Reacción de Benedict
En química, la reacción o prueba de Benedict identifica azúcares reductores
(aquellos que tienen su OH libre del C anomérico), como la lactosa, la glucosa, la
maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene
color azul a Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-
naranja.
El reactivo de Benedict consta de:
Sulfato cúprico;
Citrato de sodio;
Carbonato Anhidro de Sodio.
Además se emplea NaOH para alcalinizar el medio.
El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico
(otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo
Aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como
un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).
El medio alcalino facilita que el azúcar esté de forma lineal, puesto que el azúcar
en solución forma un anillo de piranósico o furanósico. Una vez que el azúcar está
lineal, su grupo aldehído puede reaccionar con el ion cúprico en solución.
En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetohexosa) es capaz
de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba: en un
medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando por un
intermediario enólico) a glucosa (que es capaz de reducir al ion cúprico).
Los disacáridos como la sacarosa (enlace α(1 → 2)O) y la trehalosa (enlace
α(1→1)O), no dan positivo puesto que sus OH del C anoméricos están siendo
utilizados en el enlace glucosídico.
En resumen, se habla de azúcares reductores cuando tienen su OH del C
anomérico libre, y éstos son los que dan positivo en la prueba de Benedict.
Algunos azúcares tienen la propiedad de oxidarse en presencia de agentes
oxidantes suaves como el ion Fe3+ o Cu2+. Esta característica radica en la
presencia de un grupo carbonilo libre, el cual es oxidado y genera un grupo
carboxilo. Por lo tanto, aquellos azúcares con un grupo carbonilo libre son
llamados azúcares reductores y aquellos en los que el grupo carbonilo se
encuentra combinado en unión glicosídica se conocen como azúcares no
reductores. Existen varias reacciones químicas que permiten determinar si se está
en presencia de un azúcar reductor o no. La prueba de Benedict es una de ellas y
se basa precisamente en la reacción o no de un azúcar con el ion Cu2+. El
reactivo 21 de Benedict contiene soluciones de carbonato de sodio, sulfato de
cobre, y citrato de sodio. El Na2CO3 confiere a la solución un pH alcalino
necesario para que la reacción pueda llevarse a cabo. El citrato de sodio mantiene
al ion Cu2+ en solución ya que tiene la propiedad de formar complejos coloreados
poco ionizados con algunos de los metales pesados. Con el cobre produce un
complejo de color azul. Si se le agrega al reactivo una solución de azúcar reductor
y se calienta hasta llevar la mezcla a ebullición, el azúcar en solución alcalina a
elevadas temperaturas se convertirá en D-gluconato y su ene-diol, rompiéndose
luego en dos fragmentos altamente reductores, los cuales con sus electrones
expuestos, reaccionarán con el Cu++. Se obtiene entonces un azúcar oxidado y
dos iones Cu+. Posteriormente el Cu+ producido reacciona con los iones OH-
presentes en la solución para formar el hidróxido de cobre: Cu + + OH - → Cu(OH)
(precipitado amarillo)
El hidróxido pierde agua 2Cu (OH) → Cu2O (precipitado rojo ladrillo) + H2O
La aparición de un precipitado amarillo, anaranjado, o rojo ladrillo evidencia la
presencia de un azúcar reductor.
2.- Identificación de polisacáridos: identificación de almidón
mediante la prueba del Lugol
En solución acuosa, la amilosa forma estructuras helicoidales lineales y la
amilopectina ramificadas, gracias a la formación de puentes de H entre los grupos
OH de la glucosa y las moléculas de H2O. Si a una disolución de almidón de le
añade I, esta toma un color azul intenso. Esta característica es específica del
almidón, debido a su estructura, y se debe a la adsorción del I por las cadenas
helicoidales, especialmente de la amilosa. Por tanto no es una reacción química,
sino una interacción física reversible por métodos físicos. Esto se puede
comprobar fácilmente, pues al calentar la mezcla, el color azul desaparece, y al
enfriarla vuelve a aparecer.
1. Reacción de Molisch
La presencia de carbohidratos en una muestra se pone de manifiesto por la
reacción de Molisch, que a cierto punto es la reacción universal para cualquier
carbohidrato. Se basa en la acción hidrolizante y deshidratante del ácido sulfúrico
sobre los hidratos de carbono. En dicha reacción el ácido sulfúrico cataliza la
hidrólisis de los enlaces glucosídicos de la muestra y la deshidratación afurfural
(en las pentosas) o hidroximetilfurfural (en las hexosas).Estos furfurales se
condensan con el alfa naftol del reactivo de Molisch (reacción de Molisch) dando
un producto coloreado.
2. Reacción de Benedict
Una de las reacciones más comunes en la identificación de carbohidratos es la
reacción de Benedict. Esta reacción es específica para azúcares congrupo
reductores libres (C=O).Todos los monosacáridos poseen un grupo reductor libre.
Los disacáridos maltosa y lactosa tienen grupos reductores libres, pero la
sacarosa no los posee, ya que se pierden los grupos reductores de sus
componentes cuando ésta es formada. Se basa en la capacidad del carbohidrato
de reducir el+2Cuen un medio alcalino. Este+1Cuse oxida y precipita en forma de
OCu2, lo que proporciona la coloración positiva de la reacción. La coloración
dependerá de la concentración de óxido de cobre y ésta a su vez de la reducción
del cobre; va desde verde, amarillo, anaranjado o rojizo, dependiendo de la
coloración.
3. Reacción de Seliwanoff
Los carbohidratos se clasifican como cetosas o aldosas. Vale decir, que las
cetosas en el carbono 2 tienen una función cetona, que en presencia de un ácido
fuerte producen rápidamente derivados furfúricos que reaccionan con un difenol
llamado resorcina que está contenido en el reactivo de Seliwanoff. La sacarosa
(un disacárido formado por glucosa y fructosa) y la inulina (un polisacárido de la
fructosa) dan positiva la reacción, ya que el HCl del reactivo provoca en caliente la
hidrólisis del compuesto liberando fructosa (responsable de la reacción positiva).
