CENTRO EDUCATIVO Y TECNOLÓGICO “BILL

GATES”
LICENCIA 0289 DEL 18 DE NOVIEMBRE DE 2004
E-mail: [email protected]
ASIGNATURA: LABORATORIO DE QUIMICA
TUTOR: Mr. Sneider Guillen

USO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

A. M. Muñoz°
°Estudiante del grado decimo A, Centro Educativo & Tecnológico Bill Gates
Soledad, Atlántico

RESUMEN
En esta práctica se realizó la observación y el modo de uso correcto del
microscopio en sus diferentes aplicaciones en el campo de la biología celular.
El objetivo principal fue familiarizarse con el manejo del microscopio y
aprender a identificar estructuras celulares. Durante el experimento, se
prepararon muestras de un cuadrado de un trozo de una hoja milimétrica, una
epidermis de cebolla, y la saliva de un compañero junto con el reactivo azul de
metileno. se ajustaron correctamente los componentes del microscopio
(enfoque, iluminación y aumentos), y se realizaron observaciones detalladas a
diferentes niveles de magnificación. la práctica demostró la utilidad del
microscopio óptico para el estudio detallado de las células, destacando su
papel esencial en la investigación biológica y la educación científica.
PALABRAS CLAVES: Observación, biológico celular, manejo, aprender,
identificar, practica, educación científica.
ABSTRAC
In this practice, the observation and correct use of the microscope in its
different applications in the field of cell biology was performed. The main
objective was to become familiar with the handling of the microscope and to
learn how to identify cellular structures. During the experiment, samples of a
square of a piece of a millimeter leaf, an onion epidermis, and the saliva of a
classmate were prepared together with methylene blue reagent. the microscope
components (focus, illumination and magnification) were correctly adjusted,
and detailed observations were made at different magnification levels. the
practice demonstrated the usefulness of the optical microscope for the detailed
study of cells, highlighting its essential role in biological research and science
education.

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TUTOR: Mr. Sneider Guillen
KEYWORDS: Observation, Cellular biology, handling, learn, identify, practice,
science education.
1. INTRODUCCIÓN
El microscopio óptico e una
herramienta fundamental en la
biología y otras ciencias,
permitiendo la observación
detallada de estructuras que son
invisibles a simple vista. Este
instrumento utiliza lentes ópticas
para magnificar las muestras, lo que
facilita el estudio de las células y
sus componentes. La práctica del
uso del microscopio óptico tiene
como objetivo principal familiarizar Imagen 2 Partes de un microscopio
a los estudiantes con su manejo compuesto.
correcto y eficiente, así como con Años más tarde, en 1665, el inglés
las técnicas necesarias para preparar Robert Hooke creó el primer
y observar muestras biológicas. El microscopio compuesto (imagen 3),
microscopio fue inventado por el que utilizaba dos sistemas de lentes:
holandés Zaccharias Janssen en el oculares y objetivos.
siglo XVI (imagen 2).

Imagen 1 El microscopio simple, se

optimizó en el siglo XVII gracias al trabajo Imagen 3 se ilustra un microscopio
de Anton Van Leeuwenhoek Él fue capaz de compuesto simple inventado por el
observar organismos microscópicos microscopista británico Robert Hooke en la
unicelulares (a los que llamó «animálculos») década de 1665.

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Por su parte, el holandés Antoni objetivo) para aumentar la imagen
Van Leeuwenhoek, un comerciante de un objeto. El objetivo, cercano a
y científico neerlandés, fabricó sus la muestra, tiene una distancia focal
propios microscopios monoculares corta, invirtiendo la imagen que
de buen poder de resolución, que lo finalmente se integra en el cerebro
llevaron al descubrimiento de los como una imagen bidimensional. El
glóbulos rojos en 1673, como poder de resolución del
también al descubrimiento de microscopio, crucial para la
algunas bacterias y definición de la muestra, depende
espermatozoides humanos (imagen de la longitud de onda utilizada y la
1). Por lo anterior, Leeuwenhoek es apertura numérica. La iluminación
reconocido como la primera es esencial, utilizando un
persona en interesarse en observar condensador para enfocar la luz
la naturaleza a través del sobre la muestra y un diafragma
microscopio (Wollmanet al., 2015). para controlar el diámetro de la luz
Durante los siglos XVIII y XIX se dirigida. Los microscopios se
realizaron avances para su utilizan principalmente para
mejoramiento, principalmente en examinar muestras frescas o
Inglaterra. Durante la segunda teñidas.
mitad del siglo XIX, las empresas
alemanas Leitz y Zeiss
popularizaron el uso del
microscopio de luz. En la
actualidad, la microscopía ha
avanzado significativamente,
desarrollándose diversos tipos de
microscopios, como el simple, el
compuesto (invertido, de
fluorescencia, de luz ultravioleta,
luz polarizada, de contraste de
fases, de campo oscuro), y el Imagen 4 Partes de un microscopio
electrónico (de transmisión y de compuesto. Imagen modificada tomada de:
barrido), entre otros. Un http:// www.ibdciencia.com [Fecha de
consulta: 10 de mayo de 2016].
microscopio, que puede ser
monocular o binocular, combina El microscopio tiene varias
dos sistemas de lentes (ocular y propiedades clave: el poder de

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amplificación, que permite capacidad de una lente para
aumentar una imagen varias veces concentrar luz, siendo un producto
su tamaño natural; el poder de del índice de refracción del medio y
resolución, que mide la cantidad de el seno del semiángulo de apertura.
detalle que puede distinguir el Un microscopio de luz compuesto
objetivo y permite diferenciar dos incluye un sistema de soporte con
puntos muy próximos, con un límite una base para estabilidad, una
de resolución de 0.275 micras para platina metálica con un orificio
el microscopio óptico, comparado central para el paso de luz y un
con los 0.075 mm del ojo humano; brazo que conecta la base con el
el poder de definición, que asegura sistema óptico. Este sistema óptico
la claridad y nitidez de las incluye oculares ubicados en el
imágenes; y el aumento final, que cabezal, separados por un
resulta del producto del aumento diafragma, permitiendo ajustar la
del ocular por el del objetivo. La imagen para mejorar la calidad y la
apertura numérica mide la comodidad visual.

2. METODOLOGIA Y RESULTADOS
Equipos Materiales Reactivos
Microscopio Frasco gotero Azul de metileno
Cámara de Neubauer Bisturí Lugol
Micropipeta Papel de arroz Agua destilada
Porta y cubreobjetos
Papel milimetrado
Papel toalla
Tijeras
Hilos de diferentes colores
Bajalenguas
Cebolla

Antes de comenzar con las practicas se debe tener en cuenta las

recomendaciones y el uso correcto del microscopio.
El uso correcto del microscopio requiere varios ajustes para obtener una
imagen clara y detallada. Antes de usar el microscopio, asegúrate de que los
lentes oculares y objetivos estén limpios, utilizando solo papel de lente seco o
la humedad del aliento para empañarlos y limpiarlos suavemente. Si la
laminilla está sucia, límpiala con una franela. La suciedad, el polvo y las
huellas digitales en los lentes o en la laminilla son causas comunes de
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imágenes borrosas. NUNCA toques los lentes o la parte central de la laminilla
con los dedos. También recuerda que no te debes apoyar tanto al microscopio.
2.1 Primera practica
I. Tomamos el papel milimétrico y recortamos un cuadro de este.
II. Luego tomamos un portaobjeto al cual le agregamos una gota de agua,
seguido de esto, el cuadro que recortamos de papel milimétrico, lo colocamos
sobre la gota de agua y finalmente, colocamos un cubreobjetos.
III. Llevamos la muestra a la platina del microscopio.
IV. Enfocamos el papel milimétrico con el objetivo de 4X y tratamos de que
una línea del papel milimétrico quede como diámetro del campo visual.
V. Procedemos a observar la muestra con el objetivo de 10X
2.2 Segunda practica
I. tomamos la cebolla y procedemos a cortarla con un bisturí, una capa de la
cebolla.
II. La capa de la cebolla la cortamos con ayuda del bisturí, hasta que salga
entre sus paredes una telita transparentosa de la cebolla.
III. Procedemos a colocarlo sin agua en el porta objetivo, y luego colocamos
encima el cubre objeto.
IV. Siguiente de esto, lo colocamos en la platina, y observaremos nuestros
objetivos 4x, 10x, 40x.
2.3 Tercera practica
I. Tomaremos un baja lenguas, y lo frotaremos con el lado del cachete por un
determinado tiempo
II. Luego, tomaremos esta muestra y la colocaremos en el portaobjetos
III. Con el agua de metileno, le echamos un poco encima de la muestra de
saliva, y esperaremos a que se seque, en esta parte no colocaremos un
cubreobjeto.
IV. Observamos la muestra en la platina en los objetivos 4x, 10x, 40x.

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3. RESULTADOS Y ANALISIS

Figura 1 Papel Milimetrado observado con el objetivo 10x.

Figura 2 Papel Milimetrado observado con el objetivo 4x.

Figura 3 Epidermis de la cebolla en el objetivo 4x.

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Figura 4 Epidermis de la cebolla en el objetivo 10x

Figura 5 Epidermis de la cebolla en el objetivo 40x.

Figura 6 Muestra de la saliva en el objetivo 4x.

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Figura 7 Muestra de saliva en el objetivo 10x.

Figura 8 Muestra de saliva en el objetivo 40x.

CUESTIONARIO DE PRACTICA N°3
1. ¿Cuál es la diferencia entre un microscopio simple y uno compuesto?
2. ¿Qué importancia tiene el uso del microscopio en la Biología Celular?
3. ¿Por qué es necesario utilizar aceite de inmersión al utilizar el objetivo del mismo
nombre?
4. ¿Qué significa resolución, poder de resolución y amplificación, asimismo de qué
factores depende cada uno de ellos? Presenta tus respuestas a manera de tabla.
5. Realiza una tabla comparativa de todos los tipos de microscopios incluyendo:
fuente de iluminación, condensador, longitud de onda, tipo de tinción, resolución,
amplificación, tipo de lentes, etc.
Desarrollo
1-Diferencia entre un microscopio simple y uno compuesto:
Microscopio Simple: También conocido como microscopio óptico de una
lente, es un dispositivo que utiliza una única lente para aumentar el tamaño de
una muestra. Ejemplos comunes incluyen la lupa.

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Microscopio Compuesto: Es un microscopio que utiliza múltiples lentes
(objetivo y ocular) para aumentar el tamaño de una muestra. Este tipo de
microscopio es mucho más potente y versátil que el microscopio simple,
permitiendo aumentos mucho mayores y una mejor resolución.
2- El microscopio es una herramienta fundamental en la biología celular
porque permite a los científicos observar estructuras celulares que son
demasiado pequeñas para ser vistas a simple vista. Con el microscopio, los
investigadores pueden estudiar la morfología, la estructura interna y la función
de las células, lo que proporciona una comprensión más profunda de los
procesos biológicos fundamentales, como la división celular, el transporte de
sustancias dentro y fuera de la célula, y la interacción entre células.
3- El objetivo de inmersión es un tipo de objetivo de alta potencia utilizado en
microscopios compuestos. Para lograr la mayor resolución y claridad posible
al observar muestras a través de este objetivo, es necesario eliminar el aire
entre el objetivo y la muestra. El aceite de inmersión tiene un índice de
refracción similar al del vidrio del objetivo y al de las estructuras biológicas,
lo que minimiza la refracción de la luz y maximiza la resolución. El aceite
también evita la dispersión de la luz que ocurriría si el aire estuviera presente
entre el objetivo y la muestra. Por lo tanto, el uso del aceite de inmersión es
necesario para obtener imágenes claras y nítidas cuando se utiliza un objetivo
de inmersión de alta potencia.
4-
TERMINO DEFINICIÓN FACTORES QUE LO AFECTAN
RESOLUCIÓN Capacidad de distinguir dos - Longitud de onda de la luz
puntos cercanos en una muestra. utilizada.
Es la mínima distancia entre dos -Numerical aperture (NA) del
objetos que aún se pueden ver objetivo.
como separados. -Calidad de las lentes y la óptica.
-Procesamiento de imagen y
tecnología de detección.
PODER DE LA RESOLUCIÓN Especifica la mínima distancia - Longitud de onda de la luz
entre dos puntos que pueden ser utilizada.
distinguibles en una imagen. Es -Numerical aperture (NA) del
una medida cuantitativa de la objetivo.
capacidad del microscopio para -Apertura numérica del sistema
resolver detalles finos en una de detección (oculares y cámara).
muestra. -Factores ambientales como la
temperatura y la humedad.

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AMPLIFICACIÓN Aumento del tamaño aparente de -Potencia del objetivo
una muestra vista a través del (ampliación del objetivo).
microscopio en comparación con - Potencia del ocular (ampliación
el tamaño real de la muestra. del ocular).
- Distancia entre el objetivo y la
muestra.
- Longitud focal del sistema
óptico.
- Factor de zoom en el caso de
microscopios estereoscópicos.

5-
Tipos de fuente de condensado Longitud Tipo de resolució amplificado Tipos de lentes
microscopio iluminació r de onda tinción n r
s n
Microscopio Luz visible Condensador ~400-700 Tinción de ~0.2 μm 1000-2000x Lentes de Vidrio
óptico Abbe nm (visible) Hematoxilina
y Eosina
(H&E),
Tinción de
Giemsa,
Tinción de
Wright-
Giemsa

Microscopio Láser o Luz Condensador Visible Tinción ~0.2 μm Hasta 1000x Lentes de Vidrio
confocal Fluorescente de Haz (láser) / Fluorescente y Objetivos de
Fluorescent Inmersión
e (luz)
Microscopio Haz de No se utiliza ~0.005 nm Tinción de ~0.1 nm Hasta Lentes
Electrónico de Electrones (Electrones) Fosfotungstat (máxima) 2,000,000x Electromagnética
Transmisión o de Uranilo, s
(TEM) Tinción de
Acetato de
Uranilo,
Tinción de
OsO4
Microscopio Haz de No se utiliza ~0.005 nm No se requiere ~1-10 nm Hasta Lentes
Electrónico de Electrones (Electrones) (uso de 100,000x Electromagnética
Barrido (SEM) Electrones) s
Microscopio No se No se utiliza No se aplica No se requiere ~0.1 nm Hasta No aplica
de Fuerza requiere (uso de 10,000,000x (Sondas de Punta)
Atómica sondas)
(AFM)

4. CONCLUSIÓN

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En esta práctica de laboratorio, el uso del microscopio óptico nos permitió
observar y analizar diversas muestras biológicas con gran detalle. A través del
correcto manejo y ajuste del microscopio compuesto, pudimos identificar
estructuras celulares clave, como las paredes celulares, los núcleos y las
vacuolas, en muestras de epidermis de cebolla y saliva teñida con azul de
metileno. La práctica subrayó la importancia de mantener los lentes y las
laminillas limpias para obtener imágenes claras y definidas, y destacó la
necesidad de comprender los fundamentos de la óptica, como el poder de
resolución y la apertura numérica, para maximizar la efectividad del
microscopio. En conclusión, esta experiencia no solo fortaleció nuestras
habilidades técnicas en el manejo del microscopio, sino que también
profundizó nuestra comprensión de la biología celular, demostrando el papel
esencial de este instrumento en la investigación científica y la educación.

5. BIBLIOGRAFIAS
[1] No title. (s/f-b). Coursehero.com. Recuperado el 18 de mayo de 2024, de
https://www.coursehero.com/file/74273648/laboratoriodocx/

[2] Gómez, G. F. (s/f). El microscopio: fundamentos para su uso. Edu.co. Recuperado el 18

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%20microscopio%20fundamentos%20para%20su%20uso.pdf?sequence=1&isAllowed=y

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[5] Sánchez Lera, R. M., & Oliva García, N. R. (2015). Historia del microscopio y su
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[6] Laboratorio 3. (s/f). Biología Básica. Recuperado el 18 de mayo de 2024, de

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cebolla – de la epitelio bucal. Monografias.com.

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observacion-celulas-epidermis-cebolla

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informe-1-microscopia/34786098?origin=home-recent-1

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