UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTOBAL DE

HUAMANGA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFECIONAL DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

PRACTICA N°01, 02, 03, 04

CURSO: bioquímica II
DOCENTE: Dr. YARLEQUÉ MUJICA, José Alejandro
ALUMNO: LANDEO LAPA, Deyvis Roly

AYACUCHO –PERÚ
2023
 PRACTICA N°02
DETERMINACIÓN DE GLUCOSA
I. OBJETIVOS
 Interpretar el metabolismo de los glúcidos en la práctica.
 Determinar la glicemia empleando un método enzimático-
espectrofotométrico
II. MATERIALES
 Micropipeta
 tubo vacutainer con tapa roja o amarilla
 espectrofotómetro UV-Vis
 gradillas
 torundas de algodón
 alcohol de 70°
 aguja venojet 21

III. RESULTADO
Tabla N°1: determinación del nivel de hemoglobina de una muestra de sangre.

tubos absorbancia Concentración de

glucosa en mg/dl
Blanco 0.000 -----
Estándar 0.309 -----
Muestra 1 0.252 87.7813
Muestra2 0.290 96.7845

IV. DISCUSIONES
Según Schlienger Jean. Los glúcidos se clasifican habitualmente en azucares
simples (monosacáridos y disacáridos) y como complejos (polisacáridos, entre
ellos los almidones). Como solo los primeros tienen poder edulcorante (PE), se
ha postulado precipitadamente con el texto falaz de que el PE y el efecto
hiperglucemiante de un azúcar discurren en paralelo que todos los azucares
 simples deberían retirarse de la alimentación de los diabéticos porque suponen
un perjuicio para la glucemia posprandial (1).
Según Diaz J. Los factores que disminuyen la tolerancia a la glucosa son: la
inactividad física, dieta hipocalórica, con menos de 100g de hidratos de carbono
al día, determinados fármacos, como diuréticos no ahorradores de potasio,
difenilhidantoína, agentes simpaticomiméticos, anovulatorios, glucocorticoides,
antidepresivos tricíclicos, etc. Enfermedades intercurrentes; insuficiencia renal,
cirrosis hepática, enfermedades endocrinas (acromegalia, síndrome de Cushing,
feocromocitoma, etc.) (2).
Según Diaz J. Los factores que aumentan la tolerancia a la glucosa son el
alcohol y determinados fármacos como la aspirina a dosis altas,
betabloqueantes, IMAO que actúan aumentando la vida media de las
sulfonilureas, sulfonamidas y dicumarinicos por su interacción con los
antidiabéticos orales (2).
Durante el proceso de la práctica se realizaron pruebas para la determinación de
glucosa para lo cual se necesitaron muestras sanguíneas extraídas por
venopunción, las muestras ya estaban previamente recolectadas por lo cual no se
nos permitió obtener experiencia propia en la extracción sanguínea para la
marcha experimental de la práctica, por lo demás en el manejo del
espectrofotómetro y el tratamiento de la muestra para su posterior análisis se
realizó de manera exitosa, para ello se requirió que solo una persona consigne
todos los pasos por que como se sabe todo análisis y más aún en un análisis
bioquímico hay porcentajes de error entonces se trata de evitar ello es por ello
que solo un analista dentro del laboratorio se encargó de realizar el
procedimiento o protocolo de la práctica y así se obtuvieron resultados que
aparentemente son óptimos.

V. CONCLUSIONES
 Se logró interpretar el metabolismo de los glúcidos en la práctica.
 Se realizó la determinación de la glicemia empleando un método
enzimático- espectrofotométrico.
VI. CUESTIONARIO
1. Describa y fundamente de otros métodos de determinación de glucosa.
La técnica del análisis de glucosa en orina: la glucosuria es un método
indirecto de determinar la glucosa de un individuo y debemos tener en
cuenta que algunas sustancias presentes en la orina pueden alterar los
resultados. Además, una técnica incorrecta en la recogida de orina o en la
lectura del análisis, aumenta consideradamente la posibilidad de error.
Determinación de glucosa por medio de espectroscopia como método no
invasivo: Las técnicas no invasivas, actualmente en estudio, se pueden
clasificar en dos grupos: ópticas y transdérmicas, ambas midiendo la
cantidad de glucosa existente en el líquido intersticial.10 Si bien la principal
población beneficiada con estas técnicas sería la de los pacientes diabéticos
dada la constante necesidad de mediciones, contar con un dispositivo que no
provoca dolor y que es sencillo de utilizar beneficiaría a cualquier persona
que necesite una medición de glucemia por cualquier motivo (hipoglucemia,
revisión de rutina, etcétera), por lo que el beneficio se extendería a una
mayor población (3).
2. Analice y describa los valores de glucosa, insulina y glucagón en estados
de ayuna postprandial.
Tabla N°2 valores de glucosa en estado de ayuna

GLUCOSA
VALORES
AYUNANAS Se consideran plenamente normales
los valores de glucosa en ayunas
que no superan los 70-110 mg/dL.

POSPRANDIAL El nivel de glucosa en sangre tras

las comidas (glucemia postprandial)
no debe superar los 160 mg/dL a
los 60-90 minutos después de
comer, y después volver a valores
 normales a las 3 horas.

Tabla N°3 valores de insulina en estado de ayuna

INSULINA
VALORES
AYUNANAS se considera de 60 – 100 mg/dl

POSPRANDIAL se considera < 140mg /dl D. Jaobs,

“Información básica sobre la
insulina” afirma que el páncreas
segrega insulina que tiene la
capacidad de equilibrar los niveles
de sangre en el cuerpo, durante
ayunas los niveles de insulina no
diabética son 60-100 mg/dl y menor
a los 140mg/dl

Tabla N°4 valores de glucagón en estado de ayuna

GLUCAGON
VALORES
AYUNANAS se considera 40-99 pg/ml.

POSPRANDIAL Se considera 50-100 pg/ml El

glucagón estimula al hígado a
secretar glucosa, a medida que
disminuye el nivel del azúcar en
sangre.
3. ¿Qué glúcidos elevan menos la glicemia?
El índice glucémico (IG) de un alimento, una bebida o una comida
compuesta que contenga 50g de glúcidos es la relación entre el área de
hiperglucemia posterior a la ingesta y área observada después de la ingestión
de un glúcido de referencia fijado en 1 (en general, 50g de glucosa diluida
en agua). Los índices glucémicos considerados como bajos son inferiores a
0.5, y los elevados son superiores a 0.7 (4).

Tabla N°4 glúcidos que elevan menos la glucemia

IG Alimentos
IG<50 Semillas integrales de cereales
Semillas de oleaginosas (almendra,
avellana, nuez, etc.) La mayor parte
de las frutas y verduras.

50≤IG≤70 Harina integral, arroz basmati,

zanahorias, patatas cocidas con su
piel, uva, ciruela, helado.

IG>70 Pan y arroz blanco, copos de

cereales, pure de patatas Glucosa,
sacarosa, pastas y pasteles.

Glúcidos rápidos y lentos La clasificación de los glúcidos en azucares

rápidos y azucares lentos no corresponde a una realidad bioquímica o
nutricional, pero es un ardid pedagógico para hacer comprender el efecto de
la ingesta de los glúcidos en la glucemia durante y después de una comida.
Los primeros elevan la glucemia más y con mayor rapidez que los segundos,
que deben preferirse. Esta noción es relativa y depende del entorno
 nutricional. Un mismo alimento puede pertenecer a uno u otra categoría
según su estado de cocción, su estado físico y el lugar que ocupa en la
ingesta alimentaria. El empleo de las nociones de índice glucémico es
preferible, pero más complejo.

Tabla N°5 glúcidos rápidos y lentos

Glúcidos rápidos Glúcidos lentos

 Zumo de frutas  Fruta entera
 Pan blanco  Pan integral
 Arroz blanco  Arroz integral
 Pasta muy cocida  Pasta al dente
 Puré de patatas  Patatas al vapor
 Chocolate con leche
 Pastel relleno de chocolate
 Caramelos

4. ¿Cómo se sospecha que debiera estar la glicemia de un paciente que

ingirió una dieta alta en fructuosa y fundamente por qué?
Una pequeña ingesta de fructosa (contenida en frutas) se ha demostrado que
reduce las concentraciones postprandiales de glucosa. Además, bajas dosis
de fructosa, restaura el efecto inhibidor de la hiperglucemia en la reducción
de la producción neta de glucosa hepática en la Diabetes Mellitus Tipo 2. Es
por tanto que un aumento en el consumo de frutas de bajo índice glucémico,
mediante la liberación de fructosa (6 o más gramos) en el intestino delgado a
la circulación durante un periodo prolongado de tiempo, tiene un gran efecto
en la reducción en los niveles de glucosa postprandial en sangre (3).
Situación muy diferente es el consumo elevado de fructosa (17-25% de la
ingesta de energía alimentaria) como el incorporado en las bebidas
azucaradas, productos de panadería y los cereales de desayuno, estos han
sido asociados con un aumento de los triglicéridos y posterior aumento de
 colesterol LDL y también se ha demostrado que es un factor de riesgo para
un aumento de la grasa visceral, Diabetes Mellitus y enfermedad
cardiovascular (5).

VII. REFERENCIA BIBLIOGRAFICA

1. Diaz J. Stryer L, Berg JM, Tymoczcko JL. 7° edición. Editorial reverte:
Barcelona. 2015.
2. Eduardo Wood García, Patricia Nogueira Salgueiro, Yurena Naranjo
Santana, Inmaculada Alarcón Torres. DIABETES: Interpretación de los
parámetros de laboratorio. Sitio web:
[Link]

07/septiembre/ 2020. Farmacéuticas las palmas, Sitio web:

[Link]
3. Dr. Josep Franch Nadal, Dra. M. Luisa de Pablo Pons. Alteraciones
metabólicas como origen de la diabetes tipo 2 en población joven. Sitio
web: [Link]

4. Calabuig Alborch JR. Diabetes y salud pública. Cribado, prevención,

organización de cuidados y problemas sociales. Protocolos diabetes
mellitus tipo 2. Madrid, España: Sociedad Española de Medicina Interna;
2016.

5. Samuel Alberto García Castrejón. SSE #174: Metabolismo de la fructosa

desde una perspectiva funcional: Implicaciones para los atletas
[Internet]. [cited 2022 Jun 20]. Available from:
[Link]
%C3%ADculo/sse-174- metabolismo-de-la-fructosa-desde-una-
perspectiva-funcional-implicaciones-para-losatletas.

V I Stryer L,
I I .
Berg JM, Tymoczcko
 JL. Bioquimica. 7°
edición. Editorial
Reverte:
IX. Barcelona. 201
 PRACTICA N°03
REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN DE LOS LÍPIDOS
1. RESULTADOS
Experiencia N°01
Tabla N°01: solubilidad de las grasas
Solventes
(2ml)
Muestra 3 Agua fría Agua Alcohol acetona propanol
gotas caliente amílico
Aceite de oliva - + +++ ++ +++

Aceite de - - ++ + +++
cocina
Mantequilla - + ++ +

(+++) muy soluble

(++) soluble
(+) poco soluble
(-) insoluble

Experiencia N°02 esterificación

Tabla N°02: proceso de esterificación
Reactivos

Añadimos en un Ácido Ácido etanol Baño resultado

tubo de ensayo acético sulfúrico maría
los reactivos
    positivo

Experiencia N°03: saponificación

A = aceite de cocina B = aceite de oliva C = mantequilla

la reacción de saponificación se basa en la

reacción de un ácido graso más un álcali en
este caso se emplee NAOH, para el caso del
aceite de oliva la reacción salió positiva al igual
que el de aceite de casa.
2. DISCUSIÓN
Según … los lípidos son sustancias naturales que se disuelven en hidrocarburos,
pero no en agua, realizan un conjunto extraordinario de funciones en los seres vivos.
Algunos lípidos son reservas energéticas vitales. Otros son los componentes
estructurales primarios de las membranas biológicas. Asimismo, otras moléculas,
lipídicas actúan como hormonas, antioxidantes, pigmentos o factores de crecimiento
vitales y vitaminas (1).
Según Moreno S. La saponificación es una reacción química entre un ácido graso o
un lípido saponificable, y una base, en la que se obtiene como principal producto la
sal correspondiente. Así, los jabones son sales de ácidos grasos y metales alcalinos
que se obtienen mediante este proceso (2).
Durante la experiencia N°1 se logró realizar todas las pruebas en cuanto a la
solubilidad de grasas, pero hubo una prueba que no se realizó por falta de reactivo
que es el cloroformo que según las bibliografías es uno de los solventes en la cual la
evaluación de la solubilidad es uno de los mejores indicadores en cuanto a esta
prueba de reacción química de lípidos. Durante la experiencia N°2 que es la
esterificación se realizó con éxito en la cual consiste en la reacción de un ácido
graso más un alcohol y nos da como resultado un éster más agua y esto se
comprueba con el olor característico que emite al someterlo a baño maría. Durante
la experiencia N°3 se logró realizar el ensayo de saponificación en la cual se
fundamenta en la obtención de jabón a partir de la reacción de ácido graso más una
base fuerte, durante el desarrollo de esta experiencia se obtuvo de manera exitosa
con la muestra de aceite de oliva obteniéndose casi de forma instantánea el jabón
mediante la reacción de saponificación y de igual forma con la muestra de aceite de
casa, pero se necesitó acelerar su reacción mediante baño maría.
3. CONCLUSIONES
 Concluida la práctica se logró realizar el análisis de ciertas propiedades de
los lípidos tanto físicas y químicas, de la misma forma se logró determinar
su clasificación en simples, complejos, saponificables y no saponificables.
  Se logró verificar la presencia de los productos de saponificación, realizando
la reacción de saponificación en donde los actores primordiales son el ácido
graso y una base fuerte ya sea KOH o en su defecto NaOH.
4. CUESTIONARIO
1. ¿Qué pruebas exige la USP para la identificación y cuantificación de
lípidos?
 Índice de acidez: Es la cantidad, en mg, de hidróxido de potasio
necesaria para neutralizar 1,0g de muestra (3).
 Índice de esterificación: es la cantidad, en mg., de hidróxido de potasio
necesaria para saponificar esteres presentes en 1,0g de muestra (3).
 Índice de hidroxilo: es la cantidad, en g, de hidroxilo de potasio
equivalente al contenido de hidroxilo de 1,0g de muestra (3).
 Índice de iodo: es la cantidad, en g, de iodo capaz de ser fijado, bajo las
condiciones indicadas, por 100 g de muestra (3).
 Índice de saponificación: es la cantidad en mg, de hidróxido de potasio
necesaria para neutralizar los ácidos libres y saponificar los esteres
presentes en 1,0 g de muestra (3).
2. ¿Cuáles son las funciones de las lipasas?
Las lipasas (glicerol-éster hidrolasas) son enzimas que catalizan la hidrolisis de
los enlaces éster presentes en los acilgliceroles in vivo. Además, pueden
catalizar la hidrolisis o síntesis de un grupo amplio de esteres carboxílicos. Estas
enzimas están ampliamente distribuidas en la naturaleza y se encuentran en
microorganismos, plantas y animales. Una característica peculiar de las lipasas
es que son enzimas solubles en agua que actúan sobre sustratos insolubles y
agregados, por lo que operan unidas a interfaces lípido-agua (4).

3. Describa a los ácidos grasos insaturados de importancia fisiológica

Tabla N°1: importancia fisiológica y nutricional de los acidos grasos

insaturados
Numero de átomos de familia Nombre Nombre Aparición
C y número y común sistemático
posición de dobles
enlaces comunes

𝛚7
ACIDOS MONOENOICOS (UN DOBLE ENLACE)
16:1,9 Palmitoleico cis-9- En casi todas las

𝛚9
hexadecenoico grasas.
18:1,9 Oleico cis-9- Posiblemente el
octadecenoico ácido graso más
común en grasas
naturales;
particularmente alto

𝛚9
en el aceite de oliva
18:1,9 Elaídico trans-9- Grasas hidrogenadas
Octadecenoico y de rumiantes.

𝛚6
ACIDOS DINOICOS (DOS DOBLES ENLACES)
18:2;9;12 Linoleico holo-cis-9,12- Maíz, palta o maní;
Octadecadienoico semillas de algodón,
frijol de soja y
muchos aceites
vegetales.

𝛚6 𝛄-Linoleico holo-cis-6,9,12-
ACIDO TRIENOICOS (TRES DOBLES ENLACES)
18:3;6;9;12 Algunos vegetales,
Octadecatrienoico por ejemplo; aceite
de onagra, aceite de
borraja; ácido graso

𝛚3 𝛂-Linoleico holo-cis-9,12,15-
menor en animales.
18:3;9;12;15 Suele encontrarse
Octadecatrienoico con acido linoleico,
pero se halla
particularmente en el
aceite de linaza.

𝛚6
ACIDOS TETRAENOICOS (CUATRO DOBLES ENLACES)
20:4;5;8;11;14 Araquidónic holo-cis- Se encuentra en
o 5,8,11,14- grasas de animales;
Elicosatetraenoico es un componente
importante de
fosfolípidos en
animales.

𝛚3
ACIDOS PENTAENOICOS (CINCO DOBLES ENLACES)
20:5;5;5;8;11;14;17 Timnodónico holo-cis- Componente
5,8,11,14,17- importante de aceites
Eicosapentaenoico de pescado; por
ejemplo: aceites de
 hígado de bacalao,
caballa, sábalo
atlántico y salmón.

𝛚3
ACIDOS HEXAENOICOS (SEIS DOBLES ENLACES)
22:6;4;7;10;13;16;19 Cervónico holo-cis- Aceite de pescado,
4,7,10,13,16,19- fosfolípido en el
Docosahexaenoico cerebro

5. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Anonimo. Lipidos y membrana [Internet]. [cited 2024 Agosto18]. Available
from: [Link]
2. Sergio F. Moreno Salazar. Lipidos [Internet]. Temas Selectos de Bioquímica
Genera. [cited 2024 Agosto 17]. Available from:
[Link]
3. Farmacopea Argentina. Ácidos graos y aceites fijos [Internet]. [cited 2024
Agosto 19]. Available from:
[Link]
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4. González-Bacerio J, Rodríguez Hernández J, del Monte Martínez A. Las
lipasas: enzimas con potencial para el desarrollo de biocatalizadores
inmovilizados por adsorción interfacial. Vol. 1, Rev. Colomb. Biotecnol. 2010.
 PRACTICA N°04
DETERMINACION DE COLESTEROL TOTAL SERICO
I. OBJETIVOS
 Determinar el colesterol total en suero fisiológico mediante método
enzimático.
II. RESULTADOS

Tabla N°01: resultados de lectura para colesterol

N° muestra Absorbancia
1 B 0.000
2 E 0.182
3 Muestra 1 0.164
4 Muestra 2 0.134

LEYENDA:
B: BLANCO
E: ESTANDAR
M1: MUESTRA 01
M2: MUESTRA 02
 Muestra 01
0.164
Colesterol (mg/dl) = x 200
0.182
Colesterol (mg/dl) = 180.21

Muestra 02
0.134
Colesterol (mg/dl) = x 200
0.182
Colesterol (mg/dl) = 147.2527

III. CONCLUSIONES
 Se logró determinar el colesterol total sérico mediante el suero sanguíneo
por obtención de una muestra sanguínea obtenida por venopunción y esta
se realizó por un método enzimático - colorimetrico.
IV. DISCUCIONES
Según BAYER. El colesterol es un componente esencial de las membranas
celulares y lipoproteínas y es precursor de la síntesis de hormonas esteroideas y
ácidos biliares. El 25- 40% del colesterol en el plasma está presente en forma
libre no esterificada, el 60-75% restante esta esterificado con ácidos grasos no
saturados. Estas dos formas de colesterol en la mayoría de los casos no son
distinguidos en los procedimientos de rutina, son medidas normativas como
colesterol total. Debido a su baja solubilidad es transportado en plasma
exclusivamente complejo con proteínas formando las lipoproteínas. La mayor
parte del colesterol es transportado por la fracción de lipoproteína de baja
densidad LDL, el remanente por las lipoproteínas de alta densidad HDL y las
lipoproteínas de muy baja densidad VLDL, muy poca cantidad en los
quilomicrones. El colesterol es uno de los factores que contribuyen a la
formación de ateromas. La ateroesclerosis es una enfermedad silenciosa hasta
que alcanza estadios avanzados cuando ocurren las primeras manifestaciones
clínicas (1).
 Según la practica realizada en la tabla 01 se puede calcular los niveles de
colesterol total sérico y teniendo en cuenta la tabla de valores de referencia 02
se puede realizar las interpretaciones correspondientes: en la muestra 01 se
obtuvo un valor de 180.21 mg/dL que nos indica que su valor esta un tanto
elevado ello puede ser a que el análisis fue postprandial se puede clasificar
como un valor de estado deseable, en cuanto a la muestra 02 se obtuvo un valor
de 147.2527 mg/dL en este caso es un valor muy elevado podríamos reportar
que este paciente tiene hipercolesterolemia.

V. CUESTIONARIO
1. Fundamente como y cuando se da el hipercolesterolemia.
El hipercolesterolemia familiar es un trastorno monogénico causado por una
mutación en el gen que codifica el receptor LDL. La captación celular de
partículas remanentes y de las LDL esta alterada (HF heterocigota) o
completamente inhibida (HF homocigota, muy rara). Otras mutaciones
desorganizan el reciclado del receptor LDL a la membrana plasmática. Los
pacientes con HF presentan concentraciones plasmáticas muy altas de
colesterol y de colesterol LDL el modo de herencia de la HF es autosómico
dominante, de modo que suele haber antecedentes familiares notorios de un
ECVA precoz (es decir, los síntomas aparecen en un varón menor de 55
años o en una mujer menor de 65 años). Algunos pacientes desarrollan
depósitos de lípidos en los tendones de las manos y las rodillas y en
particular el tendón de Aquiles: se conocen como xantomas y son
diagnósticos de trastorno. La HF conlleva un riesgo de enfermedad
cardiovascular precoz (2).
2. Describa otros métodos de determinación del nivel del colesterol.
La determinación del colesterol total se extrae del suero con una mezcla de
alcoholéter y el colesterol se estima por métodos colorimétricos después de
la reacción con el reactivo anhidrido acético-acido sulfúrico (reacción de
Liebermann-Buchard). La precipitación de colesterol libre con digitonina
diferenciara el colesterol libre del colesterol esterificado(3). Separación
Cromatográfica La separación cromatográfica del colesterol de sus esteres
 en columnas de alúmina, acido silícico o silicato de magnesio con solventes
orgánicos. Los procedimientos de cromatografía gaseosa permitieron la
separación y la cuantificación del colesterol, sus metabolitos y sus
precursores; este método es un tipo de cromatografía de partición en la cual
una muestra volatilizada se divide entre una fase liquida estacionaria y una
fase gaseosa móvil (3).

VI. REFERENCIA BIBLIOOGRAFICA

1. Bayer HealthCare. COLESTEROL TOTAL [Internet]. [cited 2022 Jul 5]. Available
from: [Link]
2. JHON W. BAYNES. BIOQUIMICA MEDICA.
3. Alfonso R. Gennaro. Remington Farmacia [Internet]. [cited 2022 Jun 20]. Available
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id=Av4IIsyHqcC&pg=PA663&dq=metodos+para+la+determinacion+de+colesterol+
total+serico&hl=es&
sa=X&ved=2ahUKEwjZvKXA2L34AhVVD7kGHZsxCQgQ6AF6BAgCEAI#v=onepage&q
=metodo s%20para%20la%20determinacion%20de%20colesterol%20total
%20serico&f=true