22/02/2022

Definición
Catalizador biológico de naturaleza principalmente proteica.
Permiten que los tiempos de las reacciones químicas sean compatibles con la vida.

Un catalizador es una sustancia capaz de

acelerar una reacción química sin
consumirse en el proceso.

Características
- Son proteínas o ARN (ribozimas)
- Presentan alta especificidad por el sustrato (S) y son específicas para la reacción
que catalizan
- Presentan gran capacidad para acelerar reacciones químicas
- Actúan en un rango óptimo de pH y T
- Medicina
o Implicadas en patologías de origen genético
o Utilidad en el diagnóstico clínico
- Otras aplicaciones
o Herramientas de biología molecular
o Blanco de fármacos en tratamiento de diferentes patologías
Pueden ser simples (1) o conjugadas (2):
1) Totalmente proteicas: apoenzimas
2) No totalmente proteicas: holoenzimas

Holoenzima = Apoenzima + Cofactor

Cofactores:
- Iones inorgánicos: se unen temporalmente a las enzimas. Fe, Cu, Zn, etc.
- Coenzimas: moléculas orgánicas pequeñas que interaccionan débilmente durante
la catálisis. Transportadores transitorios de grupos funcionales. La mayoría son
derivadas de vitaminas, muchas de las cuales deben ser incorporadas con la dieta.
NAD, coenzima A (CoA).
- Grupos prostéticos: ion metálico o coenzima que esta unido a la enzima de
manera covalente. FAD, Retinol.

También podemos clasificar a los cofactores como:

- Catalíticos: no son consumidos en la reacción.
- No catalíticos / Cosustrato: si son transformados durante la reacción.

Clasificación
Según el tipo de reacción catalizada, se las clasifica en 6 grupos:
1) Oxidorreductasas: catalizan reacciones redox / de oxido-reducción. Se produce
transferencia de electrones (átomos de H o de iones hidruro).
2) Transferasas: catalizan reacciones con transferencia de grupos funcionales. (ej:
para el fosfato → fosfotransferasas).
3) Hidrolasas: catalizan reacciones de hidrolisis (ruptura de un enlace por la
incorporación de una molécula de H2O).
4) Liasas: catalizan la adición de grupos a un doble enlace o la formación de un doble
enlace por la remoción de un grupo.
5) Isomerasas: catalizan la transferencia de un grupo de una posición a otra dentro
de la misma molécula para convertir un isómero de posición en otro.
6) Ligasas: catalizan reacciones donde hay formación de enlaces C-C, C-S, C-O, y
C-N por reacciones de condensación acopladas a la hidrolisis de ATP o de
cofactores similares (como el GTP).
 23/02/2022
Código / N° EC: conjunto de 4 números que identifican a una enzima.
El primer N° corresponde al grupo (ej, 3: hidrolasas). El segundo y tercer N° son
subgrupos y sub-subgrupos, y el cuarto corresponde a la enzima individual.
Por ejemplo: identifica a la invertasa o sacarasa.

Funcionamiento
Las enzimas son catalizadores altamente específicos que aumentan las velocidades de
reacción por un factor de 105 a 1017. Esto lo logran por tener un sitio activo que es
complementario al estado de transición.
Las reacciones catalizadas por enzimas se caracterizan por la formación de un complejo
enzima-sustrato (ES) que se convierte en complejo enzima-producto (EP) y luego se
disocia para generar el producto libre y regenerar la enzima en su estado original.

E + S → ES → EP → E + P

La catálisis se realiza disminuyendo la energía de activación.

El equilibrio de la reacción no se modifica por la enzima.

A la diferencia de energía libre entre productos

y reactivos/sustratos la denominamos ∆G.
Cuando ∆G < 0 significa que en la reacción se
libera energía libre (reacción exergónica, puede
ocurrir espontáneamente). Pero esto no
significa que pueda ocurrir a una velocidad
apreciable. El ∆G se relaciona con el equilibrio,
pero no nos dice nada sobre la velocidad de la
reacción.
La velocidad de la reacción depende de la energía de activación (Ea) que es la diferencia
de energía libre entre el estado de transición y el estado inicial. Ea es la barrera
energética que debe superarse para que los reactivos se conviertan en productos. A
mayor Ea más lenta es la reacción.
 En presencia de la enzima se crea un
nuevo camino para la canalización, que
pasa por un estado de transición diferente
que es mas estable y con menor energía
libre que en ausencia de la enzima.
La enzima disminuye la Ea de la reaccion,
la barrera energetica a superar es menor,
y por lo tanto la velocidad de la reaccion
aumenta.
La enzima no modifica la energia libre de
los estados inicial y final. En consecuencia
no se modifica el ∆G de la reaccion y
tampoco el equilibrio de la misma.

De donde proviene la energía necesaria para disminuir la energía de activación (∆G≠)

La mayor parte del poder catalítico de las enzimas procede de la energía libre liberada
al formarse múltiples enlaces débiles entre el S y la E. Esta energía de fijación contribuye
tanto a la especificidad como a la catálisis.

Los sitios activos son complementarios al estado de transición, no a los S. El sitio activo
esta estructurado para que estas interacciones débiles ocurran preferentemente en el
estado de transición.
 02/03/2022
Sitio activo
La necesidad de múltiples interacciones débiles para
impulsar la catálisis es una de las razones de que las
enzimas sean tan grandes.

Antes se pensaba en un modelo de llave-cerradura en el que

el sitio activo era complementario al estado de transición del
sustrato.

Hoy es más aceptado el modelo de ajuste inducido en el que

la complementariedad entre el sitio activo y el sustrato no
es evidente al ver a la enzima aislada, pero aparece luego de
la unión del sustrato debido a cambios conformacionales
inducidos por esa unión.

Cinética enzimática
Uno de los estudios clásicos de cinética enzimática
es realizar curvas de la velocidad inicial de la
reacción en función de la concentración de sustrato.
Esto nos da generalmente dos tipos de curvas:
- Las enzimas que siguen la cinética de Michaelis-
Menten muestran una curva hiperbólica.
- Las enzimas alostéricas que presentan
cooperatividad positiva muestran curvas sigmoideas.

Velocidad de una reacción (--------)

Cambio en la concentración de producto en la unidad de tiempo. También puede definirse
como el cambio en la concentración de sustrato en la unidad de tiempo (con signo
invertido porque disminuye con el tiempo).

V = ∆[P] / ∆tiempo V = -∆[S] / ∆tiempo

Necesitamos un método para medir como va apareciendo producto o como va
desapareciendo sustrato con el tiempo. Se suele usar el seguimiento en el tiempo de
alguna propiedad que cambie entre el sustrato y el producto (como la densidad óptica
o capacidad de absorber luz; y en caso de que la reacción involucre gases podemos
utilizar la presión). También se puede usar un método separativo como la cromatografía,
que permita la separación y cuantificación del sustrato o del producto. Otro método es
una reacción acoplada en la que el producto de la primer reacción sirva como sustrato
en una segunda reacción acoplada que permita su fácil cuantificación.
Cuando tenemos el método adecuado, primero
construimos una curva de concentración de
producto o de sustrato en función del tiempo.
La velocidad de la reacción es relativamente alta a
tiempos cortos, pero va disminuyendo a través del
tiempo hasta hacerse 0 cuando se alcanza el
equilibrio. Esto es porque la concentración del
sustrato va disminuyendo con el tiempo y por
efecto de la reacción inversa cuya velocidad se va
incrementando a medida que se forma producto.

Velocidad inicial de la reacción (V0) (- - - - -)

Punto donde conocemos exactamente la concentración de sustrato que es la que
agregamos inicialmente al medio de reacción, y también sabemos que la concentración
del producto a este tiempo 0 va a ser igual a 0 y por lo tanto no va a haber aquí
influencia de la reacción inversa.

Para distintas concentraciones de sustrato

determinamos V0 calculando la tangente de la
pendiente de la curva a tiempo 0.
Una vez determinada la V0 a diferentes concentraciones de sustrato, construimos una
curva de V0 en función de la concentración del sustrato.
Podremos obtener una hipérbola si la enzima sigue la
cinética de Michaelis Menten, o una sigmoidea si existe
cooperatividad positiva.
En cualquiera de los casos, siempre se observará una
saturación con el sustrato.
característica distintiva de la catálisis enzimática.

Vmax sería la velocidad que podría alcanzarse con una concentración de enzimas igual a infinito.
Km es la relación entre las constantes de velocidad de las reacciones que hacen desaparecer al
complejo ES (k2 y k -1 ), dividido k1 que es la constante de velocidad de la reacción de formación del
complejo ES.

Cuando la concentración del

sustrato es muy grande, el
valor de Km + [S] puede
despreciarse, por lo que la V0
tiende a ser igual a Vmax.
Cuando la concentración del
sustrato es igual a Km la V0
será igual a 1/2Vmax.
A concentraciones muy altas de sustrato, toda la enzima estará formando el complejo
ES (estará saturada por el sustrato) alcanzándose así la Vmax.
Cuando la concentración de sustrato es igual a Km solo 1/2 de la concentración de
enzima estará formando el complejo ES (tendremos un 50% de saturación).
El Km es una constante inversamente relacionada con la afinidad de la enzima por el
sustrato. A menor Km habrá mayor afinidad y la enzima saturará con menores
concentraciones de sustrato.
La Vmax no es constante, sino que varía proporcionalmente con la cantidad de enzima,
y estará además relacionada con el numero de recambio de la enzima (k2).
De estas curvas hiperbólicas no es simple calcular gráficamente la Vmax. Tendremos una
incerteza debido a que la Vmax solo se alcanza con concentración de sustrato infinito
que nunca podremos alcanzar. Si tenemos incerteza sobre Vmax también la tendremos
sobre el Km (1/2 Vmax) ya que para saber su valor necesitamos saber el de la Vmax.

Representación de Lineweaver-Burk (doble recíproca)

Si no disponemos de una computadora y de un programa de cálculo de regresión no
lineal, podemos acudir al método grafico tradicional de la doble recíproca.
Es la transformación algebraica de la ecuación de MM en una forma que nos permite
calcular los valores de Vmax y Km por extrapolación de una recta.

Si tomamos la inversa de la ecuación

de MM vamos a tener la ecuación de
una recta.
Si graficamos esta ecuación inversa
nos dará una recta que tendrá una
pendiente igual a km/Vmax y la
ordenada de origen será igual a la
inversa de la Vmax.
Si extrapolamos la recta hasta el valor de la reciproca de la V0 tendremos el valor de
-1/km.
Factores que alteran la actividad enzimática
- Concentración de sustrato

- Concentración de los cofactores

- Temperatura: normalmente tiene forma de campana.

Las reacciones químicas no enzimáticas son favorecidas por
un aumento de la temperatura (una mayor temperatura
facilitará pasar la barrera energética).
En el caso de reacciones enzimáticas el aumento de actividad
ocurre a temperaturas relativamente bajas, pero a
temperaturas mas altas ocurre que las proteínas y los ARN (por lo tanto,
todas las enzimas) van a ser desnaturalizadas, produciéndose una brusca
disminución en la actividad.
Por lo tanto, las enzimas mostraran una temperatura optima para su
actividad. Cuanto más estable sea la enzima, mayor será la temperatura
optima.
 07/03/2022
- pH: la mayoría de las enzimas presenta un pH
óptimo. Esto se debe a que los cambios de pH
pueden afectar la ionización del mismo sustrato o
de residuos de Aa en distintas partes de la proteína
que pueden generar cambios conformacionales,
modificar la unión de sustrato o modificar el
proceso de catálisis en el sitio activo.
También algunas enzimas pueden ser desnaturalizadas cuando son sometidas
a pH extremos.
La mayoría de las enzimas
intracelulares tiene un pH cercano
a 7 - 7,5 pero la pepsina (que
actúa en el estómago) tiene un pH
óptimo de 2.
La tripsina (enzima intestinal)
tiene un pH óptimo de aprox 8.

Mecanismos de inhibición de la actividad enzimática

Hay pocos inhibidores naturales.

La gran mayoría de los inhibidores son fármacos o
medicamentos usados con fines terapéuticos, que a
pesar de no ser naturales tienen una gran importancia
en cuanto su aplicación en medicina.

Hay dos grandes grupos:

- Reversibles: se unen a la enzima de manera reversible por interacciones debiles.
o Competitivo
o Acompetitivo
o Mixto
o No competitivo
 - Irreversibles: se unen a la enzima de manera irreversible por uniones
covalentes.
o Inhibidores suicidas

Inhibidores competitivos:
- Se unen al sitio activo de la enzima, compitiendo por
el mismo con el sustrato.
- No modifican la Vmax
- Disminuyen la afinidad aparente de la enzima por el
sustrato (kmI > km)

Inhibición reversible competitiva

Un inhibidor competitivo solo puede unirse a la enzima
libre, pero no puede hacerlo al complejo ES donde el sitio
ya esta ocupado por el S.

Si hacemos un gráfico de doble reciproca en presencia

y ausencia de una determinada concentración de
inhibidor, observaremos un mayor km en presencia que
en ausencia. Vemos que disminuye el valor absoluto de
-1/km.
La competencia entre sustrato e inhibidor por el
mismo sitio genera una aparente disminución en la
afinidad por el sustrato.
El km en presencia del inhibidor se verá incrementado
en una magnitud relacionada con la concentración del inhibidor y la constante de
disociación del complejo enzima-inhibidor EI (kI que será una medida de la afinidad
enzima-inhibidor).
Al existir competencia por el sitio, si se incrementa suficientemente [S] se podrá
desplazar a todo el inhibidor del sitio activo y por lo tanto se alcanzará la Vmax.
Inhibidores acompetitivos, mixtos y no competitivos:
- Se unen a un lugar distinto del sitio activo, pero cambian la conformación de
la enzima y del sitio activo interfiriendo con la reacción.
- Todos disminuyen la Vmax y se diferencian entre si por su efecto sobre la
afinidad aparente (kmI)
- Si kmI > km es un inhibidor acompetitivo
- Si kmI < km es un inhibidor mixto
- Si kmI = km es un inhibidor no competitivo

KmI: km en presencia del inhibidor

Inhibición reversible acompetitiva

El inhibidor se une al complejo ES, pero no se puede unir
a la enzima libre.
Se necesita la unión previa del sustrato para que el
inhibidor pueda unirse a la enzima.
La presencia del inhibidor en el complejo ternario ESI impide
que el sustrato pueda convertirse en producto.

En el gráfico de doble recíproca vemos que esta

situación genera líneas paralelas con una progresiva
disminución en los valores de km y Vm a medida que
aumentamos la concentración del inhibidor.

Inhibición reversible mixta

El inhibidor se une a la enzima libre y al complejo
ES con diferente afinidad.
KI es diferente a kII.
De alguna manera la presencia de sustrato en el
complejo afecta a la unión del inhibidor.
 En el gráfico de doble recíproca podemos ver que al
irse incrementando la concentración del inhibidor mixto
observamos una progresiva disminución de los valores
de Vmax y un progresivo incremento en los valores de
km.

Inhibición reversible no competitiva

El inhibidor se une a la enzima libre y al complejo
ES con igual afinidad.
KI es igual a kII.

Podemos ver que la presencia del inhibidor no

competitivo produce una disminución en la Vmax, pero
ningún cambio en el km.
Ni la presencia del inhibidor afecta la afinidad de la
enzima por el sustrato, ni la presencia de sustrato
afecta la afinidad de la enzima por el inhibidor.
Esta independencia entre los dos sitios de unión de
sustrato e inhibidor indicaría que estos sitios están
alejados entre sí, que no hay interferencia en los mismos.
De alguna manera sin embargo la unión del inhibidor tiene que
afectar al sitio activo para dificultar la formación de producto
y hacer que disminuya Vmax.
Inhibidores irreversibles
Inhibición suicida (sustratos suicidas)
Son diseñados para inactivar selectivamente una determinada enzima.
Se trata de análogos de sustrato que son convertidos por la enzima en una especie
reactiva que termina uniéndose al sitio activo de manera covalente inactivando así a la
enzima.
Un ejemplo es el ácido
clavulánico, que es un
sustrato suicida para la β
-lactamasa (enzima que
expresa aquellas bacterias
resistentes a la penicilina y
derivados de la penicilina,
como por ejemplo la amoxicilina).
La β-lactamasa rompe el anillo β-
lactamico de la penicilina dando un
compuesto inactivo (el ácido penicilinoico).

Enzimas regulables
La actividad de una enzima puede estar regulada de varias formas:
- Podemos regular su síntesis (su concentración): regulación a nivel de la
transcripción de sus genes, y regulando también su degradación.
- Podemos regular una enzima preexistente (ya se encuentra en el sitio de
acción)
o Por regulación de un ligando (regulación alostérica)
o Por regulación por modificación covalente (como la fosforilación)
o Por compartimentalización: se saca a la enzima de su sitio de acción
o Por unión a alguna proteína regulatoria
 Síntesis del producto D a
partir del sustrato A.
Pasa por varios puntos
intermedios catalizados por
distintas enzimas, y algunos de ellos pasos son irreversibles mientras otros son
reversibles.
Generalmente la enzima que va a estar regulada en una vía metabólica va a ser la
primera de la vía. Así la célula se da cuenta si el producto que quiere fabricar es
necesario o no, para no terminar gastando energía sin propósito.
También se puede encontrar en encrucijadas metabólicas donde un intermediario de las
vías puede seguir varios pasos dependiendo la condición fisiológica y energética de la
célula.
Esas enzimas reguladas generalmente regulan reacciones irreversibles.

Enzimas alostéricas
Contienen dos tipos de sitios:
- Sitios activos: unión del S (sitio catalítico)
- Sitio alostérico: unión del modulador + o – (sitio regulatorio)
 o Modulador positivo: sustancia que al unirse al
sitio le produce un cambio conformacional a la
enzima y aumenta su actividad enzimática.
o Modulador negativo: la unión de esta molécula le
produce un cambio conformacional a la proteína,
disminuyendo su afinidad por el sustrato y por
lo tanto disminuyendo su actividad catalítica.

La unión del modulador modifica la forma de la enzima.

Cinética sigmoidea: cooperatividad
Estructura cuaternaria
Hay dos tipos de enzimas alostéricas:
- Homotrópicas: el modulador alostérico es igual que el sustrato.
- Heterotrópicas: el modulador alostérico es una molécula distinta al sustrato.

Curvas de cinética
Graficamos la V sobre la [S].
Vemos que las enzimas regulatorias presentan una curva
sigmoidea distinta a las michaelianas (que eran una
hipérbola).
La cinética está caracterizada por:

El km acá es k aparente o k0,5 : representa la [S] a la cual la V de la enzima es ½Vmax

Vm es Vmax

Podemos ver que las enzimas alostéricas existen en dos conformaciones:

- Conformación R relajada de mayor actividad: curva
hiperbólica similar a las Michaelianas.
- Conformación T tensa de menor actividad: curva que
corre hacia la derecha.
La unión de un modulador alostérico va a inducir la
conformación ya sea R o T. Si el modulador es positivo
va a favorecer la conformación R; si es negativo va a
favorecer la conformación T.
Interacción homotrópica

- Modelo concertado (Monod) → “todo o nada”

Enzima en su estado tenso.

Se produce un cambio conformacional a todas sus subunidades a la vez por el modulador
alostérico que favorece la conformación R, aumentando su afinidad por el sustrato.

- Modelo secuencial (Koshland)

La unión del modulador alostérico produce un cambio conformacional en una de las

subunidades, favoreciendo la unión por el sustrato. Este cambio produce el cambio
conformacional de otro de manera secuencial, que aumenta la afinidad por el sustrato,
y así sucesivamente hasta que se evidencia el efecto cooperativo.

El modulador es igual al sustrato.

La V en presencia de modulador positivo
varía hacia la izquierda variando su k0,5
haciendo más eficiente la actividad.
En presencia de modulador negativo se
corre hacia la derecha aumentando así
el k0,5.
Interacción heterotrópica

En cuanto a los modeladores alostéricos heterotrópicos podemos tener dos situaciones:

El modulador positivo disminuye al k0,5

haciendo más afín la proteína por el
sustrato, pero manteniendo igual su Vmax.
En presencia de modulador negativo
aumenta k0,5 y la Vmax también.

El modulador positivo varia tanto el k0,5

como la Vmax (aumentando).
Y el negativo también, pero disminuyendo
la Vmax.

Ejemplo de enzima alostérica: PKA (proteína quinasa A)

Intermediario en las vías de transducción de señales de
algunas hormonas como el glucagón y la adrenalina.
Es una proteína quinasa (fosforila sustratos) A (dependiente
de AMPc.
Constituida por 4 subunidades: 2 catalíticas y 2 regulatorias.
Cuando aumenta el AMPc en la célula, lleva a que se una a los sitios regulatorios de la
PKA, separándolos de los sitios activos. Esta separación lleva a que la PKA se active, y
así pueda fosforilar una serie de proteínas necesarias para activar la vía de transducción
de señales.

Modificación covalente
Unión de forma covalente de distintos compuestos.
Puede activar o inactivar a la enzima.
Es una modificación reversible.
Están dadas por otras enzimas.
Por ejemplo:
Fosforilación
La más ampliamente distribuida.
Hay proteínas quinasas que fosforilan enzimas, siendo el ATP
la molécula que da el fosfato.
Las enzimas fosforiladas pueden ser activas o inactivas.
Los residuos que se fosforilan son las tirosinas, las serinas, las treoninas y las histidinas.
Las quinasas fosforilan enzimas, las fosfatasas las desfosforilan.

Adenilación
Unión de una adenina a la enzima, siendo el ATP el
dador de la adenina, liberando en este caso
pirofosfato.
Los residuos adenilados son las tirosinas.

Acetilación
En residuos α-amino de las lisinas.
El acetil-CoA es el dador del grupo acetilo.
Miristoilización
Unión de un ácido graso a extremos α-amino
de las lisinas.
El miristoil-CoA es quien da el ácido graso.

Ubiquitinación

En residuos de lisina.
Forma en que se marcan las proteínas para que
sean degradadas por el proteasoma.
Es reversible, pero una enzima que es
ubiquitinizada es inmediatamente degradada por
el proteasoma, y el proceso de proteólisis no es
reversible.
ADP-Ribosilación

Adición de uno o más restos ADP-ribosa a una

proteína, siendo el NAD quien lo aporta.
Es reversible.

Metilación
En residuos de glutamina.
Por la s-adenosil-metionina.
Glucógeno fosforilasa
Enzima encargada de la degradación de glucógeno
a sus subunidades constituyentes que es la glucosa.
Tenemos glucógeno hepático y muscular.
Existe en conformación:
- Fosforilasa b (menos activa)
- Fosforilasa a (más activa)

Cuando es fosforilada por una fosforilasa quinasa

por 2ATP la proteína fosforilasa toma su
conformación a convirtiéndose en más activa. Esta
cascada está inducida por hormonas.

Activación proteolítica
Tipo de regulación irreversible, porque un zimógeno o una proenzima necesita ser
proteolizada (necesita escindir alguna porción de la cadena polipeptídica) para ser activa.
Por ejemplo:
Enzimas digestivas
Las enzimas proteolíticas
existen en forma de
zimógenos, siendo ellos: el
tripsinógeno, la proelastasa,
la procarboxipeptidasa, y la
quimiotripsinogeno.
Estos zimógenos se
encuentran en el páncreas, y
son volcados al intestino delgado cuando el bolo acido llega ahí.
En el páncreas están de forma de zimógenos para encontrarse inactivas y activarse
solo en su sitio de acción.
Una vez que llega al intestino delgado, el tripsinógeno se activa por una enteropeptidasa
que lo convierte en tripsina escindiendo una porción de la cadena polipeptídica. Esta
tripsina tiene un efecto catalítico (tiende a auto activarse) y a la vez proteoliza al
quimiotripsinogeno (convirtiéndolo en quimiotripsina), a la procarboxipeptidasa (activando
la carboxipeptidasa), y a la proelastasa (convirtiéndola en elastasa).
Así la tripsina activa a las demás enzimas proteolíticas.

Enzimas de la cascada de la coagulación

Actúan de manera similar a las digestivas.

La trombina se activa por proteólisis, y una vez
activada participa en la formación de los trombos.

Unión a proteínas reguladoras

- Proteínas inhibidoras: al unirse a una enzima inhiben su acción.
o inhibidor de tripsina pancreática: segunda regulación de la regulación irreversible
de los zimógenos, para asegurarse que la tripsina no se active en el páncreas.
o antitrombina 3.
- Ciclinas: proteínas que se unen a las quinasas del ciclo celular y las activan.

Compartimentalización
Sacar de su lugar de acción a una enzima.
Ejemplo: hexoquinasa IV.
Ubicación hepática.
Cataliza la fosforilación de la glucosa
a glucosa-6P.
Cuando los niveles de glucosa
sanguíneo son elevados, ingresan a
través del transportador de glucosa GLUT2 al interior del hepatocito, y esta glucosa
es inmediatamente fosforilada a glucosa-6P por la hexoquinasa IV.
Tiene un km elevado para la glucosa (baja afinidad por la glucosa), solo la fosforila cuando
esté en concentraciones elevadas.
A esta hexoquinasa IV se le une una proteína reguladora que la recluta hacia el núcleo.
Entonces cuando los niveles de glucosa en el citosol son elevados, la glucosa se une a la
proteína reguladora compitiendo por la fructosa-6P y haciendo que la hexoquinasa que
está recluida en el núcleo se transloque al citosol donde es activa.
Cuando la glucosa-6P se isomeriza a fructosa-6P y esta ultima empieza a acumularse
porque no se está utilizando, se une a la proteína reguladora que favorece la traslocación
de la hexoquinasa IV al núcleo.

DATO: una enzima puede tener varios mecanismos de regulación.