Práctica No.
9 Retracción del coágulo
OBJETIVO
El alumno determina la retracción del coágulo que se utiliza como medida de la
función plaquetaria. Es la retracción del coágulo resultante de la contracción de los
pseudopodos de las plaquetas unidas a la fibra de fibrina la retracción depende de
la proteína contractil tromboestenina.
FUNDAMENTO
El tapón hemostático de plaquetas que se forma como resultado de la hemostasia
primaria, crece hasta que consigue cerrar la abertura en el vaso. Durante este
tiempo, las plaquetas del tapón metabolizan glucosa y producen ATP de alta energía
este inicia la contracción de una proteína de las plaquetas parecida a la
actinomiosina llamada trombostenina que es la causante de la retracción del
coagulo. Esta retracción ocurre una vez estabilizado el coagulo, por contracción de
las proteínas fibrilares del cito esqueleto plaquetario, de las glicoproteínas
receptoras de membrana de la propia fibrina, el coagulo que se retrae queda
firmemente adherido a la pared vascular.
Al contraerse el coagulo los hilos de fibrina se contraen gradualmente y expulsan
el plasma del coagulo, aunque se retienen eritrocitos, plaquetas y otros elementos
sólidos. El plasma expulsado del coagulo tiene poco o nada de fibrinógeno porque
se ha convertido en fibrina y se llama suero. Para que ocurra retracción máxima del
coagulo, la sangre debe poseer número adecuado de plaquetas.
Al coagularse en forma espontanea la sangre, se forma una masa solida con todos
los componentes sanguíneos. Con el tiempo, la acción de las plaquetas sobre la red
de fibrina retrae el coagulo reduciendo su masa.
Utilidad de la prueba: Evaluación de la función plaquetaria y de la estructura de la
fibrina en la inducción de la retracción del coágulo; es un parámetro de coagulación
utilizado para investigar la posibilidad de enfermedad de Glanzmann.
Limitaciones: La concentración y la habilidad funcional del fibrinógeno y el nivel del
hematocrito deberán estar dentro de los límites normales para la correcta
interpretación del funcionamiento de las plaquetas. Un recuento de plaquetas bajo,
terapia con aspirina, aumento de la fibrinolísis, estructura alterada del
fibrinógeno/fibrina, o hipofribrinogenemia, puede ocurrir retracción anormal del
coágulo y limitar la habilidad para evaluar la función plaquetaria. En la coagulación
intravascular diseminada, afribrinogenemia y estados hemofílicos severos, no
ocurre formación de coágulo.
Utilidad clínica :
• Evaluar la función plaquetaria y la estructura de la fibrina en inducir la
retracción del coágulo.
• Evaluación de la enfermedad de Glanzmann.
• La retracción del coagulo se realiza gracias a una proteína la tromboastenina,
que utiliza el ATP como fuente de energía en presencia de iones cálcicos o
magnésicos.
La rapidez y calidad del coagulo depende de: número y calidad de las plaquetas,
concentraciones adecuadas de fibrinógeno y trombina. La retracción es influenciada
por la temperatura, el volumen eritrocítico, la superficie de contacto y el pH.
Retracción de un coágulo resultante de la contracción de los pseudópodos de las
plaquetas unidos a las fibras de fibrina. La retracción depende de la proteína
contráctil tromboestenina.
La retracción del coágulo se usa como medida de la función plaquetaria.
Equipo:
Baño María a 37°C
Material
a) Biológico Sangre obtenida al momento, sin anticoagulante.
b) De laboratorio
Tubos de centrifuga de 10 ml graduados
Alambre de cobre de 1 mm de grosor con el extremo distal enroscado unas 10
vueltas Gradillas
Procedimiento
[Link] un tubo de centrifuga graduado, colocar 5 ml de sangre venosa recientemente
extraída. [Link] el alambre de cobre hasta el fondo del tubo.
[Link] en baño María a 37°C, durante una hora.
[Link] ese tiempo, sacar cuidadosamente el alambre con el coagulo
adherido, permitiendo que el plasma escurra dentro del tubo durante unos 2
minutos.
[Link] el volumen que queda en el tubo y anotarlo como porcentaje con relación al
volumen total de sangre inicial. Aunque existan algunos glóbulos, no es necesario
hacer corrección de volumen.
Volumen del liquido exudado x 100
% de retracción: ----------------------------------------------------------
Volumen inicial
Metodología:
1. En el tubo de centrifuga graduado, colocar 5 ml de sangre venosa recientemente
extraída.
2. Tapar con el tubo de hule el tubo introduciendo el alambre de cobre hasta el
fondo del tubo.
3. Incubarlo en baño maría a 37°C, durante una hora.
4. Transcurriendo ese tiempo, sacar cuidadosamente el alambre con el coagulo
adherido, permitiendo que el plasma escurra dentro del tubo durante unos 2
minutos.
5. Leer el volumen que queda en el tubo y anotarlo como porcentaje con relación
del volumen total de sangre inicial. Utilizando una regla de tres, de la siguiente
manera:
Volumen inicial 5 ml -------- 100%
Volumen líquido exudado ------- x
Comentarios:
Es una prueba gruesa para medir la capacidad de las plaquetas para retraer el
coagulo, aunque también es influida por el fibrinógeno y por el hematocrito.
Valores de referencia:
Con este método la retracción del coagulo tiene como valores de referencia de 40
a 65%.
OBSERVACIONES
Aquí estaba en baño Maria cuando paso el tiempo sacamos el alambre y se
observaba una paleta de coágulo.
RESULTADOS
CONCLUSIÓN
Esta práctica fue muy sencilla y sobre todo muy interesante sobre todo cuando se
formo el coágulo sobre el alambre y se observó como una paleta con esta práctica
pudimos medir la función plaquetaria.
Preguntas de Control.
Anexa 1 o 2 fotos de la práctica realizada.
Nota:
La retracción del coágulo depende de sobre todo de la función normal de las
plaquetas, una proteína contráctil presente en la membrana de las plaquetas
(tromboestenina), el magnesio, el ATP y la piruvato cinasa. Este también está
influenciado por el nivel del hematocrito y la estructura y concentración del
fibrinógeno. La trombocitopenia y tromboastenia se caracterizan por un coágulo
friable con aumento en la cantidad de suero liberado y disminución de la cantidad
de suero expresado. Con hipofribrinogenemia, el coágulo es pequeño, firme y
demuestra un aumento en escape de [Link]. Con el aumento de la fibrinolísis, el
coágulo es suave e irregular con aumento en el escape células rojas. En la
coagulación intravascular diseminada, el coágulo es pequeño y * con aumento en
el % de escape celular. En la disfibrinogenemia congénita el coágulo es de tamaño
normal pero con el % de escape celular aumentado. El recubrimiento de las
plaquetas con paraproteínas (como en la macroglobulinemia) la retracción del
coágulo es pobre. En la tromboastenia (enfermedad de Glanzmann) es una
condición hemorrágica con recuento de plaquetas normal pero con tiempo de
sangría prolongado, retracción del coágulo marcadamente disminuida y con
anormal agregación y adhesión plaquetaria. La retracción del coágulo defectuosa
puede reflejar una falla en la activación del ADP de la actina en la membrana
plaquetaria. Una disminución en la cantidad de glicoproteínas IIb y IIIa de la
membrana se acepta como la característica de anormalidad de la membrana en la
tromboastenia de Glanzmann. Los procedimientos de retracción del coágulo han
sido ampliamente reemplazados por las pruebas de agregación plaquetaria,
adhesión plaquetaria y estudios de liberación plaquetaria. Existen instrumentos que
han sido desarrollados que miden el desarrollo de la fuerza durante la retracción del
coágulo. La fuerza generada es traducida en un cambio de voltaje que es grabado.
De esta manera el efecto sobre la retracción del coágulo en la función de las
plaquetas y la estructura de la fibrina puede ser cuantificada. Este instrumento
puede alargar la vida de los estudios sobre la retracción del coágulo seguido por los
parámetros de cuantificación de la retracción de manera más específica y
reproducible. La disfunción cualitativa de las plaquetas puede así ser caracterizada
en parte por la medición de la retracción del coágulo funcionalmente anormal. La
aplicación en la práctica clínica deberá esperar los resultados de los estudios de los
pacientes. Esto ha demostrado que los parámetros de la retracción del coágulo
dependen de la temperatura con una inhibición total a 15°C.
BIBLIOGRAFÍA
[Link]
[Link]
coagul
