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INSTITUTO SUPERIOR TECNOLÓGICO MANUEL NÚÑEZ BUTRÓN
CARRERA PROFESIONAL DE LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA
PATOLOGICA DETERMINACION DE PERFILES BIOQUIMICOS
TEMA: PERFIL RENAL, UTILIDAD E IMPORTANCIA. ESTUDIO DE LA
FUNCION RENAL, FISIOPATOLOGIA RENAL, DETERMINACIONES
ANALITICAS, PATRONES DE ALTERACION RENAL. DETERMINANCION
DE UREA. PRINCIPIOS, TECNICAS, EQUIPOS, INSTRUMENTOS,
INSUMOS E INTERPRETACION CLINICA
AUTORES:
- GUTIERREZ PARIAPAZA, Ruth Cinthia
- RUELAS APAZA, Ingrith Alexandra
tamaño, reciban aproximadamente un
RESUMEN 20% del gasto cardiaco. Además, una
destacada inervación por fibras nerviosas
Los riñones son órganos esenciales que,
simpáticas, regula entre otras actividades
además de actuar a modo de filtro
la liberación de renina, el flujo sanguíneo
eliminando productos metabólicos y
renal o la reabsorción de Na+ en las
toxinas de la sangre, participan en el
células tubulares.
control integrado del líquido extracelular,
del equilibrio electrolítico y del equilibrio
acido-básico. Producen hormonas como el .PALABRAS CLAVE
calcitriol o la eritropoyetina, y en ellos se Nefrona, Filtrado glomerular, Función
activan metabolitos como la enzima tubular, Función endocrina renal,
renina. Por ello, al describir la fisiología Formación de orina
renal, hay que recordar que va mucho más
allá del estudio del órgano que regula la ABSTRAC
excreción de productos de desecho. Esto The kidneys are essential organs that, in
es especialmente relevante en el ámbito addition to acting as a filter eliminating
de la Nefrología, donde en ocasiones, la metabolic products and toxins from the
valoración de mantener, aunque solo sea blood, participate in the integrated control
de forma parcial esta funcionalidad renal, of extracellular fluid, electrolyte balance
alcanza una gran importancia. and acid-base balance. They produce
hormones such as calcitriol or
Como ocurre con el resto de nuestro erythropoietin, and metabolites such as
organismo, la fisiología renal está ligada a the enzyme renin are activated. Therefore,
la estructura del aparato excretor renal, when describing kidney physiology, we
diseñada para mantener un flujo must remember that it goes far beyond
unidireccional. Este flujo hará que la orina, the study of the organ that regulates the
que inicia su formación en los riñones, excretion of waste products. This is
órganos principales del sistema, pase a especially relevant in the field of
través de los uréteres a la vejiga urinaria Nephrology, where sometimes the
para su almacenamiento, para que assessment of maintaining, even if only
posteriormente pueda ser eliminada a partially, this renal functionality is of great
través de la uretra. Para que esta actividad importance.
se lleve a cabo, los riñones cuentan con
una vascularización muy significativa, que As with the rest of our body, kidney
facilita que, a pesar de su pequeño physiology is linked to the structure of the
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renal excretory system, designed to etiología de la nefropatía, requerirá
maintain a unidirectional flow. This flow otras exploraciones complementarias
will cause the urine, which begins its (analíticas, radiológicas o estudio
formation in the kidneys, the main organs anatomopatológico mediante biopsia).
of the system, to pass through the ureters Resulta útil por la inmediatez de la
to the urinary bladder for storage, so that información, el bajo coste y la
it can later be eliminated through the simplicidad de obtención de la
urethra. For this activity to be carried out, muestra. También existen pruebas
the kidneys have very significant orientadas al diagnóstico de patologías
vascularization, which makes it possible tubulares y no glomerulares
for them, despite their small size, to (reabsorción y concentración y
receive approximately 20% of cardiac acidificación de la orina).
output. Furthermore, a prominent
innervation by sympathetic nerve fibers ESTIMACIÓN DEL FILTRADO
regulates, among other activities, the GLOMERULAR.
release of renin, renal blood flow or the
reabsorption of Na+ in tubular cells. CONCEPTO DE ACLARAMIENTO
RENAL
KEYWORDS
La estimación del FG se basa en el
Nephron, Glomerular filtration, Tubular concepto de aclaramiento plasmático
function, Renal endocrine function, de una sustancia en su paso por el
Urine formation riñón. Este aclaramiento se define
como el volumen de plasma que
INTRODUCCIÓN queda totalmente libre de dicha
sustancia a su paso por el riñón por
La Enfermedad Renal Crónica (ERC) unidad de tiempo (ml/min). La mejor
cursa en muchos pacientes de forma estimación del FG requeriría que la
asintomática durante tiempo. sustancia utilizada se filtre libremente,
Determinar de forma adecuada la no se reabsorba ni secrete a nivel del
función renal tiene gran importancia en túbulo renal y no presente eliminación
la práctica clínica, tanto para el extrarrenal.
diagnóstico precoz de la nefropatía Distintas sustancias, exógenas y
como para el seguimiento de la endógenas, se han utilizado para
progresión y previsión del inicio de conocer el FG a partir de su
tratamiento renal sustitutivo. Con aclaramiento renal. Para estas
frecuencia, la detección inicial de la mediciones, se requiere conocer los
enfermedad renal se realiza a partir de niveles en sangre y orina de la
un análisis rutinario en el que se sustancia y el volumen urinario
observa un aumento en la (ml/min).
concentración de creatinina en sangre
y/o alteración en el análisis cualitativo El aclaramiento de una sustancia se
de la orina. El dato del aumento de puede medir mediante
creatinina debe completarse con una
estimación del FG. El análisis Medición del FG mediante sustancias
cualitativo de la orina denominado exógenas administradas vía
anormales y sedimento, útil en la intravenosa.
orientación diagnóstica de la posible
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Considerada clásicamente como la fórmulas está recomendado en
técnica de elección para medición del distintas guías de la práctica clínica.
FG, sólo se utiliza en estudios de
investigación clínica por su De todos modos, la fórmula del
complejidad y coste: aclaramiento de creatinina endógena
con recogida de orina de 24 horas se
Inulina: filtrada por el riñón no se mantiene para situaciones especiales
reabsorbe ni secreta a nivel tubular. en las que el valor de creatinina sérica
está influido por factores dependientes
Medición del FG mediante sustancias del paciente debido a situaciones
endógenas específicas.1 En dichas situaciones
(tabla 1) el uso de fórmulas
Creatinina sérica: sustancia de matemáticas basadas en la creatinina
producción endógena más utilizada sérica en lugar del aclaramiento con
para calcular la tasa de FG. Deriva del recogida de orina de 24 horas puede
metabolismo de la creatina y infraestimar el valor del FG.3
fosfocreatina en el tejido muscular.
Diariamente, entre un 1-2% de la Urea.
creatina muscular se convierte a Aunque el 90% de la urea es eliminada
creatinina. Por tanto, la producción de por el riñón por filtración, el 40-70%
creatinina es proporcional a la masa difunde pasivamente del túbulo al
muscular. En condiciones normales, es intersticio, y esta difusión se
filtrada libremente por el glomérulo y incrementa cuando menor es el flujo
un 10-15% es secretado a nivel tubular. Por eso, la disminución del
tubular. Debido a esta secreción volumen urinario comporta un aumento
tubular, que puede aumentar hasta el de la reabsorción pasiva de la urea y
50% en la insuficiencia renal, el cálculo una disminución en su eliminación.
del FG mediante esta sustancia puede Estos datos y la variabilidad de urea
estar sobreestimado en determinados en sangre dependiente de la ingesta y
casos.1 De hecho, aun cuando este catabolismo proteico hacen que el
error de estimación podría estar cálculo del aclaramiento de urea no se
equilibrado por un error semejante y utilice en la práctica clínica para
de signo contrario atribuible a la calcular el FG.
técnica de determinación de la
creatinina sérica (reacción de Jaffé), Aclaramiento medio de urea y
se acepta que suele haber siempre creatinina: el cálculo del aclaramiento
una sobreestimación en la tasa de FG medio de urea y creatinina con
calculada a partir de la creatinina en recogida de orina de 24 horas es
sangre y orina. recomendado por las guías europeas
de diálisis y trasplante para pacientes
Como, por otro lado, no se puede con ERC avanzada (ERC estadio 4-5 o
garantizar que la recogida de la orina con valores de creatinina sérica >2,5
sea adecuada (completa y correcta), mg/dl).2 Fórmula:[Aclaramiento de
sobre todo en ancianos y niños, se han creatinina + aclaramiento de urea]/2
propuesto distintas fórmulas, que se
considerarán más adelante, que
estiman el FG sin requerir recogida de
orina de 24 horas. El uso de estas
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Esta recomendación se incluye porque
en la ERC avanzada existe un La correcta interpretación de los
aumento de la reabsorción de urea a resultados de estas fórmulas exige
nivel tubular (de hasta un 40-50%) que estabilidad en la función renal, puesto
determina que se infraestime el FG, y que pequeños cambios en el valor de
que viene compensado por la creatinina sérica pueden significar
secreción tubular de creatinina que lo variaciones importantes en el FG. Este
sobrestima. Por este motivo, el cálculo hecho limita su utilidad en procesos
del aclaramiento medio de ambos renales agudos. Por otro lado, al ser
valores (BUN y creatinina) parece útil ecuaciones estimativas, entre ellas hay
en estos pacientes. diferencias dependientes del método
estadístico utilizado en su desarrollo y
En condiciones normales, el riñón filtra validación, las variables incluidas y el
aproximadamente 180 litros de plasma rendimiento, sobre todo en función de
en 24 horas. En varones, el valor de las poblaciones en que se apliquen.
referencia del aclaramiento plasmático
es de 130 ml/min/1,73 m2, y en OTROS PARÁMETROS
mujeres de 120 ml/min/1,73 m2. Estos RELACIONADOS CON LA FUNCIÓN
valores corresponden a la suma de la GLOMERULAR
tasa de filtración de todas las nefronas
funcionantes, varían según la masa Relación entre creatinina y filtrado
corporal y disminuyen con la edad. Se glomerular
calcula una disminución de 10 ml/min
por 1,73 m2 por cada década a partir Aunque la creatinina sérica aislada
de los 40 años, y llegando a ser la sigue siendo el método más extendido
mitad a los 80 años.3 de medida indirecta de función renal,
la relación entre la concentración
ECUACIONES ESTIMATIVAS DEL sérica de creatinina y el FG no es
FILTRADO GLOMERULAR lineal. Como consecuencia, hay que
tener en cuenta que el FG debe
Debido a las limitaciones del cálculo descender al menos el 50% para que
del FG mediante el aclaramiento de las la concentración de creatinina se eleve
sustancias anteriormente por encima del rango de referencia
mencionadas, se han desarrollado una (figura 1).
serie de ecuaciones que tratan de
estimar el FG en la mayoría de los Cistatina C sérica
casos a partir de la creatinina sérica y
determinadas variables Proteína de bajo peso molecular
antropométricas y demográficas. Las (13.300 Da) que pertenece a la familia
ecuaciones de estimación del FG son de los inhibidores de la cisteína-
más exactas que la valoración del proteasa. Es filtrada en el glomérulo y
mismo a partir de la medida exclusiva catabolizada a nivel tubular. A
de creatinina (nivel de recomendación diferencia de la creatinina, se produce
A).4 Las fórmulas más utilizadas son de forma constante por las células
Cockcroft-Gault y MDRD (Modification nucleadas y aparentemente no es
of Diet in Renal Disease) en adultos, y modificable por la dieta. Por este
Schwartz y Counahan- Barratt en motivo, en los últimos años se ha
población pediátrica.5 propuesto como posible medida
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indirecta del FG. Sin embargo, también riñones no funcionan bien, no pueden
parece estar influenciada por el sexo, filtrar la urea correctamente, y sus
la masa muscular, la edad, niveles aumentan en la sangre. La
alteraciones funcionales del tiroides y concentración de urea en sangre
toma de esteroides.18-20 Por este empieza a aumentar cuando la
motivo, su uso en poblaciones capacidad de filtrado de los riñones es
trasplantadas, entre otras, está una cuarta parte más baja de lo
limitado.22 normal.
La cistatina C parece ser más eficaz En el laboratorio, el análisis de la urea
que la creatinina para detectar el sanguínea se solicita en una petición
deterioro inicial de la función renal, general de bioquímica en sangre.
sobre todo en el fracaso renal agudo. Puede expresarse en forma de
Sin embargo, aunque hay estudios que nitrógeno ureico en sangre (BUN) o de
muestran una mejor correlación con el urea propiamente dicha y mide la
FG de los niveles de cistatina C en concentración de urea o de nitrógeno
sangre respecto a los de creatinina, y ureico (BUN) en la sangre.
que incluso existen ecuaciones
estimativas del FG que incluyen la ¿Para qué se determina la urea en
cistatina C, sus ventajas clínicas están sangre?
aún en estudio.21,22 Se ha propuesto
su uso para poblaciones con menor La determinación de urea en sangre se
producción endógena de creatinina realiza para:
(niños, ancianos y cirróticos). Por otro Valorar el funcionamiento de los
lado, parece que la cistatina C predice riñones.
el riesgo cardiovascular y la mortalidad Valorar la evolución de las
global mejor que la creatinina y las enfermedades renales.
ecuaciones derivadas de ésta, sin Comprobar el funcionamiento del
poder diferenciar si esta ventaja es por tratamiento de las enfermedades
ser mejor marcador de función renal o renales (ej. diálisis).
porque ejerce efectos cardiovasculares Valorar si existe deshidratación.
independientes del FG.23,24
1. DETERMINACION DE UREA
II.1. POR ANALIZADOR
MARCO TEORICO BIOQUIMICO SEMI-
AUTOMATIZADO
La urea es el principal residuo de la
descomposición de las proteínas. Está
directamente relacionada con la
cantidad de proteínas que comemos y
con las que el propio cuerpo
descompone, lo que depende de la
masa muscular. La urea se produce
fundamentalmente en el hígado. Los
riñones son los encargados de extraer
la mayor parte de la urea (90 %) de la
FASE PRE- ANALITICA
sangre y eliminarla por la orina. Si los
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Antes de cualquier procedimiento: Libre de hemólisis. El suero o plasma
utilizar los equipos deproteccion deben separarse lo antes
personal posible de los eritrocitos con el fin de
evitar la liberación de fósforo
1. Recepcion de orden de los hematies. Estabilidad: 7 días a
2-8ºC.
FASE ANALITICA
1. Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: . . . .. . . . . . .
2. identificacion del paciente Cubeta:. . . . . .. . . . ………. . . .
Temperatura. . .. . . . . ……... . .
FASE POST ANALITICA
VALORES REFERENCIALES
3. Orientación y preparacion del Suero o plasma
paciente 0,10 - 0,50 g/l como urea (4,7 - 23,4
mg/dl como BUN)
Este rango se obtuvo de muestras
provenientes de 120
individuos habitantes de la ciudad de
Rosario (Argentina),
de ambos sexos (entre 20 y 45 años),
TOMA DE MUESTRA sin síntomas de
disfunción renal u otra enfermedad
aparente.
Orina
Normalmente, la eliminación de urea
está sujeta a grandes
variaciones dependientes de la dieta.
Por término medio, y
MATERIALES con una dieta mixta corriente, se
1. Espectrofotómetro ó analizador excretan unos 30 g en 24
horas, con oscilaciones comprendidas
para lecturas a 340 nm.
entre 20 g y 40 g.
2. Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
En la literatura (Tietz, N.W.) se
3. Equipamiento habitual de
menciona el siguiente rango
laboratorio
de referencia:
4. Tubos de ensayo Suero o plasma: 13 - 43 mg/dl (2,1 -
5. Tips o puntillas de 1000 ul y 100ul 7,1 mmol/l)
6. Micropipetas graduables Orina: 26 - 43 g/24 hs (0,43 - 0,72
7. Agua destilada mol/24 horas)
8. Reactivo para la determinación de Se recomienda que cada laboratorio
urea. establezca sus propios valores de
referencia.
CONDICIONES DE LAS MUESTRAS CONVERSION DE UNIDADES
a) Suero o plasma1,5: Urea (g/l) x 46,7 = BUN (mg/dl)
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Urea (mg/dl) x 0,1665 = Urea (mmol/l) ) a los 120
Urea (mg/dl) x 0,467 = BUN (mg/dl) segundos (60 segundos después de la
BUN (mg/dl) x 2,14 = Urea (mg/dl) 1° lectura).
Urea (g/24 hs) x 0,0167 = Urea (mol/24 II- TECNICA CON REACTIVO UNICO
hs) Llevar a cero el espectrofotómetro con
Para convertir valores de urea (en g/l) agua destilada.
a valores de BUN (en En una cubeta mantenida a la
mg/dl), se debe utilizar el siguiente temperatura de trabajo,
factor de conversión: colocar:
1 1000 Reactivo único 1 ml
factor = x = 46,7 Muestra o Standard 10 ul
2,14 10 Mezclar inmediatamente (sin invertir) y
donde: disparar simultáneamente un
1/2,14 = factor de conversión entre la cronómetro. A los 60 segundos
urea y el nitrógeno exactos
ureico en sangre (BUN) medir la absorbancia (D1 o S1
1000 = factor de conversión entre ) y continuar la incubación.
gramo y miligramo Medir nuevamente la absorbancia (D2
1/10 = factor de conversión entre litro y o S2) a los 120
decilitro segundos (60 segundos después de la
Ejemplo: 1° lectura)
0,50 g/l de urea x 46,7 = 23,4 mg/dl de
BUN FASE POST ANALITICA
RANGOS DE MEDIDA
FASE ANALITICA
PROCEDIMIENTO
I- TECNICA CON REACTIVOS
SEPARADOS
Llevar a cero el espectrofotómetro con
agua destilada.
En una cubeta mantenida a la
temperatura de trabajo,
colocar:
Reactivo A 1 ml
Muestra o Standard 10 ul
Mezclar sin invertir. Incubar
aproximadamente 1 minuto
a 37o
C. Luego agregar:
Reactivo B 250 ul
Mezclar inmediatamente (sin invertir) y
disparar simultáneamente un
cronómetro. A los 60 segundos
exactos
medir la absorbancia (D1 o S1
) y continuar la incubación.
Medir nuevamente la absorbancia (D2
o S2
