Cariotipo

Frida Fernanda Ruiz Orozco

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Medicina genómica
Azalea Romero
 INTRODUCCIÓN

➢ En 1956 fue determinado el

El análisis de las características de los número de cromosomas
cromosomas es el objeto de estudio humanos (46).
de la Citogenética Humana. ➢ En 1959 se describió el
síndrome de Down

Actualmente, la Citogenética Médica usa metodologías derivadas de la Genética Molecular,

especialmente las técnicas de hibridación in situ y fluorescencia (HISYF=FISH en inglés), que
permiten la localización de secuencias específicas del ADN en una región cromosómica.

El conjunto de los cromosomas constituye el cariotipo.

● Dos cromátidas idénticas procedentes de la
duplicación del ADN, por lo que se les denomina
cromátidas hermanas.
● El centrómero o constricción primaria que hace que
el cromosoma presente cuatro brazos,
manteniendo unidas a las dos cromátidas.
● El cinetocoro, donde se insertan los microtúbulos
del huso mitótico.
● El satélite, segmento del cromosoma separado por
la constricción secundaria).
● El telómero es el extremo del cromosoma, con
propiedades especiales que protegen al cromosoma.
 Métodos de estudio de los cromosomas
La sangre se siembra
en un frasco de cultivo, con un medio
esencial mínimo y 10% de suero

● fibroblastos dérmicos, Al cultivo se le incorpora

● células exfoliadas de fitohemaglutinina u otro mitógeno
mucosas, células del
feto presentes en el
A su término, se agrega colchicina o
líquido amniótico su derivado “colcemid”, para detener
● vellosidades coriales las mitosis en metafase

Antes de realizar las preparaciones,

se somete a las células a un “choque
hipotónico”

Los preparados se realizan utilizando

un fijador para la cromatina de las
células
 Mediante ciertas técnicas de tinción, es posible
detectar a lo largo de cada cromosoma bandas
alternantes de mayor y menor tinción (o
fluorescencia), que forman un patrón estable y
característico para cada cromosoma.

varía según el estado de elongación

de los cromosomas:
● En los cromosomas más acortados el número
total de bandas detectables en todo el cariotipo
humano no pasa de 400;
● cuando se observan células en prometafase, con
cromosomas más alongados, se llama “de alta
resolución”.

Bandeado cromosómico: significado

del patrón fundamental G y Q
Bandeado “Q” (quinacrind) Bandeado “G” (giemsa)

Produce uno de los patrones

de bandas más informativos,
aunque requiere microscopía
“ Idéntico al bandeo Q, excepto en las zonas
heterocromáticas de los cromosomas 1, 9
y 16 y en los satélites de los acrocéntricos,
de fluorescencia que dan una tinción variable.
Daunomicina
Producen bandas que están relacionadas con la composición predominante de bases en el ADN
y el “Hoechst
de las regiones bandeadas. ADN rico en el par A-T (o T-A)
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El bandeado G se
caracterizan por
replicar su ADN
en la segunda
mitad del período
S del ciclo celular

De esta manera, se ha propuesto que el patrón de bandas G (o Q) responde a un

empaquetamiento diferencial de las regiones cromosómicas axiales, ricas en A-T,
las cuales están más apretadamente dispuestas en las bandas oscuras que en las
bandas claras.
“armazón cromosómico”
 Otros tipos de bandeado: bandeado C,
bandeado R y bandas N

BANDAS C
● Tiñe exclusivamente la heterocromatina constitutiva,
compuesta por ADN de tipo satélite
● Sólo tiñe las regiones centroméricas y los bloques de
heterocromatina C de los cromosomas 1, 9 y 16 y del
brazo largo del cromosoma Y.
● Se desnaturaliza y extrae el material cromosómico con
álcali, y se incuba en solución salina para teñir después
con Giemsa u otros colorantes
● Las bandas C indican los sitios donde hay ADN altamente
repetitivo que no se ha extraído.
● Es indicado para la búsqueda de polimorfismos de
heterocromatina.
BANDA R BANDA N

● Inverso del bandeado clásico (G o Q). ● Tiñe con exclusividad las regiones que
● Se usa la cromomicina A3 y las contienen organizadores nucleolares
bandas fluorescentes son las ricas en ● Es totalmente ajeno al bandeado clásico, ya
C-G. que se basa en la presencia de proteínas
argentafines en esas regiones
● Se tiñe con nitrato de plata.
 Aplicaciones de lo hibridación
in situ Y fluorescencia

La técnica HISYF o FISH consiste en la identificación de la región

F cromosómica en la que se encuentra una secuencia determinada de
un ácido nucleico, detectada finalmente por una señal fluorescente.
I hibridación in situ no isotópicas
S La base del procedimiento es
lograr que la secuencia buscada
H del ADN celular se hibride con
una secuencia preparada in vitro y avidina y antidigoxigenina
rotulada con nucleótidos
marcados especialmente con
biotina o con digoxigenina.
Mapeo del genoma humano

❖ Identificación inmediata y precisa de cada cromosoma, por

medio de sondas centroméricas, específicas para el tipo de
secuencias satélite presentes en cada uno.
❖ Se ha desarrollado el llamado “pintado cromosómico”
Se realiza con una mezcla de varias sondas, cada una específica para un cromosoma;
La HISYF
cada sonda es detectable no está
por medio limitada
de un coloranteafluorescente
cromosomas de color, con
de distinto
lo cual se obtienecélulas mitóticas
en la misma y es posible
preparación, realizarla
por ejemplo, en de dos
la localización
cromosomas, identificables por su color de fluorescencia, o de distintas regiones del
células interfásicas
mismo cromosoma, identificadas por colores diferentes