UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

ESCUELA DE INGENIERÍA AMBIENTAL

PRÁCTICA N°6

DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE Fe

ALUMNA:

RODRIGUEZ SIFUENTES KIARA MARIFE

DOCENTE DE PRÁCTICA:

CRUZ MONZON JOSE ALFREDO

TRUJILLO – PERÚ

2024
I. OBJETIVOS

• Cuantificar el Fe total de una muestra acuosa, utilizando la espectrofotometría.

• Evaluar la recta de calibrado obtenida para Fe total

II. FUNDAMENTO TEORICO

Espectrofotometría. La UV/Visible detecta la absorbancia de moléculas en solución en un

rango de 190 a 700 nm, que abarca desde el cercano ultravioleta hasta el espectro visible. La

técnica se basa en la capacidad de las moléculas para absorber radiación a distintas longitudes

de onda, lo cual depende de su estructura atómica y de condiciones del medio, como la

temperatura, el pH y la fuerza iónica (Elrakaybi, 2018).

Absorbancia. Es una medida de la cantidad de luz que una sustancia absorbe cuando un haz de

luz pasa a través de ella. Se utiliza compuestos químicos analíticos para determinar la

concentración de una sustancia en una solución.

Conceptos Clave:

.Transmisión de Luz : Cuando la luz pasa a través de una muestra, parte de ella es absorbida y

el resto es transmitida. La absorbancia cuantifica la fracción de luz que es absorbida por la

muestra.

.Relación Matemática : La absorbancia está relacionada con la intensidad de la luz incidente y

la intensidad de la luz transmitida. (Díaz, 2018)

Curva de calibración. Es una gráfica utilizada en química analítica para determinar la

concentración de una sustancia en una muestra desconocida. La gráfica se construye al medir

una propiedad (como la absorbancia) en varias soluciones estándar con concentraciones

conocidas y luego usar esta relación para analizar la muestra de interés. Este método se basa en

la relación directa entre la concentración y una señal analítica específica. A partir de esta

relación, es posible calcular la concentración desconocida utilizando una ecuación matemática

(Castillo, 2021).
 Hierro (Fe). Este metal es un buen agente reductor y, dependiendo de las condiciones, puede

oxidarse hasta el estado 2+ 3+ o 6+. En la mayor parte de los compuestos de hierro está presente

el ion ferroso, hierro(II), o el ion férrico, hierro(III), como una unidad distinta. Por lo común,

los compuestos ferrosos son de color amarillo claro hasta café verdoso oscuro; el ion hidratado

Fe(H2O)62+, que se encuentra en muchos compuestos y en solución, es verde claro. Este ion

presenta poca tendencia a formar complejos de coordinación, excepto con reactivos fuertes,

como el ion cianuro, las poliaminas y las porfirinas. El ion férrico, por razón de su alta carga

(3+) y su tamaño pequeño, tiene una fuerte tendencia a capturar aniones. (Dominguez, 2023).

Límites máximos permisibles de Fe en agua. De acuerdo con el Decreto Supremo N° 004-

2017-MINAM, los Límites Máximos Permisibles (LMP) para la concentración de hierro en el

agua varían en función de la categoría de uso del agua. Para agua destinada a la producción de

agua potable (Categoría 1, subcategorías A1, A2, y A3), los límites son 0,3 mg/L, 1 mg/L, y 5

mg/L, respectivamente, dependiendo del tipo de tratamiento requerido para potabilizarla. Estos

valores están establecidos para asegurar que la concentración de hierro no represente un riesgo

significativo para la salud humana ni para el ambiente (MINAM, 2017).

III. MATERIALES Y REACTIVOS

1. Preparación de 100 mL de Solución stock de Fierro:

Mezclar 5 mL de 𝐻2 𝑆𝑂4 cc en 50 mL de agua destilada. Disolver en ella 0,1000 de

(𝑁𝐻4 )2 𝐹𝑒(𝑆𝑂4 )2 . 6𝐻2 𝑂 pureza 98,6%. Adicionar gota a gota 𝐾𝑀𝑛𝑂4 0,1N hasta color

rosa débil. Diluir a 100 mL con agua destilada. La solución es teóricamente de 140,5336

ppm Fe.

2. Solución de cloruro de hidroxilamonio (𝑁𝐻4 𝐶𝐿𝑂) :

Pesar 2 g de la sal y aforar a 10 mL con agua destilada. Sólo se conserva por 7 días.

3. Solución del 1,10-cloruro de fenantrolina (𝐶12 𝐻9 𝐶𝑙𝑁2 . 𝐻2 𝑂):

Pesar 0,125 g de la sal y llevar a 25 mL con agua destilada. Sólo conserva por 7 días.

4. Preparación de 250 mL de Ácido Sulfúrico 1M:

 Tomar 13,5 mL 𝐻2 𝑆𝑂4 cc (sp = 1,84; % = 98), y aforar a 250, mL con agua destilada.

5. Preparación de 100 mL de Buffer Acetato de Amonio - Ácido Acético Glacial:

Pesar 40g 𝐶𝐻3 𝐶𝑂𝑂𝑁𝐻4 y adicionar 50 mL de 𝐶𝐻3 𝐶𝑂𝑂𝐻 glacial (sp = 1,06; mínimo 96%),

aforando a 100 mL con agua destilada.

6. Preparación de 100 mL de Buffer de Acetato de Sodio - Ácido Acético Glacial:

Pesar 27,40 g 𝐶𝐻3 𝐶𝑂𝑂𝑁𝑎 . 3𝐻2 𝑂 y adicionarle 11,50 mL de 𝐶𝐻3 𝐶𝑂𝑂𝐻 glacial (sp 1.06

mínimo 96%), aforando a 100 mL con agua destilada

7. Preparación de 50 mL de una Solución de ácido ascórbico al 10%:

Pesar 5 g de 𝐶6 𝐻8 𝑂6 y aforar a 50 ml con agua destilada.

8. Preparación de 100 mL de Solución de NaOH 2M:

Pesar 8 g de 𝑁𝑎𝑂𝐻 a aforar a 100 mL con agua destilada.

IV. PROCEDIMIENTO.

Preparación de recta de calibración de Fe

1. Tomar 05 fiolas volumétricas de 50 mL, numerarlas y colocar en ellas: 0; 100; 200;

300 y 400 uL de la solución Stock de Fe preparada.

2. Añadir agua destilada a c/u hasta aproximadamente 25 mL.

3. Colocar 2 mL de solución de CH₃COONH₄ - CH₃COOH glacial.

4. Adicionar 1 mL de cloruro de hidroxilamonio.

5. Si se sospecha presencia de PO₄³⁻ agregar 1 mL de ácido ascórbico.

6. Verificar un pH entre 3 y 4. De ser necesario ajustar con H₂SO₄ 1M o NaOH 2M.

7. Adicionar 2 mL del reactivo cloruro de 1,10-cloruro de fenantrolina.

8. Aforar a la marca con agua destilada.

9. Dejar reaccionar durante 10 min. a oscuras.

10. Fijar la longitud de onda 510 nm correspondiente al Fe.

11. Usando la fiola N° 1 (blanco) calibrar el espectrofotómetro a cero de absorbancia.

12. Proceder a leer la absorbancia de cada solución estándar.

13. Graficar la Abs vs. [Fe] y obtener la ecuación de recta que cumple la Ley de Beer.
 Preparación y medición de la muestra:

1. La muestra debe ser incolora, filtrarla si es necesario con carbón activado para quitarle

coloración o lo contrario centrifugarla.

2. Colocar en una fiola de 50 mL una cantidad determinada de muestra (10 mL),

previamente tratada según el paso anterior.

3. Adicionar cada uno de los reactivos al igual que a las soluciones patrón.

4. Si la absorbancia estimada fuera del rango de la curva de calibración entonces debe

tomar un volumen menor de muestra o diluirla, o mayor si la absorbancia es muy

pequeña.

5. Con el valor de absorbancia determinado partir a la curva de calibración y correlacionar

el valor presente en ella, para luego multiplicar por el factor de dilución de la muestra.

De esta manera obtenemos la ppm de Fe presentes en el agua analizada.

Para la preparación de las muestras:

𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 (𝑔𝑟á𝑓𝑖𝑐𝑎) ∗ 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑖𝑑𝑎

𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 (𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎) =
𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 (𝑔𝑟á𝑓𝑖𝑐𝑎) ∗ 50
𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 (𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎) =
10

V. CÁLCULOS Y RESULTADOS

Datos experimentales:

1. Determinamos la [Fe] real para un para un peso real de 0.1014 g de

(𝑵𝑯𝟒 )𝟐 𝑭𝒆(𝑺𝑶𝟒 )𝟐 . 𝟔𝑯𝟐 𝑶 del 98.6% de pureza, el cual finalmente fue aforado a

100 mL con agua destilada.

𝑃𝑀(𝑁𝐻4)2𝐹𝑒(𝑆𝑂4)2 .6𝐻2 𝑂 = 392.14 g

𝑚𝑔 Fe 1 𝑔 𝐹𝑒 392.14 𝑆𝐹𝐴. 6𝐻2 𝑂 𝑔

𝑊(𝑁𝐻4 )2 𝐹𝑒(𝑆𝑂4)2 .6𝐻2𝑂 (𝑔) = 140,5336 𝑥 0,1𝐿 3 𝑥
𝐿 10 𝑚𝑔 Fe 55.85 𝑔 𝐹𝑒

𝑊(𝑁𝐻4 )2 𝐹𝑒(𝑆𝑂4)2 .6𝐻2𝑂 (𝑔) = 0,09867 𝑔

El reactivo se encuentra al 98.6% de pureza, entonces:

 1
𝑊(𝑁𝐻4 )2 𝐹𝑒(𝑆𝑂4 )2 .6𝐻2 𝑂 (𝑔) = 0,09867𝑔 𝑥
0.986

𝑊(𝑁𝐻4 )2 𝐹𝑒(𝑆𝑂4 )2 .6𝐻2 𝑂 (𝑔) = 0,100074 𝑔

2. Determinación de la concentración real de Fe para un peso real tomado de 0.1756g

(𝑵𝑯𝟒 )𝟐 𝑭𝒆(𝑺𝑶𝟒 )𝟐 . 𝟔𝑯𝟐 𝑶

0.1756 (0,986)𝑔 (𝑁𝐻4 )2 𝐹𝑒(𝑆𝑂4 )2 . 6𝐻2 𝑂 55.85 𝑔 𝐹𝑒 103 𝑚𝑔 Fe

[𝐹𝑒] = 𝑥 𝑥
0,25 𝐿 392.14 𝑆𝐹𝐴. 6𝐻2 𝑂 𝑔 1 𝑔 Fe

𝑚𝑔
[𝐹𝑒] = 98,6378 Fe
𝐿

[𝐹𝑒] = 98,6378 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒

3. Determinación de los volúmenes teóricos a tomar de la solución stock preparada.

𝐶1 ∗ 𝑉1 = 𝐶2 ∗ 𝑉2

o Standar 1:
𝑉1 ∗ 98,6378 = 0 ∗ 50
𝑉1 = 0 𝑚𝑙
o Standar 2:
𝑉1 ∗ 98,6378 = 0,25 ∗ 50
𝑉1 = 0,1267 𝑚𝑙
o Standar 3:
𝑉1 ∗ 98,6378 = 0,50 ∗ 50
𝑉1 = 0,2534 𝑚𝑙
o Standar 4:
𝑉1 ∗ 98,6378 = 0,75 ∗ 50
𝑉1 = 0,3802 𝑚𝑙
o Standar 5:
𝑉1 ∗ 98,6378 = 1,20 ∗ 50
𝑉1 = 0,6803 𝑚
Tabla 1.

Determinación teórica del volumen inicial

Std. [𝐹𝑒 2+ ]𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙 Aforar [𝐹𝑒]𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 𝑉𝑡𝑜𝑚𝑎𝑑𝑎𝑠 (𝑚𝐿) 𝑉𝑡𝑜𝑚𝑎𝑑𝑎𝑠 (𝑢𝐿)

Requeridos (mL) (ppm Fe)

1 0 50 98,6378 0 0

2 0,25 50 98,6378 0,1267 126,7

3 0,50 50 98,6378 0,25345 253,5

4 0,75 50 98,6378 0,3802 380,2

5 1.20 50 98,6378 0,6083 608,3

4. Determinación real de las concentraciones a los valores ajustados de volumen.

𝐶1 ∗ 𝑉1 = 𝐶2 ∗ 𝑉2

o Standar 1:
98,6378 ∗ 0 = 𝐶2 ∗ 50
𝐶2 = 0 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒
o Standar 2:
98,6378 ∗ 0,15 = 𝐶2 ∗ 50
𝐶2 = 0,2959 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒
o Standar 3:
98,6378 ∗ 0,30 = 𝐶2 ∗ 50
𝐶2 = 0,5918 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒
o Standar 4:
98,6378 ∗ 0,45 = 𝐶2 ∗ 50
𝐶2 = 0,8877 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒
o Standar 5:
98,6378 ∗ 0,60 = 𝐶2 ∗ 50
𝐶2 = 1,1836 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒
Tabla 2.

Determinación de la concentración de Fe final con el ajuste de volumen inicial

Std. 𝑉𝑡𝑜𝑚𝑎𝑑𝑎𝑠 (𝑢𝐿) 𝑉𝑡𝑜𝑚𝑎𝑑𝑎𝑠 (𝑚𝐿) [𝐹𝑒]𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 Aforar [𝐹𝑒]𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿

(ppm Fe) (mL) (ppm Fe)

1 0 0 98,6378 50 0

2 150 0,15 98,6378 50 0,2959

3 300 0,30 98,6378 50 0,5918

4 450 0,45 98,6378 50 0,8877

5 600 0,60 98,6378 50 1,1836

*Debemos saber que las micropipetas de 150 uL que utilizamos tienen un error de 2,3
ml, es por eso que, cada vez que tomemos una muestra vamos a restarle dicho volumen
de error .

Std 𝑉𝑡𝑜𝑚𝑎𝑑𝑎𝑠 (𝑢𝐿) 𝑉𝑡𝑜𝑚𝑎𝑑𝑎𝑠 (𝑚𝐿) [𝐹𝑒]𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 (ppm Fe)

1 0 0 0

2 147,7 0, 148 0,2919

3 295,4 0, 295 0,5820

4 443,10 0, 443 0,8739

5 590,8 0, 591 1,1659

5. Lecturas obtenidas en el espectrofotómetro para estándares y muestras.

Tabla 3.

Datos obtenidos las concentraciones de Fe y absorbancias

Std. Fe ppm Absorbancia

1 0 0

2 0,2919 0,017

3 0,5820 0,080

4 0,8739 0,139

5 1,1659 0,211

MUESTRA 0,023
 6. Construcción de recta de calibrado y determinación de concentración de Fe en

muestra de agua.

Grafica 1.
Recta de calibrado obtenida en función a absorbancia y ppm

RECTA DE CALIBRADO
0.25
0.211
y = 0.1867x - 0.0194
0.2 R² = 0.9681

0.139
Absorbancia

0.15

0.1 0.08

0.05
0.017
0
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4
-0.05
ppm Fe

• Determinamos la concentración de sulfatos presentes en el agua potable:

Abs: 0,023

Abs: 0.1867 (ppm Fe) -0,0194

Sustituimos en la ecuación de recta y tenemos:

0,023 = 0.1867 (ppm Fe) - 0,0194

0, 023 + 0,0194
𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 =
0,1867

𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 = 0,2271
 Multiplicamos el resultado obtenido, por el factor de dilución:

𝑚𝐿 𝑎𝑓𝑜𝑟𝑎𝑑𝑜𝑠
𝑝𝑝𝑚 Fe = 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 x 𝑚𝐿 𝑎𝑙í𝑐𝑢𝑜𝑡𝑎

50 𝑚𝐿
𝑝𝑝𝑚 Fe = 0,2271 x 10 𝑚𝐿

𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒 = 1,1355

VI. CONCLUSIONES.

• La espectrofotometría nos permitió realizar una cuantificación más precisa del hierro

total en la muestra acuosa, esto se pudo ver reflejado en los valores obtenidos en las

mediciones de absorbancia; donde a partir de eso pudimos determinar la concentración

total de Fe obteniendo un valor de 1,1355.

• La recta de calibrado mostró una variación muy cercana a 1, lo que indica que este método

utilizado es adecuado para la determinación de Fe; además se pudo observar cierta

linealidad de la curva de calibración en función a la absorbancia y la concentración de

hierro, donde obtuvimos una ecuación de 0.1867 x − 0.0194 y un R2 de 0.9681.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.

Castillo, V. (2021). Propuesta didáctica para la obtención de una curva de calibración.

Determinación de ácido acético con hidrogenocarbonato de sodio, lavavajillas

y un agitador magnético. RSEQ.

https://analesdequimica.es/index.php/AnalesQuimica/article/view/1668

Díaz, A. (2018). Espectros de absorción y cuantificación colorimétrica.

https://www.uco.es/dptos/bioquimicabiolmol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMET

RIA.pdf

Dominguez, J., González, A., Sabio, L. (2023). Érase una vez el hierro. Real Sociedad

Española de Química. https://dialnet.unirioja.es/descarga/articulo/9024836.pdf

 Elrakaybi, R., Fouahd, H., Hashim, M. (2018). The application of flame atomic

absorption for gold determination in some of its bearing rocks. American Journal

of Analytical Chemistry, v. 6, n. 5, pp. 411-421

Ministerio del Ambiente. (2017). Decreto Supremo N° 004-2017-MINAM que aprueba

los Estándares de Calidad Ambiental para Agua y establece disposiciones

complementarias. El Peruano. https://sinia.minam.gob.pe/normas/limites-

maximos-permisibles-lmp-efluentes-plantas-tratamiento-aguas

VIII. ANEXOS

Figura 1. Muestras realizadas para obtener sus absorbancias

Figura 2. Espectrofotómetro utilizado para la determinación de absorbancias

 Figura 3. Solución madre de Fe utilizada

Figura 4. Micropipeta utilizada en un rango de 20 – 200 µl

Figura 5. Reactivos y materiales utilizados en laboratorio