MÉTODOS DE LISIS
CELULAR
¿PARA QUÉ ROMPER CÉLULAS?
• Para obtener productos que se encuentran en el interior de las
células.
• La técnica seleccionada determina el tamaño de los desechos y la
influencia que tendrán en las operaciones que se utilicen para su
separación.
EJEMPLOS DE PRODUCTOS
INTRACELULARES
• Ácidos nucleicos
• Enzimas
• Tanasa
• Invertasa
• Proteasas
• DNA polimerasa
• Pigmentos
• B-ficoeritrina (BPE), colorante rosa
• Polímeros intracelulares
• Antibióticos
• La recuperación óptima de productos intracelulares
requiere del conocimiento de la estructura de las capas
externas que protegen a las células.
La selección de una técnica depende de las características del producto:
• Medios alcalinos La técnica utilizada
determinará el tamaño
• Solventes de los desechos que se
• Detergentes producirán.
• Enzimas
LOS MÉTODOS DE RUPTURA
CELULAR EN LA INDUSTRIA PUEDEN
SER DIVIDIDOS EN:
• Métodos químicos
• Métodos Físicos
• Métodos biológicos
ROMPIMIENTO CELULAR POR MÉTODOS QUÍMICOS.
Técnicas Principio Estrés en el producto Ejemplo
Solubilización Detergentes Suave
solubilizan la
membrana
Choque osmótico Ruptura osmótica Suave Ruptura de glóbulos
de la membrana rojos
Disolución lipídica Solventes orgánicos Moderado Rompimiento de
actúan sobre la levaduras con
pared celular tolueno
desestabilizándola
Digestión enzimática Rompimiento por la Suave
digestión de la
pared celular
Tratamiento alcalino La saponificación Fuerte Micrococcus
de los lípidos lysodeikticus tratado
solubiliza la con lisozima
membrana
Permeabilización Permeabilizan la Suave Tratamiento de M.
enzimática membrana lysodeikticus con
ocasionando la lisozima
ruptura de la célula
ROMPIMIENTO CELULAR POR MÉTODOS MECÁNICOS.
Técnicas Principio Estrés en el Costo Ejemplo
producto
Homogeneizador de Las células son rotas en un Moderado Moderado Rompimiento de
cuchillos mezclador . tejidos y células
animales.
Homogeneizador Las células son forzadas a pasar a Fuerte Moderado Tratamiento a gran
alta presión través de un pequeño orificio, escala de suspensión
produciendo su ruptura por el de células.
esfuerzo de corte .
Molienda Las células son rotas por medio de Moderado Barato
una molienda con abrasivos.
Molino de perlas Las células son trituradas con perlas Fuerte Barato Rompimiento a gran
de acero o vidrio. escala para
suspensiones de
células y células de
plantas.
Ultrasonificación Las células son quebradas en una Fuerte Caro Rompimiento de
cavidad ultrasónica . suspensiones de
células a lo menos
en pequeña escala.
MÉTODOS BIOLÓGICOS
• Enzimas
• Fagos
• Agentes inhibidores de pared celular
Estos métodos no son muy empleados debido a que son muy costosos.
• ¿Qué hay que tomar en cuenta para la selección de un método de
ruptura celular?
• Naturaleza del producto intracelular
• Escala de la operación
• Velocidad
• Estabilidad del producto
• Pureza del producto
• Costo del método