INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE

BIOTECNOLOGÍA
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BÁSICAS
ACADEMIA DE MICROBIOLOGÍA

Nombre de los profesores: Martha Morales Martínez, Adrián Morales González

Nombre del alumno: Pool Espino America Yuliana

Unidad de aprendizaje: Fecha Grupo: Semestre: Equipo:

Laboratorio de Microbiología 02-10- 2LM3 25-1 1
2024
Practica No.2 Métodos de Esterilización y Reducción de carga microbiana

OBJETIVOS
Objetivo general:
Preparar material de uso común en un laboratorio de microbiología para su esterilización y
analizar los diferentes métodos para seleccionar el más adecuado acorde a la naturaleza del
material.
Objetivos específicos:
Preparar el material de vidrio e instrumental para ser esterilizado por calor seco y calor húmedo.
Esterilizar el material preparado, por calor seco y calor húmedo, haciendo uso de controles.
Realizar el proceso de filtración a través de membrana.
CUESTIONARIO Y RESULTADOS
1. ¿Cuál es la finalidad de utilizar agua destilada en el enjuagado del material?
El enjuagar el material permite eliminar los residuos de detergente y otras impurezas, además
de agua destilada se encuentra libre de sales que a largo plazo pueden reducir la vida útil del
material al generar sarro.
2. ¿Por qué se utiliza papel Kraft para envolver el material?
Porque el papel Kraft tiene características como la permeabilidad que permite que el vapor
atraviese, la resistencia a altas temperaturas y un bajo costo-beneficio, además el colocar papel
protege el material al ser retirados de la autoclave para que no se contamine de nuevo.
3. Completa el siguiente cuadro anotando la presencia o ausencia de turbidez en los tubos

Método Tratamiento Calor húmedo Calor seco Filtración a través

Control Control
110ºC/10`/10psi 121ºC/15`/15psi 180ºC/1h de la membrana Positivo Negativo

Resultado Poca turbidez Sin turbidez Sin Turbidez Turbidez Sin

(turbidez) turbidez Turbidez

4. Explicar porque utilizamos un tapón de algodón en las pipetas, matraces y tubos de ensayo
Funciona como una barrera física para prevenir la contaminación del proceso de esterilización
además de permitir el paso del vapor caliente.
5. ¿Qué explicación darías si después de la esterilización el tubo que contiene la tira de
esporas, hay crecimiento después de la incubación?
Un mal manejo del material después de esterilizarlo, una mala práctica de la esterilización;
como el que no se hayan cumplido las condiciones adecuadas como la temperatura o el tiempo
y en el caso de la autoclave la presión, y en el caso de la filtración, el contacto con alguna
superficie o incluso no haber trabajado cerca de la zona estéril del mechero
ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS
El calor seco y el calor húmedo son dos métodos para esterilizar, cada método tiene un proceso
específico para aplicarse de manera adecuada, en calor seco (horno) se debe cuidar el tiempo y
la temperatura; en el calor húmedo además de esos dos criterios también se debe vigilar la
presión en la autoclave.
Así como cada método maneja condiciones específicas, el material se debe prepara de una
forma adecuada para cada procedimiento. Cuando usamos el horno para esterilizar se debe
proteger con papel aluminio, se les coloca a los matraces, vasos, tubos de ensayo, etc. un
“gorro” y las placas y pipetas se colocan dentro de un recipiente de acero. Esto permite la
conductividad de calor para que exista una temperatura constante en todo el material.
En el uso de la autoclave, se debe colocar un tapón de algodón con gasa que no quede muy
ajustado, así como un “gorro” de papel Kraft para prevenir contaminación después de que se
esteriliza, para proteger el material y para permitir que el vapor pase por estas barreras.
Si no se realiza un correcto preparamiento del material dependiendo de como se esterilizará,
puede no resultar efectivo el tratamiento y ar lugar a una esterilización incompleta si no se
manejan correctamente o si las condiciones no son ideales.
Particularmente en la practica se realizo un manejo correcto de los métodos de calor húmedo y
seco, sin embargo, en el proceso de filtración (después de la incubación) notamos crecimiento
microbiano en el caldo, lo que significa que no hubo un debido cuidado al momento de
realizarse.
Algunas de las explicaciones para esto, es una mala manipulación del material, como haber
tocado la boquilla del matraz o la parte del filtro por donde sale el caldo, así como no trabajar
cerca de la zona séptica para evitar la contaminación. Así como el que hubiera mas de una
persona manipulando el material.
Estos aspectos se deben de tomar en cuenta para el futuro y que de esta forma se preste más
atención a los detalles y se maneje con mejor cuidado el procedimiento.
CONCLUSIONES
En base a los objetivos se puede concluir que se preparo correctamente el material para su
esterilización, tomando en cuenta las condiciones y el proceso al que iba a ser sometido, así
como también se identificó como elegir adecuadamente el método de esterilización basándonos
en las características del material.
Cada método de esterilización tiene sus propias ventajas y desventajas, y seleccionar el más
adecuado depende de varios factores. En primer lugar, el tipo de material que se va a esterilizar
es fundamental. Algunos instrumentos pueden tolerar calor y humedad, mientras que otros,
como ciertos plásticos o dispositivos electrónicos, pueden verse dañados en esas condiciones.
El contexto en el que se lleva a cabo la esterilización es igualmente importante. En un
laboratorio que trabaja con soluciones biológicas sensibles, la filtración puede ser la opción más
adecuada, ya que evita la exposición al calor. Por otro lado, en situaciones que implican
instrumentos metálicos, el calor seco puede resultar más apropiado.
Además, la preparación del material es esencial para maximizar la eficacia de cualquier método
de esterilización. Un manejo y envoltura adecuados del material garantizan que se logre una
esterilización completa, lo que contribuye a la seguridad y la calidad de los procedimientos en
entornos de laboratorio o clínicos. En definitiva, la elección del método y la preparación
cuidadosa del material son fundamentales para asegurar resultados confiables y efectivos.
BIBLIOGRAFÍA
Universidad Autónoma de Mexico. FES Zaragosa. QFB. (2023). Manual de laboratorio de
microbiología general I (Manual no.2) MicrobiologiaGeneral_I.pdf (unam.mx)
Antibióticos (cobituc.org.ar)
LibreTexts. (n.d.). Priones. En Microbiología (9.6C). 9.6C: Priones - LibreTexts Español
Macmillan Education. (n.d.). HMH Unidad cast [PDF]. hmh_unidad_cast.pdf
(macmillaneducation.es)
LibreTexts. (n.d.). 4.2: Conceptos básicos de la técnica aséptica. En Microbiología (4.2)4.2:
Conceptos básicos de la técnica aséptica - LibreTexts Español