensayo a un baño de maría durante dos minutos.
Deje reposar y observe las diferentes tonalidades presentes en los tubos de ensayo.

http://biocoments.blogspot.com/2015/04/prueba-de-benedict-y-carbohidratos.html

Prueba para azucares (monosacáridos).

Rallar un poco de pera, o cualquier fruto dulce y coloque una porción en un tubo de ensayo.
Agregue al tubo 10 gotas de agua y 1ml de reactivo de Benedict.
Coloque el tubo en un vaso químico con agua hirviente por 30 segundos y observe el color que
desarrolla la reacción.

20
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

PROTEÍNAS Las proteínas desempeñan una amplia variedad de funciones en plantas y animales.
Estas funciones se pueden agrupar en dos clases: dinámicas y estructurales. Entre las funciones
dinámicas de las proteínas se encuentran el transporte de sustancias, el control metabólico, la
contracción, la comunicación y la catálisis de transformaciones químicas. En cuanto a sus funciones
estructurales, las proteínas proporcionan la matriz para los tejidos óseo y conjuntivo que dan
igualmente forma al organismo. Las proteínas son polímeros de a-aminoácidos. Es interesante
anotar que todos los tipos diferentes de proteínas se sintetizan inicialmente como polímeros de 20
aminoácidos, conocidos como aminoácidos comunes. Además de los aminoácidos comunes, en las
proteínas se encuentran aminoácidos derivados, formados a partir de los comunes, normalmente
mediante una reacción catalizada por una enzima. Los aminoácidos comunes tienen en común un
átomo de carbono central, denominado carbono-a, al que están unidos covalentemente un grupo
ácido carboxílico (-COOH), un grupo amino (-NH2) y un átomo de hidrógeno (-H). Además de esto,
al átomo de carbono se le une una cadena lateral, designada como R, la cual es diferente para cada
uno de los aminoácidos comunes (Cuero, et al 2010).

IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS.
Reacción de Biuret
En una gradilla Se toman 2 tubos de ensayo de 16 x 150 y se rotulan como PATRÓN y otro como
CONTROL.
Se deposita en un tubo marcado como patrón 20gotas de solución de ovoalbúmina preparada.
Se deposita en el tubo marcado como control 20gotas de agua destilada.
Tome cada tubo y agregue 10 GOTAS de REACTIVO DE BIURET, mezclar suavemente cada tubo.
Hágalo de manera lenta, segura.
Caliente suavemente de ser necesario en el baño de María. Deje enfriar.
*Se realiza la misma prueba con leche de tarro para observar la reacción proteínica.

http://japt.es/vida/biomoleculas/luengo/proteinas.html

Reacción Xantoproteica
En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular como PATRÓN y otro como CONTROL.
Depositar en el tubo patrón 20gotas de solución de ovoalbúmina preparada y en el tubo control
20 gotas de agua destilada.
Tomar cada tubo y agregar 10 GOTAS de Ácido Nítrico concentrado, hacerlo de manera lenta,
segura por las paredes del tubo. Colocarlos a baño de María. Deje enfriar

21
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

http://japt.es/vida/biomoleculas/luengo/proteinas.html

Reacción de aminoácidos azufrados

Se pone de manifiesto por la formación de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa
esta reacción en la separación mediante un álcali, del azufre de los aminoácidos, el cual al reaccionar
con una solución de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.
Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de albúmina de huevo (clara de huevo).
Añadir 2 cc. de solución de hidróxido sódico al 20%.
Añadir 10 gotas de solución de acetato de plomo al 5%.
Calentar el tubo hasta ebullición.
Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de plomo,
utilizándose el azufre de los aminoácidos, lo que nos sirve para identificar proteinas que
tienen en su composición aminoácidos con azufre.

http://japt.es/vida/biomoleculas/luengo/proteinas.html

Desnaturalización de proteínas - Método del calor

En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular como PATRÓN y otro como CONTROL.
Depositar en el tubo patrón 20gotas de solución de ovoalbúmina preparada y en el tubo control
20 gotas de agua destilada.
Se introducen al baño de María que se encuentre hirviendo. Deje enfriar.

22
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

http://japt.es/vida/biomoleculas/luengo/proteinas.html

Desnaturalización de proteínas - Método por alcohol

En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular como PATRÓN y otro como CONTROL.
Depositar en el tubo patrón 20gotas de solución de ovoalbúmina preparada y en el tubo control
20 gotas de agua destilada.
A cada tubo y agregar 20 GOTAS de alcohol etílico/metanol, mezclar suavemente cada tubo.
Hágalo de manera lenta, segura.

http://iespoetaclaudio.centros.educa.jcyl.es/sitio/print.cgi?wid_seccion=19&wid_item=804&wOut=print

http://cienciaintuitiva.blogspot.com/2011/05/reconocimiento-de-catalasas-enzimas.html

23
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

LÍPIDOS: Los lípidos pertenecen a otra clase de biomoléculas, a aquellos que siendo insolubles en
agua pueden ser extraídas a partir de las células con disolventes orgánicos de polaridad baja como
el éter y el cloroformo. Cierta clase de lípidos, los fosfolípidos, son constituyentes esenciales de las
membranas celulares y otros son importantes moléculas de reserva energética y componentes
básicos de hormonas, vitaminas y prostaglandinas. Los lípidos también pueden clasificarse. Una
primera división los sitúa en tres: lípidos simples, compuestos y derivados.

IDENTIFICACIÓN DE GRASAS.
Reacción del Sudan
En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular como PATRÓN y otro como CONTROL.
Depositar en el tubo patrón 20 gotas de solución de aceite vegetal y en el tubo control 20 gotas
de agua destilada.
Adicionar a los tubos 10 gotas de reactivo de Sudan, mezclar suavemente cada tubo. Hágalo de
manera lenta, segura.

http://gutierrezpechoainhoacmc.blogspot.com/2011/03/reconocimiento-de-lipidos.html

Reacción de saponificación
En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular como PATRON y otro como CONTROL
Depositar en el tubo patrón 2ml del aceite vegetal, y en el tubo control la misma cantidad de
agua destilada
Adicionar a los tubos 2ml de hidróxido sódico al 20%
Agitar enérgicamente y llevar el tubo a baño maría durante 20 minutos.
Nota: Pasado el tiempo se puede visualizar en el tubo tres capas, en la capa intermedia se podrá
visualizar la solución de forma grumosa (jabón formado)

http://japt.es/vida/biomoleculas/luengo/lipidos.html

24
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

Solubilidad
En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular como PATRÓN y otro como CONTROL.
Depositar en el tubo patrón 3ml de éter o cualquier otro disolvente orgánico y en el tubo control
3ml de agua destilada.
Añadir a cada tubo 1ml de aceite vegetal y agitar fuertemente

http://japt.es/vida/biomoleculas/luengo/lipidos.html

CUESTIONARIO
1. ¿Qué son los azucares reductores?
2. ¿Nombre al menos 3 procedimientos diferentes a los de la guía, útiles para determinar
proteínas, carbohidratos y lípidos?
3. ¿Qué es saponificación?
4. ¿Cuál es el principio en que se basa la reacción de Benedict?
5. ¿Cuál es el principio en que se basa la reacción de Sudan? ¿Qué composición tiene el
reactivo de Sudan?
6. ¿Cuál es el principio en que se basa la reacción de Biuret?

25
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

PRACTICA N° 06: DIFERENCIACIÓN DE CÉLULAS PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS

Introducción:
La citología es la ciencia que se encarga del estudio de la célula.
Todos los seres vivos están constituidos por células que son unidades morfológicas y funcionales
donde se llevan a cabo las funciones vitales tales como la digestión, respiración, excreción,
circulación, reproducción, etc.
Se reconocen dos tipos de células: procariontes y eucariontes.
Las procariontes no presentan núcleo, carecen de membrana nuclear y su ADN se encuentra
inmerso en el citoplasma al igual que el ARN y los ribosomas; los componentes celulares no están
formados por membranas, excepto la membrana plasmática y poseen pared celular (bacterias y
algas verdeazuladas).
Las Eucariontes presentan núcleo verdadero, tienen membrana nuclear y el ADN se encuentra
dentro del mismo; los componentes celulares del citoplasma están formados por membranas.
El citoplasma está rodeado por la membrana plasmática que posee una permeabilidad selectiva
para el pasaje de sustancias y además le brinda protección y límite celular. Tiene las características
de un coloide, es contráctil, elástico y transparente.
La zona externa, ectoplasma, es muy contráctil homogénea, menos fluida y posee pocos organelos.
La zona interna, endoplasma es más fluida y heterogénea y se hallan suspendidas la mayor parte de
los organelos, las sustancias de reserva y los productos del metabolismo celular

Objetivos:
Conocer e interpretar las funciones que realizan los distintos componentes de la célula.
Conocer e interpretar la estructura y fisiología célula

Materiales:
Muestras de catáfilo de cebolla, hojas. Muestras de células animales.
Láminas portaobjetos y cubreobjetos
Guillette
Lugol, agua destilada
Microscopio

Procedimiento:
1.- Observación de células en fresco. Retirar el epitelio del catáfilo de cebolla, colocar en una
lámina portaobjetos, colocar una gota de lugol, colocar la lámina cubreobjetos y observar
microscopio

http://cienciasjpl.blogspot.com/2016/05/catafilo-de-cebolla.html

26
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

http://cienciasjpl.blogspot.com/2016/05/catafilo-de-cebolla.html

Sacar epitelio de una hoja, colocar en la lámina porta objetos, colocar una gota de agua, cubrir con
el cubreobjetos y observar al microscopio

2.- Observación de las figuras de las diapositivas y colocar los nombres de los componentes de la
célula, señalando el nombre de esta.
2.1.- Reconocer el tipo de célula y colocar sus partes: observar laS figuraS 01 Y 02 y describir de
acuerdo a los siguientes ítems:

Tipo de célula:…………………………………….
Reino:…………………………………………………
Dominio:…………………………………………..

27
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

Partes:
1……………………………………………
2……………………………………………
3…………………………………………..
4…………………………………………..
…………………………………………..
…………………………………………..
…………………………………………..
Figura 01

Tipo de célula:…………………………………….
Reino:…………………………………………………
Dominio:…………………………………………..
Partes:
1……………………………………………
2……………………………………………
3…………………………………………..
4…………………………………………..
…………………………………………..
………………………………………….

28
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

Figura 02

1
5

4
3

https://www.cerebriti.com/juegos-de-ciencias/partes-de-la-celula-vegetal-

Cuestionario:
1.- Considere 6 caracteres diferenciales entre célula animal y vegetal
CARACTER CÉLULA ANIMAL CÉLULA VEGETAL

2.- Indique las funciones de cada uno de los organelos mencionados

ORGANELOS FUNCIONES
Aparato de Golgi

Peroxisomas

Ribosomas

29
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

Retículo endoplasmático liso

Vacuola

Mitocondrias

Plastos y plastidios

Centrosomas

Ribosomas

Glioxisomas

3.- Indique 5 ejemplos de células eucariotas y procariotas, mencionando la función que estas
cumplen en el medio ambiente o en un ecosistema específico
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………
………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..

4.- A partir de materiales reciclados elabore dos maquetas una de célula procariota y otra de célula
eucariota.

30
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

PRACTICA N° 07: DIFERENCIACIÓN DE MONERAS Y PROTISTAS

Introducción:
La Biología Celular es la rama de la Biología dedicada al estudio de la estructura, función y
composición de las células de los organismos, en cualquiera de las fases de su ciclo vital. El objetivo
general de esta práctica es introducir a nuestros alumnos en la observación, análisis y reflexión sobre
algunos ejemplos de células pertenecientes a organismos del reino monera y del reino protista.
Concretamente, trabajaremos sobre bacterias del yogurt, como ejemplos de células pertenecientes
al reino monera, y sobre levaduras y protozoos como ejemplos de células pertenecientes al reino
protistas. Antes de realizar la práctica, el alumno deberá repasar los principales conceptos
relacionados con la clasificación de los organismos en 5 reinos, según Whitaker (1959) y Margulis
(1982).

2. OBSERVACION DE BACTERIAS DEL YOGURT

A) Consideraciones previas El interés de esta práctica radica en que las células procariotas son las
células más extendidas y abundantes de la biosfera y se encuentran en nuestro medio en grandes
cantidades activas o en forma de esporas. Su actividad tiene gran interés para la vida del hombre
tanto por su participación en múltiples procesos fisiológicos y patológicos, como por su intervención
en muchos fenómenos de naturaleza industrial.
Las bacterias, son células procariotas, pertenecientes al reino monera que se caracterizan por su
pequeño tamaño y por incluirse en una de estas tres formas básicas: bacilos cocos y espirilos. Con
frecuencia las bacterias se encuentran agrupadas en acumulos o en cadenas
B) Objetivo
Observar directamente, con el microscopio óptico, células procariotas para percatarse de su
pequeño tamaño y de sus diferentes formas, así como introducirse en el concepto de fijación y en
el uso de colorantes para aumentar el contraste de las células por medios químicos.
C) Material
Microscopio
Mechero de alcohol
Portaobjetos
Cubreobjetos
Aguja enmangada o asa de platino (asa microbiológica) o una pipeta Pasteur.
Frasco lavador
Solución de azul de metileno al 1%
Solución de fucsina básica
Solución de nigrosina
Pinzas para portaobjetos
Yogurt natural
D) Fundamento EL yogurt es leche que ha sufrido la fermentación láctica por acción de dos
bacterias, el Lactobacillus (Bacillus lacticus y bulgaricus) y el Streptococcus lacti, por ello, ambas
bacterias son abundantes en este material.
E) Procedimiento
a) Extensión del material:
• Limpiar bien un portaobjetos.
• Con la ayuda de una pipeta Pasteur coloca una gota de agua destilada sobre el portaobjetos limpio
• Esteriliza el asa microbiológica a la llama del mechero calentándola hasta que se ponga al rojo
vivo.

31
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

• Con el asa esterilizada (u otro objeto: palillo de dientes, pinza, etc.) y tras haberla dejado enfriar
unos segundos, toma una pequeña cantidad de yogurt y colócala sobre la gota de agua destilada, a
continuación, extiende suavemente la gota con el material sobre toda la superficie del portaobjeto.

http://axonveterinaria.net/web_axoncomunicacion/auxiliarveterinario/3/3_Procesado_muestras.pdf

b) Fijación del material: Sujeta el portaobjeto por uno de sus extremos y realizando una ligera
oscilación, pásalo suavemente sobre la llama del mechero, por la cara opuesta a la de la extensión,
hasta que se seque el material, procurando que el calor no sea excesivo. Con este proceder las
bacterias mueren, se altera la permeabilidad de sus membranas y el colorante pasa mucho mejor a
su interior. También se las puede dejar secar al aire, bien dejándolas sobre la bancada, durante
algunos minutos, o bien con un secador de aire.

https://procariontes.wordpress.com/morfologia-microscopica-y-tincion-de-gram/

c) Tinción de las bacterias:

• Coloca el portaobjeto, en el soporte y cúbrelo con el colorante durante 3-5 minutos, si se tiñe con
azul de metileno, o durante 2-3 minutos si se utiliza fucsina básica.
• Lava la preparación con agua destilada para arrastrar el exceso de colorante y sécala con papel de
filtro al aire o con un chorro de aire caliente.
• Utilizando como colorante nigrosina, se puede obtener una tinción negativa. Para ello coloca un
poco de yogurt y un poco de nigrosina en un extremo del portaobjetos, mezclando y
homogeneizando el material y el colorante.
• Una vez homogénea la mezcla, realiza un frotis con la ayuda de otro portaobjetos (ver práctica
sobre el frotis). El resto es igual.

32
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

http://erik2693.blogspot.com/2009/06/practica-6-tincion-de-gram.html

d) Observar al microscopio óptico.

estreptocococos

bacilos

http://www.carm.es/edu/pub/19800_2020/pub_contenido_09_seleccion-de-imagenes.html

Staphylococcus aureus

https://www.pinterest.com/pin/118360296440066824/

3. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS DE LA LEVADURA

A) Consideraciones previas El interés de esta práctica radica en que las levaduras son hongos
unicelulares muy abundantes en la naturaleza. Los podemos encontrar tanto sobre las semillas, las
frutas y las flores como en el suelo y en el intestino de los animales.
Las levaduras tienen gran interés para la vida del hombre tanto por su participación en múltiples
procesos de naturaleza industrial y económica, como la fermentación del pan, de la cerveza y del
vino; la síntesis de algunas vitaminas, grasas y proteínas, a partir de azucares sencillos y nitrógeno

33
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

amoniacal, así como en la producción de alteraciones patológicas en los organismos animales (las
candidiasis producidas por la Candida albicans, en la piel y mucosas del hombre) como vegetales (la
Nematospora coryli puede infectar y destruir frutas y verduras).
B) Objetivo: Observar directamente, con el microscopio óptico, células eucariotas del reino hongos.
C) Material
Microscopio
Mechero de alcohol
Portaobjetos
Cubreobjetos
Aguja enmangada o asa de platino (asa microbiológica) o una pipeta Pasteur.
Frasco lavador
Solución de azul de metileno al 1%
Pinzas para portaobjetos
Frascos con soluciones de levadura

D) Fundamento Las levaduras pueden buscarse tanto en su hábitat natural (flores, frutas, etc.) o
comprarla en aquellos establecimientos donde se vende para la fabricación del pan o la cerveza. Se
trata de levaduras que pertenecen al género Saccharomyces. En las farmacias se pueden comprar
cápsulas (UltraLevura) con la cepa Saccharomyces boulardii, donde se expenden para administrarla
a pacientes tratados con antibióticos, para subsanar los trastornos debidos a la destrucción de la
flora intestinal

E) Procedimiento
a) Preparación de la levadura: Para realizar una solución acuosa de levadura, pon agua con azúcar
en un tubo de ensayo. Agrégale un poco de levadura del comercio y agítelo hasta que quede
totalmente disuelta y con un aspecto lechoso homogéneo. Reparte la solución en dos tubos. Coloca
uno de ellos en una estufa a 37 grados durante 24 horas para que la levadura se divida por gemación.

b) Preparación del material para su observación:

b1) "In vivo":
• Limpiar bien un portaobjetos
• Con la ayuda de una pipeta Pasteur toma una gota de la solución del tubo de ensayo recién
preparado y ponla sobre el portaobjetos limpio. Colócale un cubreobjetos encima y ya está lista para
observar al microscopio. Si has cogido la muestra del frasco con levaduras en gemación, podrás ver
este fenómeno.
b2) En material fijado:
• Limpiar bien un portaobjetos
• Con la ayuda de una pipeta Pasteur toma una gota de la solución del tubo de ensayo y ponla sobre
un portaobjetos limpio
• Esteriliza, a la llama del mechero, el asa microbiológica, calentándola hasta que se ponga al rojo
vivo.
• Con el asa esterilizada (u otro objeto: palillo, pinza, etc.) y tras haberla dejado enfriar unos
segundos, extiende suavemente la gota sobre toda la superficie del portaobjetos
• Sujeta el portaobjetos por uno de sus extremos y realizando ligeras oscilaciones pásalo
suavemente, 3 ó 4 veces, sobre la llama del mechero, por la cara opuesta a la de la extensión, hasta
que se seque el material, procurando que el calor no sea excesivo
• Con este proceder las células mueren, se altera la permeabilidad de sus membranas y el colorante
pasa mucho mejor a su interior. También se las puede dejar secar al aire

34
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

• Coloca el portaobjetos, en el soporte y cúbrelo con el colorante, durante 15 minutos (azul de

metileno al 1%). Lava la preparación con agua destilada para arrastrar el exceso de colorante y sécala
con papel de filtro, al aire o con un chorro de aire caliente.
c) Observación al microscopio óptico.

http://ccnnvalledeloja1eso.blogspot.com/2012/02/observacion-de-levaduras.html

4. OBSERVACIÓN DE PROTOZOARIOS:
A) Consideraciones previas El interés de esta práctica radica en que los protozoos son organismos
unicelulares eucariotas, muy abundantes en la naturaleza. Los podemos encontrar tanto en medios
acuosos (marinos o no) como en medios terrestres húmedos y parasitando a otros organismos. Los
protozoos a pesar de ser unicelulares presentan una gran diversidad de formas y especies, con una
estructura celular, a veces, compleja. Ciliados, flagelados y rizópodos se pueden encontrar
prácticamente en cualquier muestra de agua.
B) Objetivo: Observar directamente, con el microscopio óptico, células eucariotas del reino protista,
concretamente protozoos.
C) Materiales
Microscopio
Mechero de alcohol
Portaobjetos
Cubreobjetos
Aguja enmangada o asa de platino (asa microbiológica) o una pipeta Pasteur.
Frasco lavador
Solución de azul de metileno al 1%
Pinzas para portaobjetos
Solución con protozoos
D) Fundamento Los protozoos pueden buscarse en su hábitat natural, es decir en medios acuosos
de agua dulce o salada. Por lo tanto, es fácil obtener muestras para su observación al microscopio.
El cultivo que vas a utilizar ha sido preparado en nuestro laboratorio.
E) Procedimiento
a) Preparar el material: Realiza una solución acuosa con protozoos de diferentes tipos ("cultivo
mixto"). Para ello pon agua corriente en un frasco bien limpio y dentro unos granos de trigo, arroz,
o unas barritas de paja o de heno, dejándolo destapado a la intemperie durante unas horas o un
día. Al cabo de varios días se habrán desarrollado varias especies de ciliados, sobre todo de
flagelados.

35
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

b) Preparación del material para su observación:

b1) "In vivo":
• Limpiar bien un portaobjetos, con la ayuda de una pipeta Pasteur toma una gota de la solución
de protozoos y ponla sobre el portaobjetos limpio
• Colócale un cubreobjetos encima y ya está lista para observar al microscopio. Trata de identificar
los diferentes tipos de protozoos que observes
b2) En material fijado:
• Limpiar bien un portaobjetos, con la ayuda de una pipeta Pasteur toma una gota de la solución de
protozoos y ponla sobre el portaobjetos limpio.
• Esteriliza el asa microbiológica a la llama del mechero, calentándola hasta que se ponga al rojo
vivo. Con el asa esterilizada y tras haberla dejado enfriar unos segundos, extiende suavemente la
gota sobre toda la superficie del portaobjeto
• Sujeta el portaobjetos por uno de sus extremos y realizando ligeras oscilaciones pásalo
suavemente, 3 ó 4 veces, sobre la llama del mechero, por la cara opuesta a la de la extensión, hasta
que se seque el material, procurando que el calor no sea excesivo.
• Con este proceder las células mueren, se altera la permeabilidad de sus membranas y el colorante
pasa mucho mejor a su interior. También se las puede dejar secar al aire.
• Otra forma de fijar los protozoos consiste en centrifugar suavemente el cultivo, desechando parte
del sobrenadante y agregándole una cantidad similar de formol al 10%. Esperar 1 hora. Volver a
centrifugar y retira el sobrenadante.
• Coloca el portaobjetos, en el soporte. Cúbrelo con el colorante, durante 5 a 10 minutos, si se tiñe
con hematoxilina de Carazzi. Lava la preparación con agua destilada para arrastrar el exceso de
colorante. Lávala de nuevo con agua corriente hasta que vire. Tiñe la preparación con eosina
durante 2 minutos y sécala con papel de filtro, al aire o con un chorro de aire caliente.

c) Observación al microscopio óptico.

Paramnecium caudatum

http://www.zootecniadomestica.com/infusorios-protozoarios/

36
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

Vorticella

http://practicasbiologia.unileon.es/practica4.htm

Cuestionario.
1. Indique las bacterias, protozoarios y hongos que en la actualidad se utilizan para
reducir la contaminación del medio ambiente.
2. Haga un listado de 5 especies de bacterias, hongos y protozoarios que ocasionan
contaminación al medio ambiente y/o enfermedades a los organismos vivos

37
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

PRÁCTICA N° 08: DIFERENCIACION DEL REINO FUNGI-LÍQUENES

Introducción
Los hongos se agrupan en el reino Fungi. Son organismos heterotróficos, con quitina en la pared
celular, son de muy variadas formas y hábitat, y comprenden un grupo amplio y heterogéneo.
Los dos rasgos principales que los caracterizan son:
1) una completa carencia de clorofila,
2) reproducción típicamente por esporas.
La ciencia que trata su ciclo de vida, relaciones y proceso evolucionaría de los hongos es conocida
como micología.
A partir de la clasificación establecida en 1969 por R.H Whittaker en cinco reinos, Animales, Plantas
Hongos, Moneras y Protoctistas, taxonómicamente los hongos dentro del Reino Fungi, se ordenan
mediante una determinada clasificación donde se establecen una serie de categorías que buscan el
facilitar el estudio de los mismos.
Reino Fungi; Phylum – mycota; Clase – mycetes; Orden – ales; Familia – aceae; además Género y
Especie.
Una forma característica de identificar las setas es por la estructura y morfología junto con el tipo
de esporas que pueden producir. En el caso de las setas con esporas, los dos principales grupos son
los Basidiomycetes y los Ascomycetes. La principal diferencia es la forma en que producen
microscópicamente sus esporas, en los Basidiomycetes, las esporas se generan externamente en
estructuras microscópicas denominadas basidios, mientras que, en los Ascomycetes, las esporas se
generan internamente en estructuras en forma de saco denominadas ascas.
De acuerdo a estas características y diferentes criterios los micólogos establecen sus propias
clasificaciones, más básicas y más fáciles de usar en las que se pueden clasificar las distintas especies
tanto de acuerdo a caracteres macroscópicos como microscópicos.
Si un hongo es filamentoso se llama moho, cuando es una célula aislada unicelular se dice levadura
y los hongos macroscópicos.

https://hongosmasquecallampas.wordpress.com/2016/03/22/clasificacion-de-los-hongos/

Las levaduras o fermento a un conjunto diverso de hongos, por lo general microscópicos y

unicelulares, capaces de iniciar los procesos de descomposición (fermentación) de distintas
sustancias orgánicas, particularmente los azúcares y los carbohidratos, obteniendo como
subproducto otras sustancias específicas como alcoholes, pueden buscarse tanto en su hábitat

38
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

natural (flores, frutas, etc.) o comprarla en aquellos establecimientos donde se vende para la
fabricación del pan o la cerveza. Se trata de levaduras que pertenecen al género Saccharomyces. En
las farmacias se pueden comprar cápsulas (UltraLevura) con la cepa Saccharomyces boulardii, donde
se expenden para administrarla a pacientes tratados con antibióticos, para subsanar los trastornos
debidos a la destrucción de la flora intestinal.
Los hongos (moho) son organismos microscópicos que viven en la materia animal o vegetal. Ayudan
en la descomposición de la materia muerta y a reciclar los nutrientes en el medio ambiente. Se
encuentran presente prácticamente en todas partes y se les puede encontrar creciendo en materia
orgánica como el suelo, los alimentos y la materia vegetal. Para poder reproducirse, el moho
produce esporas, las cuales se propagan a través del aire, el agua o a través de insectos. Estas
esporas actúan como semillas y pueden propiciar un nuevo crecimiento de moho si las condiciones
son apropiadas.

LIQUENES: Los líquenes, también conocidos como “hongos liquenizados”, son organismos
constituidos por una asociación entre un hongo (micobionte), generalmente un ascomiceto, y un
microorganismo fotosintético, una cianobacteria o un alga verde (ficobionte). De esa interacción se
origina un talo estable con estructura, ecología y fisiología diferentes a las que tienen los hongos o
algas por separado. El alga provee compuestos de carbono al micobionte por medio de la
fotosíntesis y, en algunos casos, puede también proveer nitrógeno fijado directamente desde la
atmósfera, mientras que la estructura y la forma del talo del liquen están determinadas por el
hongo, que además provee protección al alga contra la desecación y la radiación solar. Se han
descrito aproximadamente 0.000 especies de hongos, de los cuales un 20 son “liquenizados”. Por
otra parte, se cree que existen más de 17.000 especies de líquenes, las cuales se hallan en hábitats
muy diversos, algunos de ellos extremadamente secos y calurosos, tanto que ningún otro tipo de
organismo podría sobrevivir bajo tales condiciones. Se les considera, por lo tanto, organismos
excepcionalmente resistentes a las condiciones ambientales adversas y capaces de colonizar una
gran variedad de ecosistemas. Los líquenes, viven en casi todos los hábitats terrestres desde los
trópicos a las regiones polares, creciendo sobre substratos muy diversos. Los más comunes crecen
sobre la corteza de los árboles o de otras plantas o sobre rocas. Algunos son capaces de colonizar
los suelos desnudos, y unos pocos son capaces de vivir dentro de las rocas.

Procedimientos
1. OBSERVACIÓN DE LEVADURAS: El interés de esta práctica radica en que las levaduras son hongos
unicelulares muy abundantes en la naturaleza. Los podemos encontrar tanto sobre las semillas, las
frutas y las flores como en el suelo y en el intestino de los animales. Las levaduras tienen gran interés
para la vida del hombre tanto por su participación en múltiples procesos de naturaleza industrial y
económica, como la fermentación del pan, de la cerveza y del vino; la síntesis de algunas vitaminas,
grasas y proteínas a partir de azucares sencillos y nitrógeno amoniacal. Así como en la producción
de alteraciones patológicas en los organismos animales (las candidiasis producidas por la Candida
albicans, en la piel y mucosas del hombre) como vegetales (Nematospora coryli puede infectar y
destruir frutas y verduras).

Objetivo: Observar directamente con el microscopio óptico células eucariotas del reino fungi.

Materiales
Microscopio
Mechero de alcohol y pinzas para portaobjetos

39
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

Portaobjetos y cubreobjetos
Aguja enmangada o asa de platino (asa microbiológica) o una pipeta Pasteur.
Frasco lavador y frascos con soluciones de levadura
Solución de azul de metileno al 1%

Experimento:
a) Preparación de la levadura: Para realizar una solución acuosa de levadura, pon agua con azúcar
en un tubo de ensayo. Agrégale un poco de levadura del comercio y agítalo hasta que quede
totalmente disuelta y con un aspecto lechoso homogéneo. Reparte la solución en dos tubos. Coloca
uno de ellos en una estufa a 37 grados durante 24 horas para que la levadura se divida por gemación.
b) Preparación del material para su observación:
b1) "In vivo":
• Limpiar bien un portaobjetos
• Con la ayuda de una pipeta Pasteur toma una gota de la solución del tubo de ensayo recién
preparado y ponla sobre el portaobjetivo limpio. Colócale un cubreobjetos encima y ya está lista
para observar al microscopio. Si has cogido la muestra del frasco con levaduras en gemación, podrás
ver este fenómeno.
b2) En material fijado:
• Limpiar bien un portaobjetos. Con la ayuda de una pipeta Pasteur toma una gota de la solución
del tubo de ensayo y ponla sobre un portaobjeto limpio
• Esteriliza, a la llama del mechero, el asa microbiológica, calentándola hasta que se ponga al rojo
vivo. Con el asa esterilizada y tras haberla dejado enfriar unos segundos, extiende suavemente la
gota sobre toda la superficie del portaobjetos
• Sujeta el portaobjeto por uno de sus extremos y realizando ligeras oscilaciones pásalo
suavemente, 3 ó 4 veces, sobre la llama del mechero, por la cara opuesta a la de la extensión, hasta
que se seque el material, procurando que el calor no sea excesivo. Con este proceder las células
mueren, se altera la permeabilidad de sus membranas y el colorante pasa mucho mejor a su interior.
También se las puede dejar secar al aire
• Coloca el portaobjetos, en el soporte y cúbrelo con el colorante, durante 15 minutos (azul de
metileno al 1%). Lava la preparación con agua destilada para arrastrar el exceso de colorante y sécala
con papel de filtro, al aire o con un chorro de aire caliente.
c) Observación al microscopio óptico.

https://slideplayer.es/slide/3443163/

40
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

2. OBSERVACIÓN DE HONGOS MACROSCÓPICOS

Los hongos macroscópicos tienen cuerpos fructíferos y pigmentos que les brindan colores muy
variados.

Objetivo: Observar directamente hongos macroscópicos

Material
Muestras vivas

Experimento
a) Observación de hongos macroscópicos en su hábitat

https://mestreacasa.gva.es/web/garcia_sof3/?p_p_id=56sis&p_p_action

3. OBSERVACIÓN DE MOHOS: Los mohos forman una fina capa pulverulenta, de diverso color, que
forman estos hongos sobre materia orgánica como pan, fruta, queso, carne etc.

Objetivo: Observar directamente mohos

Material
Muestras biológicas con hongos (pan, frutas, hortaliza, etc.)

Experimento
a) Observación de hongos macroscópicos en su hábitat

41
Biología general (2022) Ingeniería Ambiental-UNAJMA

https://computerhoy.com/noticias/hardware/moho-permite-fabricar-baterias-mas-eficientes-
duraderas-42213

4. OBSERVACIÓN DE LÍQUENES: La mayoría de los líquenes se encuentran como costras adheridas

a la superficie del sustrato que les sirve de soporte.

Objetivo: Observar directamente líquenes

Material
Muestras vivas

Experimento
a) Observación de líquenes en su hábitat

https://actualidad.rt.com/actualidad/319688-liquenes-prosperar-despues-extincion-dinosaurios

CUESTIONARIO

1. ¿Dónde se encuentran las levaduras nativas?

2. ¿Qué hongos se usan para la alimentación?
3. Mencionar 3 líquenes que se usan como bioindicadores de contaminación.
4. Diferencie Basidiomycetos y Ascomycetos, considerar 4 ejemplos en cada caso
5. ¿Cuál es la diferencia entre hongos parásitos y hongos saprófitos?

42