Chocolate Agar (GC II Agar with BD IsoVitaleX™)
Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base)
Medios en placa preparados, listos para usar
L012036(02)
2022-04
Español
254060 254089 257011 257456
USO PREVISTO
El BD Chocolate Agar (GC II Agar with BD IsoVitaleX™) y el BD Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base) son medios no selectivos
para el aislamiento y cultivo de microorganismos exigentes, especialmente los géneros Neisseria y Haemophilus, a partir de diversas
muestras clínicas.
PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO
Carpenter y Morton describieron un medio mejorado para el aislamiento de gonococos en 24 horas.1 La eficacia del medio, agar GC
suplementado con hemoglobina y concentrado de levadura, se demostró en un estudio de doce medios utilizados en aquella época
para el aislamiento de este microorganismo.2 Posteriormente, se realizaron varias mejoras en el medio.3–5 En BD Chocolate Agar
(GC II Agar with BD IsoVitaleX™), la base GC II aporta nutrientes en forma de caseína y peptonas de carne como fuentes de
nitrógeno, fosfatos para mantener el pH y almidón de maíz para neutralizar los ácidos grasos tóxicos que pueden estar presentes en
el agar. La hemoglobina proporciona el factor X (hemina). El BD IsoVitaleX™ Enrichment es un suplemento definido que proporciona
el factor V (nicotinamida adenina dinucleótido, NAD), esencial para el género Haemophilus, además de vitaminas, aminoácidos,
coenzimas, glucosa, iones férricos y otros factores que favorecen el crecimiento del género patógeno Neisseria y otros
microorganismos exigentes. También se ha añadido piridoxal y factores de crecimiento específicos para favorecer el crecimiento de
bacterias grampositivas; se ha añadido piridoxal para favorecer el crecimiento del género Granulicatella y Abiotrophia (estreptococos
con nutrición diversa).6–9
Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base) es un medio alternativo para el aislamiento de microorganismos exigentes a partir de
muestras clínicas.7 BD Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base) contiene peptona de proteasa, digerido de hígado y extracto de
levadura como fuentes de nitrógeno y vitaminas. El cloruro sódico mantiene el equilibrio osmótico. La sangre de caballo calentada
(desnaturalizada por calor) aporta el factor X (hemo) y, dado que no contiene NADasa, se necesita el factor V (nicotinamida adenina
dinucleótido, NAD) para el crecimiento de Haemophilus influenzae, que además aporta nutrientes adicionales.
REACTIVOS
Fórmula aproximada* por litro de agua purificada
BD Chocolate Agar (GC II Agar with BD IsoVitaleX™) BD Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base)
Digerido pancreático de caseína 7,5 g Peptona de proteosa n.º 3 15,0 g
Peptona de carne seleccionada** 7,5 g Digerido de hígado 2,5 g
Almidón de maíz 1,0 g Extracto de levadura 5,0 g
Fosfato dipotásico 4,0 g Cloruro de sodio 5,0 g
Fosfato monopotásico 1,0 g Sangre de caballo (calentada) 7%
Cloruro de sodio 5,0 g pH 7,4 ± 0,2
Agar 12,0 g
Hemoglobina 10,0 g
BD IsoVitaleX™ Enrichment 12,0 ml
Piridoxal 0,01 g
Factores de crecimiento 0,5 g
pH 7,3 ± 0,2
* Ajustada o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.
1
BD IsoVitaleX™ Enrichment contiene los siguientes factores de crecimiento:
Vitamina B12 0,01 g
L-glutamina 10,0 g
Adenina 1,0 g
Clorhidrato de guanina 0,03 g
Acido p-aminobenzoico 0,013 g
Nicotinamida adenina dinucleótido (NAD) 0,25 g
Pirofosfato de tiamina 0,1 g
Nitrato férrico 0,02 g
Clorhidrato de tiamina 0,003 g
Hidrocloruro de cisteína 25,9 g
L-cistina 1,1 g
Glucosa 100,0 g
* Ajustada o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
Para uso diagnóstico in vitro. No reutilizar. Para uso por parte de personal de laboratorio debidamente formado.
No utilizar las placas si muestran evidencia de contaminación microbiana, decoloración, deshidratación, agrietamiento o cualquier
otro signo de deterioro.
Desecho del producto
Deseche todos los reactivos utilizados y cualquier otro material desechable contaminado siguiendo los procedimientos para residuos
infecciosos o potencialmente infecciosos. Es responsabilidad de cada laboratorio manipular los residuos sólidos y líquidos según su
naturaleza y grado de peligrosidad, así como tratarlos y desecharlos (o hacer que se traten y desechen) de acuerdo con todas las
normativas aplicables.
ALMACENAMIENTO
Al recibir las placas, almacenarlas en un lugar oscuro a una temperatura de 2–8 °C, en su envase original hasta justo antes de su uso.
Las placas pueden inocularse hasta la fecha de caducidad (consulte la etiqueta del paquete) e incubarse durante los períodos de
incubación recomendados. Las placas de pilas abiertas de 10 unidades almacenadas en un área limpia a una temperatura de 2–8 °C
pueden utilizarse durante 7 días.
Evite la congelación y el sobrecalentamiento. La congelación puede causar el deterioro completo de los geles de agar o precipitación
en los medios líquidos. Las temperaturas superiores a la temperatura de almacenamiento indicada pueden causar el deterioro de los
ingredientes de los medios. Esto se aplica especialmente a los agentes selectivos, tales como los antimicrobianos. Puede producirse
humedad en exceso debido al agua de condensación después de cambios extremos de temperatura subsiguientes (por ej., de 2 °C a
25 °C y nuevamente a 2 °C) en todos los medios sólidos. Los medios en placa con humedad en exceso deben secarse antes de la
inoculación, p. ej., colocándolos con las tapas abiertas en una incubadora a 30–37 °C hasta un máximo de 1 hora. No deshidratar los
medios. El tiempo exacto de exposición depende de la humedad del aire en la incubadora. El usuario debe evitar la contaminación
durante el almacenamiento, por ej., guardando las placas en bolsas de plástico esterilizadas. Todos los medios preparados deben
almacenarse en un lugar oscuro. Si se les expone a luz artificial, solar o UV durante un tiempo más prolongado, el rendimiento de
todos los medios se puede reducir. Todos los medios preparados de BD pueden utilizarse hasta la fecha de caducidad e incubarse
durante los periodos de incubación recomendados.
CONTROL DE CALIDAD DEL USUARIO
Incubar las placas a una temperatura de 35 ± 2 °C en una atmósfera aerobia suplementada con dióxido de carbono. Efectuar lectura
de las placas transcurridas 18–24 horas y 42–48 horas de incubación.
BD Chocolate Agar (GC II Agar with BD IsoVitaleX™) y
Especies Cepas
BD Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base)
Haemophilus influenzae ATCC® 10211 Crecimiento de bueno a excelente
Neisseria gonorrhoeae ATCC 43069 Crecimiento de aceptable a excelente
Neisseria meningitidis ATCC 13090 Crecimiento de bueno a excelente
Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 Crecimiento de bueno a excelente
Sin inocular Marrón chocolate, opaco, posiblemente poco homogéneo
*Además, BD Chocolate Agar (GC II Agar with BD IsoVitaleX™) puede analizarse con Granulicatella (Abiotrophia) adiacens DSM 9848 para delatar el
crecimiento de estreptococos con nutrición diversa.8,9
PROCEDIMIENTO
Materiales suministrados
BD Chocolate Agar (GC II Agar with BD IsoVitaleX™) o BD Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base), ambos suministrados en
BD Stacker™ Plates de 90 mm.
2
Materiales necesarios pero no suministrados
Medios de cultivo auxiliares, reactivos, asas de inoculación, esparcidores, pipetas, incubadoras y equipo de laboratorio, según se
requiera.
Tipos de muestras
El BD Chocolate Agar (GC II Agar with BD IsoVitaleX™) o el BD Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base) se pueden usar
principalmente para todos los tipos de muestras de infecciones que se sospecha que contienen microorganismos exigentes,
predominantemente para muestras de sitios corporales principalmente estériles (ej., líquido cefalorraquídeo, abscesos). Se utiliza
principalmente para el aislamiento no selectivo de Neisseria, Haemophilus y otras bacterias que pueden no crecer en los medios de
agar sangre utilizados normalmente, como el agar Columbia con sangre de carnero al 5 %. Además, el BD Chocolate Agar (GC II
Agar with BD IsoVitaleX™) puede usarse para el aislamiento de los géneros Abiotrophia y Globicatella (estreptococos con variaciones
en la nutrición).8,9 Los medios también se utilizan como medios de subcultivo a partir de hemocultivos (consulte también
CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO).
Recogida y transporte de las muestras
Neisseria gonorrhoeae, N. meningitidis, Haemophilus y otros microorganismos exigentes son sensibles a las condiciones ambientales
adversas. Por consiguiente, se deben utilizar medios de transporte adecuados para todas las muestras. Las muestras deben ser
enviadas al laboratorio tan pronto como sea posible y no deben transcurrir más de 24 horas, incluso si se utilizan medios de
transporte. La temperatura de transporte óptima es de 20–25 °C. No refrigerar.10,11
Procedimiento de análisis
1. Una vez recibida la muestra en el laboratorio, extenderla tan pronto como sea posible en BD Chocolate Agar (GC II Agar with
BD IsoVitaleX™) o BD Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base). La placa de siembra en estrías se utiliza principalmente para
aislar los cultivos puros de las muestras con flora mixta.
2. Si, por el contrario, el material se cultiva directamente empleando una torunda, hacerla girar en una sección pequeña cercana al
borde, para sembrarla luego en estrías desde esta área inoculada.
3. Si la muestra se ha obtenido de una zona corporal con flora normal, también debe inocularse en los medios selectivos
adecuados, según el agente patógeno que se desee aislar. Para Neisseria gonorrhoeae, se debe incluir una placa BD Martin-
Lewis Agar, Modified o BD GC-Lect™ Agar y, para Haemophilus, una placa BD Chocolate Agar with BD IsoVitaleX™ and
Bacitracin.
4. Incubar las placas a una temperatura de 35 ± 2 °C en una atmósfera aerobia suplementada con dióxido de carbono. Efectuar
lecturas de las placas después de 18 a 24 horas y 42–48 horas de incubación.
Resultados
En la tabla siguiente se indica la morfología característica de las colonias:
BD Chocolate Agar (GC II Agar with IsoVitaleX™) y
Microorganismos
BD Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base)
Haemophilus influenzae Pequeñas (1 mm), húmedas, nacaradas con un olor de «ratón» característico
Neisseria gonorrhoeae Pequeñas, de color blanco grisáceo a incoloro, mucoides
Neisseria meningitidis Medianas a grandes, gris azulado, mucoides
Colonias pequeñas, planas o más grandes, mucoides verdosas, las colonias circundantes
Streptococcus pneumoniae
pueden ser verdosas
Granulicatella (Abiotrophia) adiacens* Colonias pequeñas, grises verdosas; el medio que las rodea puede ser verdoso
CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
El BD Chocolate Agar (GC II Agar with BD IsoVitaleX™) y El BD Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base) son medios no selectivos
enriquecidos en los que crecen bacterias exigentes y no exigentes, incluida la flora normal. Por tanto, también se recomienda inocular
las muestras de zonas corporales con flora normal en medios selectivos apropiados.
El término «bacterias exigentes» se refiere a las bacterias que no crecen o no crecen bien en los medios de aislamiento primario
utilizados normalmente con sangre de carnero: por ej., Haemophilus, Neisseria patógena y muchos otros microorganismos. Consultar
las referencias para obtener una descripción detallada de los tipos de muestras que deben inocularse en este medio y los tipos de
microorganismos para cuyo aislamiento se utiliza este medio.8,9,11,12
Son altos el número y la variedad de especies bacterianas que se dan como agentes infecciosos. Por tanto, antes de utilizar
sistemáticamente el medio para microorganismos de reciente descripción o raramente aislados, el usuario debe analizar su
conveniencia mediante cultivos puros del microorganismo en cuestión.
No se ha demostrado que BD Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base) favorezca el crecimiento de especies de Abiotrophia y otros
estreptococos con nutrición diversa.
Consultar las referencias para obtener información acerca de los estreptococos con nutrición diversa.6,8,9,13
Rendimiento clínico respaldado por literatura científica revisada por pares.14
3
DISPONIBILIDAD
Número de catálogo Descripción Número de placas por paquete
254060 BD Chocolate Agar (GC II Agar with BD IsoVitaleX™) 20
254089 BD Chocolate Agar (GC II Agar with BD IsoVitaleX™) 120
257011 BD Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base) 20
257456 BD Chocolate Agar (Blood Agar No. 2 Base) 120
REFERENCIAS
1. Carpenter, C. M., and H. E. Morton. 1947. An improved medium for isolation of the gonococcus in 24 hours. Proc. N.Y. State
Assoc. Public Health Labs. 27:58–60.
2. Carpenter, C. M., M. A. Bucca, T. C. Buck, E. P. Casman, C. W. Christensen, E. Crowe, R. Drew, J. Hill, C. E. Lankford,
H. E. Morton, L. R. Peizer, C. I. Shaw, and J. D. Thayer. 1949. Evaluation of twelve media for the isolation of the gonococcus.
Am. J. Syphil. Gonorrh. Venereal Diseases 33:164–176.
3. Power, D. A. (ed.), and P. J. McCuen. 1988. Manual of BBL products and laboratory procedures, 6th ed. Becton Dickinson
Microbiology Systems, Sparks, Maryland USA.
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isolation of Haemophilus species from cases of seasonal conjunctivitis associated with severe endemic trachoma.
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6. Ruoff, L. R. 2003. Aerococcus, Abiotrophia, and other infrequently isolated aerobic catalase-negative, gram-positive cocci.
In: Murray, P. R., E. J. Baron, J. H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed.
American Society for Microbiology, Washington, D.C. USA.
7. Anonymous. 1998. DIFCO Manual, 11th edition. BD Difco™ Laboratories, Division of Becton Dickinson and Co. Sparks, Maryland
USA.
8. Reimer, L. G., and L. B. Reller. 1981. Growth of nutritionally variant streptococci on common laboratory and 10 commercial blood
culture media. J. Clin. Microbiol. 14:329–332.
9. Collins, M. D., and P. A. Lawson. 2000. The genus Abiotrophia (Kawamura et al.) is not monophyletic: proposal of
Granulicatella gen. nov., Granulicatella adiacens comb. nov., Granulicatella elegans comb. nov. and
Granulicatella balaenopterae comb. nov. Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 50:365–369.
10. Thomson, R. B., and J. M. Miller. 2003. Specimen collection, transport, and processing: bacteriology. In: Murray, P. R.,
E. J. Baron, J. H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for
Microbiology, Washington, D.C. USA.
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12. Murray, P. R., E. J. Baron, J. H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). 2003. Manual of clinical microbiology, 8th ed.
American Society for Microbiology, Washington, D.C. USA.
13. Ruoff, K. L. 2003. Aerococcus, Abiotrophia, and other infrequently isolated aerobic catalase-negative, gram-positive cocci.
In: Murray, P. R., E. J. Baron, J. H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed.
American Society for Microbiology, Washington, D.C. USA.
14. Doern G.V., Daum G.S., Tubert T.A. In vitro chloramphenicol susceptibility testing of Haemophilus influenzae: disk diffusion
procedures and assays for chloramphenicol acetyltransferase [published correction appears in J Clin Microbiol. 1988 Mar; 26
(3):612]. J Clin Microbiol. 1987;25(8):1453-1455.
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4
Historial de modificaciones
Revisión Fecha Resumen de modificaciones
Se ha modificado el número de documento; se ha restablecido la versión a la revisión 01 para las
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de la luz del sol», «No utilizar si el envase está dañado» y de las instrucciones de uso electrónicas con la
URL. Se ha añadido el símbolo de «REF» con los números de catálogo 254060, 254089, 257011 y
257456. Se han actualizado los símbolos ISO. Se han actualizado las secciones «Uso previsto»,
«Principios del procedimiento», «Reactivos» y «Advertencias y precauciones». Se ha añadido una
declaración de eliminación segura en la sección «Eliminación de productos». Se han actualizado las
secciones «Almacenamiento» y «Procedimiento». Se ha cambiado el encabezado «Materiales no
02 2022-04 suministrados» a «Materiales necesarios pero no suministrados». Se han actualizado las secciones
«Tipos de muestras» y «Procedimiento de análisis». Se ha actualizado la sección «Características de
rendimiento» y «Limitaciones del procedimiento». Se ha actualizado la sección «Referencias». Se ha
actualizado la declaración de información técnica. Se ha añadido una declaración de incidente grave y un
enlace que indica la disponibilidad de CoA, DOC, certificados ISO y SDS. Se ha actualizado el glosario de
símbolos. Se ha eliminado el símbolo de instrucciones de uso electrónica y el enlace de la última página.
Se han añadido la dirección y el símbolo del representante autorizado en Suiza (CH REP). Se ha
actualizado la declaración de marcas comerciales y copyright de BD.
5
GLOSARIO DE SÍMBOLOS [L006715(06) 2021-08]
Es posible que algunos de los símbolos que figuran a continuación no se apliquen a este producto.
Solo para clientes de EE. UU.: Para consultar el glosario de símbolos, visite bd.com/symbols-glossary
Símbolo Significado Símbolo Significado
Fabricante
Número de paciente
Representante autorizado en la Unión Europea
Representante autorizado en Suiza Este lado hacia arriba
Fecha de fabricación
No apilar
Fecha de caducidad
Sistema de barrera estéril única
Código de lote
Contenido o presencia de ftalato: combinación de di(2-etilhexil) ftalato (DEHP)
Número de catálogo y butilbencilftalato (BBP)
Número de serie Recoger por separado
Indica la recogida por separado obligatoria de los residuos de aparatos eléctricos y
Estéril electrónicos.
Esterilizado utilizando técnicas de procesado asépticas Marcado CE; significa que cumple con la especificación técnica europea
Esterilizado utilizando óxido de etileno
Esterilizado utilizando radiación Prueba diagnóstica en el lugar de asistencia al paciente
Esterilizado utilizando vapor de agua o calor seco
Producto para autodiagnóstico
No volver a esterilizar
Esto solo se aplica a EE. UU.: «Precaución: La ley federal estadounidense
No estéril impone restricciones sobre este dispositivo, cuya venta debe ser realizada por
un médico o por orden de este».
No utilizar si el envase está dañado y consúltense las instrucciones de uso País de fabricación
«CC» debe sustituirse por el código de país de dos o tres letras.
Vía fluida estéril Hora de recogida
Vía fluida estéril (óxido de etileno) Cortar
Vía fluida estéril (irradiación) Despegar por aquí
Frágil, manejar con cuidado Fecha de recogida
Manténgase fuera de la luz del sol
Manténgase fuera de la luz
Manténgase seco
Se produce gas de hidrógeno
Límite inferior de temperatura Perforación
Límite superior de temperatura Número de secuencia del panel de inicio
Límite de temperatura Número de secuencia del panel final
Número de secuencia interno
Limitación de humedad
Producto sanitario
Riesgos biológicos
Contiene sustancias peligrosas
No reutilizar
Marca de conformidad ucraniana
Consúltense las instrucciones de uso o consúltense las instrucciones de uso
electrónicas
Cumple los requisitos de la FCC conforme a 21 CFR, parte 15
Precaución
Certificación de producto UL para EE. UU. y Canadá
Contenido o presencia de látex de caucho natural
Identificador único de dispositivo
Producto sanitario para diagnóstico in vitro
Control negativo
Control positivo
Contenido suficiente para <n> pruebas
Sólo para la evaluación del funcionamiento en diagnóstico in vitro
Apirógeno
6
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