PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTÁNDAR (POES)

HOSPITAL NACIONAL PROCEDIMIENTO OPERATIVO

RAMIRO PRIALE PRIALE – ESTANDARIZADO
ESSALUD HUANCAYO
VERSION:
SERVICIO: LABORATORIO 01
CLÍNICO. TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL
10/03/24
ACTIVADA
SECCIÓN:

HEMOSTASIA
1.-OBJETIVOS:
La presente Guía tiene como finalidad establecer el procedimiento para la determinación del
Tiempo de tromboplastina ´parcial activada

2.-ALCANCE:
Pacientes de Consultorios Externos, Hospitalizados, Emergencias que acuden al Hospital Nacional
Ramiro Priale Priale - Essalud Huancayo.

3.-RESPONSABILIDAD:
Personal Tecnólogo Médico del Servicio de Patología Clínica.- servicio de Hematología - Hemostasia

4.-DEFINICIONES (BREVE MARCO TEORICO):

La PTT es un indicador de qué tan bien está funcionando la cascada de coagulación. La
cascada incluye varios factores de coagulación producidos en el hígado y la formación de la vía
intrínseca (vascular relacionada) o de la vía extrínseca (tejido relacionada).estas vías funcionan
individualmente y luego juntos (vía común) para formar un coágulo de sangre estable. Para que
esto ocurra, cada uno de los factores (proteínas) debe estar presente en una cantidad suficiente y
funcionando normalmente. Cuando existen anomalías, ya sea heredadas o adquiridas, la
formación normal de coágulos no se produce; esto puede resultar en un sangrado excesivo
o la coagulación excesiva. La PTT prueba de uso corriente para el seguimiento de la terapia con
heparina es la prueba “activado”, pero aún se hace referencia a menudo como PTT. La PTT es una
prueba de medida de la longitud de tiempo que toma para que se produzca la coagulación en una
muestra de plasma en un tubo de ensayo cuando se añaden reactivos particulares. Cuando la
longitud de tiempo es más de lo normal, la PTT se prolonga. En general, el PTT se utiliza para
controlar la terapia con heparina, mientras que el tiempo de protrombina (PT) (o cociente
normalizado internacional (IRN) se utiliza para supervisar la terapia con warfarina (Coumadin);
cuando el paciente está en el proceso de cambiar de heparina a la warfarina, ambos se utilizan.
cuando el resultado de la prueba es demasiado bajo, por lo general necesita aumentar la dosis de
anticoagulante

4.1.-PRINCIPIO
STA COMPACT MAX 3 realiza exámenes coagulométricos, cromogénicos e inmunoturbidimétricos

Tiempo hasta el primer resultado: 15 minutos

4.2.-REQUISITOS
● PACIENTE
 Paciente de consulta externa que acude al Servicio de laboratorio, pacientes del servicio de
emergencia y pacientes hospitalizados.

● MUESTRA
o Tipo de Muestra:
Plasma con citrato de sodio (3.2%): 1 vol. de citrato para 9 vol. de sangre

o Estabilidad/Conservación/Acondicionamiento

Plasma
Volumen Requerido: El tubo indicado para colectar pruebas de coagulación, es aquel que
contiene citrato de sodio, a una concentración de 3,2 % (0,109 mol/L) (Na3C6H5O7 · 2H2O)
y utilizada en una relación al décimo entre anticoagulante/sangre [1+9] (4). Se recomienda
que los laboratorios de coagulación, adquieran tubos comerciales de citrato de sodio al 3,2
% ya que éstos eliminan errores en la preparación, indican niveles de volumen de llenado y
fecha de expiración siempre visible en su etiqueta
Instrucciones especiales: El volumen de llenado de tubo es aquel que indique el fabricante,
permite una variación de +/- 10% del volumen ideal. El tubo recomendado además es aquel
en que una vez lleno, queda un espacio (headspace) para producir la suficiente turbulencia
para la homogeneización correcta entre la sangre y el anticoagulante, dicha
homogeneización corresponde a 10 inversiones completas (sin agitar), no es suficiente el
efecto de la velocidad del flujo sanguíneo en el llenado del tubo para lograr la
homogeneidad con el anticoagulante. Es recomendable y en la medida de lo posible utilizar
un agitador mecánico de muestras. La omisión de este paso genera una anticoagulación
parcial de la muestra y por el contrario si la agitación es vigorosa producirá hemólisis.

● CRITERIOS DE RECHAZO
• Tubo mal rotulado o sin rotular.
● Muestra coagulada.
● Muestra derramada sobre el tubo o contenedor de transporte.
● Llenado del tubo, criterio +/- 10% del volumen ideal (verificar vacío del lote de tubos).
● Muestras en tubos donde la etiqueta comercial, no coincide con el color de la tapa.
● Rotulación del tubo, nombres y apellidos no legibles.
● No correspondencia entre los datos de la solicitud
● de examen y la rotulación del tubo.
● Muestra hemolizada, lipémica o ictérica (visualización post centrifugado, el rechazo o
aceptación dependerá del método de medición).
● Tubos con Muestras Espumosas(exceso de agitación).
● Tubos inadecuadamente cerrados.
● Tubos inadecuados, anticoagulante distinto a citrato de sodio.
● Fecha y hora de toma de muestras fuera de los tiempos de conservación de la muestra.

4.3.- MATERIAL NECESARIO

● Materiales para toma de muestra:
○ Algodón
○ Alcohol
○ Agujas
○ Tubo con citrato de sodio
 ○ Esparadrapo
● Controles y calibradores
● Micropipeta
● Punteras
● Crioviales

4.4.- EQUIPO NECESARIO

● Centrífuga
● STA COMPACT MAX 3
4.5.- REACTIVOS A EMPLEAR
● STA-Desorb U 24 viales de STA-Desorb U 24 x 15 ml
● STA-Cleaner Solution 6 viales de STA-Cleaner Solution 6 x 2,5 l
● STA-CaCl2 0,025 M 24 viales de STA-CaCl2 0,025 M 24 x 15 ml
● STA-Owren-Koller 24 viales de STA-Owren-Koller 24 x 15 ml
● PEG 25% 6 viales de PEG 25% 6 x 2,5 ml
● Asserachrom Washing Solution 2 viales de solución de lavado para kit Asserachrom 2 x 50
ml

4.6.-CALIBRACIÓN:
● Para garantizar la calidad analítica se debe verificar, controlar y registrar los volúmenes de
dispensación de los equipos. Las micropipetas deben estar calibradas y verificadas en
balanzas que se encuentran debidamente calibradas. El laboratorio puede verificar
localmente sus micropipetas, para ello requiere de una balanza analítica de sensibilidad de
1x10-4 gr y la tabla de conversión de la densidad del H2O a diferentes temperaturas, siendo
1.0 g/ml a 15°C (la precisión y exactitud de las micropipetas debe ser inferior a 1 % de CV).
Las micropipetas nuevas deben estar acompañadas de un certificado de calibración vigente.
Las puntas para micropipetas han de considerarse como un insumo único, desechable.
● Funciones de rutinas: gestión de calibración y control de calidad (incluido Westgard),
trazabilidad completa y muestras urgentes (STAT)

4.7.-CONTROL DE CALIDAD:
● El material de control reconstituido y sin alicuotar es estable a 4°C por 72 hrs. En el
caso de alicuotar utilice tubos eppendorf o criotubos con el volumen suficiente para
uso diario, en éste último caso almacenar a -20°C con estabilidad por 10 días. Para
descongelar utilizar baño maría a 37° C por 3 a 5 minutos.
● Para el cálculo de los límites de control se sugiere utilizar el modelo “N20” u otros
similares, acto seguido aplicar un método para exclusión de aberrantes. Definidos
los límites de control estos deben ser presentados a través de un método gráfico
como por ejemplo: gráficos de Levey–Jennings.
● Graficar los resultados de cada control y corrida analítica, manteniendo registro de
la evaluación diaria e histórica del CCI.

5.- DESARROLLO DE ACCIONES (PROCEDIMIENTO) RESPONSABLE

I.-PRE ANALITICO:
 Personal Técnico,
Tecnólogo Medico.
1. Muestra Plasma :

⮚ Verificar la solicitud
⮚ Realizar la recolección de muestra (sangre venosa), de
acuerdo al protocolo establecido, usando las medidas
de Bioseguridad correspondiente.
⮚ Llenar adecuadamente el tubo
⮚ Identificar las muestras
⮚ Rotular los tubos para el proceso.

II.-ANALITICO: Tecnólogo Medico

1. Centrifugar las muestras por 15 min a 2000-2500 rpm para

obtener el plasma

2. Colocar las muestras codificadas a bordo del equipo

3. Iniciar el proceso

4. El equipo obtendrá los resultados de las pruebas solicitadas

5. El analizador emitirá el resultado respectivo desde la

computadora del equipo

III.-POSTANALITICO: Tecnólogo medico

1. El tecnólogo medico revisa los resultados emitidos

2. Los resultados discordantes se indagarán referente a la

muestra con el área de procedencia (toma de muestras,
emergencia y respectivo pabellón de hospitalización), para
tomar las medidas correctivas.

3. Los resultados son validados por el tecnólogo responsable

del área.

4. Los resultados validados van directamente al sistema ESI del

hospital.

5. Descartar las muestras de acuerdo a las normas de

bioseguridad vigentes.

5.1. LIMITACIONES/INTERFERENCIAS.

● El resultado PTT puede ser invalidado por una muestra coagulada, una muestra insuficiente,
o la contaminación de heparina cuando la sangre se extrae de un puerto que se elimina de
forma rutinaria. Elevaciones PTT falsas pueden ocurrir con un hematocrito elevado, en
 estos casos, el laboratorio puede suministrar un tubo de recogida con una concentración
de citrato ajustado.
5.2. INTERVALOS DE REFERENCIA.

● El rango normal del PTT es de 25-45 segundos

● Valor crítico: > 70 segundos se asocia con hemorragia espontánea. Este es un valor de
pánico si el paciente no está anticoagulado. si el paciente está anticoagulada (por
enfermedad de la arteria coronaria o enfermedad vascular periférica con embolia), PTT
debe estar en el intervalo de 50-80 segundos
● Aumento de los niveles:
○ Deficiencia de coagulación genética o adquirida
○ Terapia anticoagulante
○ Tratamiento con estreptoquinasa o uroquinasa
○ Deficiencia de vitamina K
○ Cirrosis
○ Coagulación Intravascular Diseminada (CID)
○ Hipofibrinogenemia
○ Productos de degradación de fibrina
○ presencia de anticoagulante lúpico y anticardiolipina antibióticos
○ Leucemia
● Disminución de los niveles:
○ Cáncer generalizado (salvo la participación del hígado)
○ Publicación de hemorragia aguda
○ Primeras etapas de la DIC
○ Inflamación aguda de los tejidos o trauma

6.- REFERENCIAS (NORMAS DE BIOSEGURIDAD, NORMAS O DIRECTIVAS MINSA,

ESSALUD, OMS, IFCC, CLIA, etc.).
1. Manual de la Calidad del hospital IV-EsSalud Huancayo

2. Manual de Procedimientos de Laboratorio, Minsa, 4ta edición, 2014.

3. CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex- NCCLS) - Protocol EP15-A, 2001 / EP
17A, 2004.

7.- ANEXOS

● Manual de toma de muestras

● Manual del equipo STA COMPACT MAX 3

8.- LISTA DE DISTRIBUCIÓN:

✔ Jefatura de Departamento Ayuda al Diagnóstico y Tratamiento.

✔ Jefatura del Servicio de Patología Clínica
✔ Tecnólogo Médico, Coordinador del Servicio de Laboratorio Clínico
✔ Servicio de Hematología y Hemostasia del HNRPP-EsSalud Huancayo
 ✔ Archivo.

FIRMA FIRMA
……………………………. …………………………………….
INT. MARAVI ZARAYASI.T.M. LIC. T.M. COORDINADOR

………………………………………………………………
JEFE DEL SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTÁNDAR (POES)

HOSPITAL NACIONAL PROCEDIMIENTO OPERATIVO

RAMIRO PRIALE PRIALE – ESTANDARIZADO
ESSALUD HUANCAYO
VERSIÓN:
SERVICIO: LABORATORIO 01
CLÍNICO.
TIEMPO DE PROTROMBINA 10/03/24
SECCIÓN:

HEMOSTASIA
1.-OBJETIVOS:
La presente Guía tiene como finalidad establecer el procedimiento para la determinación del
Tiempo de Protrombina

2.-ALCANCE:
Pacientes de Consultorios Externos, Hospitalizados, Emergencias que acuden al Hospital Nacional
Ramiro Priale Priale - Essalud Huancayo.

3.-RESPONSABILIDAD:
Personal Tecnólogo Médico del Servicio de Patología Clínica.- servicio de Hematología - Hemostasia

4.-DEFINICIONES (BREVE MARCO TEÓRICO):

El tiempo de protrombina (TP) evalúa la vías extrínseca y común del sistema de coagulación.
La prueba consiste en medir el tiempo de coagulación de un plasma citrado en presencia de
tromboplastina (mezcla de factor tisular con fosfolípidos) e iones calcio. El TP refleja cambios en los
niveles de tres factores vitamina K-dependientes (FII, FVII, FX) y del FV. El TP se mide en segundos.
Esta relacionado con el INR (índice internacional normalizado).

4.1.-PRINCIPIO
STA COMPACT MAX 3 realiza exámenes coagulométricos, cromogénicos e inmunoturbidimétricos

Tiempo hasta el primer resultado: 15 minutos

4.2.-REQUISITOS
● PACIENTE
Paciente de consulta externa que acude al Servicio de laboratorio, pacientes del servicio de
emergencia y pacientes hospitalizados.

● MUESTRA
o Tipo de Muestra:
Plasma con citrato de sodio (3.2%): 1 vol. de citrato para 9 vol. de sangre

o Estabilidad/Conservación/Acondicionamiento

Plasma
Volumen Requerido: El tubo indicado para colectar pruebas de coagulación, es aquel que
contiene citrato de sodio, a una concentración de 3,2 % (0,109 mol/L) (Na3C6H5O7 · 2H2O)
y utilizada en una relación al décimo entre anticoagulante/sangre [1+9] (4). Se recomienda
 que los laboratorios de coagulación, adquieran tubos comerciales de citrato de sodio al 3,2
% ya que éstos eliminan errores en la preparación, indican niveles de volumen de llenado y
fecha de expiración siempre visible en su etiqueta
Instrucciones especiales: El volumen de llenado de tubo es aquel que indique el fabricante,
permite una variación de +/- 10% del volumen ideal. El tubo recomendado además es aquel
en que una vez lleno, queda un espacio (headspace) para producir la suficiente turbulencia
para la homogeneización correcta entre la sangre y el anticoagulante, dicha
homogeneización corresponde a 10 inversiones completas (sin agitar), no es suficiente el
efecto de la velocidad del flujo sanguíneo en el llenado del tubo para lograr la
homogeneidad con el anticoagulante. Es recomendable y en la medida de lo posible utilizar
un agitador mecánico de muestras. La omisión de este paso genera una anticoagulación
parcial de la muestra y por el contrario si la agitación es vigorosa producirá hemólisis.

● CRITERIOS DE RECHAZO
• Tubo mal rotulado o sin rotular.
● Muestra coagulada.
● Muestra derramada sobre el tubo o contenedor de transporte.
● Llenado del tubo, criterio +/- 10% del volumen ideal (verificar vacío del lote de tubos).
● Muestras en tubos donde la etiqueta comercial, no coincide con el color de la tapa.
● Rotulación del tubo, nombres y apellidos no legibles.
● No correspondencia entre los datos de la solicitud
● de examen y la rotulación del tubo.
● Muestra hemolizada, lipémica o ictérica (visualización post centrifugado, el rechazo o
aceptación dependerá del método de medición).
● Tubos con Muestras Espumosas(exceso de agitación).
● Tubos inadecuadamente cerrados.
● Tubos inadecuados, anticoagulante distinto a citrato de sodio.
● Fecha y hora de toma de muestras fuera de los tiempos de conservación de la muestra.

4.3.- MATERIAL NECESARIO

● Materiales para toma de muestra:
○ Algodón
○ Alcohol
○ Agujas
○ Tubo con citrato de sodio
○ Esparadrapo
● Controles y calibradores
● Micropipeta
● Punteras
● Crioviales

4.4.- EQUIPO NECESARIO

● Centrífuga
● STA COMPACT MAX 3
4.5.- REACTIVOS A EMPLEAR
● STA-Desorb U 24 viales de STA-Desorb U 24 x 15 ml
● STA-Cleaner Solution 6 viales de STA-Cleaner Solution 6 x 2,5 l
 ● STA-CaCl2 0,025 M 24 viales de STA-CaCl2 0,025 M 24 x 15 ml
● STA-Owren-Koller 24 viales de STA-Owren-Koller 24 x 15 ml
● PEG 25% 6 viales de PEG 25% 6 x 2,5 ml
● Asserachrom Washing Solution 2 viales de solución de lavado para kit Asserachrom 2 x 50
ml

4.6.-CALIBRACIÓN:
● Para garantizar la calidad analítica se debe verificar, controlar y registrar los volúmenes de
dispensación de los equipos. Las micropipetas deben estar calibradas y verificadas en
balanzas que se encuentran debidamente calibradas. El laboratorio puede verificar
localmente sus micropipetas, para ello requiere de una balanza analítica de sensibilidad de
1x10-4 gr y la tabla de conversión de la densidad del H2O a diferentes temperaturas, siendo
1.0 g/ml a 15°C (la precisión y exactitud de las micropipetas debe ser inferior a 1 % de CV).
Las micropipetas nuevas deben estar acompañadas de un certificado de calibración vigente.
Las puntas para micropipetas han de considerarse como un insumo único, desechable.
● Funciones de rutinas: gestión de calibración y control de calidad (incluido Westgard),
trazabilidad completa y muestras urgentes (STAT)

4.7.-CONTROL DE CALIDAD:
● El material de control reconstituido y sin alicuotar es estable a 4°C por 72 hrs. En el
caso de alicuotar utilice tubos eppendorf o criotubos con el volumen suficiente para
uso diario, en éste último caso almacenar a -20°C con estabilidad por 10 días. Para
descongelar utilizar baño maría a 37° C por 3 a 5 minutos.
● Para el cálculo de los límites de control se sugiere utilizar el modelo “N20” u otros
similares, acto seguido aplicar un método para exclusión de aberrantes. Definidos
los límites de control estos deben ser presentados a través de un método gráfico
como por ejemplo: gráficos de Levey–Jennings.
● Graficar los resultados de cada control y corrida analítica, manteniendo registro de
la evaluación diaria e histórica del CCI.

5.- DESARROLLO DE ACCIONES (PROCEDIMIENTO) RESPONSABLE

I.-PRE ANALITICO:
Personal Técnico,
Tecnólogo Medico.
2. Muestra Plasma :

⮚ Verificar la solicitud
⮚ Realizar la recolección de muestra (sangre venosa), de
acuerdo al protocolo establecido, usando las medidas
de Bioseguridad correspondiente.
⮚ Llenar adecuadamente el tubo
⮚ Identificar las muestras
⮚ Rotular los tubos para el proceso.
 II.-ANALITICO: Tecnólogo Medico

6. Centrifugar las muestras por 15 min a 2000-2500 rpm para

obtener el plasma

7. Colocar las muestras codificadas a bordo del equipo

8. Iniciar el proceso

9. El equipo obtendrá los resultados de las pruebas solicitadas

10. El analizador emitirá el resultado respectivo desde la

computadora del equipo

III.-POSTANALITICO: Tecnólogo medico

6. El tecnólogo medico revisa los resultados emitidos

7. Los resultados discordantes se indagarán referente a la

muestra con el área de procedencia (toma de muestras,
emergencia y respectivo pabellón de hospitalización), para
tomar las medidas correctivas.

8. Los resultados son validados por el tecnólogo responsable

del área.

9. Los resultados validados van directamente al sistema ESI del

hospital.

10. Descartar las muestras de acuerdo a las normas de

bioseguridad vigentes.

10.1. LIMITACIONES/INTERFERENCIAS.

● La mala toma de muestra debido a la cantidad de citrato de sodio en relación con la muestra
del paciente puede tener interferencias en los resultados (prolongación del TP)
10.2. INTERVALOS DE REFERENCIA.

● Si no está tomando anticoagulantes: el rango normal es de 14 a 16 segundos. INR: 0.8 a

1.1 seg.
● Si está tomando anticoagulantes: el rango normal es de 35 a 40 segundos. INR: 2.0 a 3.0
seg
● FACTORES DE COAGULACIÓN EVALUADOS: Vía extrínseca Sensible a los factores de la
coagulación II, V, VII y X
● SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES: Si no está tomando anticoagulantes y el
resultado de INR está por encima de 1.1 significa que su sangre está coagulando más
lentamente de lo normal, esto puede deberse a:
○ Trastornos hemorrágicos
○ Nivel bajo de vitamina K: vitaminas k dependientes X, IX,VII y II
 ○ Trastornos en los cuales las proteínas que controlan la coagulación de la sangre se
vuelven demasiado activas
○ Enfermedades hepáticas
○ Déficit de factor X
○ Coagulación intravascular diseminada: formación excesiva de trombina

6.- REFERENCIAS (NORMAS DE BIOSEGURIDAD, NORMAS O DIRECTIVAS MINSA,

ESSALUD, OMS, IFCC, CLIA, etc.).
2. Manual de la Calidad del hospital IV-EsSalud Huancayo

2. Manual de Procedimientos de Laboratorio, Minsa, 4ta edición, 2014.

3. CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex- NCCLS) - Protocol EP15-A, 2001 / EP
17A, 2004.

7.- ANEXOS

● Manual de toma de muestras

● Manual del equipo STA COMPACT MAX 3

8.- LISTA DE DISTRIBUCIÓN:

✔ Jefatura de Departamento Ayuda al Diagnóstico y Tratamiento.

✔ Jefatura del Servicio de Patología Clínica
✔ Tecnólogo Médico, Coordinador del Servicio de Laboratorio Clínico
✔ Servicio de Hematología y Hemostasia del HNRPP-EsSalud Huancayo
✔ Archivo.

FIRMA FIRMA
……………………………. …………………………………….
INT. MARAVI ZARAYASI.T.M. LIC. T.M. COORDINADOR

………………………………………………………………
JEFE DEL SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO
 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTÁNDAR (POES)

HOSPITAL NACIONAL PROCEDIMIENTO OPERATIVO

RAMIRO PRIALE PRIALE – ESTANDARIZADO
ESSALUD HUANCAYO
VERSIÓN:
SERVICIO: LABORATORIO 01
CLÍNICO.
Proteína sérica total 10/03/24
SECCIÓN:

BIOQUIMICA

1.-OBJETIVOS:
La presente Guía tiene como finalidad establecer el procedimiento para la determinación de
proteína sérica total que mide la cantidad proteína total en la sangre como también medir la
albumina y globulina

2.-ALCANCE:
Pacientes de Consultorios Externos, Hospitalizados, Emergencias que acuden al Hospital Nacional
Ramiro Priale Priale - Essalud Huancayo.

3.-RESPONSABILIDAD:
Personal Tecnólogo Médico del Servicio de Patología Clínica.- servicio de bioquímica

4.-DEFINICIONES (BREVE MARCO TEÓRICO):

La albúmina se produce principalmente en el hígado. Ayuda a evitar que la sangre se escape de los
vasos sanguíneos. La globulina está compuesta de diferentes proteínas llamadas tipo alfa, beta y
gamma. Algunas globulinas son producidas por el hígado, y otras por el sistema inmunitario. Ciertas
globulinas se ligan con la hemoglobina. Otras globulinas transportan metales en la sangre, como el
hierro, y ayudan a combatir infecciones.

4.1.-PRINCIPIO
4.2.-REQUISITOS
● PACIENTE
Paciente de consulta externa que acude al Servicio de laboratorio, pacientes del servicio de
emergencia y pacientes hospitalizados.

● MUESTRA
o Tipo de Muestra:
Sangre en tubo amarillo con gel separador

o Estabilidad/Conservación/Acondicionamiento

Plasma
el tubo contiene dos aditivos:
1) Un coagulante que se rocía uniformemente en la superficie interna del tubo, lo que
acortará en gran medida el tiempo de coagulación y
2) un gel de separación que se solidifica después de la centrifugación y separa
completamente el suero del plasma como una barrera. Esa barrera previene efectivamente
el intercambio de sustancias entre el suero sanguíneo y las células. Esto significa que la
muestra se puede centrifugar en el laboratorio y el suero separado se puede extraer
fácilmente. El tubo mantiene el suero estable durante más de 48 horas y no se producirá
ningún cambio obvio en sus características bioquímicas y composiciones químicas.
Tiempo para la retracción completa del coágulo: 20-25 min.
Velocidad de centrifugación: 3500-4000 r/m
Tiempo de centrifugación: 5 min.

● CRITERIOS DE RECHAZO
• Dieta y ayuno La dieta y la ingesta de líquidos pueden tener influencia en varias magnitudes
bioquímicas y hematológicas. Tras una comida se observan notables variaciones en la
concentración de diversos componentes, glucosa, urea, triglicéridos, recuento leucocitario...,
que aumentan considerablemente sobre los valores prepandriales, así como un incremento en
las concentraciones de quilomocrones circulantes que pueden dar lugar a interferencias en la
medida de algunos parámetros. Por otra parte, la desnutrición y el ayuno prolongado también
pueden alterar algunas magnitudes de manera clínicamente relevante (incrementos de urea,
ácido úrico, creatinina...).

4.3.- MATERIAL NECESARIO

● Materiales para toma de muestra:
○ Algodón
○ Alcohol
○ Agujas
○ Tubo amarillo con gel separador
○ Esparadrapo
● Controles y calibradores
 ● Micropipeta
● Punteras
● Crioviales

4.4.- EQUIPO NECESARIO

● Centrífuga
4.5.- REACTIVOS A EMPLEAR
Sulfato de cobre II 12 mmol/L
Tartrato de sodio y potasio 32 mmol/L
Yoduro de potasio 30 mmol/L
Hidróxido de sodio 600 mmol/L
pH 13,5 ± 0,1 a 20 °C
4.6.-CALIBRACIÓN:
Es necesaria la calibración. Se recomienda un calibrador de suero o un patrón acuoso, con
un valor asignado trazable a un patrón principal (p. ej., NIST o IRMM). Para obtener
información sobre la frecuencia de calibración de instrumentos automatizados, consulte las
especificaciones del fabricante del instrumento. Sin embargo, la estabilidad de la
calibración está supeditada al rendimiento óptimo del instrumento y el uso de reactivos
que se hayan almacenado como se recomienda en la sección de estabilidad y
almacenamiento de este prospecto del envase. Se recomienda recalibrar en cualquier
momento si se produce uno de los siguientes acontecimientos:
• El número de lote del reactivo cambia.
• Se realiza mantenimiento preventivo o se sustituye un componente crítico.
• Los valores de control han cambiado o se encuentran fuera de intervalo y un nuevo frasco
de control no rectifica el problema.
4.7.-CONTROL DE CALIDAD:
● Para asegurar un adecuado control de calidad, se deben llevar a cabo controles normales y
anómalos con valores analizados como muestras desconocidas:
• Al menos una vez al día o según lo establecido por el laboratorio.
• Cuando se utilice un nuevo frasco de reactivo.
• Después de realizarse mantenimiento preventivo o sustituirse un componente crítico.
• Con cada calibración. Los resultados de los controles que queden fuera de los límites
superior o inferior de los intervalos establecidos indican que el análisis puede estar fuera
de los límites del intervalo de control. Se recomiendan las siguientes acciones correctivas
en estas situaciones:
• Repita los mismos controles.
• Si los resultados de los controles repetidos están fuera de los límites, prepare suero de
control fresco y repita la prueba.
• Si los resultados siguen estando fuera de control, recalibre con calibrador nuevo y repita
la prueba.
• Si los resultados siguen estando fuera de control, realice una calibración con reactivo
recién preparado y repita la prueba.
• Si los resultados siguen estando fuera de control, póngase en contacto con los servicios
técnicos o su distribuidor local.
5.- DESARROLLO DE ACCIONES (PROCEDIMIENTO) RESPONSABLE

I.-PRE ANALITICO:
Personal Técnico,
Tecnólogo Medico.
3. Muestra Plasma :

⮚ Verificar la solicitud
⮚ Realizar la recolección de muestra (sangre venosa), de
acuerdo al protocolo establecido, usando las medidas
de Bioseguridad correspondiente.
⮚ Identificar las muestras
⮚ Rotular los tubos para el proceso.

II.-ANALITICO: Tecnólogo Medico

Tiempo para la retracción completa del coágulo: 20-25 min.

Velocidad de centrifugación: 3500-4000 r/m
Tiempo de centrifugación: 5 min.
Colocar las muestras codificadas a bordo del equipo

Iniciar el proceso

equipo obtendrá los resultados de las pruebas solicitadas

El analizador emitirá el resultado respectivo desde la

computadora del equipo

III.-POSTANALITICO: Tecnólogo medico

11. El tecnólogo medico revisa los resultados emitidos

12. Los resultados discordantes se indagarán referente a la

muestra con el área de procedencia (toma de muestras,
emergencia y respectivo pabellón de hospitalización), para
tomar las medidas correctivas.

13. Los resultados son validados por el tecnólogo responsable

del área.
 14. Los resultados validados van directamente al sistema ESI del
hospital.

15. Descartar las muestras de acuerdo a las normas de

bioseguridad vigentes.

15.1. LIMITACIONES/INTERFERENCIAS.

1. Se llevaron a cabo estudios para determinar el nivel de interferencia debida a la

hemoglobina, bilirrubina y lipemia en un analizador químico clínico automatizado bien
mantenido. Se obtuvieron los siguientes resultados: Hemoglobina: No hubo interferencias
debido a la hemoglobina hasta 265 mg/dL. Bilirrubina libre: No hubo interferencias debido
a la bilirrubina hasta 211 µmol/L (12,3 mg/dL). Bilirrubina conjugada: No hubo
interferencias debido a la bilirrubina hasta 211 µmol/L (12,3 mg/dL). Lipemia: No hubo
interferencias debido a la lipemia al medirlo bicromáticamente, medido como absorbancia
a 630 nm, hasta 1,046 AU.
2. Young DS5 ha publicado una amplia lista de medicamentos y sustancias que pueden
interferir con este análisis.

15.2. INTERVALOS DE REFERENCIA.

60 - 83 g/L (6,0 - 8,3 g/dL)4 Los valores mencionados deben servir solo de referencia.
Se recomienda que cada laboratorio verifique este intervalo o derive un intervalo de
referencia para la población a la que atiende.

6.- REFERENCIAS (NORMAS DE BIOSEGURIDAD, NORMAS O DIRECTIVAS MINSA,

ESSALUD, OMS, IFCC, CLIA, etc.).
1. Manual de la Calidad del hospital IV-EsSalud Huancayo
2. Manual de Procedimientos de Laboratorio, Minsa, 4ta edición,
2014.}
3. [Link]
Assets/CDD/manuals/[Link]

7.- ANEXOS

● Reactivo de Proteínas Totales

8.- LISTA DE DISTRIBUCIÓN:

✔ Jefatura de Departamento Ayuda al Diagnóstico y Tratamiento.

✔ Jefatura del Servicio de Patología Clínica
✔ Tecnólogo Médico, Coordinador del Servicio de Laboratorio Clínico
✔ Servicio de Hematología y Hemostasia del HNRPP-EsSalud Huancayo
✔ Archivo.

FIRMA FIRMA
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INT. MARAVI ZARAYASI.T.M. LIC. T.M. COORDINADOR

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JEFE DEL SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO
 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTÁNDAR (POES)

HOSPITAL NACIONAL PROCEDIMIENTO OPERATIVO

RAMIRO PRIALE PRIALE – ESTANDARIZADO
ESSALUD HUANCAYO
VERSIÓN:
SERVICIO: LABORATORIO 01
CLÍNICO.
GRUPO SANGUINEO 10/03/24
SECCIÓN:

BIOQUIMICA

1.-OBJETIVOS:
La capacidad de determinar el grupo sanguíneo de la sangre es un instrumento inestimable en los
campos de medicina y criminología. Usando este kit, los estudiantes van a realizar la misma técnica
que se utiliza para la determinación del grupo sanguíneo. Para ello se mezcla la sangre con el
Antisuero A, Anti-suero B y el Anti-suero D para ver si se produce la reacción de aglutinación que
nos indicará el grupo sanguíneo. Mientras el procedimiento de prueba usado en este equipo es igual
al utilizado con sangre verdadera, este kit contiene sangre sintética y antisuero sintético. Esto
elimina cualquier riesgo asociado con la exposición a la sangre real o productos de sangre. Estos
materiales pueden ser desechados después de su empleo. No existen materiales biológicos en la
sangre sintética o en antisuero sintético que pueda causar riesgos para la salud cuando sean
desechados.

2.-ALCANCE:
Pacientes de Consultorios Externos, Hospitalizados que acuden al Hospital Nacional Ramiro Priale
Priale - Essalud Huancayo.

3.-RESPONSABILIDAD:
Personal Tecnólogo Médico del Servicio de Laboratorio Clínica y Patología - servicio de Hematologia

4.-DEFINICIONES (BREVE MARCO TEÓRICO):

la determinación del factor RH y los grupos sanguíneos ABO. Para la realización se tomaron como
base los fundamentos teóricos sobre la reacción antígeno- anticuerpo, grupos sanguíneos y
composición sanguínea. En la primera parte, se utilizó la mina de vidrio pasillos de 4 x 4 los
cuales se marcaron de formas diferentes a un extremo (anti-A, anti-B, anti-D),
posteriormente se agregó en cada pocillo una muestra de sangre obtenida de la punción venosa. A
cada muestra se le agregó una gota de su respectivo suero (anti-A un suero anti-A y Anti -D), se
mezcló con un palillo y se observó los cambios causados por la reacción antígeno- anticuerpo; de
este modo se determinó el grupo sanguíneo y la determinación del factor RH de las distintas
muestras, teniendo claro que cuando la muestra contiene el antígeno Anti-A y se le adiciona suero
del mismo antígeno se presenta aglutinamiento, de lo contrario la muestra se mantiene. En
cuanto a la determinación de RH, si se presenta aglutinamiento es positivo (+) y si no, es
negativo (-).

4.1.-PRINCIPIO
ANTÍGENO

Un antígeno es una sustancia extraña que proviene del exterior o del ambiente, puede ser una
bacteria, sustancia química, virus o polen. Esto provoca el inicio dela respuesta inmunitaria en la
que se generan anticuerpos que tratan de combatirla debido a que el sistema inmune de la persona
no detecta o reconoce la sustancia.

ANTICUERPO

Es una proteína producida por el sistema inmunitario del cuerpo cuando detecta la presencia de
una sustancia extraña y/o dañina, es decir, un antígeno. Es importante entender que cada
antígeno es diferente y por consiguiente defiende al organismo de un tipo específico de antígeno.

REACCIÓN ANTÍGENO-ANTICUERPO

Al poner en contacto un antígeno con un anticuerpo específico se produce una reacción en la que
se unen mediante enlace no covalente. Esta reacción produce el desencadenamiento de una serie
de actividades o procesos que permiten la neutralización o eliminación del antígeno.

Algunas de las reacciones principales entre antígenos y anticuerpos son: - Neutralización: se

caracteriza por la neutralización de las toxinas, virus coenzimas. Esto ocurre con la unión de
los receptores del anticuerpo al antígeno, de manera que se bloquea la acción de la sustancia
en el tejido invadido.

- Precipitación: “ocurre cuando se combina un anticuerpo, por lo menos divalente, con un

antígeno soluble y esto conlleva a la formación de agregados que precipitan”.

- Aglutinación: se caracteriza por la formación de grumos o agregados porra aglomeración de

células, esto ocurre cuando antígeno partícula reacciona con su anticuerpo específico.

GRUPOS SANGUÍNEOS

Son los grupos que se determinan o se forman por la presencia o ausencia desiertos antígenos en
las membranas de los eritrocitos. Las sangres se pueden dividir en diversos grupos y tipos:

SISTEMA ABO

En este grupo sucede que “en los eritrocitos de diferentes personas diferentes personas hay 2
tipos de antígenos relacionados entre sí, el antígeno A y el antígeno B”.

Estos antígenos se denominan aglutinógenos pues cuando hay incompatibilidad de sangre en una
transfusión sanguínea, al reaccionar los antígenos de los eritrocitos transfundidos con los
anticuerpos queso encuentran en el ´plasma de la persona que recibe la sangre, ocurre
una aglutinación (agrupación) y destrucción de los hematíes transfundidos. “Las sangres se
clasifican en 4 grupos principales dependiendo de la presencia o ausencia de estos 2 antígenos o
aglutinógenos en la superficie de los hematíes:
Sangre de tipo O: Cuando los eritrocitos no tienen ni el antígeno A ni el B.

Sangre de tipo A: Cuando los eritrocitos sólo tienen el antígeno A.

Sangre de tipo B: Cuando los eritrocitos sólo tienen el antígeno B.

Sangre de tipo AB: Cuando los eritrocitos tienen los 2 antígenos, A y B”.

SISTEMA RH

La principal diferencia entre el sistema ABO y el sistema RH radica en que las aglutininas que
causan reacciones de transfusión se desarrollan espontáneamente, mientras que en el sistema
Rh no sucede así. En este último la persona primero debe exponerse a el antígeno Rh “antes
de que se formen suficientes aglutininas para causar una reacción por transfusión importante”.
En este sistema los eritrocitos pueden tener diferentes antígenos, sin embargo, el más frecuente es
el antígeno D, este tiene mayor prevalencia en la población. “Se considera que toda persona cuyos
hematíes posean el antígeno de tipo D es del grupo Rh +, mientras que las personas cuyos hematíes
no lo tienen son del grupo Rh-”

4.2.-REQUISITOS
● PACIENTE
Paciente de consulta externa que acude al Servicio de laboratorio, pacientes del servicio de
emergencia y pacientes hospitalizados.

● MUESTRA
o Tipo de Muestra:
Sangre en tubo lila con EDTA

● CRITERIOS DE RECHAZO

4.3.- MATERIAL NECESARIO

o Estabilidad/Conservación/Acondicionamiento

SANGRE TOTAL
Vidriería y Otros:
- Placa de vidrios con pacillos 4x4
- Tubos EDTA
- Palillos
- Algodón
●Reactivos:

Sueros: ➢Anti –A· ➢Anti -B ➢Anti –D

4.6.-CALIBRACIÓN:

5.- DESARROLLO DE ACCIONES (PROCEDIMIENTO) RESPONSABLE

I.-PRE ANALITICO:
Personal Técnico,
Tecnólogo Medico.
4. Muestra Plasma :

⮚ Verificar la solicitud
⮚ Realizar la recolección de muestra (sangre venosa), de
acuerdo al protocolo establecido, usando las medidas
de Bioseguridad correspondiente.
⮚ Identificar las muestras
⮚ Rotular los tubos para el proceso.

II.-ANALITICO: Tecnólogo Medico

Debe disponer de 4 pocillos en placa de vidrio (uno por muestra de

sangre). Con una micro pipeta suministrada colocar 1 o 2 gotas de la
sangre. Es conveniente que se identifique cada portaobjeto con la
muestra a analizar.

MUY IMPORTANTE: Todos los alumnos de un mismo grupo utilizan

la misma micro pipeta para depositar las gotas de sangre.

2. Añadir 1 o 2 gotas de Anti-suero A (líquido azul) en las gotas de

sangre.

3. Añadir 1 o 2 gotas de Anti-suero B (líquido amarillo) en las gotas

de sangre.

4. Añadir 1 o 2 gotas de Anti-suero D (Rh) (líquido transparente) en

las gotas de sangre.

5. Esperar 1 minuto. Utilizando un palillo diferente para cada

reacción, mezclar las gotas de sangre con las de Anti-suero durante
20 segundos. Evitar la contaminación entre reacciones.

6. Examinar las mezclas, si se forman gránulos, la aglutinación ha

tenido lugar. Si por el contrario la mezcla es homogénea, no hay
aglutinación.

OBSERVACIÓN: La reacción de aglutinación Rh+ es diferente a la que

observamos en los grupos A y B, se forman grumos, pero se
mantiene el color rojo en toda la mezcla que puede llevar a error.
 7. Debe responder a la tabla 1 con SI o NO. SI, cuando tiene lugar la
reacción de aglutinación. Una reacción de aglutinación positiva
indica el grupo sanguíneo.

III.-POSTANALITICO: Tecnólogo medico

16. El tecnólogo medico revisa los resultados emitidos

17. Los resultados discordantes se indagarán referente a la

muestra con el área de procedencia (toma de muestras,
emergencia y respectivo pabellón de hospitalización), para
tomar las medidas correctivas.

18. Los resultados son validados por el tecnólogo responsable

del área.

19. Los resultados validados van directamente al sistema ESI del

hospital.

20. Descartar las muestras de acuerdo a las normas de

bioseguridad vigentes.

20.1. LIMITACIONES/INTERFERENCIAS.

6.- REFERENCIAS (NORMAS DE BIOSEGURIDAD, NORMAS O DIRECTIVAS MINSA,

ESSALUD, OMS, IFCC, CLIA, etc.).
1. Manual de la Calidad del hospital IV-EsSalud Huancayo
2. Manual de Procedimientos de Laboratorio, Minsa, 4ta edición,
2014.}
3. [Link]
Assets/CDD/manuals/[Link]

7.- ANEXOS

● Reactivo de Proteínas Totales

8.- LISTA DE DISTRIBUCIÓN:

✔ Jefatura de Departamento Ayuda al Diagnóstico y Tratamiento.

 ✔ Jefatura del Servicio de Patología Clínica
✔ Tecnólogo Médico, Coordinador del Servicio de Laboratorio Clínico
✔ Servicio de Hematología y Hemostasia del HNRPP-EsSalud Huancayo
✔ Archivo.

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INT. MARAVI ZARAYASI.T.M. LIC. T.M. COORDINADOR

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