PRÁCTICA 2.

Determinación del potencial hídrico, transpiración y absorción de nutrientes

Introducción
El desarrollo del concepto de potencial hídrico y los métodos de su medida han sido muy útiles
en la cuantificación del estado hídrico de las plantas.
La capacidad de las moléculas de agua para moverse en un sistema particular depende de su
energía libre. La magnitud más empleada para expresar y medir el estado de energía libre del
agua es el potencial hídrico Ψ.
El agua en estado líquido es un fluido, cuyas moléculas se hallan en constante movimiento,
sometidas a fuerzas de atracción y repulsión mutuas. La movilidad de esas moléculas
dependerá de su energía libre, es decir, de la fracción de energía total que puede
transformarse en trabajo. Cuando se considera el agua como componente de distintos
sistemas tales como suelo, planta, célula, atmósfera, etc., la magnitud de uso más difundido
para expresar y medir su estado de energía libre es el llamado potencial hídrico (ψ). El ψ estará
básicamente determinado por la presión y por la actividad del agua.
El potencial hídrico representa un método simple para evaluar el estado fisiológico de la planta
debido a que el crecimiento celular, la fotosíntesis y la productividad están fuertemente
influenciados por sus componentes (Repellin et ál., 1997). La medida de potencial hídrico antes
del amanecer es de las más frecuentes en estudios ecofisiológicos debido a que en este punto
el contenido de agua entre las hojas y el suelo está en equilibrio y la pérdida de agua es
mínima (Sellin, 1999), si el potencial hídrico foliar es bajo o muy negativo aún en la noche, se
puede afirmar que hay estrés hídrico en la planta. Durante el día, es importante la medida del
medio día cuando la radiación fotosintéticamente activa es mayor. En el curso de un día, el
estado hídrico de la planta, aún en una planta bien regada, decrece al medio día a medida que
la tasa transpiratoria aumenta, por el ascenso de la demanda por evaporación. En buenas
condiciones ambientales, la planta recupera su estado hídrico hacia el final del día,
aumentando su potencial hídrico a medida que la temperatura y por tanto la transpiración
disminuyen (Dodd y Davies, 2010).

El potencial hídrico de una célula, es decir su capacidad para absorber agua, depende de los
solutos disueltos (potencial osmótico) y de la resistencia a la distensión que opone la pared
celular, a consecuencia del ensanchamiento de la vacuola producido por la entrada de agua.
Esta resistencia se conoce como presión de turgencia. El agua penetra en las células vegetales
por un proceso especial de difusión llamado ósmosis. En las células vegetales ocurre ósmosis
porque la membrana citoplasmática no deja pasar las numerosas sustancias disueltas en la
vacuola, lo que determina la existencia de una menor energía libre del agua en su interior,
provocando su entrada a la célula. A medida que el agua entra el protoplasma es presionado
contra las paredes celulares, limitando ellas su grado de expansión. Dicha presión, presión de
turgencia es producto, a su vez, de la presión osmótica del contenido celular. Un tejido vegetal
perderá agua si se introduce en una solución con menor potencial hídrico, ganará agua si el
vegetal introducido en la solución presenta menor potencial hídrico y no perderá ni ganará
agua cuando sea introducido en una solución con el mismo potencial hídrico. Dicha ganancia,
pérdida o estabilidad de masa puede ser cuantificada comparando las masas de un tejido
vegetal antes y después de ser introducido en una solución de potencial hídrico conocido.
potencial hídrico = potencial de solutos + potencial de presión.
En una disolución que esté a presión atmosférica, como es el caso de una disolución contenida
en un tubo de ensayo destapado, el potencial de presión = 0 y por tanto, potencial hídrico =
potencial de solutos.
¿Cómo se calcula el potencial de solutos?
Ψs = -CiRT
donde:
C = Concentración molal (nº de moles /Kg de agua)
i = Constante, que para solutos no ionizables es igual a 1
R = Constante de los gases. Su valor es 0,00831 Kg. MPa / mol ºK
T = Tª en grados Kelvin. En clase es de 294 º K

Existen varias formas de realizar la determinación del potencial hídrico, puede obtenerse en
forma gravimétrica, volumétrica y densimétrica.
El Método de Chardakov es la forma densimétrica que se basa en el cambio de densidad de
una solución a la cual se expone el tejido vegetal en estudio. El tejido vegetal no pierde ni gana
agua cuando se introduce en una disolución que tiene su mismo potencial hídrico. Si un tejido
se introduce en una disolución de menor potencial hídrico, las células perderán agua y
consecuentemente, la disolución se diluirá y se hará menos densa. Si, por el contrario, el tejido
se introduce en una disolución de mayor potencial hídrico (menos negativo), sus células
ganarán agua y consecuentemente, la disolución se hará más concentrada y por tanto más
densa.
Consiste en introducir material vegetal (siempre la misma cantidad) en una serie de
disoluciones de sacarosa con distinto potencial hídrico. Pasado un tiempo veremos en cuál de
esas disoluciones, el tejido vegetal no ha perdido ni ganado agua, o lo que es lo mismo, en cuál
de esas disoluciones no ha habido cambio de densidad.

METODOLOGÍA
a. Determinación del potencial hídrico con el método gravimétrico
Describa los materiales y el procedimiento del método según indica el video.
b. Determinación del potencial hídrico por el método de Chardakov
Materiales
 Tubérculos de patata
 5 tubos de ensayo gruesos y 6 normales
 Gradilla
 Pipetas de 5 y 25 ml
 Pipeta Pasteur
 Sacabocados
 Pinzas
 Azul de Metileno
 Sacarosa
Procedimiento:
Se preparan dos series de 6 tubos de ensayo con diferentes concentraciones de sacarosa, de
modo que tengan distinto potencial hídrico (0.05, 0,15, 0,25, 0,50 , 0,75, 0,85 M [molal]).
A cada uno de los tubos gruesos se les añaden 10 ml de solución de sacarosa sin teñir.
A cada uno de los 6 tubos de ensayo normales se les adicionan 3 ml de las diferentes
soluciones, en este caso teñidas con azul de metileno.
Con ayuda de un sacabocados, se obtienen 5 cilindros de patata recién pelada y con unas
dimensiones homogéneas para todo el experimento.
Después de lavar y secar con cuidado, cada uno de los cilindros se trocea en 10 secciones que
se distribuyen en la serie de tubos que no tienen azul de metileno.
Transcurridos entre 1.5 y 2 horas, se retiran los cilindros de sus respectivos tubos y se procede
de la siguiente manera:
Añadir 1 a 2 gotas de cada una de las disoluciones que contienen azul de metileno en la
correspondiente a la serie con el material vegetal y observar su movimiento ascendente o
descendente.
Aquella solución en la que la gota ni suba ni baje tendrá un potencial osmótico (y un potencial
hídrico) equivalente al potencial hídrico del tejido.

b. Determinación de la transpiración
Mediante la medición de las pérdidas de agua por la transpiración en plantas superiores
Objetivo
Medir la tasa de transpiración en diferentes especies de plantas
Influencia de factores externos en la transpiración
Materiales:
 reglas
 papel
 rotulador
 estuche de disección
 gradillas
 calefactor
 ventilador eléctrica
 lámparas
 lanolina
 armario
 balanza
 hojas de dos especies vegetales
Procedimiento:
Realice la descripción del método visualizado en el video.

c. Absorción de nutrientes por la raíz

Explique la forma de absorción de los nutrientes efectuados por la raíz.

IV. Resultados y conclusiones

V. Cuestionario
1. ¿Cuál es la finalidad de realizar la determinación del potencial hídrico en forma
gravimétrica?
2. ¿En qué consiste el método densimétrico?
3. ¿Cómo se relaciona el proceso del crecimiento y desarrollo de la planta con el potencial
hídrico?
4. ¿Cuáles son los factores que afecta al potencial hídrico?
5. ¿Cómo se puede realizar el experimento para demostrar la transpiración de las plantas?
6. ¿Cuánto es la pérdida de agua de la planta debido a la transpiración?
7. ¿Cómo afecta los factores externos de la planta en la transpiración?
8. ¿Influye las características de la hoja en la tasa de transpiración?
9. ¿Qué factores influyen en el transporte de fertilizantes del suelo a la planta?
10. ¿Cuál es la razón de la acidificación del suelo?