FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS.
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA.
EL MICROSCOPIO COMPUESTO
INTRODUCCIÓN
El Microscopio es un instrumento óptico que permite observar, medir y cuantificar objetos y
organismos muy pequeños. El microscopio tiene tres propiedades importantes: el
poder de amplificación (aumento), el poder penetración (profundidad) y el poder de
resolución.
El poder de amplificación se define como la relación entre el diámetro aparente de la
imagen y el diámetro o longitud del objeto. Esto quiere decir que si el microscopio aumenta
100 diámetros un objeto, la imagen que estamos viendo es 100 veces mayor que el tamaño
real del objeto. Para calcular el aumento de un microscopio, basta multiplicar el aumento del
ocular por el aumento del objetivo. Por ejemplo, si estamos utilizando un ocular de 10X y un
objetivo de 45X, el aumento a que estamos viendo la preparación será: 10X x 45X = 450X,
lo cual quiere decir que la imagen del objeto está ampliada 450 veces.
El poder de penetración está asociado con la posibilidad de ver un objeto en distintos
niveles de profundidad. A su vez. El poder de resolución es la capacidad que tiene un
microscopio (o el ojo humano, etc.) de percibir por separado dos puntos pequeños,
adyacentes y cercanos, es decir, la capacidad para percibir detalles. El poder de resolución
aumenta a medida que disminuye la distancia que separa dichos puntos. Es decir, si dos
puntos distan 1 cm uno del otro y yo los veo como un solo punto borroso tendré menor
poder resolutivo que alguien que los distingue por separado o que distingue perfectamente
puntos que distan de 0,5 cm entre sí. Cuanto mayor sea el poder resolutivo, mayor será la
definición de un objeto. Los microscopios de gran poder resolutivo son especialmente
buenos para ver pequeñas estructuras.
Existen diferentes tipos de Microscopios los cuales varían en su poder de resolución y
aumento Los rangos aproximados de magnificación se encuentran entre 4X y 40X
(Microscopio Estereoscópico), 20X - 25X (Microscopio Simple o Lupa), 40X - 1500X
(Microscopio Compuesto), 10.000X - 16.000X (Microscopio Electrónico), donde X es el
número de veces que se aumenta el tamaño real del objeto. Además de estos existen
algunos Microscopios especiales como los Microscopios de Contraste de Fase y los
Microscopios invertidos.
OBJETIVO
Al finalizar la práctica el estudiante estará en la capacidad de:
1. Adquirir de conocimientos sobre el uso y cuidado del microscopio.
2. Reconocer las partes del microscopio y sus funciones.
3. Preparar los materiales para la observación, su montaje en el microscopio,
ajuste y enfoque correctos.
4. Aprender sobre el poder de amplificación (aumento), el poder penetración y el
poder de resolución.
Disposición del Microscopio: Al recoger el microscopio tómelo con ambas manos, de tal
forma que una lo sostenga por el Brazo, y la otra por debajo de la Base. Deposite o
descargue el instrumento suavemente y oriéntelo de manera que el brazo quede mirando
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS.
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA.
hacia usted. Enciéndalo y apáguelo con la menor intensidad lumínica, no mover ni golpear
cuando esté encendido.
Partes del Microscopio: utilizando la Figura 1 distinga los nombres de las distintas
partes del Microscopio localizándolas en su propio aparato: oculares, objetivos, revolver o
porta objetivos, diafragma-iris, condensador, fuente de iluminación, base, brazo, platina,
carro mecánico, tornillo macro y micrométrico.
Figura 1. Microscopio compuesto y sus partes
Aunque como es lógico, la forma y partes de un microscopio pueden variar y varían de un
modelo a otro, existen unas partes comunes que aparecen representadas a manera de
esquema en el dibujo adjunto.
Lente Ocular: Conjunto de lentes especializadas en aumentar la imagen previamente
formada por el objetivo. Puede desmontarse a intercambiarse por otros con diferentes
aumentos o funcionalidades, agujas para señalar, retículos para recuento.
Cilindro o Tubo porta-ocular: tubo por cuyo interior avanza la luz hasta el objetivo.
Revolver: mecanismo giratorio en el que se pueden situar varios objetivos de manera
que se consigan diferentes aumentos.
Lente Objetivo: conjunto de lentes responsables de aumentar y resolver el objeto a observar.
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS.
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA.
Muestra: objeto a observar que se coloca sobre una lámina de cristal (Porta-Objetos) y
bajo otra aún más fina (Cubre-Objetos) la muestra ha de ser tan fina (transparente) que
la luz la atraviese por ello se hace "imprescindible el uso de colorantes: técnicas de
tinción.”
Platina: soporte de la muestra. Puede acercarse mediante Tornillos de enfoque
Grueso (Macrométrico) o fino (Micrométrico), y puede desplazarse con ayuda del tornillo
o carro móvil.
Condensador: conjunto de lentes que focalizan la luz sobre la muestra.
Diafragma: sistema para controlar la cantidad de luz que llega al objeto. De esta manera se
puede controlar la definición que en muchas ocasiones se consigue reduciéndola intensidad.
Para llevar esta práctica se utilizarán videos que apoyen el conocimiento del microscopio, su
uso y cuidados. De otra parte, se proveerán imágenes tomadas al microscopio de cada una
de las actividades desarrolladas con la finalidad que los estudiantes puedan realizar sus
ilustraciones y desarrollar su informe.
MATERIALES
A llevar por los estudiantes Entregados en el laboratorio
Láminas portaobjetos Microscopio
Laminillas cubreobjetos Papel milimetrado, papel periódico
Tijeras Papel de revista,
Azúcar
Toalla de papel absorbente
Frasco lavador
Gotero
PROCEDIMIENTO
1. Coloque el objetivo de menor aumento (el más pequeño), haciéndolo rotar
únicamente desde el revólver. Gradúe la intensidad de luz reflejada usando el
regulador de luz y el condensador. Ahora, observe a través del microscopio y ajuste
el diafragma de manera que el campo visual se encuentre iluminado en forma
homogénea. Si el ocular o el objetivo se encuentran empolvados o empañados, límpielos
cuidadosamente con una porción de Papel Lente. En ningún caso se debe usar otro
tipo de material para tal efecto.
2. Preparación de materiales: Los materiales para observación microscópica se
colocan en una lámina de vidrio que generalmente es de 75 mm x 25 mm y tiene el
nombre portaobjeto y se cubren con laminillas cubreobjetos (40 mm x 20 mm).
Tanto estas como el portaobjetos deben estar limpios. La limpieza del portaobjetos
debe hacerse con etanol y sosteniéndolo por los bordes. Luego se frota suavemente
con una toalla de papel absorbente para secarlo. Los cubreobjetos son muy frágiles y
por tanto deben manejarse con mucho cuidado y su limpieza debe hacerse en forma
similar a la descrita antes teniendo así mismo el cuidado de no tocar la superficie con los
dedos.
Prepare el siguiente montaje: Corte un cuadro de papel periódico de 1 cm2
aproximadamente que contenga la letra e tamaño Arial 12. Coloque el recorte en el centro
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS.
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA.
del portaobjetos con la letra e en posición de lectura y con un gotero agregue una gota de
agua sobre el papel. Espere unos segundos hasta que el agua haya embebido el
papel y luego coloque el cubre objetos sobre la preparación presionando
suavemente el montaje con la goma de un borrador evitando así que queden burbujas
de aire que puedan dificultar la observación. Otro método para eliminar burbujas de aire
y secar el montaje del exceso de líquido, es envolver el montaje en el papel absorbente
(tipo sándwich) haciéndole una ligera presión con el dedo pulgar sobre el cubreobjetos.
3. Como enfocar el microscopio: coloque la preparación sobre la Platina en forma tal que
el objeto a observar quede justamente encima de la abertura y luego fije la lámina
mediante las Pinzas que hay en la Platina. El enfoque se realiza con la ayuda del
movimiento de los Tornillos Macro y Micrométricos. Es importante tener en cuenta
que siempre que se haga una observación al microscopio se inicia primero con el objetivo
de menor aumento (4X). Para observar con un objetivo de mayor aumento hay que
rotar el revólver suavemente hasta que se encuentre en posición el siguiente objetivo de
mayor aumento. Seguidamente se enfoca nuevamente con el tornillo micrométrico
evitando quebrar la lámina porta objetos (particularmente si se trata de los objetivos 40 y
100X).
A continuación, resuelva las siguientes preguntas:
a. De acuerdo con la imagen obtenida, describa la posición de la letra e.
b. ¿A medida que cambia a objetivos de mayor aumento, cómo es el tamaño del campo
de observación? ¿Por qué?
c. Dibuje la letra e
conservando las proporciones que se observan en las imágenes
obtenidas con los campos de los objetivos 4x, 10x y 40x.
4X 10X 40X
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS.
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA.
1. Describa y compare lo observado con cada uno de los campos de observación
4. Medidas microscópicas: La unidad de longitud más frecuentemente usada en
microscopía es la micra o micrón “µm” que equivale a 1/1000 mm o 1/1'000.000 m. En los
laboratorios de investigación se utiliza un instrumento, el micrómetro o retículo
micrométrico, sin embargo, es posible estimar el tamaño de los objetos microscópicos
conociendo el diámetro del campo, correspondiente a cada objetivo.
Realice un montaje con un pedazo de papel milimetrado. Colóquelo lo más recto posible,
agregue dos gotas de agua, seque y cubra. Coloque el montaje en la platina y enfoque
correctamente.
Realice dibujos de las imágenes observadas con los objetivos 4X y 10X.
Mida el diámetro en milímetros del campo correspondiente a los objetivos 4X y 10X,
realice la conversión a micras y consigne la información en el cuadro que se encuentra
abajo. Así mismo, calcule el área de los campos de observación.
4X 10X
Aumento Diámetro aproximado de los campos de observación
Área de los campos
de observación (mm2)
Objetivo Ocular Total Objetivo Diámetro (mm) Diámetro (µm)
4X 10X ____X 4X
10X 10X ____X 10X
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS.
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA.
c. ¿Cuál es el diámetro horizontal de la letra e observada anteriormente en milímetros y en
micras?: mm _______________________ µm ____________________. Se sugiere observar
el dibujo realizado de la letra e con el objetivo de 10X del punto anterior.
5. Poder de resolución. Realice un recorte de papel de revista (color) y observe a simple
vista. Humedezca el montaje con una gota de agua, cubra y observe con los objetivos de 4x,
10x y 40x.
a. Realice dibujos de lo observado en 10X y 40X.
10X 40X
b. Compare y describa lo observado a simple vista y con cada objetivo (4X, 10X y 40X).
6. Poder de penetración o de profundidad
Observación de cristales azúcar
Sobre un portaobjetos deposite unos cuantos granos de azúcar por separado, en este caso
no cubra la muestra con la laminilla ni agregue agua. Monte en el microscopio y observe
con el objetivo de 10X.
a. Realice un dibujo de lo observado en 10X.
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS.
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA.
b. ¿Qué forma geométrica tienen los cristales de azúcar?
c. Con base en el ejercicio anterior, explique cómo define usted el poder de profundidad.
NOMBRES COMPLETOS Y CODIGO:
______________________________________________________ ___________________
______________________________________________________ ___________________
______________________________________________________ ___________________
______________________________________________________ ___________________
______________________________________________________ ___________________
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Audesirk T., Audesirk G. y Byers B. 2008. Biología, La Vida En La Tierra. Octava Edición. Pearson
Prentices Hall.
Castro F., Vélez M., González I. y Rondón F. 2002. Manual De Prácticas y Talleres En Biología
General. Universidad del Valle. Facultad de Ciencias. Departamento de Biología, Cali.
Curtis H. y Barnes S. 2015. Invitación A La Biología. Séptima Edición. En conexto social. Editorial
Médica Panamericana.
Madigan M.T., Martinko J.M., Bender K.S., Buckley D.H., Stahl D. 2015. BROCK – Biología de los
Microorganismos. Pearson. Catorceava edición.
