Inmunohematología
Sistemas ABO, Rh y
compatibilidad sanguínea
Dr…
Introducción
La transfusión segura de eritrocitos es posible en la actualidad ya que los concentrados
eritrocitarios (CE) provenientes de donantes se pueden seleccionar por su compatibilidad
con el tipo de sangre del receptor.
La superficie de cada glóbulo rojo (RBC) está recubierta de antígenos que están
integralmente unidos a proteínas o lípidos de la membrana.
La relevancia clínica de estos antígenos para la transfusión de componentes sanguíneos y el
trasplante de tejidos/órganos radica en la capacidad de estas moléculas de superficie para
incitar una respuesta inmune, causando potencialmente una reacción a la transfusión o
rechazo de órganos/tejidos.
Terminología –ISBT-
Sistema de grupo sanguíneo: colección de 1 o más antígenos bajo el control de un solo gen o genes homólogos vinculados,
actualmente son 43.
Los principales de importancia clinica: ABO, Rh, Duffy, Glob, I, Kell, Kidd, Lutheran, MNSs
Antígeno de grupo sanguíneo: azúcar o proteína presente en la superficie de los glóbulos rojos que se define serológicamente
mediante antisueros, actualmente hay 343.
Fenotipo de glóbulos rojos: combinación de antígenos en la superficie de los glóbulos rojos, el fenotipado se realiza por el
laboratorio mediante pruebas serológicas.
Genotipo de glóbulos rojos: las secuencias genéticas en los loci de los antígenos de los grupos sanguíneos, se determinan los
antígenos presentes mediante el análisis de ADN
Fenotipo Nulo: Ausencia de antígenos para un sistema
[Link] Society of Blood Transfusion. Red Cell Immunogenetics and Blood Group T
erminology. [Link] (Accessed on Janu
ary 26, 2023).
Importancia de los grupos sanguíneos
• Pruebas pre transfusionales / trasplante de órganos/tejidos
• Evaluación de la reacción a la transfusión
• Determinación del riesgo de enfermedad hemolítica del feto y del recién nacido (HDFN).
• Las anemias hemolíticas asociadas a transfusiones se asocian con ciertos antígenos de
grupos sanguíneos.
“Los principales sistemas para la compatibilidad sanguínea son ABO y Rh.”
Sistema
ABO
ABO - Generalidades
Consta de antígenos A y B y anticuerpos contra estos antígenos.
Hay 4 grupos principales en el sistema ABO (A, B, AB y O) de distribución variable
de acuerdo con la raza y el origen étnico.
Harmening, D. Modern Blood Banking & Transfusion
Los antígenos A y B son antígenos de carbohidratos.
El paso final en su biosíntesis está catalizado por las glicosiltransferasas A y B, que
Practices. 6ª. Ed. 2012. Ed. Davis.
están codificadas por los alelos A y B del gen ABO, respectivamente.
Los individuos con grupo sanguíneo O no producen glicosiltransferasas A o B
funcionales y, por lo tanto, carecen de antígenos A y B.
ABO - Generalidades
• Es el sistema más importante para medicina transfusional
• Todas las personas sanas después de los 3 - 6 meses de edad tienen anticuerpos contra los
antígenos que les faltan. → Anticuerpos naturales
• Los anticuerpos ABO son en su mayoría IgM y pueden activar el complemento y son
potencialmente mortales.
• En el laboratorio se puede demostrar de una manera sencilla mezclando a temperatura
ambiente eritrocitos y, suero o plasma con antisueros y eritrocitos de grupo ABO conocidos
respectivamente.
Yamamoto F, Clausen H, White T, et al. Moleculargenetic basis of the histo-blood group ABO system.
Nature. 1990; 345: 229–233.
Herencia
• Los genes para ABO no codifican
para los antígenos directamente sino
para las glucosiltransferasas.
• Gen H: Localizado en el cromosoma
19 codifica la producción de la
transferasa H
Yamamoto F, Clausen H, White T, et al. Moleculargenetic basis of the histo-blood group ABO system.
Nature. 1990; 345: 229–233.
Herencia
El locus del ABO se encuentra en el brazo
largo del cromosoma 9
Los genes ABO siguen reglas Mendelianas,
“codominante”:
• Los alelos A y B se expresan cuando
están presentes
• El gen O es amorfo (silencioso), no tiene
ningún producto genético detectable
Yamamoto F, Clausen H, White T, et al. Moleculargenetic basis of the histo-blood group ABO system.
Nature. 1990; 345: 229–233.
Fenotipo Bombay
Descubierto en Bombay, India, en 1952, conocido como deficiencia
de “H”. Incidencia 1/10,000 en la india
• El gen H está presente normalmente único o en doble dosis casi
en todas las personas.
• Es aparentemente necesario para el desarrollo de antígenos
AyB
• El alelo silente “h”, no produce la L-fucosiltransferasa necesaria
para convertir la substancia precursora de ABO en antígeno H.
• Incapacidad de las transferasas A y B.
• Se producen anticuerpos “naturales” (no estimulados por
eritrocitos) vs antígeno H
• Estas personas se denominan Oh o ABH nulo
Yamamoto F, McNeill PD, Kominato Y, et al. Molecular
genetic analysis of the ABO blood group system: 2, cis-
AB alleles. Vox Sang. 1993; 64: 120–123.
Fenotipo Bombay
• En la agrupación directa ABO de rutina se muestra como grupo O.
• En la agrupación inversa ABO reacciona con todas las células por la presencia de anti-H
en el suero de la persona con este fenotipo.
El anticuerpo es principalmente IgM de amplio rango térmico.
Solo puede recibir sangre fenotipo Bombay.
Pruebas para demostrar la ausencia de antígeno H:
• Tipificación con lectina anti H (Ulex europaceus) ó
• Sueros con actividad anti H libre de anti A y anti B.
Yamamoto F, McNeill PD, Kominato Y, et al. Moleculargenetic analysis of the ABO blood group
system: 2, cis- AB alleles. Vox Sang. 1993; 64: 120–123.
Antígenos ABO
• Comienzan su desarrollo en la 5ta semana de la vida fetal
• Aumentan su concentración lentamente
• Al nacer solo se expresa ~ 50% de concentración total en el adulto
• La concentración de antígenos en el adulto se alcanza entre 2 – 4
años de edad
• Presencia en :
• Eritrocitos
• Fluidos corporales
• Linfocitos
• Plaquetas
• Células epiteliales
Issitt PD. Applied Blood Group Serology. 3rd ed. Miami:
Montgomery Scientific; 1985.
Subgrupos
• Expresión anormal consecuencia de mutaciones adicionales en los genes A B
• Como consecuencia se producen Glucosiltransferasas con menor actividad enzimática
para la conversión del antígeno H.
Frecuencia poblacional
Grupo A, subgrupos:
• Más frecuentes para A que para B A1, 80%
A2, 20%
Issitt PD. Applied Blood Group Serology. 3rd ed. Miami:
Montgomery Scientific; 1985.
Anticuerpos ABO
Principalmente IgM, activan complemento
causando hemolisis intravascular, aunque
también hay tipos IgG e IgA.
• IgM e IgA no cruzan la placenta
• Ciertas versiones de IgG cruzan la
placenta → EHRN
La mayoría de los IgG reaccionan
óptimamente a 37°C, sin embrago los IgG
ABO pueden hacerlo fácilmente a
temperatura ambiente, activan mejor el
complemento a 37°C
Bird GWG, Wingham J. Haemagglutinins from Salvia.
Vox Sang. 1974; 26: 163.
Estado secretor
• En algunas personas es posible realizar la
caracterización bioquímica directa de antígenos
ABH en secreciones.
• Gen “Se”, controla la presencia de antígenos
ABH en las secreciones y, es dominante sobre su
alelo “se”; (Independiente del Gen ABH).
• La presencia de Se, ya sea SeSe ó Sese, resultará
en la presencia de antígeno H en las secreciones.
SeSe ó Sese, 78% de la población, Secretores
sese, 22% de la población, No secretores
Yamamoto F, McNeill PD, Kominato Y, et al. Moleculargenetic analysis of the ABO blood group
system: 2, cis- AB alleles. Vox Sang. 1993; 64: 120–123.
Transfusión de concentrados
eritrocitarios
NOM 253
Sistema
Rh
Rh - Generalidades
• Es el más importante después del ABO
• Es uno de los antígenos más polimórficos y antigénicos
• Es la causa primaria de enfermedad hemolítica fetal y del recién nacido
• Su antígeno principal es el “D”, y el termino Rh positivo o negativo se refiere a la presencia
o ausencia de este antígeno respectivamente.
• Otros antígenos importantes incluyendo sus antitéticos son: C, c, E, e (No tipados de
rutina).
• Contiene más de 50 antígenos.
Westhoff CM. Molecular testing for transfusion medicine.
Curr Opin Hematol. 2006; 13: 471–475.
Rh - Genética
• 2 genes codifican las proteínas del Rh:
• Gen RHC: codifica al antígeno D
• RHCE: codifica los antígenos C, c, E, e en
múltiples combinaciones (Ce, cE, CE, ce).
• Ambos genes difieren entre sí por 32 – 35
aminoácidos.
• Los D negativos, en su mayoría, ocurren por
una deleción completa del gen RHC
Westhoff CM. Molecular testing for transfusion medicine.
Curr Opin Hematol. 2006; 13: 471–475.
Nomenclatura
• Fisher y Race creían que sistema Rh estaba
formado por tres genes estrechamente
relacionados o alelos: D en un locus, C ó DCe
c en el segundo, y E ó e en el tercero,
como se refleja en la terminología del
DCE.
• Una versión modificada de Wiener
actualmente es útil para transmitir
verbalmente el haplotipo Rh.
Westhoff CM. Molecular testing for transfusion medicine.
Curr Opin Hematol. 2006; 13: 471–475.
Prevalencia del Rh y haplotipos en México
DISTRIBUCIÓN DEL ANTÍGENO Rh-D EN MÉXICO Y OTROS PAISES DE
AMÉRICA
EEUU
TRANSFUSIONAL. 2ª EDICIÓN. MÉXICO. 2006. PAG. 95-
Rh-D MÉXICO VENEZUELA ARGENTINA
(BLANCOS)
POSITIVO 97.36 % 93.0 % 85.0 % 85.0 %
RADILLO GONZÁLEZ, ALFREDO. MEDICINA
NEGATIVO 2.64 % 7.0 % 15.0 % 15.0 %
GPO ETN CDe cDE CDE cDe cde Cde cdE Cde
MESTIZO 45.6% 21.3% 2.1% 3.4% 26.6% 0.7% 0.3% 0.0%
MAYA 59.7% 33.7% 4.3% 2.3% 0.0% 0.0% 0.0% 0.0%
MIXTECO 52.6% 36.7% 5.1% 4.4% 0.0% 0.6% 0.0% 0.0%
NÁHUATL 49% 37.9% 2% 9.1% 0.5% 0.5% 0.0% 1%
R1 y R2, son los haplotipos del Rh más comunes en general nuestro país
159.
Antígeno D
Altamente antigénico y se compone de varios epítopos antigénicos.
Cambios en el gen RHD codifica cambios en la proteína resultando en variaciones de la expresión del
antígeno D:
• Las pruebas
D débil, principalmente en personas con un solo RHD serológicas
con mutación no pueden
que codifica distinguir
un cambio de entre D
débil y Den
aminoácidos, existen más de 57 mutaciones de gravedad parcial y se requiere
la expresión genotipificación
variable.
• D el, se designa bajo este nombre cuando el antígeno D es extremadamente bajo y solo se pueden
revelar con técnicas de adsorción – elución utilizando anti – D o genotipificación del RHD
Causan discrepancias entre instituciones, reactivos o métodos de tipificación, en general no producen anti –D (excepto
los tipos 11,15 y 21, que si pueden producir)
• D parcial, debido a genes híbridos en las que se reemplazan las porciones e RHD por las porciones
correspondientes de RHCE perdiendo algunos epítopos D
Naturalmente parecen D positivo pero producen anti – D posterior a la transfusión o embarazo.
Westhoff CM. Molecular testing for transfusion medicine.
Curr Opin Hematol. 2006; 13: 471–475.
Antígeno D
Rh nulo, ausencia de cualquier antígeno Rh (ausencia de RhD, RhC y RhE).
• Es raro.
Nota:
Cuando se transfunden,
• Se asocia los individuos
más comúnmente concon fenotipos Rh
mutaciones en nulos
el genpueden
RHAG yformar uno puede
también o más anticuerpos
ser causado
contra antígenos Rh de alta frecuencia → Extremadamente difícil obtener sangre compatible en el
por variantes simultáneas de RHD y RHCE asociadas con la ausencia de expresión del
futuro.
antígeno.
• El gen RHAG codifica la glicoproteína asociada a Rh (Rh50), que es necesaria para la
expresión de los antígenos Rh y para el ensamblaje adecuado de las proteínas RH en la
membrana de los glóbulos rojos.
[Link] CM. The Rh blood group system in review: a new face for the next
decade. Transfusion 2004; 44:1663.
Antígenos C y c / E y e
Están codificados por alelos o alternativas del gen RHCE
Son codominantes, y si ambos están presentes, uno en cada cromosoma, ambos se expresan
en los glóbulos rojos.
Son menos inmunogénicos que el D
En todas las poblaciones “e” es más frecuente que “E” pero este último más es inmunogénico
Reid ME, Lomas-Francis C. The Blood Group Antigen Facts
Book. 2nd ed. San Diego, CA: Academic Press; 2004.
EXPRESIÓN DE LOS
PRINCIPALES ANTIGENOS
DEL Rh EN LA MEMBRANA
ERITROCITARIA
D: 56,000-202,000
c: 32,000
e: 20,000
E: 17,900
Harmening, D. Modern Blood Banking & Transfusion
Practices. 6ª. Ed. 2012. Ed. Davis.
Antígeno G
Producto del exón 2 de RHD o exón 2 de RHCE*Ce, ya que son idénticos y codifican el
mismos aminoácidos.
Por lo tanto, los eritrocitos que son D positivo o C positivo también son G positivos.
Entonces durante la identificación de anticuerpos irregulares en el PEE donde se asume anti
D + anti C → sospechar de anti G.
¿Cómo dilucidar si se trata de anti G vs anti D + anti C? → Adsorción / Elución pero es
innecesario, ¿Por qué? Ante la presencia de anti G se deberá transfundir D- / C-
Reid ME, Lomas-Francis C. The Blood Group Antigen Facts
Book. 2nd ed. San Diego, CA: Academic Press; 2004.
Anticuerpos Rh
• Principalmente estimulados por eritrocitos (transfusión, embarazo, agujas compartidas)
• Principalmente IgG subclases 1 y 3.
• Pueden tener un componente menor de IgM.
• Aparecen después de 6 semanas – 6 meses tras la exposición al antígeno Rh.
• “No aglutinan con eritrocitos (antígenos afines) suspendidos en solución salina hasta que
consiguen altos niveles de IgM” → Se demuestran mediante Coombs indirecto.
• Reaccionan mejor a 37°C.
• No se unen a complemento → hemolisis extravascular.
• Reacciones transfusionales inmediatas o tardías.
Westhoff CM. The structure and function of the Rh antigen
complex. Semin Hematol. 2007; 44:42–50.
Anticuerpos Rh
• D es el más inmunogénico de los antígenos del Rh
• Orden de inmunogenicidad después del D: c, E, C, e.
• Del 30 – 85% de los D- producirán anti – D tras la exposición
La sensibilización dependerá de la dosis y estado inmunológico del px
• Dosis mínima para la sensibilización: > 0.03 ml de eritrocitos
• Prevención en el embarazo, Inmunoglobulina anti D:
1 dosis de 300 mcg puede suprimir 15 ml de eritrocitos D+
1 dosis de 50 mcg puede suprimir 2.5 ml de eritrocitos D+
• La formación de anti-G, anti-C y anti-E en sujetos inmunizados a D es relativamente común
La formación de estos en sujetos D positivos es muy rara.
Westhoff CM. The structure and function of the Rh antigen
complex. Semin Hematol. 2007; 44:42–50.
Rh – Respondedores y No respondedores
• Cerca de 15 % de los sujetos D- negativo transfundidos con eritrocitos D- positivo no
presentarán anti-D en los siguientes meses.
• El término Respondedor y No respondedor fue originalmente usado en los conejillos de
india .
• Se cree que la respuesta está determinada genéticamente.
Klein, Harvey. Anstee, David. Mollison’s Blood Transfusion in Clinical
Medicine. Bristol, UK. 12TH EDITION. WILEY. PAG 168-213
Pruebas
pretransfusionales
• Tipificación de Grupo y Rh
• Pruebas de compatibilidad
• Fenotipación Rh
• Rastreo de anticuerpos irregulares
• Selección de concentrados eritrocitarios
Tipificación ABO y Rh
Metodologías: Tubo, Gel y Fase sólida, aplicables también para tamizaje de anticuerpos, e
inmunocromatografía y genotipificación.
Objetivo: detectar la interacción Antígeno (Ag) – Anticuerpo (Ac)
Tubo
Tipificación ABO y Rh
Metodologías: Tubo, Gel y Microplacas, aplicables también para tamizaje de anticuerpos, e
inmunocromatografía.
Objetivo: detectar la interacción Antígeno (Ag) – Anticuerpo (Ac)
Klein HG, ed. Standards for Blood Banks and Transfusion
Gel Services. 25th ed. Bethesda, MD: American Association
of Blood Banks; 2008.
Tipificación ABO y Rh
Microplacas de
Fase sólida
Tipificación ABO y Rh
Inmunocromatográfica
Manual de técnicas de inmunohematología 2ª Ed. Licon. 2017
Tipificación ABO y Rh
Genotipificación
Manual de técnicas de inmunohematología 2ª Ed. Licon. 2017
Tipificación ABO y Rh
• La tipificación del receptor es la prueba
más importante en el servicio de
transfusión. También se debe realizar al
donador.
• Incluye la identificación por Ags (Directo) y
por Acs (Inverso).
• Para evitar una interpretación errónea se
sugiere una aglutinación mínima de 2+ (No
es una regla)
• Para establecer el Rh como positivo
primero se debe realizar una prueba
control con reactivo comercial o albúmina
al 6% la cual debe resultar negativo.
Vengelen-Tyler V, ed. Technical Manual of the American
Association of Blood Banks. 12th ed. Bethesda, MD: American
Association of Blood Banks; 1996.
Discrepancias comunes de ABO
Harmening, D. Modern Blood Banking & Transfusion
Practices. 6ª. Ed. 2012. Ed. Davis.
Fenotipo Rh
Las principales fuentes de exposición a los antígenos del Rh son la transfusión y el embarazo
Ocasionalmente autoanticuerpos (AHAI)
Objetivo, resolver discrepancias
Ejemplos:
Cuando utilizarán tratamientos biológicos (Daratumumab)
Incompatibilidad sin especificidad de anticuerpo
Paciente que será multitransfundido
Sospecha de fenotipo de baja prevalencia
RAI – Coombs indirecto -
La metodología de elección
debe contar con la
sensibilidad y especificidad
para:
• Detectar la mayoría de los
anticuerpos clínicamente
significativos
• No detectar reacciones
indeseables
• Permitir la finalización
oportuna de las pruebas
Sistemas: Rh, Duffy, Glob, I, Kell, Kidd, Lutheran, MNSs, Lewis, P, Diego
Maffei LM. Current State of the Art: The Survey PretransfusionTesting: AABB Technical Workshop on Pre-
TransfusionTesting: Routine To Complex. Bethesda, MD: American Association of Blood Banks; 1996.
Prueba Mayor de Compatibilidad
Prueba final para determinar la compatibilidad del suero/plasma con los eritrocitos del
donador.
“Prácticamente
mismo método
que para RAI”
Selección de concentrados eritrocitarios
Klein HG, ed. Standards for Blood Banks and Transfusion
Services. 25th ed. Bethesda, MD: American Association
of Blood Banks; 2008.
