UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA
ESCUELA DE INGENIERÍA AMBIENTAL
PRÁCTICA Nº 06:
“DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE Fe”
ESTUDIANTE
IGLESIAS PÉREZ NICOL ZARAÍ
EXPERIENCIA CURRICULAR
ANÁLISIS INSTRUMENTAL
DOCENTE COORDINADOR
Dr. CRUZ MONZÓN, ALFREDO
CICLO - SECCIÓN: VI - A
2024
PRÁCTICA N.º 06
DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE Fe
I. OBJETIVOS
- Cuantificar el Fe total de una muestra acuosa, utilizando la espectrofotometría.
- Evaluar la recta de calibrado obtenida para Fe total.
II. FUNDAMENTO TEÓRICO
Espectrofotometría
La espectrofotometría es una técnica analítica que permite determinar la
concentración de un compuesto en solución , a través de un instrumento que emite un
haz de luz sobre algún compuesto , midiendo la absorbancia y/o transmitancia de este
. El principio se basa en que las moléculas absorben las radiaciones electromagnéticas
, la luz absorbida o transmitida a una cierta longitud de onda es proporcional a la
concentración del material . La mayoría de las moléculas absorben luz , pero si no
fuera así , se pueden mezclar con otros reactivos para que este tenga una reacción
química que pueda ser detectada y así también conocer la concentración , es por ello
que el espectrofotómetro se vuelve tan útil , ya que puede detectar una amplia gama
de materiales (Viresa, 2022).
Ley de Lambert-Beer
La Ley de Lambert-Beer establece que la absorbancia de una muestra , es
decir , la cantidad de luz absorbida por la misma es directamente proporcional a la
concentración del analito y a la longitud del camino óptico . Por tanto , la curva de
calibración , que se obtiene siguiendo esta ley , refleja una relación lineal entre
absorbancia y concentración , y nos permite obtener un cálculo realmente preciso
(TCM, 2023).
Curva de calibración
Una curva de calibración es un gráfico que representa la relación entre la
respuesta de un instrumento de medición y la concentración de un analito en una serie
de estándares conocidos . Este gráfico suele ser una línea recta o curva que se ajusta a
los puntos de datos obtenidos a partir de las mediciones . La ecuación de esta curva
permite interpolar o extrapolar la concentración de un analito desconocido en una
muestra (Joselynne, 2024).
El Hierro actúa como un eficaz agente reductor y puede oxidarse a diferentes
estados de oxidación , como 2+ , 3+ o incluso 6+ , dependiendo de las condiciones .
En la mayoría de sus compuestos , se encuentra como ion ferroso , los cuales son
unidades químicamente distintas . Los compuestos ferrosos suelen presentar colores
que van desde un amarillo claro hasta un tono café verdoso oscuro , mientras que el
ion ferroso hidratado , es de un verde pálido y se encuentra tanto en soluciones como
en diversos compuestos (Dominguez , 2023).
Límites Máximos permitidos
En el caso de la normativa peruana, según el Decreto Supremo N°
004-2017-MINAM establece los estándares de Calidad Ambiental (ECA) para el agua
en el Perú , definiendo límites máximos para varios parámetros , entre ellos el hierro ,
con el fin de resguardar la salud pública y la calidad del agua . Según esta normativa ,
el límite máximo permitido de hierro en agua es de 0.3 mg/L (MINAM , 2017).
III. MATERIALES Y REACTIVOS
1. Preparación de 250 mL de Solución Stock de Fierro:
Mezclar 5 mL de H2SO4 cc en 50 mL de agua destilada. Disolver en ella 0.1000 de
(NH4)2Fe(SO4)2.6H2O pureza 98.6%. Adicionar gota KMnO4 0.1 N hasta color rosa
débil. Diluir a 100 mL con agua destilada. La solución es teóricamente de 140.5336
ppm Fe.
2. Solución de Cloruro de Hidroxilamonio (NH4ClO):
Pesar 2g de sal y aforar a 10 mL con agua destilada. Sólo se conserva por 7 días.
3. Solución de Cloruro 1, 10-cloruro de fenantrolina (C12H9CIN2.H2O):
Pesar 0.125g de la sal y llevar a 25 mL con agua destilada. Sólo se conserva por 7
días.
4. Preparación de 250 mL de Ácido Sulfúrico 1M:
Tomar 13.5 mL H2SO4 cc (sp = 1.84; % = 98), y aforar a 250 mL con agua destilada.
5. Preparación de 100 mL de Buffer Acetato de Amonio - Ácido Acético Glacial:
Pesar 40g CH3COONH4 y adicionar 50 mL de CH3COOH glacial (sp = 1.06; mínimo
96%), aforando a 100 mL con agua destilada.
6. Preparación de 100 mL de Buffer de Acetato de Sodio - Ácido Acético Glacial:
Pesar 27.40 g CH3COONa.3H2O y adicionarle 11.50 mL de CH₃COOH glacial (sp
1.06 mínimo 96%), aforando a 100 mL con agua destilada.
7. Preparación de 50 mL de una Solución de ácido ascórbico al 10%:
Pesar 5 g de C6H8O6 y aforar a 50 mL con agua destilada.
8. Preparación de 100 mL de Solución de NaOH 2M:
Pesar 8 g de NaOH y aforar a 100 mL con agua destilada.
IV. PROCEDIMIENTO
Preparación de recta de calibración de Fe:
1. Tomar 05 fiolas volumétricas de 50 mL, numerarlas y colocar en ellas: 0; 100;
200; 300 y 400 µL de la solución stock de Fe preparada.
2. Añadir agua destilada a c/u hasta aproximadamente 25 mL.
3. Colocar 2 mL de solución de CH3COONH4 – CH3COOH glacial.
4. Adicionar 1 mL de cloruro de hidroxilamonio.
5. Si se sospecha presencia de PO43- agregar 1 mL de ácido ascórbico.
6. Verificar un pH entre 3 y 4. De ser necesario ajustar con H2SO4 1M o NaOH
2M.
7. Adicionar 2 mL del reactivo cloruro de 1.10 Fenantrina.
8. Aforar a la marca con agua destilada.
9. Dejar reaccionar durante 10 min. a oscuras.
10. Fijar la longitud de onda 510 nm correspondiente al Fe.
11. Usando la fiola N.º 1 (blanco) calibrar el espectrofotómetro a cero de
absorbancia.
12. Proceder a leer la absorbancia de cada solución estándar.
13. Graficar la Abs vs [Fe] y obtener la ecuación de recta que cumple la Ley de
Beer.
Preparación y medición de la muestra:
1. La muestra debe ser incolora, filtrar si es necesario con carbón activado para
quitarle la coloración o de lo contrario centrifugarla.
2. Colocar en una fiola de 50 mL una cantidad determinada de muestra (10 mL),
previamente tratada según el paso anterior.
3. Adicionar cada uno de los reactivos al igual que a las soluciones patrón.
4. Si la absorbancia estuviera fuera del rango de la curva de calibración,
entonces se debe tomar un volumen menor de muestra, (o mayor si la
absorbancia es muy pequeña).
5. Con el valor de absorbancia determinar a partir de la curva de calibración la
concentración de Fe presente en la fiola, para luego multiplicar por el factor
de dilución de la muestra. De esta manera obtenemos las ppm Fe presentes en
el agua examen.
Para la presente marcha tenemos:
𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑖𝑑𝑎
𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒(𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎) = 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 (𝑔𝑟á𝑓𝑖𝑐𝑎) 𝑥 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑎𝑙í𝑐𝑢𝑜𝑡𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
50
𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 (𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎) = 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 (𝑔𝑟á𝑓𝑖𝑐𝑎) 𝑥 10
V. CÁLCULOS Y RESULTADOS
Realizar los cálculos para la preparación de los estándares de Fe.
1. Determinar la [Fe] real para un peso real de 0.1756 g de (𝑁𝐻4)2𝐹𝑒(𝑆𝑂4)2. 6𝐻2𝑂 del
98.6% de pureza, el cual finalmente fue aforado a 100 mL con agua destilada.
𝑃𝑀(𝑁𝐻 ) 𝐹𝑒(𝑆𝑂 ) . 6𝐻2𝑂
= 391. 85 𝑔
4 2 4 2
3 2−
0.1756 (0.986) 𝑔 𝐹𝐴. 6𝐻2𝑂 𝑔 55.85 𝑔 𝐹𝑒 10 𝑚𝑔 𝑆𝑂4
[𝐹𝑒] = 0.25 𝐿
× 391.85 𝑆𝐹𝐴. 6𝐻2𝑂 𝑔
× 2−
1𝑔 𝑆𝑂4
[𝐹𝑒] = 98. 7108 𝑝𝑝𝑚
2. Determinación de los volúmenes teóricos a tomar de la solución stock preparada.
Tabla 1.
Determinación teórica del volumen inicial
Std +2
𝐹𝑒 𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙 Aforar Fe inicial (mL) a tomar µL a tomar
(mL) en stock en stock
1 0 50 98.7108 0 0
2 0.250 50 98.7108 0.1266 126.6
3 0.500 50 98.7108 0.2533 253.3
4 0.750 50 98.7108 0.3799 379.9
5 1.200 50 98.7108 0.6078 607.8
Calculando:
Std 01:
𝐶2*𝑉2 0*50
𝑉1 = 𝐶1
= 98.7108
=
𝑉1 = 0. 00 𝑚𝐿
Std 02:
𝐶2*𝑉2 0.25*50
𝑉1 = 𝐶1
= 98.7108
=
𝑉1 = 0. 1266 𝑚𝐿
Std 03:
𝐶2*𝑉2 0.50*50
𝑉1 = 𝐶1
= 98.7108
𝑉1 = 0. 2533 𝑚𝐿
Std 04:
𝐶2*𝑉2 0.75*50
𝑉1 = 𝐶1
= 98.7108
𝑉1 = 0. 3799 𝑚𝐿
Std 05:
𝐶2*𝑉2 1.20*50
𝑉1 = 𝐶1
= 98.7108
𝑉1 = 0. 6078 𝑚𝐿
3. Determinación de los volúmenes reales a tomar de la solución stock preparada.
Tabla 2.
Determinación de la concentración de Fe final con el ajuste de volumen inicial, modificado
con el error de la micropipeta que era 0, 150, 300, 450, 600.
Std µL (mL) Fe inicial (mL) Fe ppm
tomados Tomados Aforar
1 0 0 98.7108 50 0
2 147.7 0.1477 98.7108 50 0.2916
3 295.4 0.2954 98.7108 50 0.5832
4 443.1 0.4431 98.7108 50 0.8748
5 590.8 0.5908 98.7108 50 1.1664
Calculando:
Std 01:
𝐶1*𝑉1 98.7108*0
𝐶2 = 𝑉2
= 50
𝐶2 = 0 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒
Std 02:
𝐶1*𝑉1 98.7108*0.1477
𝐶2 = 𝑉2
= 50
=
𝐶2 = 0. 2916 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒
Std 03:
𝐶1*𝑉1 98.7108*0.2954
𝐶2 = 𝑉2
= 50
𝐶2 = 0. 5832 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒
Std 04:
𝐶1*𝑉1 98.7108*4431
𝐶2 = 𝑉2
= 50
𝐶2 = 0. 8748 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒
Std 05:
𝐶1*𝑉1 98.7108*0.5908
𝐶2 = 𝑉2
= 50
𝐶2 = 1. 1664 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒
4. Construir la recta de calibración para el Fierro.
Tabla 3.
Datos obtenidos las concentraciones de Fe y absorbancias
STD [Fe]real Absorbancia
1 0 0
2 0.2916 0.020
3 0.5832 0.063
4 0.8748 0.125
5 1.1664 0.161
MUESTRA 0.012
Gráfica 1.
Recta de calibrado obtenida en función a absorbancia y ppm
Gráfica 2.
Recta de calibrado modificada, tomados los puntos Stnd 2, 3 y 5.
5. Determinar la concentración de Fierro.
Tenemos:
Abs. = 0.012
𝐴𝑏𝑠.= 0.1622(𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒) − 0.029
50
𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 (𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎) = 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 (𝑔𝑟á𝑓𝑖𝑐𝑎) 𝑥 10
0. 012 = 0. 1622(𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒) − 0. 029
𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 = 0. 2528
50
𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 = 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 (𝑔𝑟á𝑓𝑖𝑐𝑎) 𝑥 10
50
𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 = 0. 2528 𝑥 10
𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 = 1. 2635
VI. CONCLUSIONES
● Mediante espectrofotometría se pudo determinar la concentración final del
hierro de la muestra, teniendo como valor de 0.632 mg/L. Comparado con los
Estándares de Calidad Ambiental (ECA) de Perú, este valor está por encima
del límite de 0,3 mg/L para aguas que solo necesitan desinfección para ser
potables, pero dentro del límite de 5 mg/L para aguas que requieren.
tratamiento avanzado y por debajo del límite de 1 mg/L para tratamiento
convencional. Lo que se puede deducir que el agua analizada merece un
tratamiento.
● La línea de calibración mostró una variación muy próxima a 1, lo cual indica
que el método utilizado es adecuado para medir el hierro. Además, se
observará una buena relación lineal en la curva de calibración entre la
absorbancia y la concentración de hierro, siempre y cuando se tome solo los 3
puntos elegidos que fueron 2,3 y 5, obteniendo la ecuación 0.1622(𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒) −
0.029, con un R² de 0.999.
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Domínguez, J., González, A., Sabio, L. (2023). Érase una vez el hierro. Real Sociedad
Española de Química. [Link]
Joselynne. (2024, Agosto 28). Que es una curva de calibración.
[Link]
Ministerio del Ambiente. (2017). Decreto Supremo N° 004-2017-MINAM que
aprueba los Estándares de Calidad Ambiental para Agua y establece
disposiciones complementarias. El Peruano.
[Link]
maximos-permisibles-lmp-efluentes-plantas-tratamiento-aguas
TCM. (2023, Diciembre 18). Ley de Lambert-Beer. El papel de la ley de
Lambert-Beer. [Link]
Viresa. (2022, Julio 11). ESPECTROFOTOMETRÍA , UN AVANCE A LA CIENCIA.
[Link]
VIII. ANEXOS
Figura 1 Figura 2:
Materiales Muestra stock en las fiolas
