Tuberculosis

Monica Yurley Arias Guerrero

Msc, Bact.
 TAXONOMIA

• Género: Mycobacterium
• Familia: Micobacteriaceae
• Orden: Actinomicetales

• Aunque este orden comprende

microorganismos diversos, las
micobacterias y taxones
emparentados con ellas se
distinguen fácilmente del resto por
su capacidad de sintetizar ácidos
micólicos.
Pared celular
▪ Pared celular de peptidoglicanos
(Acido N- glucolilmurámico).

▪ Pared con alto contenido de

lípidos

▪ Ácidos grasos llamados: ácido

micólicos y lipoarabinomanano

Acido alcohol
resistente
Características de
Mycobacterium tuberculosis
• El M. tuberculosis es un bacilo en forma de bastoncillo
de extremo redondeado.

• Es resistente al ácido y al alcohol

• Tiene una longitud de 1 a 4 micras, y de 0.3 a 0.6

micra de diámetro.

• Se comprueba con la técnica de tinción de ZIEHL-

NEELSEN o algunas de sus variantes debido a los
componentes lipídico de su pared celular.
Características de
Mycobacterium tuberculosis
• Esta micobacteria es aerobia.

• Su gran virulencia se debe a que puede vivir largo tiempo fuera del
organismo (6 a 8 meses).

• La exposición a la luz la destruye.

• Casi siempre es positiva la prueba de niacina y esto nos sirve para

diferenciarla de otras micobacterias.

• En condiciones óptimas de laboratorio las cepas de M. tuberculosis

tardan en replicarse una sola vez aproximadamente 20 horas.

• Las colonias se hacen visibles en un medio de LOWENSTEIN- JENSEN;

pueden aparecer después de 6 semanas.
 PATOGENIA

Determinantes de
patogenicidad

Proteínas  El M. tuberculosis no produce

exotoxinas, endotoxinas o
 Después de los lípidos son los enzimas que puedan causar
componentes importantes, pues
son los responsables de la efectos negativos.
reacción de la tuberculina.

 Responsables de la formación de  (Es rápidamente fagocitado

anticuerpos. por los macrófagos.)
 TUBERCULOSIS PULMONAR

• Es una infección bacteriana

contagiosa de larga evolución
causada por Mycobacterium
tuberculosis que compromete
principalmente los pulmones,
además de que puede
extenderse a otros órganos y
que se caracteriza por la
formación de tubérculos que
pueden causar necrosis tisular..
 SINTOMAS Y SIGNOS

Hay síntomas al principio, solo se limita a una tos mínima y poca fiebre,
posteriormente aparece:
-Fatiga.
-Pérdida de peso.
-Tos sanguinolenta.
-Fiebre leve y sudoración nocturna.
-Tos que produce flema.

Los síntomas asociados con la enfermedad son:

-Sibilancia.
-Sudoración excesiva.
-Dolor en el tórax.
-Dificultad respiratoria.
 TRANSMISIÓN
• La tuberculosis es transmitida de persona a
persona principalmente por vía respiratoria, a
través de las gotitas de Pflüge.

• Los bacilos tuberculosos (en número de 1 a 3)

forman los núcleos de estas pequeñas gotitas, lo
suficientemente pequeñas (1-5 micras de
diámetro) como para evaporarse, y permanecer
suspendidas en el aire varias horas.

• Cuando una persona

con tuberculosis • Las partículas de mayor tamaño, aunque tengan
pulmonar o laríngea
tose, estornuda, mayor número de bacilos, son menos
habla o canta, emite contagiosas, pues caen por gravedad, o en el
estas pequeñas caso de ser inhaladas, son eliminadas por el
partículas. sistema mucociliar y la tos.
 TRANSMISIÓN
• La posibilidad de que la enfermedad se transmita depende de cuatro factores:
- Las características del enfermo.
- El entorno en que tiene lugar la exposición.
- La duración de la exposición.
- La susceptibilidad del receptor.

• La capacidad de infectar de un enfermo determinado va a depender de:

• la cantidad de bacilos que expulse con sus secreciones respiratorias, estando ésta en relación
directa con la frecuencia de la tos, la existencia de lesiones cavitadas y con las formas de
diseminación broncógena.

• La tuberculosis laríngea es especialmente infectiva.

TIPOS DE TUBERCULOSIS
EXTRAPULMONAR

 Tuberculosis del SNC

 Linfadenitis tuberculosa
 Laringitis tuberculosa
 Tuberculosis genitourinaria
 Tuberculosis osteoarticular
 Tuberculosis gastrointestinal
 Peritonitis tuberculosa
 Pericarditis tuberculosa
 Tuberculosis miliar o diseminada
 Tuberculosis ocular
DIAGNÓSTICO
 PRUEBA DE TUBERCULINA

• La prueba de la tuberculína
es una reacción cutánea de
hipersensibilidad que indica la
existencia de infección
tuberculosa previa.

• La prueba se lleva a cabo

con un extracto proteico
purificado (PPD) de M.
tuberculosis.

• Las reacciones deben leerse

midiendo el diámetro
transverso de la zona de
induración a las 48-72 horas.
 PRUEBA DE TUBERCULINA
 la reacción se considera • la reacción se considera
negativa cuando es positiva cuando es mayor
menor de 10mm de 10mm
NEGATIVA: 0-4.5 mm Positiva : 5-14 mm fuertemente positiva: MAYOR A 15 mm
DIAGNÓSTICO DE TBC POR METODOS TRADICIONALES
TIEMPO PROMEDIO DEL
PROCEDIMIENTO TECNICAS REPORTE DESDE EL DIA EN QUE
SE PROCESA LA MUESTRA
EXAMEN DIRECTO Coloración de Kinyoun
Coloración de Ziehl-Neelsen 24 HORAS

Usando Auramina rodamina

Es más sencillo
Se pone Fluorocromo a la
bacteria y ella fluórese

DETECCION DE Lowestein-Jensen
CRECIMIENTO Ogawa- Kudoh 20-25 DÌAS
IDENTIFICACIÓN DE LA Pbas bioquímicas tradicionales
ESPECIE (Niacina, Catalasa, Reducción de 50-55 DIAS
Nitratos etc)
 BACILOSCOPIA

 Es considerada el examen básico para el diagnóstico bacteriológico, especialmente

en su forma broncopulmonar, como así también para los controles de tratamiento.

 El procedimiento se basa en la capacidad de las Mycobacterias de incorporar ciertos

colorantes y retenerlos ante la acción de ácidos y alcohol, propiedad conocida como
ácido - alcohol – resistencia.

 Es una técnica sencilla, de bajo costo y disponible aún en laboratorios de baja

complejidad.

 Para obtener una baciloscopía positiva, la muestra deberá contener una población
bacilar del orden de 10.000 bacilos por ml ó más.
 BACILOSCOPIA CON TINCIONES ACIDORESISTENTES

 Es muy útil en tuberculosis

pulmonar, donde con tres
baciloscopias del esputo se puede
establecer la presencia de
micobacterias en un 70% a 80%.

 Con la primera se toma el 80% dé

pacientes con TBC, con la
siguiente el 15%, y con la tercera
el 5% restante
 BACILOSCOPIA
Simple,
Económica y
eficiente

Herramienta
Diagnóstico
fundamental
Rápido y
programa de
control de
control de
Tratamiento
Tuberculosis
Sensibilidad de Baciloscopia
 Muestras
Pulmonar Extrapulmonar

• Orina
• Esputo • Liquido Cefalorraquídeo
• Líquidos pleural, ascítico, pericárdico,
• Lavado Gástrico articular
• Biopsia
• Lavado bronquial • Sangre
• Pus
Muestras de TB pulmonar
Muestras de TB pulmonar

FTS: Fosfato trisódico

Muestras de TB pulmonar: Aspirado Gástrico
• Se emplea especialmente en niños que no saben expectorar para detectar bacilos en el
esputo ingerido, mientras se encuentran en el estómago.

• Se recomienda utilizar esta muestra sólo para diagnóstico y no en el control del tratamiento.

• Número de muestras: al menos tres.

• Envase: el aconsejado para esputo.

• Momento de la recolección: por la mañana al despertar, en ayunas dado que la ingesta de

alimentos hace que la expectoración ingerida pase al intestino. El ayuno no debe ser
demasiado prolongado y no debe haber estímulo alimenticio que aumente la acidez gástrica
Muestras de TB pulmonar: Aspirado Gástrico
• Técnica:

• Se introduce una sonda de longitud y diámetro adecuados a

la edad del paciente hasta el estómago.

• Una vez que la sonda llega al estómago, se aspira con

jeringa muy suavemente para que la succión no provoque
daño.

• En caso de no obtenerse material, se inoculan 10 a 15 ml

de agua destilada o solución fisiológica estéril y se recoge el
contenido gástrico inmediatamente después, en un frasco
de tamaño adecuado.
Muestras de TB pulmonar: Aspirado Gástrico

• Conservación: • Procesamiento:
• El material debe ser enviado
inmediatamente al laboratorio, ya que debe
ser cultivado durante las 4 horas siguientes • Las muestras de lavado gástrico
a su obtención. deben cultivarse.
• La baciloscopia se realiza con el
sedimento de la muestra centrifugada
• Si, excepcionalmente, no es posible el previamente durante 30 minutos a
procesamiento inmediato debe neutralizarse 3.000rpm, por lo que es conveniente
el material con 1 mg de bicarbonato de que sea realizado directamente en el
sódio o de fosfato trisódico anhidro por laboratorio que cultiva la muestra.
cada ml de contenido gástrico, y
conservarse en nevera por no más de 24
horas.
 Muestras de TB pulmonar: Lavado Bronquial
• Antes de tomar la muestra deben realizarse, de ser posible, baciloscopias de al menos dos
muestras espontáneas de esputo para intentar detectar el bacilo sin procedimientos invasivos y
los riesgos vinculados a este procedimiento.

• La obtención de esta muestra está reservada a médicos especialistas. Se deben respetar

las siguientes recomendaciones:

• Tomar la muestra en una sala bien ventilada y utilizando mascarillas de bioseguridad.

• Utilizar un fibrobroncoscopio esterilizado no mas de 15 días antes

• Entregar al paciente un frasco para que recoja toda la expectoración que por estímulo de la
fibrobroncoscopía se puede producir en las 24 horas siguientes
 Muestras extrapulmonares
Orina
Líquido cefalorraquídeo

• La obtención de este material está reservada a

• Número de muestras: mínimo tres y
personal médico.
máximo seis.

• Cantidad de muestras: todas las que el médico

• Cantidad y momento de recolección:
crea conveniente; cuanto mayor es la cantidad de
previa higiene externa con agua, el
muestras procesadas, mayor es la posibilidad de
paciente debe recoger no menos de
hallazgo de bacilos.
50 ml del segundo chorro de la
primera micción de la mañana. Se
desecha la primera parte para • Envase: estéril de 10-15 ml de capacidad y con
disminuir la carga de gérmenes tapa a rosca de cierre hermético.
contaminantes.
 Muestras extrapulmonares

• Líquidos pleural, ascítico, pericárdico, • Pus

articular y otros
• Envase: estéril Es preferible no usar
• La obtención de estos materiales está reservada hisopos para evitar la desecación. En
al personal médico. caso de utilizarlos, antes de la toma
de muestra deben ser humedecidos
con solución fisiológica o agua
• Número de muestras: todas las que el médico destilada estéril.
considere conveniente

• Envase: estéril, de capacidad adecuada para la

cantidad de la muestra
 Muestras extrapulmonares
• Sangre

• La investigación de sangre está indicada para

pacientes con inmunosupresión severa, como
en casos con infección por HIV con bajo
recuento de linfocitos totales o CD4, y con
baciloscopias de muestras respiratorias
reiteradamente negativas.

• Cantidad y momento de recolección: dos

muestras de 10 ml de sangre venosa en días
consecutivos.
 Preparación para el extendido
Seleccionar la partícula mas virulenta →

Ordenar las muestras →

Extender la muestra uniformemente→

Marcar el portaobjetos →

Depositar en el portaobjetos →

Partir el aplicador →

Fijar el extendido cuanto este

totalmente seco →
 Extendido para la Baciloscopia
• Seleccionar la partícula mas purulenta

• Extender homogéneamente suficiente cantidad de la partícula útil,

sin exceso, en un pequeño óvalo centrado en el portaobjetos
(2cmx2cm o 2cmx1cm)
Muestra
 Capacitación LDSP

Coloración Ziehl Neelsen

Contraste:
10 min Coloración: 5 min
Decoloración: 3 min
Contraste: 1 min

Decoloración:
3 min
Coloración: 5 min
Coloración: Fuscina
Decoloración: Alcohol acido
Contraste: Azul de metileno
Manual para el diagnostico bacteriológico de la tuberculosis.
Control de coloración
Controlar la calidad de
• Controles comerciales cada nuevo lote de
colorantes

• Controles preparados

Si se realizan mas de 10 Si se realizan menos de 10

baciloscopias por día, se debe baciloscopias por día se debe hacer
hacer el control una vez por el control diariamente.
semana
Errores de la coloración
Extendido
Lectura de Ziehl Neelsen
 Lectura
• Los campos leídos deben ser “campos microscópicos utiles”. Se
considera campo microscópico útil a aquel en el cual se observan
células bronquiales (leucocitos, células ciliadas) o fibras
mucosas, que aparecen teñidos de azul. Los campos sin estos
elementos no deben ser considerados para contar el total de
campos observados, a menos que contengan BAAR.
Lectura

Promedio de BAAR encontrados Número mínimo de campos útiles a examinar

Ninguno 100
Menos de 1 por campo 100
1 a 10 por campo 50
Más de 10 por campo 20
De 1 a 9 en todo el extendido 100
 Lectura
Resultado del Examen microscópico Informe
No se encuentran BAAR en los 100 campos observados No se observan bacilos ácido-alcohol
Resistentes
Se observan de 1 a 9 BAAR en 100 campos observados Nº exacto de bacilos en 100 campos

Se observa entre 10 y 99 BAAR en 100 campos Positivo (+)

observados
Se observan de 1 a 10 BAAR por campo en 50 campos Positivo (++)
observados
Se observan más de 10 BAAR por campo en 20 campos Positivo (+++)
observados
 Lectura de Ziehl Neelsen
• El número total de campos a examinar depende de si se encuentran bacilos y en
que concentración

Ejemplo de lectura:

➢Promedio bacilos/campo = Sumatoria de

BAAR en 50 campos

➢Promedio bacilos/campo = 80/ 50 campos =

1,6 BAAR equivale a (++)
 Procedimientos a seguir frente al hallazgo de
menos de 5 BAAR en 100 campos observados
• Debido a la posibilidad de que se trate de artefactos de coloración, se
recomienda:

• Ampliar la lectura a 200 campos.

• Si con esa lectura no se encuentran más bacilos, hacer otro extendido de la
misma muestra, tratando de elegir partículas purulentas.
• Si la lectura del segundo extendido no modifica el resultado del anterior la
muestra debe informarse con el número exacto de bacilos observados,
consignando en el libro de Registro el hallazgo y solicitar una nueva muestra.
• Cultivar o enviar para cultivo estas muestras
MEDIOS DE CULTIVO

• Lowestein-jensen.

• Kirchen.

• Middlebrook (7H9, 7H10 Y 7H11).

• Ogawa Kudoh. (OK).

• Stonebrink modificado por Giraldo

(STG).
 Cultivo
• Es el método de Diagnóstico bacteriológico de
tuberculosis y micobacteriosis de mayor sensibilidad.

• En la TB pulmonar permite captar mas pacientes de los

que podrían captar por baciloscopia.

• En la tuberculosis extrapulmonar es el mejor método de

diagnostico.

• La mayoría de los casos de tuberculosis son causados por

Mycobacterium tuberculosis
 Cultivo
• Permite detectar los casos antes que lleguen a ser
infecciosos (diagnóstico temprano).

• Es posible incrementar la detección de casos en

15 - 20%.

• Es el mejor método para demostrar la curación de

un paciente al final del tratamiento.

• Tiene 100% especificidad

 Lectura del cultivo
Según la escala semicuantitativa:
• (-) No se observan colonias
• Número exacto de colonias cuando se tiene menos de 20
• (+) 20 a 100 colonias
• (++) Mas de 100 colonias separadas
• (+++) Colonias confluentes
• Contaminado : Desarrollo de microorganismos acido alcohol
sensibles.
 Informe

• Cultivo positivo (__colonias) para bacilos acido alcohol resistente, a la ___

semana de incubación.
• Cultivo positivo (+) para bacilos acido alcohol resistentes, a la ___ semana de
incubación.
• Cultivo positivo (++) para bacilos acido alcohol resistentes, a la ___ semana
de incubación.
• Cultivo positivo (+++) para bacilos acido alcohol resistente, a la ___ semana
de incubación.
• Cultivo negativo para bacilos acido alcohol resistente, a la ___ semana de
incubación.
MEDIOS DE CULTIVO
Tiempo de reporte

Se deben
revisar de
forma semanal
para optimizar
el reporte y
envió para
pruebas de
sensibilidad
 TRATAMIENTO
Se usan tres medicamentos debido a que en un mismo tipo de bacterias hay un crecimiento heterogéneo.
Estos son:
• Isoniazida (INH)
• Es usado para los de multiplicación rápida.
• Es importante matar a los que se multiplican rápido porque son los que transmiten y perpetúan la
endemia
• Adicionalmente, se mejora rápido el paciente

• Pirazinamida
• Para los que se multiplican lento
• Es importante matar a los bacilos lentos porque son los responsables de las recaídas del paciente
• Se mejora, le dieron de alta y después de un tiempo vuelve

• Rifampicina
• Para los que son intermitentes, cronifican la enfermedad
 Control de tratamiento

• El tratamiento de la tuberculosis comprende dos fases:

→inicial intensiva: dura entre 2 y 3 meses

→Consolidación: dura de 4 a 5 meses.

• Independientemente del esquema, se aconseja examinar por baciloscopia

una muestra por mes de cada paciente de tuberculosis pulmonar con
baciloscopia inicial positiva. Si esto no es posible, se debe examinar por lo
menos una muestra MATINAL al final de la fase intensiva.
 Control de tratamiento
• Si la baciloscopia es negativa, coincidiendo con mejoría clínica y cumplimiento
del tratamiento, se pasa a la segunda fase de tratamiento.

• Si por el contrario, la baciloscopia continúa positiva, será enviada para cultivo

para el caso en que se requiera prueba de sensibilidad y se evaluará si el
paciente puede pasar a la fase de consolidación o si debe extenderse la primera
fase.

• Luego se debe tomar al menos otra muestra para microscopía al finalizar el 4º

mes para controlar la evolución del paciente y detectar un posible fracaso del
tratamiento, y una al finalizar el tratamiento para confirmar la curación.
 Protocolo de Vigilancia y control de TB
Sivigila
• En caso de que las dos baciloscopias iniciales sean negativas, se deberá cultivar la segunda
muestra de esputo.
• En el control de tratamiento de pacientes, que han sido diagnosticados por cultivo
• Pacientes menores de 15 años
• Para diagnóstico de TB infantil
• Todas las muestras de origen extrapulmonar (Líquidos, biopsias, secreciones, orina, sangre) .
• Las muestras de los pacientes con diagnóstico de VIH .
• Pacientes en tratamiento cuya baciloscopia de control de segundo mes sea positiva
Un compuesto fluorescente está incluido en silicona en la
parte inferior de los tubos de 16 x 100 mm de fondo
redondo.

El compuesto fluorescente es sensible a la presencia de

oxígeno disuelto en el caldo.

Inicialmente, la gran cantidad de oxígeno disuelto apaga

las emisiones procedentes del compuesto y se puede
detectar muy poca fluorescencia. Más tarde, los
microorganismos que respiran activamente consumen el
oxígeno y permiten que se observe la fluorescencia
mediante el uso de un transiluminador ultravioleta de 365
nm o luz ultravioleta de onda larga (lámpara de Wood).

El crecimiento también puede ser detectado por la

presencia de turbidez no homogénea o pequeños
gránulos o copos en el medio de cultivo.
 Medios líquidos

Procedimiento de la
prueba
1. Retirar el dispositivo de prueba de su bolsa de
aluminio y ubíquelo sobre una superficie plana y
seca.

2. Adicionar 100μl del cultivo liquido (o 100μl del

cultivo solido suspendido en buffer) dentro del pozo
de muestra.

3. Cuando la prueba comience a funcionar, se vera el

color purpura desplazándose a través de la ventana
de resultados en el centro del dispositivo de prueba.

4. Interprete los resultados de prueba 15 minutos

después de la aplicación de la muestra.
Resultado Negativo : La presencia de solamente la banda control (linea “C”) dentro de la ventana de
resultados indica un resultado negativo.

Resultado Positivo : La presencia de dos bandas de color (banda “T” y banda “C”) dentro de la ventana
de resultados, sin importar cual banda aparece primero, indica un resultado positivo
 ACTIVIDAD

Métodos de decontaminación/homogenización:

• N-acetil-cisteina-hidroxido de sodio (NALC-NaOH)

• Método de Kudoh Ogawa
• Decontaminación con soluciones ácidas.
• Método de Petroff modificado

Pruebas bioquímicas

• Prueba de niacina
• Inhibición de catalasa a 68 °C
• Reducción de nitrato