TEMA 9

DEGRADACIÓN DE
HIDRATOS DE CARBONO
 Panorámica de las principales vías del metabolismo de hidratos de carbono.

 Digestión y absorción de carbohidratos.

 Glucólisis
 Características generales
 Reacciones enzimáticas
 Balance energético
 Regulación

 Vías anaerobias de utilización del piruvato: fermentación láctica y alcohólica.

 Ruta de las pentosas fosfato: importancia fisiológica.

 ~ 50 % de las calorías ingeridas por un
individuo occidental medio procede de los
hidratos de carbono

Hidratos de carbono ingeridos/día:

Monosacáridos
150 g de almidón (n glucosas) Digestión  Glucosa
120 g de sacarosa (fructosa+glucosa) (lumen intestinal,  Fructosa
30 g de lactosa (galactosa+glucosa) glucosidasas)
 Galactosa
10 g de glucosa + fructosa

(transportadores)

Tejidos (Liberación a sangre por Absorción

(hígado principalmente, órgano GLUT-2) monosacáridos
encargado de regular el
metabolismo glucídico del (céls. intestinales)
organismo)
La glucosa es la única fuente de
energía para ciertas células
especializadas, y es la principal
fuente de energía para el cerebro
ALMACENAMIENTO
Síntesis de glucógeno
(hígado y músculo)

OXIDACIÓN
Ruta de las OXIDACIÓN
pentosas fosfato Vía Glucólisis
(céls. biosíntesis activa) (todas las céls. organismo)

SÍNTESIS
Gluconeogénesis
(hígado y riñón)
DIGESTIÓN DE LOS HIDRATOS DE
CARBONO

Hidrólisis de los enlaces

glucosídicos por GLUCOSIDASAS

- Saliva
- Secreciones pancreáticas
 OXIDACIÓN
Vía Glucólisis

 Presente en prácticamente todos los organismos vivos.

 Vía lineal - 10 reacciones.

 Convierte una molécula de glucosa (6C) en 2 de piruvato (3C),

generando ATP.

 En animales, es la única ruta metabólica que proporciona ATP

en ausencia de O2.

 Es una ruta citosólica.

La glucólisis desempeña un papel metabólico central en la

generación de energía y también en la de intermediarios
metabólicos para otras rutas
 REACCIÓN GLOBAL

D-glucosa + 2 Pi + 2 ADP + 2 NAD+

2 pyr + 2 ATP + 2 NADH + 2 H+ + 2 H2O

ΔGº’ = - 73.3 kJ/mol

UNIDIRECCIONAL
 (citosol) Glucólisis

Fermentación Fermentación
Alcohólica Láctica
(levaduras) (céls. animales, microorganismos)

(mitocondria) En organismos superiores, cuando el

aporte de O2 es insuficiente, la
fermentación permite obtener ATP
durante un corto período de tiempo
(ej: músculo esquelético sometido a
un ejercicio intenso)
 Balance global de la fermentación láctica

Glucosa + 2 Pi + 2 ADP
(C6H12O6)

2 lactato + 2 ATP + 2 H2O

(C3H6O3)

2 NAD+ 2 NADH 2 NADH 2 NAD+

GLUCOSA 2 pyr 2 lactato

En la fermentación los e- son aceptados, en lugar de por el O2,

por una molécula orgánica, por lo que no hay oxidación neta
de estos compuestos
Una célula que lleve a cabo la fermentación de glucosa a lactato
tiene acceso sólo a ~ 7 % de la energía libre total contenida en la
molécula de glucosa (el estado de oxidación de lactato y etanol
es el mismo que el de la glucosa).

El rendimiento energético es muy inferior al de

la respiración

Combustión de glucosa a CO2 y H2O

ΔGº’ = - 2870 kJ/mol

glucosa → 2 lactato
ΔGº’ = - 196 kJ/mol
 Visión general de la glucólisis
Fase de inversión
de energía
(5 reacciones)

La glucólisis
desempeña un
papel
metabólico
central en al
generación de
Fase de
generación de energía y de
energía intermediarios
(5 reacciones) metabólicos
para otras rutas.
RECORDAD…
 Existen 3 formas de sintetizar ATP

 Fosforilación a nivel de sustrato: la síntesis de

ATP está impulsada por la degradación de un
compuesto de energía superior.

 Fosforilación oxidativa: la síntesis indirecta de

ATP está impulsada por el transporte electrónico
mitocondrial (fuerza protón-motriz).

 Fotofosforilación: la síntesis de ATP está

impulsada por la fuerza protón-motriz generada por
la energía luminosa fotosintética (cloroplasto).
RENDIMIENTO NETO
 REACCIÓN 1. Primera inversión de ATP.
HEXOQUINASA

 Reacción de activación de la glucosa

 No es una reacción exclusiva de la glucólisis

Reacción irreversible
Además de activar a la glucosa la fosforilación le proporciona a la
molécula un grupo polar, cargado negativamente, que impide a la
glucosa atravesar la membrana de la célula

Se mantiene baja la
concentración de glucosa libre

La mayor parte de la glucosa

intracelular se encuentra fosforilada

La mayor parte de los intermediarios del metabolismo son compuestos

iónicos a pH7, lo que les impide escapar fuera de las células por simple
difusión.
La hexoquinasa puede utilizar además de glucosa otros
monosacáridos como sustrato (fructosa, manosa).

En hígado hay una segunda enzima que puede catalizar esta

reacción: GLUCOQUINASA

GLUCOQUINASA
HEXOQUINASA (Km = 10 mM)
(Km = 0.1 mM)
- No se inhibe por G6P
- Actúa cuando las [glucosa]sangre
- Se inhibe por G6P
son elevadas

Regulación alostérica de la actividad enzimática

por retroinhibición negativa (así se controla la (ej: tras la ingesta de un alto contenido de hidratos
entrada de sustratos en la ruta glucolítica) de carbono)
[glucosa]intracelular=2-15 mM

Una de las funciones

principales de hígado es
regular la concentración de
glucosa sanguínea

La concentración de glucosa
citosólica es generalmente muy
superior a la Km de la
hexoquinasa, por lo que esta
enzima está actuando en
condiciones de saturación
(Vmax), así que, ante un
aumento de concentración
citosólica de glucosa tiene que
ser otro enzima el que lleve a
cabo la reacción con el exceso
de sustrato (la glucoquinasa)
 ΔGº’ = - 16.7 kJ/mol
Es muy exergónica y por tanto irreversible
ΔG = - 33.9 kJ/mol

glucosa

Ruta de las G1P

G6P Síntesis de
pentosas
fosfato glucógeno
F6P

Continúa
glucólisis
 REACCIÓN 2. Isomerización de G6P
GLUCOSA FOSFATO ISOMERASA=FOSFOGLUCOISOMERASA

(aldohexosa) (cetohexosa)

 La presencia de un grupo carbonilo en C2 es imprescindible

para que más adelante se pueda escindir la molécula.
 Además, así el grupo –OH generado en C1 puede fosforilarse
con facilidad en la siguiente reacción.
 Es una reacción fácilmente reversible
 REACCIÓN 2. Isomerización de G6P
GLUCOSA FOSFATO ISOMERASA=FOSFOGLUCOISOMERASA

(aldohexosa) (cetohexosa)

 La presencia de un grupo carbonilo en C2 es imprescindible

para que más adelante se pueda escindir la molécula.
 Además, así el grupo –OH generado en C1 puede fosforilarse
con facilidad en la siguiente reacción.
 Es una reacción fácilmente reversible. Este enzima participa
también en la gluconeogénesis.
 FOSFOFRUCTOQUINASA 1 (PFK-1)
Es una enzima alostérica cuya actividad es muy sensible a la
situación energética de la célula, así como a las concentraciones
de otros intermediarios como citrato y ácidos grasos.

Sitio regulador
Centro activo

Centro activo
Sitio regulador

(Sólo se muestran 2 de las 4 subunidades)

Moduladores alostéricos positivos (activadores):
•AMP
•ADP
•Fructosa 2,6 bisfosfato (aumenta la afinidad de PFK-1 por
su sustrato F6P)

Moduladores alostéricos negativos (inhibidores):

•ATP
•Citrato (con una carga energética elevada el flujo a través del
ciclo de Krebs se reduce y el citrato se acumula y se trasporta de las
mitocondrias al citosol, inhibiendo la PFK-1)

La actividad de PFK-1 es muy sensible a la situación energética

de la célula.
Una carga energética alta inhibe PFK-1.

ATP ¿sustrato e inhibidor a la vez?

 FOSFOFRUCTOQUINASA 1 (PFK-1)

Como inhibidor el ATP se fija a un lugar distinto del enzima, con menor afinidad, de
modo que a concentraciones bajas de ATP el lugar regulador del enzima no está
ocupado y la cinética es casi hiperbólica. Sólo a concentraciones elevadas el ATP
funciona como inhibidor, reduciendo la afinidad por la sustrato F6P
 REACCIÓN 4. Fragmentación en dos triosas fosfato
ALDOLASA
“ruptura del azúcar” = glucólisis

 La ruptura de F1,6BP se produce entre C3 y C4.

 La reacción es muy endergónica en condiciones estándar.
 Sin embargo, en condiciones celulares ΔG = -1.3 kJ/mol.
 DHAP y G3P son importantes intermediarios metabólicos
(implicados en la gluconeogénesis y DHAP, además, en la
síntesis de fosfolípidos, ya que es precursor del glicerol-3P).
 REACCIÓN 5. Isomerización de la DHAP
TRIOSA FOSFATO ISOMERASA

Solo el G3P puede degradase en las

reacciones posteriores de la glucólisis

 La reacción es endergónica en condiciones estándar pero

transcurre hacia la derecha en la célula cuando [G3P] sea baja
(la razón es que el G3P es rápidamente consumido por la
acción de diversas enzimas).
 Los carbonos 1 y 6 de la glucosa se convierten en el C3 del
G3P.
 2 ATP
GLUCOSA 2 G3P
(6C) (3C)

Así concluye la fase de inversión de energía, ahora

comienza la fase de generación de energía, donde
se producirán compuestos de alta energía que puedan
impulsar la síntesis de ATP

2 G3P 2 pyr
4 ATP 2 NADH

Balance neto: síntesis de 2 ATP+2 NADH+2pyr / glucosa

REACCIÓN 6. Generación del primer compuesto de alta energía
GLICERALDEHIDO-3-P DESHIDROGENASA (G3PDH)

 Se oxida el grupo carbonilo del C1 de G3P a carboxilo (única reacción

de oxidación de la glucólisis).
 Se generan un par de equivalentes reductores (NADH), cuyo destino
es variable según el organismo y condiciones celulares.
 Esa oxidación es muy exergónica pero la reacción global es
endergónica porque la enzima utiliza esa energía liberada en la
oxidación para impulsar la síntesis del primer intermediario de muy
alta energía, el 1,3BPG (ΔGº’hidr= -49.4 kJ/mol).
 REACCIÓN 7. Primera fosforilación a nivel de sustrato
FOSFOGLICERATO QUINASA

(ΔGº´=-49,4 kJ/mol) (ΔGº´=30,9kJ/mol)

 El 1,3BPG tiene un elevado potencial de transferencia de grupo

fosfato. Cede el fosfato al ADP para formar ATP.
 Aunque en condiciones estándar la reacción es muy exergónica, en las
condiciones celulares [3PG]>>[1,3BPG] y ΔG es ligeramente positivo.
REACCIÓN 8. Preparación para la síntesis del siguiente compuesto
de alta energía
FOSFOGLICERATO MUTASA

Enlace éster de poca energía

 Las mutasas catalizan la migración de un grupo funcional dentro de

una molécula. [3PG]>>[2PG], por lo que “in vivo” la reacción se
produce hacia la derecha.
 Hasta este punto el balance energético es cero, para obtener ATP
necesitamos convertir el enlace éster del 3PG en un enlace rico en
energía.
 REACCIÓN 9. Síntesis del segundo compuesto de alta energía
ENOLASA

ΔG’º = 1.7 kJ/mol

 Se elimina una molécula de H2O de los átomos de carbono 2 y 3 del

2PG (también se puede considerar una oxido-reducción
intramolecular).
 Aunque ΔG’º es pequeño, aumenta mucho ΔGhidr del enlace fosfato,
que pasa de -15.6 kJ/mol en el 2PG a -61.9 kJ/mol en el PEP
porque el producto de la hidrólisis (pyr) se estabiliza por resonancia.
 REACCIÓN 10. Segunda fosforilación a nivel de sustrato
PIRUVATO QUINASA

 El PEP transfiere su Pi al ADP en otra fosforilación a nivel de sustrato.

 La reacción es muy exergónica debido a la tautomerización
espontánea del producto:

Enol piruvato Ceto piruvato

(predomina a pH 7)
Tautomería: isomería en la que la migración de un átomo de H
da lugar a 2 o más estructuras que se convierten
espontáneamente una en otra con tal facilidad que normalmente
existen juntas en el equilibrio.
 PIRUVATO QUINASA
Es otro punto importante de regulación de la ruta

 Es una enzima alostérica:

Activación del enzima por +F1,6BP garantiza que el carbono que
supere el primer paso regulado por la PFK1 (reacción 3) complete su
paso por la ruta para evitar así una acumulación indeseable de
intermediarios.
Inhibición por ATP y acetil-CoA (altos niveles de acetil-CoA indican
que los ácidos grasos están generando energía).

 La actividad del enzima se regula también por

modificación covalente fosforilación/desfosforilación

 En hígado está bajo control de la dieta (su síntesis

se induce con dietas ricas en hidratos de carbono).
[I]/[G] equilibrio
que mantiene
constante la
glucemia

La modificación covalente
de la estructura primaria de
algunas proteínas por
fosforilación-desfosforilación
motiva aumento o pérdida
de su actividad

 En hígado, cuando la
oxidación de los
ác.grasos y el ciclo de
Krebs proporcionan PK: activa PK: inactiva
suficiente cantidad de
energía a la célula ese
PEP va hacia
gluconeogénesis.

 En músculo,
prácticamente todo el
PEP producido se
convierte en piruvato.
 Destinos metabólicos del piruvato
El destino del piruvato dependerá de manera crucial del estado de oxidación de la
célula y de la dependencia de esa célula por el O2. El citoplasma tienen una
cantidad finita de NAD+, por lo que este NADH debe reoxidarse a NAD+ para que
continúe la glucólisis.

Durante la glucólisis anaerobia

se mantiene un equilibrio
electrónico global, homeostasis
redox.
 Destinos del NADH

 En condiciones aerobias (O2 disponible) el

NADH es reoxidado por la cadena de transporte
electrónico mitocondrial, proporcionando ATP por
fosforilación oxidativa.

 En condiciones anaerobias (organismos

anaerobios o células aerobias que realizan una
tasa de glucólisis elevada) el NADH es reoxidado
por la lactato deshidrogenasa LDH, con el fin de
regenerar el NAD+ necesario para que pueda
continuar la glucólisis.
 Fermentación láctica

En células animales y bacterias lácticas

 La LDH tiene 5 isoenzimas (distintas formas moleculares de una
enzima que catalizan la misma reacción). Las 5 isoenzimas difieren en
las características cinéticas (en la Km para el piruvato) y en la
regulación.

 La LDH es una proteína tetramérica, formada por 2 tipos de

subunidades (con pequeñas diferencias en su secuencia de
aminoácidos):

M (Muscle) predominan en el músculo esquelético

H (Heart) predominan en el corazón. Se inhibe por piruvato

 Las subunidades M y H se combinan entre sí para dar las 5 isoenzimas

de la LDH: M4, M3H, M2H2, MH3 y H4.

En el músculo, una alta concentración de piruvato se deriva en parte

hacia la formación de lactato, que puede ser exportado al torrente
sanguíneo y llegar a los tejidos gluconeogénicos, dando así origen al ciclo
de Cori.
 Fermentación alcohólica

Los animales carecen de la

enzima piruvato descaboxilasa

En levaduras
Ambas fermentaciones tienen la misma función: obtención de ATP. Y
el último paso, a partir de Pyr, la regeneración anaeróbica de NAD+
difieren en sus productos metabólicos.

NAD+ NAD+

Fermentación Fermentación
alcohólica láctica
Levaduras Células animales
Bacterias lácticas
(fabricación quesos, yogur…)

 El metabolismo anaerobio constituye una forma rápida, aunque poco

eficiente de conseguir energía (puede producir ATP a velocidades 100
veces superiores a la de la fosforilación oxidativa).
 El metabolismo aerobio es mucho más eficiente desde el punto de
vista energético.
Balance global de la fermentación láctica

Glucosa + 2 ADP + 2 Pi + 2H+

2 lactato + 2 ATP + 2 H2O

2 NAD+ 2 NADH 2 NADH 2 NAD+

GLUCOSA 2 pyr 2 lactato
2 ATP
 Regulación de la
glucólisis

La glucólisis está estrechamente

coordinada con otras rutas
importantes de generación y
utilización de energía:

- Síntesis y degradación de
glucógeno (controla la
disponibilidad de glucosa)
- Gluconeogénesis
- Ruta de las pentosa fosfato
- Ciclo de Krebs
Las reacciones muy exergónicas son los sitios de regulación
de la ruta:
Hexoquinasa (reacción 1)

PFK-1 (reacción 3)

Piruvato quinasa (reacción 10)

Las tres enzimas son alostéricas

La glucólisis se controla fundamentalmente por la actividad

de PFK-1 (efecto Pasteur).

PFK-1
RECORDAD…

La hexoquinasa puede utilizar además de glucosa otros

monosacáridos como sustrato (fructosa, manosa).

En hígado hay una segunda enzima que puede catalizar esta

reacción: GLUCOQUINASA

GLUCOQUINASA
HEXOQUINASA (Km = 10 mM)
(Km = 0.1 mM)
- No se inhibe por G6P

- Se inhibe por G6P - Actúa cuando las [glucosa]sangre

son elevadas
Regulación alostérica de la actividad enzimática por
retroinhibición negativa (así se controla la entrada de (ej: tras la ingesta de un alto contenido de hidratos
sustratos en la ruta glucolítica) de carbono)
 F1,6BP

anterógrada
Activación
Se evita así la
acumulación
indeseable de
intermediarios

PEP
 ATP
Piruvato
quinasa  Ácidos grasos

Retroinhibición
piruvato

El acetil CoA es el
principal producto de Acetil CoA
oxidación de los
ácidos grasos
 RESUMEN REGULACIÓN DE LA GLUCÓLISIS

La glucólisis está estrechamente coordinada con otras rutas

importantes de generación y utilización de energía
(síntesis/degradación glucógeno; gluconeogénesis; ruta de las pentosa fosfato y
ciclo de Krebs).

Las enzimas sujetas a regulación catalizan reacciones

termodinámicamente irreversibles:
 HEXOQUINASA (1. Glu-G6P) ΔGº´=-16,7 kJ/mol
 PFK-1 (3. F6P-F1,6BP). Enz. alostérica regulada por la carga
energética de la célula. Principal punto de regulación. ΔGº´=-14,2
kJ/mol
 PIRUVATO QUINASA (10. PEP-Pyr). ΔGº´=-31,4 kJ/mol

Variaciones en las concentraciones intracelulares de intermediarios

glucolíticos como el NADH, ATP, ADP y AMP, afectan a la glucólisis.
Perfil energético de la glucólisis
Entrada de azúcares distintos de la glucosa en la
glucólisis
 RUTA DE LAS PENTOSAS FOSFATO

Ruta citosólica alternativa a la glucólisis para la oxidación de la

glucosa, cuya función es más anabólica que catabólica. Tiene dos
funciones principales:
 Proporcionar poder reductor en forma de NADPH.
 Proporcionar ribosa-5-P para la biosíntesis de
nucleótidos y ácidos nucleicos.

Esta ruta es especialmente activa en tejidos especializados en la

síntesis de ácidos grasos y esteroides (tej.adiposo, hígado,
glándula mamaria, glándulas suprarrenales), así como en células
en división. Estos tejidos tienen un contenido abundante de
enzimas de las pentosas fosfato.
El predominio de glucólisis o ruta de las pentosa fosfato
dependerá de las condiciones metabólicas de la célula.
RECORDAD…

NAD+ (o NADP+) se
reducen aceptando un
ión hidruro (2 e- y 1 H+)
2´

NAD+ + 2e- + 2H+ → NADH + H+

NAD+ (vías catabólicas)y NADP+ (vías anabólicas) son

coenzimas, se unen reversiblemente a las enzimas
 Se distinguen dos fases:
Una fase oxidativa

NADPH NADPH
G6P Ribulosa-5-P
CO2

Intermediarios
Una fase no oxidativa glucolíticos

Ribosa-5-P F6P
Ribulosa-5-P
Xilulosa-5-P G3P

 Si la necesidad principal es la síntesis de nucleótidos y ácidos nucleicos, el

principal producto es la ribosa-5-P y no se producen la mayor parte de los
reordenamientos de la fase no oxidativa.

 Si la necesidad principal es la generación de NADPH para la síntesis de ácidos

grasos o de esteroides, la fase no oxidativa genera compuestos que pueden
reconvertirse con facilidad en G6P, para el paso posterior por la fase oxidativa.
Ecuación equilibrada de la ruta:

3G6P + 6NADP+ + 3H2O 2FP6 + G3P+ 6NADPH + 6H+ + 3CO2

Fase oxidativa:
2 de las 3 reacciones de esta
etapa son oxidativas, y cada una
de ellas conlleva la reducción de
un NADP+ a NADPH.

Fase no oxidativa: La secuencia de reacciones

Consiste principalmente en convierte 3 azúcares-P de
5C en 2 azúcares-P de 6C
interconversiones entre (F6P) y 1 de 3C (G3P)
moléculas.
Cuando las células no necesitan
ribosa-5-P en cantidades
elevadas la transforman en
intermediarios glucolíticos.
Balance global de la ruta de las pentosas
fosfato cuando la célula necesita tanto
NADPH como ribosa-5-P

G6P + 2NADP+ + H2O

Ribosa-5-P + CO2 + 2NADPH + 2H+

 Rutas alternativas de las pentosas fosfato

El balance global de la
ruta es variable según
las necesidades de la
célula (los metabolitos
generados pueden seguir
varios caminos, según su
consumo por otras vías)