UNIVERSIDAD DE LA SALUD DEL ESTADO DE MÉXICO
GENÉTICA CLÍNICA
Reporte práctica 1
ELECTROFORESIS
Integrantes
Hernández Ramírez Omar
Montes De Oca Villegas Valeria
Mendoza Baena Ángel Giselle
Servin Sedano Claudia Samaria
Licenciatura en Médico Cirujano
DOCENTE TITULAR: BLGO. SIGFRID LEONARDO
GARCIA MORENO MUTIO
Grupo: 602
Fecha de entrega: marzo 2024
ABSTRACT
Agarose gel electrophoresis separates DNA fragments by size. DNA is placed
on a gel, a voltage is applied, and the DNA molecules migrate through the gel
at different speeds, depending on their size. The DNA bands are visualized
with ethidium bromide and UV light. The size of the bands is compared to a
molecular weight marker to determine the size of the DNA molecules.
Keywords: electrophoresis, DNA, agarose gel, molecular weight marker, DNA
bands, DNA size.
INTRODUCCIÓN
La electroforesis, es una técnica de laboratorio fundamental para la
separación de moléculas utilizadas en diversas áreas como la bioquímica, la
biología molecular, la genética y la medicina forense, su principio básico se
basa en la migración diferencial de las moléculas a través de una matriz
porosa (como un gel) en función de su carga eléctrica, tamaño y forma, en
dicha migración las moléculas con mayor carga negativa migran más
rápido, mientras que las más grandes o con menor carga negativa migran
de forma más lenta, existen varios tipos diferentes de electro diaforesis como
la electroforesis en gel de agarosa, en gel de poliacrilamida y capilar que
poseen ventajas y desventajas, esta técnica de separación posee una alta
variedad de aplicaciones, incluyendo cosas como el análisis del ADN y ARN,
el análisis de proteínas para la detección de mutaciones génicas o proteínas
anormales llevando por consiguiente el diagnóstico de diferentes
enfermedades genéticas, es una herramienta esencial que con el desarrollo
de nuevas tecnologías va ampliando sus aplicaciones en la investigación
OBJETIVO
Explorar y explicar la técnica de electroforesis, un proceso fundamental en
biología molecular utilizado para separar moléculas según su tamaño y
carga eléctrica. A través de un enfoque accesible, se pretende elucidar los
principios básicos de la electroforesis, su aplicación en diversos campos
científicos y su relevancia en la comprensión de fenómenos biológicos. Se
proporcionará una visión general de los diferentes tipos de electroforesis,
incluyendo gel de agarosa y poliacrilamida, así como sus variantes como la
electroforesis en gradiente y la electroforesis en gel bidimensional. Además,
se discutirán las tecnologías emergentes y las innovaciones en electroforesis
que están ampliando sus aplicaciones y mejorando su eficiencia. Este
artículo busca proporcionar una comprensión sólida de la electroforesis, su
importancia en la investigación científica y su potencial para avanzar en el
conocimiento en biología molecular y disciplinas relacionadas.
HIPÓTESIS
Se postula que mediante la exploración detallada y la explicación
comprensible de la técnica de electroforesis, este estudio demostrará que la
comprensión sólida de los principios básicos de la electroforesis y su
aplicación en diversos campos científicos contribuirá significativamente al
avance del conocimiento en biología molecular y disciplinas relacionadas. Se
espera que al proporcionar una visión general de los diferentes tipos de
electroforesis y discutir las tecnologías emergentes en este campo, se
fortalezca la capacidad de los investigadores para separar moléculas según
su tamaño y carga eléctrica, y se potencie su capacidad para comprender
fenómenos biológicos complejos. Por lo tanto, se espera que esta
investigación valide la importancia de la electroforesis como una
herramienta indispensable en la investigación científica y su potencial para
impulsar descubrimientos significativos en biología molecular y áreas afines.
METODOLOGÍA
Para este proceso se necesitará de un gel en el que estarán incluidos
polisacáridos (agaros molecular), el gel es una matriz de moléculas de
agarosa que se mantienen unidas por puentes de hidrógeno que forman
pequeños poros los cuales actuarán como malla
Después las muestras (las moléculas que se desean estudiar) por lo
regular son fragmentos de ADN y se colocan en los pozos
En uno de los pozos debemos colocar un marcador de peso molecular
qué es un estándar de referencia que contiene fragmentos de ADN con
longitudes qué conocemos y que usaremos para comparar con aquellas
que desconocemos
Al conectar los electrodos comenzará a fluir la corriente a través del pozo
el ADN permitiendo su movimiento, por lo que los glucofosfatos de su
esqueleto de azúcares fosfato otorgará una carga negativa a las
moléculas de ADN
Comenzarán a moverse a través de la matriz del gel hacia el polo positivo
cuando el sistema está encendido y pasa corriente por él, se dice que el
gel está corriendo, por lo regular este se utiliza a un nivel de 80 a 120
voltios, por lo que un voltaje más alto permitirá que corra más rápido,
pero (corre el riesgo de quemar el gel, por lo que se debe tener
precaución)
El gel actuara como una malla sucesiva, las cuales se irán afinando
mientras más bajo están y por lo tanto no dejarán pasar los fragmentos
más pequeños y podrán detener los más grandes
Después de un intervalo de tiempo que a fluido el gel los fragmentos más
cortos de ADN estarán más cerca de los electrodos positivos del gel y los
más largos se mantendrán cerca de los pozos, haciendo que los
fragmentos de ADN pequeños corran hasta salirse si los dejamos fluir por
demasiado tiempo, así que hay que tener cuidado porque si no el final de
la electroforesis se quedarán los fragmentos de ADN
Como resultado las líneas que se observan se conocerán como bandas e
indican que esa parte quedaron fragmentos de ADN correctamente
separados
RESULTADOS
Fig.1: Resultado de una
electroforesis donde se
evaluaron 4 muestras
cualquiera muestran los
fragmentos de ADN más
grandes
Fig.2: Se observa el proceso por
el cual se realizó la electroforesis
mostrando desde cómo se
aplicó la energía eléctrica hasta
cuando el gel está corriendo
donde separa por tamaño los
fragmentos del ADN
1. La electroforesis de ADN permite separar fragmentos de ADN de diferentes
tamaños.
2. El tamaño de las bandas de ADN puede usarse para identificar diferentes
tipos de ADN.
3. La electroforesis de ADN es una técnica útil para diversos estudios
genéticos, como:
Identificación de individuos
Diagnóstico de enfermedades genéticas
Análisis de huellas dactilares genéticas
Comparando con la literatura nos dimos
cuenta que es el mismo procedimiento,
porque nos muestra la misma técnica
que se utiliza para llevar a cabo
correctamente la electroforesis que vimos
en el video de mis compañeros, así como
la técnica por la cual nos lleva a la
identificación de diversas aplicaciones en
la medicina
CONCLUSIÓN
La investigación ha validado la hipótesis inicial al confirmar que una
comprensión sólida de la electroforesis impulsa avances significativos en
biología molecular.
Los diversos estudios revisados respaldan los objetivos del artículo al
resaltar la importancia fundamental de la electroforesis en la separación y
análisis de moléculas biológicas.
La innovación en tecnologías de electroforesis ofrece nuevas
oportunidades para mejorar la eficiencia y ampliar las aplicaciones de
esta técnica en la investigación biomédica y la biotecnología.
Se ha observado una convergencia de evidencia que apoya la utilidad de
la electroforesis en la elucidación de fenómenos biológicos complejos,
fortaleciendo su posición como una herramienta indispensable en el
arsenal del científico molecular.
La integración de la electroforesis en estudios de genómica, proteómica y
diagnóstico clínico resalta su relevancia transversal en diversas disciplinas
científicas.
En resumen, los hallazgos subrayan la relevancia continua de la
electroforesis en la investigación científica, confirmando su papel central
en el avance del conocimiento en biología molecular y disciplinas
relacionadas.
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