UADY
FACULTAD
DE QUÍMICA
Campus de Ciencias Comentario [jsn1]: Faltó en la
portada número del equipo.
De la Salud
LABORATORIO DE MÉTODOS INSTRUMENTALES I
PRÁCTICA 1:
“DETERMINACIÓN DE FÓSFORO EN BEBIDAS DE
COLA POR ESPECTROFOTOMETRÍA UV-VIS”
LICENCIATURA EN QUIMICA
INTEGRANTES:
JENNER US MARTIN
JORGE SOSA BALAM
MÉRIDA, YUCATÁN, MÉXICO
FECHA DE ENTREGA:
20 pts
23 DE AGOSTO DEL 2012
1
PRÁCTICA 1:
“DETERMINACIÓN DE FÓSFORO EN BEBIDAS DE COLA POR
ESPECTROFOTOMETRÍA UV-VIS”
INDICE
Pág.
ANTECEDENTES………………………………………………………3
OBJETIVOS…………………………………………………………….4
METODOLOGIA..………………………………………………………5
RESULTADOS………………………………………………………….6
DISCUSIONES…………………………………………………………9
CONCLUCIONES………………………………………………………11
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS…………………………………11
2
ANTECEDENTES
México es el primer lugar per cápita en consumo de refresco en el mundo. Según
datos de la Cámara Nacional de la industria de la Leche y de la Asociación
Nacional de Productores de Refrescos. 1
El ácido fosfórico es una sustancia que contienen los refrescos de cola, el cual es
un aditivo que se emplea como antioxidante. Cantidades elevadas de fósforo en la
dieta, tienen un efecto desmineralizante del hueso, el ácido fosfórico que se
encuentra muy diluido no es tóxico, es inodoro y se emplea para dar un sabor
ácido a muchos refrescos, como la Coca-cola®, a la cual se le agrega,
aproximadamente 0.95 % de H3PO4; el pH de los refrescos es cercano a 2.3.2
Los métodos más habituales para reconocer los fosfatos por colorimetría
son dos, el primero está basado en la formación del azul de molibdeno y el
segundo es el que genera un complejo fosfomolibdovanadatado.3
Determinación de fósforo: Método del azul de Molibdeno, el cual consiste en hacer Comentario [jsn2]: A partir de aquí
debe ir como subtítulo.
reaccionar al analito (un ortofosfato) con el molibdato de amonio para producir un
complejo amarillo de fosfomolibdato, el cual puede ser reducido por la acción del
cloruro estañoso, por el ácido ascórbico, o por el ácido 1-amino-2-naftol-4-
sulfónico + sulfito e hidroquinona. El complejo reducido es conocido como “azul de
molibdeno” y probablemente tiene la fórmula siguiente (MoO2-4MoO3)2H3PO4. La Comentario [jsn3]: Probablemente??
intensidad del azul de molibdeno es directamente proporcional a la cantidad de
fósforo presente en la alícuota de la muestra y puede realizarse un análisis por
espectrofotometría UV/Vis a este cromóforo formado.4
Un espectrofotómetro de haz simple su función está basado en una luz que Comentario [jsn4]: No tienen hilación
los párrafos, otro subtitulo
procede de una fuente, se aísla una banda estrecha de longitud de onda con un
monocromador la cual pasa atraes de una muestra y se mide con n detector, que
primero se mide la irradiación que llega al detector después de haber pasado por
una cubeta de referencia , colocado en el compartimiento de muestras, cuando la
referencia se sustituye por una muestra de interés, algo de la radiación de absorbe
y la radiación que incide en el detector (p) es menor que (Po). El cociente entre
3
estos mismos (pP/Po) es un número entre 0 y 1 y es la transmitancia T. donde la
Absorbancia que es proporcional a la concentración es A = log (P/Po)= -log T.
Este contiene algunas interferencias porque la muestra y la referencia se deben de
colocar alternadamente en el camino del haz. Para diferentes medidas de longitud
5
de onda se deben de medir cada longitud de onda. Comentario [jsn5]: No se entiende
Las partes básicas de un espectrofotómetro son una fuente de luz, un
soporte para la muestra, una rejilla de difracción o monocromador y un detector.
El espectrofotómetro puede ser único o de doble haz. Las muestras para
espectrofotometría UV-Vis suelen ser líquidas, aunque la absorbancia de los
gases e incluso de los sólidos también puede medirse. Las muestras suelen ser
colocadas en una célula celda transparente, conocida como cubeta. Las mejores
cubetas están hechas con cuarzo de alta calidad, aunque son comunes las de
vidrio o plástico ya que el cristal y la mayoría de los plásticos absorben en el UV,
lo que limita su utilidad para longitudes de onda visibles.6
El espectrofotómetro de doble haz donde la luz pasa alternadamente
atreves de la muestra y el blanco (Referencia) mediante un espejo rotatorio, que
dirige el haz de luz. Cuando la luz pasa atraeves de la muestra el detector mide la Comentario [jsn6]: No se entiende
irradiación (P) y cuando el irradiador dirige la luz a la cubeta de referencia el
detector mide (Po). El haz se corta varias veces, el circuito y este compara Comentario [jsn7]: Quién este?
Mencionas mucho este
automáticamente (P y Po) para obtener la transmitancia y la absorbancia. Yy este
procedimiento posibilita una corrección de la intensidad de la fuente y del detector.
Existe un procedimiento de rutina el cual consiste en registrar el pico base con la
disolución de referencia.6 Comentario [jsn8]: No tiene
concordancia los párrafos de los
OBJETIVOS antecedentes. Mejora tu redacción para la
próxima práctica.
Conocer las partes de un espectrofotómetro de ultravioleta-visible.
Realizar una curva de calibración para cuantificar, por ultravioleta-visible, el
contenido de fósforo en una muestra de refresco de cola.
Con formato: Sangría: Izquierda:
1.27 cm, Sin viñetas ni numeración
4
METODOLOGÍA
Inicialmente se procedió a preparar 100 mL de una solución stock de 100 ppm de
P2O5 a partir de 0.0243 g de fosfato dibásico de potasio (K2HPO4), se tomó 1mL de Con formato: Subíndice
Con formato: Subíndice
la solución stock y se prepararon 25 mL de una solución de trabajo P2O5 a una
concentración de 4ppm.
Preparación de la solución reductora:
Para el proceso de preparación de la solución reductora.
Se pesaron 0.1562 g de molibdato de amonio y se disolvió en 5 mL de agua
destilada, se pesaron 0.2113 g de acidoácido ascórbico y se disolvió en 10mL de
agua destilada y se le añadieron 2.2 mL de H2SO4 aforando a 25 mL con agua
destilada. Posteriormente estas tres soluciones se mezclaron, llevándose a un
aforo de 50mL con H2O. Comentario [jsn9]: Mejorar redacción
Preparación de la curva de calibración:
Se prepararon soluciones estándares en matraces aforados de 10 mL.
Para esto proceso se extrajeron alícuotas de 1, 2, 3, 4 y 5 mL de la solución de
trabajo (P2O5 de concentración 4 ppm) y se les agregó a cada una 4 mL de la
solución reductora se aforaron a 50mL. Posteriormente estas soluciones se
incubaron por 30 minutos a una temperatura de 50°C.
Preparación de la muestra:
Se desgasificó 10 mL de la bebida de cola (Tuist cola®) en un baño de ultrasonido
alrededor de 5 minutos, posteriormente se tomó 1mL del refresco desgasificado y
se llevó a aforo a 50 mL con agua destilada. A continuación se tomó una alícuota
de 1 mL por duplicado de la solucion anterior y se le añadieron 4 mL de la solución
reductora y se aforó a 10 mL con agua destilada. Igualmente se preparó un blanco
5
añadiendo 4 mL de la solución reductora y se aforó a 10 mL con agua destilada.
Todas las soluciones se incubaron, al mismo tiempo a 50 0C por 30 minutos.
Análisis espectrofotométrico
Para llevar a cabo el análisis espectrofotométrico primero, se realizó el ajuste de la
longitud de onda en el intervalo de 750 a 850 y se realizorealizó un barrido de
exploración con el punto de la curva de calibración más concentrado (2 ppm).
Posteriormente a partir de la longitud de onda en la que se alcanzó el máximo de
absorción el cual fue de 825 nm se realizó un análisis de la curva de calibración y
de las muestras.
Para realizar estos análisis primero se realizorealizó la medición del blanco, el cual
se colocó en el espectrofotómetro de UV-VIS (GENESYS UV10 THERMO
SCIENTIFIE) y se hizo la medición correspondiente.
Después se hizo la medición de los estándares de 0.4, 0.8, 1.2, 1.6 y 2 ppm y se
vertieron en la celda y ésta se introdujo en el espectrofotómetro. Se hizo la
medición correspondiente y se anotaron los resultados obtenidos.
En seguida se realizó de nuevo la medición del blanco y por último se llevaron a
cabo las mediciones de las muestras y se anotaron los resultados obtenidos.
RESULTADOS
Para determinar la longitud de onda se utilizó el estándar de mayor concentración
de P2O5 y a partir de este se realizó un barrido para determinar la longitud de onda
(λmáx.) a la cual se obtiene un valor máximo de absorbancia.
Barrido de exploración.
Cuadro 1. Datos obtenidos del barrido de exploración de P2O5
Solución Absorbancia máx registrada en nm
Concentración 2ppm 0.678 825
6
Análisis de los estándares paraRealiz la cCurva de calibración.
Cuadro 2. Puntos para la curva de calibración
Solución de 10 mL Concentración de P2O5 Absorbancia
Alícuotas (mL) (ppm) =825 nm
1 0.4 0.231
2 0.8 0.395
3 1.2 ---------
4 1.6 0.642
5 2 0.765
A continuación se presenta la gráfica de los resultados, en la cual los valores
situados en la abscisa corresponden a los valores de la concentración de cada
estándar en partes por millón (ppm), y los valores de la ordenada corresponden a
la absorbancia obtenida de acuerdo a la concentración del estándar.
Curva de calibracion de P2O5 A 825 nm.
1
0.8
Absorbancia
0.6
0.4
y = 0.3288x + 0.1138
0.2 R² = 0.9967
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5
Concentración
Figura 1. Curva de calibración del P2O5 realizado en excel
7
Características de la curva de calibración dados por el equipo:
Pendiente: 0.329 Desviación estándar: 1.7 x 10-2
Intercepto: 0.114 Coeficiente de correlación: 0.998
Análisis de la muestra de cola por duplicado M1 Y M2
Comentario [jsn10]: Falto título a esta
tabla
Muestra Concentración de P2O5 Absorbancia
(ppm) =825 nm
M1 0.713 0.348
M2 0.740 0.357
Las concentraciones se hallaron aplicando la ley de Lambert-Beer, utilizando la
recta de la curva de calibración dados por el equipo: y=0.329x + 0.114 donde
x=concentración.
Para M1 x= (0.348 – 0.114)/0.329 = 0.711246 = 0.713
Para M2 x = (0.357 – 0.114)/0.329 = 0.73860 = 0.740
Cálculo de la concentración de fósforo en ppm presente en el
refresco de cola.
Se tomó la concentración calculada a partir de la medida de absorbancia
del espectrofotómetro a 825nm, posteriormente esta se multiplicó por 50 debido a
la cantidad a la que fue llevado a aforo 1mL de muestra (refresco de cola
desgasificada) y luego se multiplicó por 10 porque se tomó 1 mL de la solución
anterior y se lleva nuevamente a la marca de aforo a 10mL. Finalmente el
resultado obtenido fue multiplicado por el peso molecular del fósforo entre el peso
de P2O5, obteniéndose lo siguiente:
8
Para M1:
ppm de P= 0.713 ppm de P2O5 x 50 x 10 x ( )
= 155.654 ppm de fósforo en la muestra original
Para M2:
ppm de P= 0.740 ppm de P2O5 x 50 x 10 x ( )
= 161.549 ppm de fósforo en la muestra original
Promedio de M1 Y M2= (155.654 + 161.549)/2 = 158.6015 ppm
DISCUSIONES
El medio ácido generado con ácido sulfúrico presente en la solución
reductora de color amarillo al reacción con el P2O5 permite la aceleración de la Con formato: Subíndice
Con formato: Subíndice
reducción del ácido fosfomolíbdico (forma protonada del fosfomolibdato) para la
formación del complejo azul de molibdeno, antes de que el exceso de molibdato
de amonio, que también se reduce pero un poco más lento interfiera.7 Además Comentario [jsn11]: No se entiende
minimiza las interferencias por silicatos si se hallan presentes en la solución. Sin
embargo al preparar la solución reductora esta no permaneció de color amarillo
sino que cambió a un color azul claro lo que indica que probablemente haya
alguna impureza en el agua que contenga fósforo ya que se preparó dos veces la
sustancia reductora obteniéndose el mismo resultado por lo tantoy se procedió a
realizar el análisis con la sustancia reductora preparada inicialmente.de color azul
mas pálido.
La determinación espectrofotométrica estrictamente no se llevó a cabo
sobre disoluciones de la especie P2O5, sino que se realizó sobre el complejo en
disolución denominado “azul de molibdeno”. Este complejo es conveniente para el
análisis ya que presenta un color azul intenso que permite identificarlo y su
9
absortividad molar basada en fósforo es aproximadamente 25 000, lo que lo hace
muy sensible, además de que presenta un máximo de absorbancia a 850nm. 7
En el análisis experimental la longitud de onda donde se presentó un
máximo de absorbancia fue a 825 nm. Lo que indica que probablemente haya
ocurrido una desviación química puesto que las soluciones estándar al calentarlos
para que reaccionaran se debían mantener a una temperatura a 50 °C durante 30
minutos pero en el trabajo experimental se trabajó a 45° C en el tiempo
establecido. Lo anterior pudo ocasionar que en el barrido donde se usó la solución Comentario [jsn12]: Menciona en que
te basas para decir lo que se encuentra
con mayor concentración de P2O5, aunque ya presentaba un color azul intenso, señalado en el párrafo.
probablemente seguía reaccionando y esto ocasionó que la absorción sea
diferente a lo reportado en la literatura.8 Otro factor que pudo afectar fue la Comentario [jsn13]: ¿Cuál es el valor
reportado? Fundamenta tus discusiones
preparación de las soluciones estándar ya que al momento de pesar, aforar y
pipetear se pudo haber perdido cierta cantidad de reactivo por lo que las
concentraciones de las soluciones pudo modificarse.
En el cuadro 1 se puede apreciar observar que en el estándar 3 no se
obtuvo la lectura de la absorbancia, esto pudo deberse probablemente a un error
en el equipo o en la preparación del estándar, esto es que no se aforó
correctamente o no se dejó el tiempo suficiente para que reaccionara lo que pudo
provocar que la concentración disminuyera y se saliera de la linealidad de la
recta. Por lo que se trabajó con cuatro estándares sin tomar en cuenta el estándar Comentario [jsn14]: Mejorar
redacción.
3, por esta razón en la curva de de calibración (figura 1) solo hay cuatro puntos.
En el cuadro 1 y en la figura 1 se puede notar que se cumple con la ley de
Lambert-Beer ya que a mayor concentración mayor absorbancia asiasí como a
mayor espesor de la cubeta menor absorbancia.9
Experimentalmente encontramos que en la muestra de cola de la marca Comentario [jsn15]: Se determinó una
concentración de ….
“Tuist cola” hay 158.6015 ppm de fosforo por cada litro. No se encontraron datos
acerca del contenido de fosforo de dicha marca ya que probablemente es una
marca regional asiasí que comparando con la normatividad de la coca cola
company que reporta que por cada 250 mL hay 43 mg/L de fosforo y para un litro Comentario [jsn16]: Referencia
10
habría 172 mg/L de fosforo.10 Se puede notar que en la marca Tuist cola existe
una menor cantidad de fosforo y se refleja en el menor costo a comparación de la
coca cola. Comentario [jsn17]: Mejorar
redacción a la hora de discutir resultados
Conclusiones.
Se logró el objetivo de conocer y aprender el funcionamiento de los Con formato: Sangría: Izquierda:
1.25 cm
componentes del espectrofotómetro de ultravioleta-visible, además del uso
del equipo de incubación por ultrasonido.
Se logró el objetivo de realizar una curva de calibración para cuantificar la
concentracionconcentración del contenido de fósforo en una muestra de
refresco de cola de la marca Tuist Cola® por ultravioleta-visible.
Se comprendió que se debe realizar el barrido de exploración de la solución
estándar más concentrada para que las absorbancias obtenidas de las
demás soluciones estándar estén dentro de la longitud de onda establecida.
Referencias bibliograficasbibliográficas. Comentario [jsn18]: Revisar el manual
de procedimientos
1.-Cavazos, Norma C.; Zárate, L.; Torres de Navarro, E.. Determinación de fósforo
y cafeína en bebidas de cola. Educación Química, 2001, 12,2, pp.116-120.
2.- Guzmán B., J. Las bebidas gaseosas no te alimentan, Tu Vida Sana, Colombia,
Ene.18, 2011: pp 18
3.- S. Torres Cartas. ;Técnicas instrumentales: Manual de laboratorio
Ed. Univ. Politéc. Valencia, 2006; pp. 75.
4. Villegas Casares, W. A. ; Acereto ,P. O. Escoffié ;Vargas, M. E. Análisis
Ultravioleta-visible. la Teoría y la Práctica en el ejercicio profesional.;1ª ed. ; Ed.
UADY; Mexico:2006; pp.82,86.
11
5.- Daniel C, Harris; Análisis químico cuantitativo.;3a ed. ; Ed EditorReverte, 2007;
pp 462.
6.- Angelici R.J. Técnica y Síntesis en Química Inorgánica. Editorial Reverté.
1979, España. p 246-247.
7.-. W. F. Harnold,; Análisis químico e instrumental moderno; 2ª ed. ; Ed. Reverté ;
España:2005; pp.187,188.
8-.Skoog, principios de análisis instrumental, 5ta edición, España, pp 326-327.
9. Skoog; West,; Fundamentos de química analítica, 8va edición, mexico, editorial
Thomson.
10.-http://www.centrodenutricion.co.cr/content/articulo/contenido-de-
%C3%A1cido-fosf%C3%B3rico-en-bebidas.html consultado el 20 de agosto de
2012.
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