PRACTICA N° 5
EXTRACCIÓN DE ADN
I. INTRODUCCION
La genética clásica o mendeliana estudia la transmisión de caracteres que nos hace iguales o
diferentes, por lo cual, cuando Mendel describía como se hereda un carácter en realidad, hoy
sabemos que describía como se heredan los genes. El gen de acuerdo al punto de vista de la
genética clásica es una unidad de información hereditaria. (1). El ADN es la molécula que contiene
la información genética necesaria para la vida. Contiene los genes que codifican las proteínas y
regulan las funciones celulares. (2) En el laboratorio, se emplearán métodos físicos y químicos para
extraer el ADN de células animales, optimizando su visualización y estudio. Estos métodos incluyen
el uso de detergentes para descomponer las membranas celulares y enzimáticos para
desnaturalizar proteínas, así como la precipitación con alcohol para separar el ADN del resto de los
componentes celulares (3). La comprensión y dominio de estos procesos no solo son esenciales
para el avance en investigación biotecnológica, sino que también constituyen un paso inicial en
numerosas técnicas de diagnóstico y de biología molecular moderna (4). el enfoque estará en
aplicar de forma sistemática los pasos necesarios para extraer ADN de células modelo, evaluando
tanto la pureza como la cantidad de material genético obtenido. Esta experiencia en laboratorio
reforzará conceptos teóricos y técnicas prácticas clave en el ámbito de las ciencias biológicas. (5)
II. OBJETIVO GENERAL
III. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
IV. MATERIALES REACTIVOS
Muestra (mucosa bucal)
Baja lengua esteril
Agua
Tubo de ensayo con tapon
Detergente lava vajilla
Goteros
Ablandador de carne
Frascos de orina
Alcohol 95% a 0° C
Guantes
Cloruro de sodio
Gorro
Baño maría
Papel absorbente
V. MÉTODO O PROCEDIMIENTO
1) Preparamos el tampón de lisis con lava vajilla agua mezclando energéticamente
sacudiendo por unos minutos
2) Preparamos reactivo de Proteasas ponemos el ablandador de carne más agua agitamos
energéticamente por unos minutos y filtramos
3) Preparamos reactivo de Cloruro de sodio mas agua
4) Tomamos un tubo de ensayo con su tapa y ponemos unos 4 ml de tampón de lisis
5) Tomamos una baja lengua estéril y lo partimos en 2, tomamos una mitad y empezamos a
hacer un barrido de las células epiteliales interiores de la cavidad bucal por aproximadamente 3
minutos
6) Lo ponemos en el tubo con tampón de lisis, lo enjuagamos, sacamos el baja lenguas y lo
tapamos para que no se contamine
7) Hacemos el mismo procedimiento con el lado derecho de la cavidad bucal, ponemos la
muestra al mismo tubo haciendo el mismo procedimiento anteriormente hecho, este tampón lo
que hace es disolver las membranas, libera todo el contenido del citoplasma
8) Ponemos el reactivo de proteasas 2ml aproximadamente, llevamos a baño maría sin
mover, por 10 minutos a 80°C, este reactivo va ir digiriendo todas las proteínas
9) Sacamos de baño María, llevamos él tuvo a 45°C y ponemos cloruro de sodio una vez
puesto el reactivo lo ponemos en vertical
10) Seguidamente tomamos el tubo a 45°C y ponemos el alcohol que esta refrigerado a 0°C,
observamos la interfase donde se va polimerizando el ADN
11) Observamos el ADN extraído que está en la interface con una especie de hilos, con poco de
oxigeno y opaco
VI. RESULTADOS
VII. CONCLUSIÓN
VIII. DISCUSIÓN
IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
CUESTIONARIO
1. Imagina que deseas explicar la diferencia entre genes, cromosomas y ADN a un
estudiante de primaria escribe como le explicarías con palabras sencillas para que
puedan entender
R.-
2. ¿Contiene una célula hepática los mismos cromosomas que una célula de la mucosa
bucal? Si porque, no porque
R.- Las células hepáticas (hepatocitos) y las células de la mucosa bucal contienen el mismo número
de cromosomas en los seres humanos. En general, las células somáticas humanas tienen 46
cromosomas, organizados en 23 pares. Esto incluye tanto a los hepatocitos como a las células
epiteliales de la mucosa bucal, ya que ambas son células diploides que contienen dos juegos de
cromosomas.
3. Si quisiera aislar una copia del gen que codifica para la proteína gastrina, ubicada en el
aparato digestivo, ¿podría encontrar este mismo gen en las células de la mucosa bucal?
Si porque no porque
R.- El gen GAS, que codifica mucosa bucal. Sin embargo, no se expresa en las células de la mucosa
bucal. Esto significa que, aunque puedes encontrar el ADN del gen GAS en estas células, no se
produce la proteína gastrina en la mucosa bucal, ya que la expresión de este gen está restringida a
las células.
el gen GAS está presente en las células de la mucosa bucal, pero no se traduce en la producción de
la proteína gastrina en esas células.
4. Porque es necesario un intermediario como el ARNm para pasar la información del ADN
a la síntesis de proteínas
R.- La existencia de ARNm permite que el proceso de síntesis de proteínas sea más rápido y
eficiente. Al mantener el ADN protegido y producir copias de ARNm, la célula puede responder
más rápidamente a las demandas metabólicas y ambientales que requieren una producción
acelerada de proteínas
5. Cual crees que seria el paso a seguir una vez realizado la extracción del ADN de las
células
R.-
6. Cuál es la función de la proteasa enzima utilizada en este experimento
R.- Podemos deshacernos fácilmente de las proteínas sin dañar el ADN, usando una enzima
específica que digiere las proteínas, llamada proteasa. La proteasa rompe los enlaces peptídicos
existentes entre los aminoácidos de las proteínas.
