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Reconocimiento de Proteínas y Enzimas

RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS Y ENZIMAS

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PRACT

0
ICA N
04
TITUL
O:
RECO
NOCIM I. FUNDAMENTO
IENTO
DE
PROTE
Las proteínas son moléculas grandes y complejas que desempeñan muchas
funciones críticas en el cuerpo constituidos por cadenas lineales de
aminoácido. Realizan la mayor parte del trabajo en las células. Son necesarias
INAS Y
para la estructura, función, regulación de los tejidos y órganos del cuerpo y
el transporte de oxígeno y de grasas en la sangre y para la asimilación de

ENZIM
nutrientes en el organismo. Además, algunas moléculas de naturaleza
proteínica son capaces de catalizar reacciones químicas (enzimas).

AS
II. OBJETIVOS. –

 Conocer y aprender técnicas de reconocimiento de


proteínas y enzimas.
 Identificación de proteínas.
 Comprobar la acción de la temperatura sobre la actividad
de las enzimas.
 Comprobar la acción hidrolítica de la amilasa.
 Ver reflejada en la practica lo aprendido en la teoría

III. MATERIALES
 Vidrios y otros
Tubo de ensayo( 3), gradilla, mechero, Ron de quemar., pinza de madera y vaso
precipitado

 Reactivo. -

Experiencia 01 : reactivo de biuret ( por método experimental cuantitativo )


Hidroxido de Sodio al 40 % y Sulfato de Cobre al 5%
Experiencia 02 Reaccion de Mulder Xantoproteica ( CUALITATIVA)
HNO3 C NaHO al 40%

 Muestra Biológicos. –

EXPERIENCIA 01
Ovoalbumina al 20%
Lecho al 20%
EXPERIENCIA 02
Ovoalbúmina pura

IV. METODO

VI PROCEDIMIENTO:

EXPERIENCIA 01

1. SELECCIONAR DOS tubos de ensayo y verter cantidad suficiente de clara de huevo y


leche
2. Diluir las muestras al 20% y enumerar las muestras :tubo 1 (clara de huevo) y tubo2
(leche

3. Agregar al primer tubo a,5 ml hasta 1ml de hidróxido de sodio al 40% , la muestra se
hidroliza y se vuelve transparente
4. Agregar por gotas sulfato de cobre y agitar simultáneamente ,y calentar suavemente ,
se empezará a tornar de un color violeta esto revela la presencia de la proteína

5. En el segundo tubo agregar el mismo reactivo de biuret y observa que la leche no se


vuelve transparente pero si cambia de color a violeta claro

EXPERIENCIA 02

1. Agregar un tercer tubo de ensayo y verter cantidad suficiente de albumina pura


2. Adicionar 4-5 gotas de HCNO3 C empezar a agitar y se podrá observar cómo se
forma un color blanco lechoso
3. Llevar al mechero y empezar a calentar y se puede observar que cambia a un color
amarillos esto debido a la presencia del aminoácido tirozina
4. Luego se le agrega dióxido de sodio al 20% ( debería ser de 40%) y se observará
como se forma en el principio un anillo de color rojo , esto se debe por la presencia
del aminoácido triptofano

V. RESULTADOS

EXPERIENCIA 01

En el primer ´procedimiento la clara de huevo se observa que se cristaliza y cambia de color a violeta
esto debido a que el sulfato de cobre se ioniza en su menor valencia y forma un enlace de de
coordinación entre el ion cúprico de 2 nitrogeno de dos uniones pertidicas , es decir se rompe el
enlace peptídico y forma un nuevo enlace

En el caso de la leche el color que cambia es a un vileta claro debido a que contiene menor cantidad
de proteínas que la clara de huevo y de la misma forma se obtiene como resultado el rompimiento
del enlace y la formación de uno nuevo
EXPERIENCIA 02

En la reacción xantaproteica , al utilizar clara de huevo pura se observó que al echar el reactivo no se
diluyo fácilmente ya que no entraba en proceso de desnaturalización (por ser clara pura ) por eso se
calentó y recién es donde se observa que cambia aun color anillo debido al presencia del aminoácido
aromático (tiroxina) y al agregarle hidróxido se sodio se forma un anillo de color rojo que es
aminoácido triptófano

VI CONCLUCION

✓ En la clara de huevo, hay presencia de enlaces peptídicos y


por ende la reacción Biuret es apreciable por la transparencia
y el color violeta que se produce
Al añadir ácido acético a disoluciones que contengan
proteínas, se producen una desnaturalización de la proteína,
pero se produce más rápido si la muestra esta diluida de esa
forma ingresa más rápido, si es pura se calienta para apreciar
los resultados (cambio de color
✓ En la clara de huevo existen aminoácidos aromáticos, y su
reacción xantoprotéica es apreciable ya que se puede
identificar la tiroxina y triptofano
VII. DISCUSIÓN DE LOS RESULTADOS

EN CADA MESA DE LABORATORIO QUE REALIZO EL EXPERIMENTO DIERON LOS


MISMOS RSULTADOS

VIII. RECOMENDACIONES

PROCURAR DE HACER SOLOS LOS PRECEDIMIENTOS

TENER TODOS LOS MATERIALES REQUERIDOS

MANIPULAR CON CUIDADO LOS MATERIALES DEL


LABORATORIO
VII. ANEXOS

MATERIALES

MUESTRA DE LECHE Y
HUEVO
RESULTADOS

CLARA CLARA LECHE


PURA AL 20% AL 20%

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