ESCUELA POLITÉCNICA NACIONAL

FACULTAD DE INGENIERIA CIVIL Y AMBIENTAL

CARRERA DE INGENIERÍA AMBIENTAL

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
PRÁCTICA Nº 1
MICROSCOPÍA

Realizado por:
Pamela Bonilla Vallejo
Franklin Solano Yépez
Cristian Tomarema Miranda

Docente:
Biol. Mónica Guerra

Fecha de realización: Lunes 6 de mayo del 2024

Fecha de entrega: Martes 7 de mayo del 2024
1. Introducción

La microscopia es una técnica que permite la observación de la microestructura,

caracterización y estudio detallado de muestras biológicas y orgánicas, que son

invisibles a simple vista, mediante la interacción con una fuente de luz (Universidad de

Illes Balears, s.f.).

El microscopio óptico, también conocido como microscopio de luz, es uno de

los microscopios más comúnmente utilizados para investigaciones principalmente en

campos como la biología, medicina, química física y geología (Eafit, 2015). Su

funcionamiento se basa en la refracción y reflexión de la luz a través de un conjunto de

lentes, logrando aumentos que pueden variar desde 4x hasta 1000 x. Este microscopio

magnifica la imagen producida por su objetivo para observar estructuras celulares,

bacterias, protozoos y otros microorganismos, proporcionando información importante

para su estudio y clasificación (Mscholz, 2021).

Por otro lado, el estereoscopio o microscopio binocular, se diferencia del

microscopio óptico por ser una técnica de observación tridimensional que proporciona

una visión en relieve y profundidad de las muestras, lo que resulta especialmente útil

para el estudio de muestras grandes o estructuras complejas (Estereoscopía, s. f.).

Ambas técnicas son esenciales para el análisis de microorganismos, las

interacciones entre los estos y su entorno, su morfología y estructura. En este informe,

se introducirá el funcionamiento básico del microscopio óptico y del estereoscopio, se

analizarán sus aplicaciones en el estudio de diversos microorganismos y estructuras

biológicas.
 Figura 1. Esquema del microscopio óptico y sus partes.

Figura 2. Esquema del estereoscopio y sus partes básicas.

2. Materiales y métodos

Materiales

 Muestras de tejidos celulares

Equipo

 Microscopio óptico

 Estereoscopio

Métodos

Primero, se reconocieron las partes del equipo se identificaron una a una como

se mostró en la guía de práctica, luego se tuvo que hacer uso del instrumento con

teniendo en consideración las normas de uso entre las cuales se pudo destacar el

posicionamiento del objetivo 4x como primer lente para próximas observaciones.

Una vez considerado lo anterior como premisa se procedió a colocar la muestra

de tejido sobre la platina para obtener una visualización clara con el primer objetivo

para luego consecuentemente ir avanzando con el resto hasta antes del objetivo 100x ya

que para su uso de debe usar un lubricante para obtener una visualización correcta en el

instrumento.

3. Resultados y discusión

3.1. Ensayo 1

Tras observar la división celular de una muestra de raíz de cebolla fijada a

diferentes niveles de aumento en el microscopio óptico, se generaron las siguientes

imágenes:
 Figura 3. Muestra de raíz de cebolla observada en 4x.

En la observación inicial de la muestra de la raíz de cebolla (Figura 1.) bajo un

aumento de 4x se detectaron rastros rojos escasos y dispersos por toda la muestra.

Figura 4. Muestra de raíz de cebolla observada en 10x.

Figura 5. Muestra de raíz de cebolla observada en 40x.

Bajo un aumento de 10x se apreció mayor detalle en la forma de las células. No

obstante, al observar la muestra bajo un aumento de 40x se observó gran cantidad de

puntos rojos conglomerados que simulaban la forma de la pared celular y como se

encontraban agrupadas las células.

 Figura 6. Muestras de raíz de cebolla observadas con un aumento de 100x. A. Metafase B. Telofase

Por último, bajo el aumento de 100x se identificaron algunas fases de la división

celular que incluyen la transición entre metafase y anafase (A), que posteriormente pasa

a telofase (B).

3.2. Ensayo 2

Tras observar una muestra de estriado muscular de Grenouille fijada a diferentes

niveles de aumento en el microscopio óptico, se generaron las siguientes imágenes:

Figura 7. Muestra de estriado muscular (Grenouille) observada en 4x.

 Figura 8. Muestra de estriado muscular (Grenouille) observada en 10x.

Figura 9. Muestra de estriado muscular (Grenouille) observada en 40x.

Figura 10. Muestra de estriado muscular (Grenouille) observada en 100x.

En este ensayo la variación de los aumentos no genera mayor detalle en la

visualización de tejido muscular; dicho de otra forma, solo magnifica la imagen de la

muestra en varios aumentos.

3.3. Ensayo 3
 Tras observar artemias en una solución de agua salada en el

estereoscopio, se generó la siguiente imagen:

Figura 11. Artemias observadas con un estereoscopio.

Previo al ensayo, se preparó la muestra y, luego con un estereoscopio se

observaron pequeños organismos vivos (Figura 11.) llamados “artemias”, un género de

crustáceo branquiópodo que se movía en el medio. Sin embrago, debido a una

limitación del objetivo no se pudo magnificar a detalle su visualización.

4. Cuestionario

4.1. ¿Cuál es la función de cada parte del microscopio?

 Ocular: En esta parte del microscopio se observa ña muestra.

 Tubo: Es la parte que conecta el ocular al objetivo, también dirige la luz hacia el

ocular.

 Revólver: Aquí se sostienen los objetivos, básicamente es un disco giratorio en

el que se puede cambiar entre diferentes aumentos.

 Objetivos: Son 4 lentes que están cerca de las muestras, tienen varios objetivos

como 4x, 10x, 40x y 100x. Estos lentes permiten aumentar la imagen de la

muestra.
  Platina: En este objeto se transporta la muestra. Suele contener clips que

permiten mantener la muestra.

 Diafragma: Se encuentra debajo de la platina, es una abertura que controla la

cantidad de luz que pasa a través de la muestra.

 Condensador: Al igual que el diafragma este se encuentra debajo de la platina y

se usa para ajustar la intensidad de la luz.

 Enfoque grueso y fino: Sirven para enfocar la muestra, el enfoque grueso realiza

movimientos rápidos de arriba hacia abajo. En cambio, el enfoque fino realiza

los mismos movimientos, pero a una velocidad menor.

 Base: Es el soporte del microscopio y se encuentra en la parte inferior.

4.2. ¿Cuál es el objetivo de tener orden, cuidado y limpieza del microscopio?

Al cumplir estos objetivos se va a garantizar un funcionamiento óptimo y una

gran precisión al analizar las muestras. La limpieza en los lentes y otras partes ópticas

del microscopio permitirá obtener imágenes sin distorsiones. Con el mantenimiento

constante se va a prologar su vida útil.

4.3. Explica cuál es la utilidad de tener un correcto ajuste en el microscopio.

Si se realiza un ajuste correcto al equipo se podrán observar mejor las muestras.

Cada componente del microscopio debe ser ajustada con precisión, esto permitirá

obtener imágenes con una resolución alta. En microorganismos pequeños esto es

esencial para observar estructuras y patrones.

4.4. Discute a que se puede deber que se obtenga poca resolución y mal

contraste de la imagen.

Existen varios factores que pueden afectar, entre ellos están un equipo mal

calibrado o las partes ópticas podrían estar manchadas o sucias. También pueden afectar

la inadecuada iluminación o una mala alineación en el condensador. Las muestras

podrían estar mal preparadas o deterioradas contribuyendo a la falta de detalles en la

imagen.

4.5. Explica cómo se obtiene el aumento al que se están haciendo

las observaciones.

El ocular por donde se observa la muestra tiene un aumento de 10x y cada lente

que cercana a la muestra tiene varios aumentos, estás son 4x, 10x, 40x y 100x, en

algunos casos pueden tener otras magnificaciones, pero estas son las más comunes en

los microscopios. Entonces un ejemplo sería si se está utilizando el aumento de 40x

para analizar la muestra y con el ocular en 10x, el aumento total se obtendría

multiplicando ambos valores, entonces para este ejemplo el aumento total sería de

400x.

4.6. Discute por que dos personas diferentes pueden no ver con la misma nitidez

la misma imagen.

Esto se debe a múltiples factores, entre ellas están la percepción visual

individual y la configuración del equipo. La agudeza visual y la corrección óptica del

equipo pueden influir, además, el enfoque y la iluminación puede variar en los

observadores. Los ángulos de observación también pueden tener un impacto en la

percepción.

4.7. Investiga sobre la historia y descubrimiento del microscopio.

En el año 3000 A.C ya se creó el vidrio, en Mesopotamia usaban lentes de cristal

de roca pulida y en Egipto se usaban cuentas de cristal. En el año 1200 A.C se usaba el

término lentes debido a su parecido a las “lentejas”, incluso Leonardo da Vinci

planteaba los beneficios del uso de cristales para observar objetos pequeños.

Hans Jansen y su hijo Zacharias Jansen fueron dos holandeses que fabricaron los

antejos entre los años 1590 y 1608, estos lentes eran convexos, aumentaban los objetos

hasta 10 veces (10x). Años después, Galileo Galilei fabricó en 1609 su primer
 microscopio compuesto, combinando un lente cóncavo con uno convexo, logrando

aumentos de 30x.

En 1625, Giovanni Faber fue el primero que usó el término microscopio,

después entre 1663 y 1665, Robert Hooke perfeccionó el microscopio y se pudo

observar hasta 57 elementos. En 1676, el holandés Anton van Leeuwenhoek creó un

microscopio simple con un solo lente, este permitió observar hasta 270x. En 1730 se

introdujo la primera cromática por Chester Moore, mientras que la aberración esférica

fue corregida gracias a un diseño de Jackson Lister. En 1830, se crearon los primeros

microscopios con lente acromáticos (Valles, 2020).

4.8. Investiga a que se puede deber que los ojos del observador se cansan con

largos ratos de observación al microscopio.

Se produce cansancio ocular debido a que los músculos oculares se fatigan, ya

que para observar las muestras se debe mantener un esfuerzo continuo para sostener un

enfoque y posición adecuados. Una postura incorrecta también podría contribuir al

cansancio ocular, y la iluminación inadecuada podría tensar los ojos.

5. Bibliografía

Eafit, U. (2015). Microscopios, lentes para conocer lo que no vemos - Universidad de los niños
- Universidad de los niños / Diario de viaje agosto - septiembre 2015 - Universidad EAFIT.
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Mscholz. (2021, 2 junio). ¿Qué es un Microscopio Óptico? Cientec.
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Valles, L. E. T. (2020). Historia breve del microscopio. En Prospectiva, 1(1), 103-112.