DETERMINACION ESPECTROFOTOMÉTRICA DE NITRITOS EN AGUA

FUNDAMENTO TEÓRICO:

El nitrógeno de nitritos raras veces aparece en concentraciones mayores de 1 mg/L, aun en

fuentes de plantas de tratamiento de aguas residuales. En aguas superficiales y subterráneas
su concentración por lo general es menor de 0.1 mg/L. Su presencia indica, por lo regular,
procesos activos biológicos en el agua, ya que es fácil y rápidamente convertido en nitrato
(Salcedo, 2021).

NITRITOS Y NITRATOS

Los nitratos y nitritos son compuestos químicos inorgánicos derivados del nitrógeno, que se
encuentran naturalmente en alimentos vegetales y de manera adicionada en algunos
productos cárnicos procesados (Villamil E., 2021). Su presencia en la dieta se ha relacionado
históricamente con un alto riesgo de desarrollar cáncer en diferentes tejidos debido a su
capacidad de transformarse en N-nitrosaminas, altamente carcinogénicas. El objetivo de este
artículo es revisar el impacto que tiene para la salud humana la ingesta de nitratos y nitritos
alimentarios, en relación con su procedencia de fuentes naturales o de productos procesados a
los que han sido añadidos como aditivos químicos (Londoño P. & Gómez R., 2021).

El nitrito es un estado de oxidación intermedio de nitrógeno, tanto en la oxidación de

amoníaco a nitrato y en la reducción de nitrato. Dicha oxidación y la reducción puede ocurrir
en plantas de tratamiento de aguas residuales, sistemas de distribución de agua, y las aguas
naturales. Además, puede entrar en el sistema de 8 suministro de agua a través de su uso
como un inhibidor de la corrosión en agua de proceso industrial. El nitrito es un agente
etiológico actual de metahemoglobinemia (Hoyos, 2021).

Analíticamente, los nitratos y nitritos pueden ser determinados por métodos de

espectrometría ultravioleta-visible (UV/VIS), electroquímicos, cromatográficos y enzimáticos
entre otros.

ESPECTROMETRÍA
Las técnicas espectroscópicas se basan en la interacción de la radiación electromagnética con
la materia. A través de esta interacción las moléculas pueden pasar de un estado energético,
m, a otro estado energético distinto, l, absorbiendo una cantidad de energía radiante igual a la
diferencia energética existente entre los dos niveles: El – Em (Becerra & Mosqueira, 2019).
La espectrometría, es un método es adecuado para determinar nitrito en concentraciones de
10 a 1000 µg NO2 – -N/L. El sistema de color obedece la ley de Beer en concentraciones hasta
de 180 µg NO2 – -N/L a 543 nm si se emplea celda de 1 cm de longitud; se pueden hacer
mediciones en el intervalo de 5 a 50 µg NO2 – -N/L con una celda de 5 cm de paso de luz y un
filtro de color verde. Se pueden determinar concentraciones más altas por dilución de la
muestra (Pretell & Socarrás, 2020).

MATERIALES Y REACTIVOS

1. Solución de Ácido Sulfanílico: Disolver 0,80 g de ácido sulfanílico en 28 mL de CH3COOH

glacial y diluir a 100 mL con agua destilada.
2. Solución de 1-Naftilamina: Disolver 0,50g de 1-naftilaminaen 28 mL de CH3COOH glacial y
diluir a 100 mL con agua destilada
3. Solución de Acetato de Sodio: Disolver 14 g de CH3COONa en agua y diluir a 50 mL.
4. Solución madre de nitritos: Pesar con exactitud 0,1875 g de NaNO2(g.r) y disolver con
agua destilada y llevar a fiola de 250 mL. Aforar a la marca. Esta solución es de 500 ppm
NO2-
5. Solución de Trabajo: Tomar 0,50 mL de solución madre de nitrito y depositar en una fiola
de 250 mL. Aforar a la marca con agua destilada. Esta solución es de 1 ppm NO2-.

PROCEDIMIENTO

Preparación de recta de calibración:

1. Tomar 05 fiolas volumétricas de 50 mL y colocar los volúmenes adecuados (en μL), de
solución standard de tal manera que la concentración en las fiolas sean 0; 0,10; 0,15 ; 0,20
y 0,25 ppm NO2-.
2. Añadir agua destilada a c/u hasta aproximadamente 25 mL.
3. Agregar 2 mL de solución acetato de sodio, CH3COONa
4. Colocar 0,50 mL de la solución de ácido sulfanílico y dejar reposar 5 min.
5. Adicionar 0,50 mL de 1-Naftilaminay aforar a la marca con agua destilada.
6. Seleccione la longitud de onda óptima de operación, del instrumento. (aprox. 540 nm)
7. Usando la fiola N°1 calibrar el instrumento a cero.
8. Proceder a leer la absorbancia de cada solución patrón.
9. Graficar la absorbancia obtenidas contra las concentraciones y verificar si cumple con la

Ley de Beer.

Preparación y medición de la muestra.

1. Colocar en una fiola de 50 mL una cantidad determinada de muestra (2,5 mL), previamente
tratada.
2. 2.Adicionar cada uno de los reactivos al igual que a las soluciones patrón.
3. 3.Leer en el instrumento la absorbancia
4. 4.Usando la recta de calibración determine la concentración de NO2-, para luego
multiplicar por el factor de dilución de la muestra.
5. 5.Obtener la ppm NO2-presentes en el agua problema.

Para la presente marcha tenemos:

Nitritos (ppm NO2-) = ppm NO2- (gráfico) * ((mL aforo fiola) /(mL alícuota muestra))

CÁLCULOS:

Datos Experimentales

1. Determinación de la masa teórica a tomar del reactivo NaNO 2 para la

preparación teórica de 100 mL de una solución que sea de 600 ppm NO2 -.
 ppm NO2- requerida = 600
 Vol. Solución stock (L) = 0.1 L
 Masa molar NaNO2 = 69
 Masa molar NO2- = 46
 Pureza (%) = 99

Ahora hallamos el peso de NaNO2 (g) al 100% de pureza:

−¿ −¿
O2 O2
W NaN O ( g )=600 mgN ∗0.10 L∗1 gN −¿ ¿¿
2
L 3 O2 ∗69.0 gN aN O2
10 mgN ¿
46.0 gN O−¿
2 =0.0900 g N aN O 2 ¿

Pero, como el reactivo se encuentra al 99%, entonces:

W NaN O ( g )=0.0900 g / 0.99

2

W NaN O ( g )=0.0909 g N aN O2
2

2. Determinación de [ ] real para un peso real tomado de 0.1022 g NaNO2

 Masa real tomada de NaNO2 (g) = 0.1022
 Vol. a preparar (L) = 0.1 L
  Pureza NaNO2 (%) = 99
 Masa molar NaNO2 = 69
 Masa molar NO2- = 46

3. Preparación de 100 mL de solución de trabajo de 10 ppm NO2-:

 ppm NO2- inicial (real preparado) = 674.5200

 ppm NO2- final (requerido) = 10

 vol. final a preparar S. Trab (ml) = 100

Reemplazamos en:

C1*V1 = C2*V2

(674.5200 ppm) * V1 = (10 ppm) * (100 mL)

V1 = 1.4825 mL

Ahora pasamos a uL:

V1 = 1.4825 mL * (1000 uL/1mL)

V1 = 1482.5 uL

4. Determinación de [ ] real de solución de trabajo ajustando volumen a 1.50 mL

 ppm NO2- inicial (real preparado) = 674.5200

 Vol. inicial tomado (ml) = 1.5

 vol. final a preparar S. Trab (ml) = 100

C1*V1 = C2*V2

(674.5200 ppm) * (1.5 mL) = C2 * (100 mL)

C2 = 10.1178 ppm
 5. Preparación teórica de las soluciones estándar para recta de calibrado de NO 2-
usando solución de trabajo real:

Aplicando ecuación de dilución: C1*V1 = C2*V2

Std ppm final Aforar a ppm inicial Vol a tomar Vol a tomar
teórico (mL) (uL)
1 0 50 10.1178 0 0
2 0.05 50 10.1178 0.2470893 247.0893
3 0.10 50 10.1178 0.4941786 494.1786
4 0.15 50 10.1178 0.7412679 741.2679
5 0.20 50 10.1178 0.9883572 988.3572
6 0.25 50 10.1178 1.235446 1 235.446
Fuente: Elaboración propia

Calculamos el volumen en (mL):

- Para un “ppm final teórico” de valor (0):

C1*V1 = C2*V2

(10.1178 ppm) * V1= 0 * (50 mL)

V1 = 0 mL = 0 uL

- Para un “ppm final teórico” de valor (0.05):

C1*V1 = C2*V2

(10.1178 ppm) * V1= 0.05 * (50 mL)

V1 = 0.2470893 mL = 247.0893 uL

- Para un “ppm final teórico” de valor (0.10):

C1*V1 = C2*V2

(10.1178 ppm) * V1= 0.10 * (50 mL)

 V1 = 0.4941786 mL = 494.1786 uL

- Para un “ppm final teórico” de valor (0.15):

C1*V1 = C2*V2

(10.1178 ppm) * V1= 0.15 * (50 mL)

V1 = 0.7412679 mL = 741.2679 uL

- Para un “ppm final teórico” de valor (0.20):

C1*V1 = C2*V2

(10.1178 ppm) * V1= 0.20 * (50 mL)

V1 = 0.9883572 mL = 988.3572 uL

- Para un “ppm final teórico” de valor (0.25):

C1*V1 = C2*V2

(10.1178 ppm) * V1= 0.25 * (50 mL)

V1 = 1.235446 mL = 1235.446 uL

6. Determinación real de las concentraciones a los valores ajustados de volumen:

Std Vol a Vol a ppm Aforar ppm NO2-

tomar tomar (mL) inicial a
(uL)
1 0 0 10.1178 50 0
2 250 0.250 10.1178 50 0.0506
3 490 0.490 10.1178 50 0.0992
4 740 0.740 10.1178 50 0.1497
5 990 0.990 10.1178 50 0.2003
6 1240 1.240 10.1178 50 0.2509
Fuente: Elaboración propia

Aplicando ecuación de dilución: C1*V1 = C2*V2

Calculamos la concentración en (ppm):

- Para un “volumen inicial” de valor (0 mL):

 C1*V1 = C2*V2

(10.1178 ppm) * 0 = C2 * (50 mL)

C2 = 0 ppm

- Para un “volumen inicial” de valor (0.250 mL):

C1*V1 = C2*V2

(10.1178 ppm) * 0.250 = C2 * (50 mL)

C2 = 0.0506 ppm

- Para un “volumen inicial” de valor (0.490 mL):

C1*V1 = C2*V2

(10.1178 ppm) * 0.490 = C2 * (50 mL)

C2 = 0.0992 ppm

- Para un “volumen inicial” de valor (0.740 mL):

C1*V1 = C2*V2

(10.1178 ppm) * 0.740 = C2 * (50 mL)

C2 = 0.1497 ppm

- Para un “volumen inicial” de valor (0.990 mL):

C1*V1 = C2*V2

(10.1178 ppm) * 0.990 = C2 * (50 mL)

C2 = 0.2003 ppm

- Para un “volumen inicial” de valor (0.1240 mL):

C1*V1 = C2*V2

(10.1178 ppm) * 0.1240 = C2 * (50 mL)

C2 = 0.2509 ppm

7. Lecturas obtenidas en el espectrofotómetro para estándares y muestra

volumen de muestra de agua tomada para análisis = 10 mL.

Std ppm NO2- Abs

1 0 0
 2 0.0506 0.018
3 0.0992 0.037
4 0.1497 0.061
5 0.2003 0.078
6 0.2509 0.095
Muestra 0.022
Fuente: Elaboración propia

8. Construcción de recta de calibrado y determinación de concentración de NO 2-

en muestra de agua problema

Concentración NO2- (ppm) vs Absorbancia

0.1
0.09 f(x) = 0.388597376329647 x − 0.000323809276334477
R² = 0.997484942649049
0.08
0.07
Absorbancia

0.06
0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
Concentración NO2- (ppm)

Fuente: Elaboración propia

Construcción de recta de calibrado y determinación de concentración de NO2 - en

muestra de agua problema:

Ecuación de la recta:

Absorbancia = 0.3886 (ppm NO2-) – 0.0003

Ahora tenemos que sacar los ppm NO 2- del gráfico, para ello, reemplazamos el
0.022 de absorbancia:

0.022 = 0.3886 (ppm NO2-) – 0.0003

ppm NO2-(gráfico) = 0.0574

 −¿¿
El resultado obtenido de la concentración de NO 2 se multiplica por el factor de
dilución:

Nitritos (ppm NO2-) = ppm NO2- (gráfico) * ((mL aforo fiola) /(mL alícuota muestra))

Nitritos (ppm NO2-) = 0.0574 * (50/10)

Nitritos (ppm NO2-) = 0.287

CONCLUSIONES

 Se logró determinar la concentración de nitritos en muestra de agua residual

durante el experimento, en el cual se obtuvo que la concentración de nitritos
fue de 0.287 ppm.
 Se logró evaluar la recta de calibrado obtenida usando la espectrofotometría
molecular para hallar la cantidad de nitritos que se encontraban en las
muestras.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Becerra Suárez, V. A., & Mosqueira Pachamango, M. F. (2019). Determinación

espectrofotométrica de la concentración de nitratos y nitritos en jamón ahumado
comercializado en el Distrito de Cajamarca, Perú.

Hoyos Tirado, R. J. (2021). Validación de un método analítico para la determinación de nitritos

y nitratos en agua potable, natural y residual por espectrometría UV-VIS.
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Londoño M., & Gómez B. (2021). Nitratos y nitritos, la doble cara de la moneda. Revista de
Nutrición Clínica Y Metabolismo, 4(1), 110–119.
https://doi.org/10.35454/rncm.v4n1.202

Salcedo, N. E. R. (2021). TRABAJOS PRÁCTICOS DE LABORATORIO EN LA DETERMINACIÓN DE

NITRÓGENO EN AGUAS POR MÉTODO ESPECTROFOTOMÉTRICO.

Pretelt Vega, F., & Socarrás Galindo, S. (2020). Validación del método analítico para la
determinación de nitritos en agua natural y potable, por espectrofotometría visible en
 el laboratorio de investigación y calidad ambiental del Centro de Comercio, Industria y
Turismo del SENA, Regional Córdoba.

Villamil E., Piagentini A. (2021). El uso de Nitratos y Nitritos en la Industria cárnica, lo bueno, lo
malo y el modelado matemático para optimizar su uso. Una revisión
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