Validación de

Limpieza
Q.F. Serrana Sánchez
1 Q.F. Romina Espinosa
2 Objetivos de la limpieza de
equipos/ áreas

 Eliminar la suciedad y cualquier residuo indeseable

remanente de un proceso de producción, independiente de su
origen y composición.

 Implica:
 Eliminar/ Reducir niveles de principio activo del producto anterior.
 Reducir niveles microbiológicos
 Eliminar/Reducir agente de limpieza utilizado
 La limpieza es una parte
3 fundamental

 Limpiar no es solamente “pasar un trapo”.

 Hay que saber qué trapo pasar,
 dónde pasarlo,
 con qué pasarlo,
 cuándo pasarlo.

 NO alcanza con eliminar lo visible

 Normalmente hay también que desinfectar y eliminar lo
invisible.
 La limpieza es una parte
4
fundamental

Limpieza + Desinfección = Sanitización.

5 ¿Por qué Validamos Limpieza?

Porque un producto farmacéutico:

Debe contener lo que indica el rótulo en la
cantidad declarada
No debe contener sustancias extrañas
NUNCA debe contener microorganismos
patógenos
6 ¿Por qué Validamos Limpieza?

Pero además:
en algunos casos NO debe contener
ningún microorganismo vivo.
en algunos casos que las cantidades de
microorganismos muertos sean también
limitadas (límite de pirógenos)
7
Etapas de la limpieza

Física: sacar lo visible

Química: usar detergente por ejemplo
Microbiológica: eliminar microorganismos o
disminuir su número
 Orden en la limpieza
8

1. De arriba hacia abajo

2. De más limpio a menos limpio
9
Definición Validación de
limpieza:
Evidencia documentada que establece
que los procedimientos de limpieza
remueven los residuos a niveles
aceptables predeterminados,
considerando factores tales como:
tamaño de lote, dosis, toxicidad y
tamaño del equipamiento
 Marco regulatorio
10

 FDA:
 21CFR Sec. 211.67 Equipment cleaning and maintenance. (Rev
2018)
 Questions and Answers on Current Good Manufacturing Practice
Requirements | Equipment (No legalmente vinculante)
 Validation of Cleaning Processes (7/93) GUIDE TO INSPECTIONS
VALIDATION OF CLEANING PROCESSES (2014) (No legalmente
vinculante)
 EMA (2015), Guideline on setting health based exposure limits for
use in risk identification in the manufacture of different medicinal
products in shared facilities
 Definición de límites considerando PDE de acuerdo al Apéndice 3
de ICH Q3C (R4).
 Q&A en la implementación de la guía (2018).
 Marco regulatorio
11

 OMS
 Reporte 44, Anexo 2 (2010)
 Reporte 53 Anexo 3 (2019).
 DRAFT WORKING DOCUMENT FOR COMMENTS:
QAS/20.849/Rev.1 Points to consider when including Health-Based
Exposure Limits (HBELs) in cleaning validation (Agosto 2020)
 PIC/S
 GUIDELINE ON SETTING HEALTH BASED EXPOSURE LIMITS FOR
USE IN RISK IDENTIFICATION IN THE MANUFACTURE OF
DIFFERENT MEDICINAL PRODUCTS IN SHARED FACILITIES (2018)
 Aide Memoire
 CROSS-CONTAMINATION IN SHARED FACILITIES (2018)
 INSPECTION OF HEALTH BASED EXPOSURE LIMIT (HBEL)
ASSESSMENTS AND USE IN QUALITY RISK MANAGEMENT (2020)
 Marco regulatorio
12

 ISPE
 Baseline Guide Vol 7: Risk-Based Manufacture of Pharma
Products 2nd Edition ISPE Risk-MaPP
 Cleaning Validation Lifecycle - Applications, Methods, and
Controls ISPE Cleaning Validation Guideline (2020)
 PDA:
 Technical Report 29: Points to Consider for Cleaning
Validation PDA TR 29
 Technical Report 49: Points to Consider for Biotechnology
Cleaning Validation PDA TR 49
 Health Canada
 GUI 0028 (2021)
13
¿Por qué validación de
limpieza?
Evitar la contaminación cruzada.
Asegurar la consistencia en los procedimientos de
limpieza.
Reducir los controles en proceso.
Mantener la integridad y seguridad del producto.
Es requisito de GMP
 Antecedentes históricos
14

Producto Causa Efecto Año/País

Tabletas de vitaminas y Contaminación cruzada con Aparición de 1958
minerales pediátricas estrógenos por limpieza caracteres sexuales EEUU
defectuosa del equipo secundarios en niños Otro caso
de 5 a 10 años similar en 1962
Soluciones de dextrosa Malas condiciones sanitarias Varias pacientes 1990 Colombia
de gran volumen del laboratorio fabricante y muertos en un centro
procedimientos deficientes hospitalario
 Criterios de validación de limpieza
15
 Los criterios de aceptación visual de la eficacia de la limpieza son recomendables
pero no pueden ser el único criterio. Un criterio visual es que el agua deslice
fácilmente la superficie del equipo.
 Es aceptable efectuar controles analíticos de verificación después de la limpieza
hasta que no se pueda validar.
 Si se dispone de métodos automáticos de limpieza, los límites del funcionamiento de
estos equipos deben estar validados.
 En cambio, si los métodos son manuales hay que estudiar las fuentes de variabilidad
(grado de eficiencia de los operarios o tiempos o volumen de agua de aclarado) con
los que se llevan a cabo. Una vez determinadas las fuentes y los rangos de
variabilidad, la validación debe hacerse en las condiciones definidas como las más
desfavorables.
 La validez de las conclusiones deber revalidarse de manera periódica.
 Criterios de validación de limpieza
16

 NO puede validarse la limpieza por equipo, sino en un tren de equipos, ya que

hay que tener en cuenta el efecto acumulativo, a menos que se justifique lo
contrario. Caso de un equipo que se utiliza un día diferente al resto de los
equipos involucrados (ejemplo: paila, blistera).
 Se han de considerar la susceptibilidad a la contaminación y la proliferación
microbiológica para determinar los límites aceptables de contaminación
microbiológica después de la limpieza.
 Lo mismo para el contenido de endotoxinas, si es necesario.
 La validación determina los máximos intervalos de tiempo antes de la limpieza
y entre la limpieza y el uso.
 Si se hacen campañas de producción, se debe comprobar el impacto de la
duración de éstas y comprobar la duración de la limpieza
 Criterios de validación de limpieza
17

 Es aceptable utilizar el caso más desfavorable para validar un solo

método de limpieza, si éste se utiliza para limpiar diversos
productos.
 Si no es posible decidir entre el más difícil de limpiar y el más tóxico
es necesario determinar los límites máximos aceptables de los dos.
 Hay que definir como mínimo un caso mas desfavorable para cada
método de limpieza.
 Si sale un pico anómalo en el perfil cromatográfico hay que
analizarlo y consultar su toxicidad ya que si es más tóxico que el
residuo buscado, hay que utilizar este producto en el cálculo de
límites.
 Criterios de validación de limpieza
18

 Los protocolos de validación de los métodos de limpieza han

de determinar el racional en que se basa la selección de los
puntos muestreados y los límites aceptables de residuo en
cada uno de ellos.
 Se aceptan los métodos de muestreo en superficie
(hisopado - swab) y de aclarado (enjuague - rinsing) en
forma combinada según el equipo.
 Se deben presentar datos sobre el grado de recuperación de
todos los métodos de muestreo empleados.
 En Europa la validación de limpieza de áreas no es una
exigencia. A veces se realiza por seguridad para el personal.
 Criterios de validación de
19
limpieza
 Para la producción de medicamentos en investigación que se
fabrican ocasionalmente o donde se pueden fabricar gran
cantidad de productos diferentes en los mismos equipos, es
recomendable hacer verificaciones de la limpieza en lugar de
utilizar un enfoque de tipo caso mas desfavorable.
 Si no es posible validar los métodos limpieza según los
criterios expuestos hay que utilizar equipos dedicados.
 Previo a la validación de
20 limpieza
 Correcta identificación de los equipos
Registros (bitácoras)
Rotulación adecuada
 Mantenimiento / Calificación / Validación de los
sistemas de apoyo crítico involucrados
 Procedimientos documentados.
 Personal calificado.
 Agentes de limpieza adecuados.
 Implementos de limpieza estandarizados.
 Métodos validados.
 Requisitos para la
21 validación de limpieza
Procedimientos documentados.
Deben ser claros y detallados.
Deben indicar tiempos máximos de espera de
equipos sucios ( DHT – Dirty Hold Time)
Deben indicar tiempo de validez de la limpieza
(vigencia)
Deben indicar agentes de limpieza/desinfección
usados y diluciones de los mismos.
Debe indicar tiempos de aplicación de los agentes de
limpieza/desinfección.
 Tiempo de espera de equipo
22 sucio (DHT)
Se toma en cuenta en la validación de limpieza
Es importante definirlo porque:
Cuanto más demore en limpiar:
Más difícil puede ser la limpieza (producto adherido a las
paredes del equipo).
más microorganismos tendré.
Si quedan restos de productos anteriores, pueden servir de
alimento para los microorganismos.
Los microorganismos no se ven a simple vista, por lo tanto,
para eliminarlos, tengo que trabajar de la manera
adecuada y no guiarme por la idea de que si “brilla”, está
limpio y no tiene microorganismos.
 Validez de la limpieza
23
CHT (Clean holding time)
Tiempo desde la limpieza hasta que se puede
volver a utilizar sin mediar ninguna acción
sobre el equipo.
Que significa validez/vigencia de la limpieza?
Se determina durante la validación de limpieza.
Sólo del punto de vista microbiológico.
Pasado este tiempo debo realizar algún tipo de
limpieza previo al uso del equipo.
Ej: Sanitización con alcohol 70 %
24 Validez de la limpieza en
campaña
 Tiempo durante el cual puedo trabajar en campaña
(varios días), realizando limpiezas parciales.
Se debe definir y considerar en la validación de
limpieza.
Pasado dicho período debo realizar una limpieza
completa aún cuando continúe trabajando en
campaña.
Monitoreos microbiológicos del área y equipos
 Requisitos para la validación
25
de limpieza

Personal calificado.
Capacitado en los procedimientos de limpieza.
Capacitado en las practicas básicas de higiene.
Higiene personal .
No comer, beber, fumar .
 No usara joyas, maquillaje.
Informar si esta enfermo o tiene heridas.
 Requisitos para la validación
26 de limpieza

Personal calificado.
En procedimientos de limpieza manual, la
capacitación del personal es de extrema
importancia.
La supervisión del personal debe ser efectiva
Se debe considerar que el personal es un agente
contaminante.
 Requisitos para la validación
27
de limpieza
 Agentes de limpieza/ desinfección adecuados.
Limpiadores alcalinos
Agentes surfactantes.
Agentes complejantes
Agentes secuestrante
Antiespumantes
Agentes oxidantes
Inhibidores de corrosión
 Requisitos para la validación
28
de limpieza
Selección Agentes de limpieza/
desinfección
Amplio espectro
No tóxico
No corrosivo
Estable
Acción rápida
Que no se inactive con materia orgánica
 Requisitos para la
29
validación de limpieza
Implementos de limpieza adecuados
Adecuados para el tipo de material a limpiar
Que no liberen fibras
Dedicados de ser necesario
Almacenamiento adecuado
Mantenerlos ORDENADOS
Mantenerlos LIMPIOS y SECOS
Separados e identificados por ZONA
 RECOMENDACIONES PARA SU
30 UTILIZACIÓN
 Leer cuidadosamente las instrucciones del fabricante y el procedimiento de la
empresa.
 Preparar y utilizar los agentes químicos con los elementos de protección
correspondientes.
 No mezclar otros agentes de limpieza con desinfectante a menos que el
fabricante especifique que no existe incompatibilidad.
 Medir adecuadamente las cantidades de desinfectante en el momento de
diluirlo utilizando recipientes graduados o medidas adecuadas.
 Preparar las soluciones de limpieza y desinfección siguiendo estrictamente el
procedimiento escrito correspondiente. Cualquier cambio debe ser
comunicado al responsable del sector.
 Respetar los procedimientos de aplicación.
 Respetar los tiempos de contacto.
31
 Requisitos para la
32
validación de limpieza

Métodos validados.
Para determinación de límites de
contaminantes
Métodos de muestreo.
Hisopado
Agua de enjuague
33 PMV
 La validación de limpieza se enmarca dentro del Plan Maestro de
Validación de la empresa.
 Se debe definir
Cantidad de lotes
 Mínimo 3 lotes consecutivos de producto. Enfoque de
riesgo
Definición de límites de aceptación.
Principio activo
Detergente
Microbiológico
Criterios de selección del peor caso a validar ( Si aplica)
34

Documentación
 PMVL:
35 Plan maestro de Validación
de Limpieza
 Contenido
Objetivo
 Alcance
 Introducción: Realizar una pequeña descripción del
PMVL
 Glosario: significado de términos, acrónimos
Referencias: Normas, exigencias de las autoridades
sanitarias
36 PMVL
Responsabilidades:
Elaboración de documentos
Ejecución de muestreos
 Análisis químicos y microbiológicos.
 Aprobación final.
Seguimiento.
Entrenamiento de personal.
37
PMVL
Política de validación
Tipos de contaminante:
Químicos
Microbiológicos
Materiales no esperados
Pasos previos a la validación
Identificación y Codificación de equipos
Registros
Mantenimiento / Calificación / Validación de los
sistemas de apoyo crítico
38
PMVL

Personal capacitado

Materiales e implementos de limpieza adecuados y

caracterizados
39
PMVL
Validación propiamente dicha y límites para la
validación:
Criterios de toxicidad
Criterio de solubilidad
Criterio de potencia
Criterio de liberación de polvo
Criterio cantidad de puntos críticos de control
Cálculo de peor caso
40 PMVL
Métodos de muestreo
Límites:
Químico
Agentes de limpieza
Microbiológicos
Criterio de control de cambios y re-
validación
 Protocolo de Validación de
41 Limpieza
 Contenido
Objetivo
Alcance
Justificación del principio activo seleccionado
Responsabilidades
Proceso de Validación
Desafíos a ejecutar durante la validación
Re-evaluaciones periódicas
Re-validación
42
 Se debe especificar
 Descripción de los equipos: Partes principales, dimensiones, ubicación.
 Diagrama del Proceso de Manufactura
 Listado de Procedimientos de limpieza de los equipos
 Agentes de limpieza utilizados
 Criterios de aceptación: Cálculo de los Límites
 Método de muestreo (Hisopos a ser utilizados o solvente para el agua de
enjuague).
 Técnica de muestreo.
 Preparación de la muestra.
 Diagramas de los puntos hisopados.
 Técnicas de análisis.
 Informe de
43 Validación de limpieza
Objetivo
Campo de aplicación
Abreviaturas
Referencias
Procedimiento
Resultados:
Registro de responsabilidades
Disponibilidad y adecuación de procedimientos
44

Capacitación del personal

Detalle de los productos y sus características
Puntos críticos y áreas compartidas
Cálculos de límites de agentes de limpieza /
desinfectante / microbiológico
Cálculos de recuperación
Métodos analíticos
Ejecución
Re-validación
45

No conformidades
Observaciones
Conclusiones
46

Estrategias de Validación
47
 Selección del proceso a validar
 Selección del método de muestreo
 Hisopado
 Agua de enjuague
 Determinación de criterios de aceptación o límites de
limpieza .
 Principio activo
 Agente de limpieza
 Microbiológico
 Selección del método de análisis de residuos.
 Selección del proceso de
48 limpieza a validar
 Se valida específicamente la limpieza para cada producto.
 Implica llevar a cabo la validación determinando residuos luego
de la limpieza de 3 lotes para cada producto envasado.
 Se agrupan los productos en categorías de riesgo y se encara la
validación prioritariamente para aquellos productos que se
encuadren en la categoría de riesgo alto.
 Solubilidad
 Toxicidad
 Dificultad de detección
 Alta potencia
 Dificultad de limpieza
 Factores de selección residuo
49
“peor caso”
FACTOR INDICADOR PEOR CASO DATO

Solubilidad en
Mas
Solubilidad agente de Experimental
insoluble
limpieza
Actividad Dosis mínima
Menor dosis Prescripción
terapéutica terapéutica
Safety Data
Toxicidad PDE Menor PDE
Sheet
Forma
farmacéutica,
Características del presencia de Mas difícil
Know how
producto colorantes, de limpiar
grasas,
aromas….
 Análisis de Riesgos: “peor”
50 residuo
NIVEL DE RIESGO
PARAMETRO 1 2 3 4 5 6

Moderadamente Difícil de Muy difícil de

Dificultad de Moderadamente fácil
Fácil de difícil de retirar, retirar, retirar:
limpieza (estudio Muy fácil con de retirar,
retirar con pegajoso con producto proteínas
de laboratorio o agua producto
líquido productos oleoso o desnaturalizadas,
subjetivo) viscoso
insolubles excipiente colorantes, TiO2

>1 mg/
1mg-
día 10-100μg/día 1-10μg/día
Toxicidad (PDE, ≥2500 100μg/día <1μg/día
≥2500 y >500 y ≤250 >250 y ≤25
LD50 oral rata) mg/kg ≥1250 y ≥25 mg/kg
≤1250 mg/kg mg/kg
≤500 mg/kg
mg/kg

Solubilidad Muy Bastante Muy poco

Poco soluble Prácticamente
(g/100 mL de soluble soluble Soluble 99% soluble
>10% y <90% insoluble <0,01%
agua) 100% 99,9% <10%

Actividad >100-500
Excipiente <1 mg 1-10 mg >10-100 mg >500 mg
terapéutica (Dosis) mg
 Ejemplo de selección de
51 “peor caso”

Definición de Parámetros.
Por ejemplo:
Toxicidad (PDE)
Solubilidad
Potencia
Generación de polvo
Cantidad de puntos críticos de control en el proceso
 Ejemplo de selección de
52 “peor caso”

Definición de Peor Caso

 Se selecciona como producto pero caso, aquel
que tenga mayor puntaje resultante de
multiplicar la totalidad de los puntajes de los
criterios seleccionados
53
Validación múltiple

Casos en que sea necesario más de un “peor

caso”
No todos los productos comparten las mismas
partes del equipo
Productos incomparables
 Selección del método de
54
muestreo
La elección de un método particular de muestreo
para un residuo depende de la configuración del
equipo y de la superficie muestreada.
 Las superficies de fácil acceso pueden muestrearse
mediante hisopado (25cm2 o 100cm2).
 Las de difícil acceso puede muestrearse mediante agua
de enjuague.
 Se debería usar una combinación de métodos de
muestreo.
46
Agrupación de
productos: ejemplo

Si un determinado producto es el más difícil de

limpiar, entonces validamos con este producto
tomando como límite el más estricto del grupo.
47
¿Qué residuos (trazadores)
buscamos?

Principios Activos
Productos de Degradación de API
Excipientes (pomadas o cremas)
Agentes de Limpieza
Contaminación microbiana
Endotoxinas (productos parenterales)
48

Hay que evaluar si el P.A. del residuo no reacciona

con el agente de limpieza, generando un producto
de degradación mas tóxico.
Si se usan dos agentes de limpieza o sanitizante, se
debe validar para los dos y no para el mas tóxico.
Se selecciona aquel agente de limpieza que
permita limpiar a Temperatura ambiente.
Métodos de Muestreo
La aproximación recomendada es utilizar una
combinación de hisopado y enjuague

49 ICH Q7, 12.73: Sampling should include swabbing, rinsing, or alternative

methods (e.g., direct extraction), as appropiate, to
detect both insoluble and soluble residues.
 Selección del método
59 de muestreo
Hisopado.
Ventajas
 Reproducibilidad
 Disuelve y físicamente remueve la muestra
 Útil en muchos tipos de superficie
 Aplicable a activos, detergentes y microorganismos
 La distribución de la contaminación residual en el
equipo se observa en los resultados analíticos
 Los residuos insolubles o secos se pueden arrastrar
físicamente
 Selección del método de
60
muestreo
Hisopado.
 Desventajas
 Uso limitado en áreas de difícil acceso
 Entrenamiento y habilidad del operador
 Interferencias procedentes de los materiales de muestreo
 Requiere de cálculo de áreas del equipamiento
 El hisopo debe liberar el analito y el solvente y no interferir en el
ensayo
 La evaporación de disolventes durante el muestreo puede afectar
los resultados
 Selección del método
61 de muestreo
Agua de enjuague
 Ventajas
 Permite el muestreo de grandes áreas.
 No depende del operador
 Fácil de muestrear
 Desventajas
 No permite detectar el punto de contaminación
 El volumen utilizado es crítico
 No todas las sustancias son solubles
 Muestreo de mangueras
62

SE PASA EL AGUA DE ENJUAGUE POR LA

MANGUERA. EL AGUA RESULTANTE SE
FILTRA POR UN FILTRO ESTERILIZANTE Y
SE INCUBA EL FILTRO.
 Selección del método de
63 muestreo

La empresa deberá desafiar el método analítico

en combinación con el método de muestreo
para demostrar que los contaminantes pueden
ser recobrados de la superficie del equipo y a
qué concentración
 Recuperación del
64
analito
Los estudios de recuperación deben ser realizados
para evaluar la aplicabilidad del método analítico y
el procedimiento de muestreo para recuperar
residuos de las superficies que tienen contacto con
el producto.
Estos estudios se usan para verificar que la
concentración de residuos puede ser recuperada de
las superficies del equipo con un muestreo y un
método analítico dados.
 Recuperación del
65 analito

Los estudios son realizados antes de que los ejercicios

de validación de limpieza sean ejecutados.
 El porcentaje de recuperación será utilizado como un
factor de corrección para los resultados de los
ensayos.
Todos los estudios de recuperación deben ser
realizados en conformidad con procedimiento
operativo escrito o un protocolo.
 Recuperación del
66 analito: Hisopado
 Ejemplo:
 Blanco: Hisopo sin uso en solvente
 Muestra:
 Plantilla de acero 25 cm2 – sembrar 100 uL de
solución de principio activo en metanol, etanol u otro
solvente
 La concentración de la solución sembrada debe ser
tal que la cantidad de analito en la placa coincida con
el limite de limpieza (100%).
 Dejar secar.
 Recuperación del
67
analito: Hisopado

La manera en que se realiza la toma de muestra

de una superficie es critica.
Debe asegurarse que sea exacta y reproducible
en la recolección de los residuos.
 Para mejores resultados el Hisopo debe ser
humedecido, pero no saturado.
 Recuperación del
68
analito: Hisopado

Se realiza el hisopado en 3 direcciones

Horizontal
Vertical
Diagonal
 Recuperación del
69 analito: Hisopado
 Recuperación del
70 analito: Hisopado
Se sumerge el hisopo en la solución (tubo de
ensayo o frasco).
Se extrae el analito del hisopo.
 Ultrasonido
Cálculo del % de recuperación =
(Cantidad detectada / Cantidad total) x 100
Porcentaje de recuperación aceptable.
 Mayor al 70% (sin corrección)
 Recuperación del analito:
71
Agua de enjuague

Mismas consideraciones que para el

método de hisopado
La extracción se realiza enjuagando la
superficie con un volumen conocido de
solvente.
Porcentaje de recuperación aceptado
mayor al 50%.
 Recuperación del
72
analito

Por triplicado.
En las superficie a ser muestreada.
En 3 niveles
50, 100 y 150 % del Límite de limpieza.
 73 Muestreo
 Solvente a utilizarse
 Agua de enjuague
 Hisopado
 alcohol
 fase móvil
 otro solvente
 Las muestras deben ser tomadas antes del ensamble del equipo.
 El área de muestreo puede ser aumentada conforme sea necesario para ayudar a
alcanzar el limite de cuantificación del método analítico
 Superficie de muestreo
 Hisopado (25-100) cm2
 Agua de enjuague: todo el equipo
74 Muestreo

 Debe utilizarse guantes y máscara, para reducir el riesgo de

contaminación.
 Se recomienda el análisis dentro de las 24 horas.
 El tiempo de almacenamiento después de tomar las muestras
debe ser validado.
 Las muestras o pruebas microbiológicas deben ser tomadas
antes de los muestreos químicos, para evitar la posibilidad de
contaminación.
 Antes de iniciar los muestreos, debe realizarse una inspección
visual que el equipo esta limpio y seco.
 Muestreo: Selección de
75
puntos de muestreo
4 o 5 puntos por equipo
Se considera como un punto crítico de difícil
limpieza
 dificultad del acceso para ser limpiado.
 naturaleza de diseño
 Juntas, válvulas, conexiones o uniones, codos
 Soldaduras
 Desagües
 Donde se estanca el agua.
 Dosificadores
 Agujas
 Puntos Críticos

76
77

 Tener en cuenta diferentes materiales de la superficie. Se

requiere certificado de calidad de todas las superficies que
toman contacto con el producto para autoridades regulatorias
extranjeras.
 Para muestreo por hisopado normalmente para obtener
resultados reproductibles se utilizan 2 hisopos (húmedo y
seco).
 CÁLCULO DE LIMITES

78
 Determinación de criterios de
79
aceptación o límites de limpieza

Principio activo
Agente de limpieza
Microbiológico
80
Determinación de criterios de
aceptación o límites de limpieza

Equipo dedicado.
 Utilizado para un único producto.
 Utilizado para un mismo producto de
diferentes concentraciones
Equipo para fabricación de diferentes formas
farmacéuticas con diferentes principios activos.
81 Determinación de criterios de
aceptación o límites de limpieza
Equipo dedicado.
 Visiblemente limpio.
 Análisis de detergente
 Carga microbiológica
 Análisis de el peor caso tiene aplicación cuando
se trabaje con productos del mismo principio
activo, pero con 2 concentraciones diferentes.
82
Criterios que se pueden emplear para calcular los
límites de aceptación permitidos de residuos

 Criterios toxicológicos
 Criterios organolépticos
 Criterio de Dosis máxima
 Criterio de Fracción de Dosis terapéutica
 Criterios Organolépticos
83

Ningún residuo de la fabricación del

producto anterior debe ser detectable por
los sentidos tras la limpieza
Subjetivo
No visible (límite: 4-100 µg/cm2)
No detectable por olor (esencias)
No detectable por el tacto (grasas)
84 Criterios de Dosis Máximas

10 ppm del producto A en el producto B

86 Criterios de Fracción Dosis
Terapéutica

0,1% de la dosis normal del producto A

en la máxima dosis diaria del producto B
No detectable por el método más
sensible (alérgenos o API con potencia
muy alta)
 Criterios de Fracción Dosis
87 Terapéutica
 Hasta ahora se empleaba para calcular el residuo aceptable del PA del producto
fabricado anteriormente en el equipo.

 La cantidad de contaminante del producto fabricado anteriormente presente en la

máxima dosis diaria que puede ser ingerida del producto posterior a fabricarse en el
equipo, debe ser inferior a una fracción determinada de la dosis terapéutica del
contaminante.
 1/10 a 1/100 Vía tópica
 1/100 a 1/1000 Orales
 1/1000 a 1/10000 Inyectables
 1/1000 a 1/10000 Oftálmicos
 1/10000 a 1/100000 I+D
 Criterio Toxicológico
88 Exposición Diaria
Permitida (PDE)
Guideline on setting health based exposure limits for use in
risk identification in the manufacture of different medicinal
products in shared facilities

20 November 2014 Coming into effect 01 June 2015

PDE: PERMITTED DAILY EXPOSURE

Dosis específica de una sustancia para la cual no es de esperar que cause

ningún efecto adverso si un individuo está expuesto diariamente, durante toda
la vida. Implica toxicidad a largo plazo.
 Criterios toxicológicos (PDE)
89

Dosis específica de una sustancia para la

cual no es de esperar que cause ningún
efecto adverso si un individuo está
expuesto diariamente, durante toda la vida.
Implica toxicidad a largo plazo
 Cálculo de PDE
90
 Ajuste de Peso: peso de una persona adulta: 60-70 Kg.
Se utiliza 50 Kg para dar margen de seguridad adicional.
 F1: Extrapolación entre la especie usada para calcular el NOAEL y la especie
humana:
• F1=5 de ratas a humanos
• F1=2 de perros a humanos
• F1=2,5 de conejos a humanos
• F1=3 de monos a humanos
• F1=10 de otras especies a humanos
• F1=12 de ratones a humanos
 Criterio Toxicológico
91 Exposición Diaria
Permitida (PDE) (cont.)

Toxicidad subaguda: estudios hasta 1 o 2 semanas

Toxicidad subcrónica: 3 a 6 meses

Toxicidad crónica: 1 a 2 años

Se deben investigar efectos adversos a nivel de fertilidad,

embrionario (teratogenicidad), carcinogenicidad.
 Cálculo de PDE (cont.)
92
• F2: Variabilidad entre individuos
Se utiliza el valor 10 (EMA, ISPE)
• F3: Estudios realizados a corto/medio/largo plazo
• F3=1 cubren la mitad de la vida o más
• F3=1 estudios reproducción que cubren toda la
organogénesis
• F3=2 6 meses en roedores o 3,5 años en otros
• F3=5 3 meses en roedores o 2,5 años en otros
• F3=10 estudios a corto plazo
Artículo: RG Sussman et al.
Regul.Toxicol.Pharmacolo.2016, 79, S57-S66.
 Cálculo de PDE (cont.)
93

F4: Factor a aplicar en casos de toxicidad severa: carcinogénesis,

neurotoxicidad, teratogeneidad
F4=1 toxicidad fetal asociada con toxicidad materna
F4=5 toxicidad fetal sin toxicidad materna
F4=5 efecto teratogénico con toxicidad materna
F4=10 efecto teratogénico sin toxicidad materna

F5: Cuando en lugar del NOAEL tenemos definido

el LOEL/LOAEL Se utiliza el valor 10. ISPE: 3
94
 RIESGO ASOCIADO A LA
95
TOXiCIDAD DEL PRODUCTO
 CRITERIO GLOBAL
96

 CRITERIO ORGANOLEPTICO (DE ENTRADA)

El mínimo requerimiento para un método de

limpieza es que no se observen restos de residuos
en el equipo

+
EL MAS RESTRICTIVO DE:
CRITERIO TOXICOLOGICO
Ó
CRITERIO DE DOSIS MAXIMAS
 Cálculo de PDE
97

FIRMADO POR UN FARMAOLOGO

 Base de Datos útiles
98
 TOXNET http://toxnet.nlm.nih.gov
 PubChem. http://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov
 Network. http://www.epa.gov/ncct/dsstox/index.html
 US EPA Toxcast. http://www.epa.gov/ncct/toxcast/
 http://www.dguv.de/ifa/gestis/gestis-dnel-datenbank/index-2.jsp
 PubMed (Medline). www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed
 BIOMED Central www.biomedcentral.com
 TripDatabase www.tripdatabase.com
 Dossier autoridades reguladoras: FDA, EMA, TGA
 Estudios internos (innovadores)
 Principales datos para
99 cálculo PDE
 Identificar NOAEL 1º Efecto
100 crítico

 NOEL: No Observed Effect Level

 NOAEL: No Observed Adverse Effect Level
 LOAEL: Lowest Observed Adverse Effect Level
 Alternativas
101

En los casos en que no se disponga del valor de PDE, pueden utilizarse de forma equivalente los
siguientes valores:

ADE: Allowable Daily Exposure *

• Se estableció este parámetro como una métrica apropiada para manejar el riesgo durante la
manufactura en la exposición a los trabajadores y en la seguridad del paciente.
• Se basa en el concepto de que la toxicidad de un producto es dosis dependiente, por lo que altas
dosis de un componente puede generar efectos adversos extremos, mientras que bajas dosis
pueden ser menos dañinas.
* Calculado según se describe en la Guía ISPE:
ISPE Baseline® Guide, the Risk-Based Manufacture of Pharmaceutical Products (Risk-MaPP) - A Guide
to Managing Risks Associated with Cross Contamination, 8th September 2010.
 Límite de Residuos
102
Aceptables

MACO: maximum allowable carry over (cantidad

permitida máxima de residuo en el próximo lote)
 Límite de Residuos
103
Aceptables

DDmaxB = Dosis máxima de producto B

TLB = Tamaño del lote B

Si los productos no disponen de PDE por su baja

toxicidad, entonces calcular MACO
considerando: criterios de fracción de dosis
terapéutica y 10ppm
 Límite de Residuos
104 Aceptables

 MACO: maximum allowable carry over (cantidad permitida máxima de

residuo en el próximo lote)
 Límite de Residuos
105 Aceptables

DD min A= Dosis diaria mínima de A (en mg)

DD max B= Dosis máxima de producto B (en unidades de dosis)
TLB= Tamaño del lote B (en unidades de dosis)
 CALCULO DE LIMITES USANDO
CRITERIOS DE DL50

Cuando no hay estudios de toxicidad a largo plazo

Se toma DL50 para un modelo animal (rata
normalmente) y la vía de administración que se trate

Máximo residuo permitido / área hisopo: NOEL × TLB × Am

SCC

NOEL=LD50 × Factor empírico (unidad de masa/kg of peso corporal)

106
Donde: LD50 = Dosis letal para el 50% de la población de animales en estudio
(mg/kg/día); para detergente corresponde al del componente más
tóxico.
Factor empírico = derivado de un modelo animal desarrollado por Layton, et. al.:
0.001, usado por expertos del panel de WHO (10-3)
 Consideraciones a tener en cuenta
107
para el cálculo de límites

Evaluar todos los productos fabricados que

compartan la totalidad o parte del tren de
fabricación (Producto B).
Superficie de muestreo y áreas compartidas de
equipos.
En agua de enjuague: totalidad del equipo
En hisopado 25-100 cm2
Factor de recuperación del método de muestreo.
108 Límite Microbiológico

Aspectos a considerar:
Analizar los riesgos de contaminación
Considerar el tiempo de almacenamiento y las
condiciones del equipo.
El equipo debe estar seco.
Esterilización y contaminación por pirógenos.
La validez de la limpieza del equipo esta dada por los
análisis microbiológicos.
109 Límite Microbiológico

Aspectos a considerar.

Especificación microbiológica del producto terminado.

Especificaciones microbiológicas según clasificación del
área.
 ELECCION DEL TRAZADOR
¿Qué debe cumplir el trazador?

• El más difícil de limpiar

• Con mas proporción de P.A.
• Método analítico sensible
• Sin poder antimicrobiano

110
 Factores de selección
del trazador

111
 METODOS ANALITICOS
TIPOS

• ORGANOLEPTICOS
Si no da correcto no es necesario continuar
• METODOS ESPECIFICOS
• Proporcionan el valor exacto del analito
• METODOS INESPECIFICOS
• Proporcionan un valor inferior a……..

112 • METODOS MICROBIOLOGICOS

• Microorganismos
• Endotoxinas
 METODOS ANALITICOS
Requisitos
• Validados.
• Métodos documentados
• Instrumentos y equipos calificados y
calibrados
• Patrones de referencia confiables
• Personal calificado
113
• Capaces de cuantificar trazas del orden
del límite de limpieza.
• LOQ del método menor al Límite calculado
 METODOS ANALITICOS

CARACTERISTICAS DE LOS METODOS FISICOQUIMICOS

114
115 PROBLEMAS QUE SE PRESENTAN
 La muestra tiene una concentración por debajo del límite de
cuantificación
¿Cómo aumentar la concentración de la muestra?
Agua de enjuague
Disminuyendo el volumen de agua de muestreo
Hisopado
• Disminuyendo volumen de extracción del hisopo
 110 µg/20 mL= 5,5 µg/mL pero en 10 mL es 11 µg/mL
• Incrementando el área muestreada
 Si el límite es 11 µg/mL para 25 cm2, extraídos con 10 mL, para 100 cm2
será de 22 µg/mL
 TOC en Validaciones de Limpieza

• Medida de residuos de PA
• Medida de residuos de detergentes
• Peor caso posible de análisis: cualquier
residuo se asume que será el contaminante
• Se asume que todo el TOC es principio
activo o detergente

116 Ejemplo:
Límite residuo de detergente: 5 ppm
Si el resultado del análisis de TOC es < 5 ppm,
entonces el sistema está limpio.
 TOC: cálculo del factor de
recuperación

Carbónico orgánico total (TOC): Cálculos

FR= (Mprob.-Cneg.)/(Cposit. – Blanco)

Mprob.: Lectura problema (concentración conocida)

Cneg.: Lectura del control negativo (hisopo más agua purificada)
Cposit.: Lectura del control positivo (patrón de igual
117 concentración teórica que el problema)
Blanco: Lectura del control de agua purificada
 Límite de aceptación TOC

µ𝑔
𝐹𝑥𝐷𝑇 𝑑𝑖𝑎𝑟𝑖𝑎 𝑚í𝑛𝑖𝑚𝑎 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑎𝑚𝑖𝑛𝑎𝑛𝑡𝑒 𝐴 )
𝑑í𝑎
PPM A = µ𝑔
𝐷𝑇 𝑑𝑖𝑎𝑟𝑖𝑎 𝑚á𝑥𝑖𝑚𝑎 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜 𝑠𝑖𝑔𝑢𝑖𝑒𝑛𝑡𝑒 𝐵 ( )
𝑑í𝑎

En el supuesto que:
• Dosis mínima A sea 25 mg
118 • PDE: 20 µg/día
• Dosis máxima de B: 1 g
Calcular las ppm límites para método de TOC, teniendo en cuenta
que el compuesto A tiene un 57, 34 % de C en su composición
119

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